胰腺干细胞体外诱导分化研究进展

胰腺干细胞是一种多能干细胞,具有无限分裂和永久自我更新的能力,可在特定因素的影响或诱导下,分化成胰腺导管、胰岛、外分泌腺泡等特定胰腺组织类型,甚至肝细胞.由胰腺干细胞诱导分化的胰岛β细胞在治疗Ⅰ型糖尿病和纠正部分Ⅱ型糖尿病中具有重要意义.论文就胰腺干细胞的存在部位、诱导干细胞为胰岛β细胞的生物活性物质、诱导分化为胰腺β细胞的方法及调控胰腺干细胞分化的信号通路等方面做一综述.     

仔猪胰腺干／祖细胞的生物学特性

分离1日龄长白仔猪的胰腺细胞后,通过显微镜和电镜观察细胞生长形态和超微结构,运用细胞计数法制作细胞生长曲线测定其群体倍增时间,采用免疫组化法测定细胞生长不同时期的表面标志蛋白的表达,用肝细胞因子和尼克酰胺联合诱导其向功能性G细胞分化,并测定了分化细胞对葡萄糖的反应能力。结果显示获得的仔猪胰腺祖／干细胞具有多种形态,以神经样细胞克隆生长占优势,电镜超微结构证实其具有核质比高、细胞器不分化的干细胞态特征。试验测得第1代和第3代群体的倍增时间分别为96．0、307．7h,仔猪胰腺祖／干细胞表达胚胎干细胞标志Oct4、SSEA-1、SSEA-4,也表达胰腺干细胞的标志PDX-1、CK7等。仔猪胰腺干／祖细胞的向β细胞诱导分化细胞对22mmol／L葡萄糖的刺激产生强烈的胰岛素分泌反应,胰岛素分泌量可达321．75mIU／L。结果证实仔猪胰腺千／祖细胞具有干细胞和胰腺祖的表面标志和超微结构,同时具有分化成分泌胰岛素β细胞的能力。     

胰腺胚胎发育调控机制及胰腺干细胞诱导分化方法研究进展

近年来糖尿病发病率逐年增加,研究如何控制和预防糖尿病成为世界性课题。传统的治疗方法不仅不能从根本上解决高血糖也不能有效地控制糖尿病并发症。胰岛移植技术的出现为临床治疗糖尿病提供了新的途径,但是胰岛数量的不足和胰岛移植出现的免疫排斥反应制约了胰岛移植技术的发展。因此,通过自体胰腺干细胞分化修复胰腺组织从而达到平稳血糖和控制糖尿病并发症成为一种新的技术手段。论文综述胰腺胚胎发育调控机制、胰腺干细胞的定位及体外诱导分化方法等方面的研究进展。     

山羊胰腺腺泡细胞体外分离、纯化、培养和鉴定

本试验旨在建立湘东黑山羊胰腺腺泡细胞的原代培养方法,为研究反刍动物胰腺外分泌功能提供细胞模型。试验利用胶原酶Ⅳ分离山羊胰腺腺泡细胞,开展了胶原Ⅳ的适宜浓度和消化时间、与0.25%胰蛋白酶消化效率对比、腺泡细胞纯化以及鉴定研究。结果表明：1）采用1.0 mg/mL胶原酶Ⅳ对湘东黑山羊胰腺组织消化20 min时,腺泡细胞分离效果最佳。应用此条件消化得到2.275×106个/mL总细胞数及91%的细胞活率。2）采用差时消化、差速贴壁及细胞刮取等方法纯化原代细胞,得到活性良好且形态均一成簇生长呈“鹅卵石”状的山羊胰腺腺泡细胞。3）纯化后腺泡细胞能够稳定传5代以上,且形态不发生改变。4）通过免疫荧光技术运用兔抗羧肽酶A1(CPA1)作为一抗对第1代和第5代山羊胰腺腺泡细胞进行鉴定,结果显示阳性。综上所述,本方法快速地分离了山羊胰腺腺泡细胞,并成功地纯化、鉴定和稳定培养了分离的山羊胰腺腺泡细胞。     

仔猪胰腺细胞体外培养体系的建立

为了研究体外培养仔猪胰腺细胞的适宜条件,试验选取1日龄的仔猪胰腺组织置于冰上清洗、修剪,对消化酶、离心方式、培养皿铺被方式、培养液及添加不同促生长因子等多种因素进行筛选和优化。结果表明:0.25%胰酶消化所获得的细胞强于0.1%胶原酶消化获得的细胞,细胞清亮,易于生长;采用500 r/min离心5 min、多次离心所获得的细胞较Percoll不连续密度梯度离心和5%BSA等密度梯度离心所获得的细胞贴壁率高,生长能力强,易于培养传代;采用0.1%明胶或20μg/mL的层黏连蛋白铺被培养皿均比无铺被的培养皿获得更多的贴壁细胞;以RPMI 1640、M199、F12、L-DMEM多种培养液培养仔猪胰腺细胞,表现出多种细胞形态和生长趋势;在基础培养液中添加上皮生长因子、角质化生长因子、β-巯基乙醇和白血病细胞抑制因子、转铁蛋白与亚硒酸盐混合试剂等促干细胞增殖因子可促进不同形态细胞的增殖。说明按此方式培养可获得大量、多种细胞形态的仔猪胰腺祖/干细胞。     

胚胎干细胞分离培养研究进展

胚胎干细胞(ESCs)是一种高度未分化,能自我复制、自我更新,在体外连续传代并保持未分化状态和具有发育全能性的细胞.文章从研究概况、体外分离培养、生物学特性、鉴定方法、影响ESCs分离培养的因素、存在问题以及应用前景等方面对胚胎干细胞进行了概述.     

细毛羊毛囊干细胞分离培养方法比较研究

试验旨在对细毛羊毛囊干细胞的分离培养方法进行初步研究,建立细毛羊毛囊干细胞体外培养体系。采用两步酶消化法、机械分离法和两步酶消化法+机械分离法3种方法分离培养细毛羊毛囊干细胞,通过测定毛囊干细胞的数量、克隆形成率及毛囊干细胞的增殖能力等综合评估3种培养方法的优劣,寻求既能方便获得大量毛囊干细胞,又能减少其分化的理想培养条件。倒置显微镜下观察3种培养方法获得的细胞均为铺路石状,均表达角蛋白K19和整合素β1,表明成功获得细毛羊毛囊干细胞,建立体外培养体系。采用"两步酶消化法和机械分离法"相结合的方法获得毛囊干细胞体外培养效果最优。     

ICR小鼠胰岛内nestin阳性细胞的分离培养及特性鉴定

通过向ICR小鼠胆总管注射胶原酶Ⅴ的方法体外分离胰岛,并从中分离培养出nestin一细胞,之后通过低糖、低血清诱导其分化产生类胰岛样细胞团.结果显示,小鼠胰岛内存在nestin-细胞,将其分离纯化后在体外低糖(2.5 mmol/L)和低血清(2％)条件下可诱导分化为胰岛样细胞团；表明nestin-细胞具有胰腺干/祖细胞的特性.     

精原干细胞体外培养及影响因素

影响精原干细胞体外培养的主要因素有温度、饲养层细胞、细胞因子包括分化抑制因子(LIF)和生长因子(SCF和bFGF)等。本文拟对其研究进展和精原干细胞体外培养所涉及到的精原干细胞的鉴定和分离纯化技术的研究进展进行综述。     

鸡脑神经干细胞体外诱导分化研究

为了研究鸡脑神经干细胞(neural stem cells,NSCs)体外的分离、培养及诱导分化等生物学特性,试验采用机械吹打法分离鸡脑神经干细胞,通过免疫荧光对体外培养鸡脑神经干细胞进行表面标记检测,并在适宜的诱导条件下向神经元细胞、星形胶质细胞和少突胶质细胞三个方向进行诱导,检测其多向分化潜能。结果表明:体外分离培养的鸡NSCs为目的细胞,并可向神经元细胞、星形胶质细胞和少突胶质细胞诱导分化。说明鸡脑NSCs具有良好的体外增殖能力和多向分化潜能。     

干细胞研究的新进展

近年来 ,干细胞因其自身的许多特性成为生命科学的研究热点。干细胞能够自我更新和多向分化的生物学特性 ,具有重要的医学价值 ,在基因治疗、组织工程学、药学研究等许多领域都具有广泛的应用。而且干细胞的研究对于科学家重新认识细胞生长、分化、生物发育机制等基本生命规律也将起到重大作用。虽然干细胞的研究已取得许多重大的研究进展 ,并展现出诱人的应用前景 ,但仍存在不少技术难题有待于进一步的研究。文章就干细胞的概念、特性、主要研究领域的最新进展、研究存在的问题及其应用前景作一概述     

麦冬水提物对猫肾细胞的影响研究

麦冬是我国传统中药之一,兼备保健和治疗作用。为了探究麦冬能否应用在宠物食品中,本试验以不同浓度的麦冬水提物(3.91 ～8000 μg/mL)为受试药物,从细胞的形态、增殖、凋亡及周期4个方面对猫肾细胞(F81)进行安全性评价。结果表明：在试验浓度范围内,麦冬水提物没有抑制F81的增殖,且在3.91～62.5 μg/mL的浓度范围内,凋亡及周期结果经统计学分析均无显著性差异,与对照组接近,且细胞形态良好。说明在一定浓度范围内,麦冬水提物对F81细胞无毒害作用。     

异荭草素抗肿瘤药理作用及其机制的研究

异荭草素是从植物中提取的含有黄酮类活性成分的化合物。研究表明,异荭草素具有多种药理作用,不仅可以抗氧化、抗炎、抗病毒,还具有良好的抗肿瘤活性。异荭草素可通过干扰肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡、调控活性氧水平、诱导肿瘤细胞自噬、阻碍肿瘤细胞浸润和转移等途径发挥抗肿瘤作用。现将异荭草素的抗肿瘤作用及其机制的相关研究进展进行综述。     

鸡视网膜移动性无长突细胞的分布

利用Nissl染色、视神经溃变试验和计算机图像处理的方法，研究了30日龄鸡（P30）视网膜移动性无长突细胞（displace damacrine     

野牦牛成纤维细胞的分离培养与传代

为了提高野牦牛成纤维细胞分离培养效果,研究了组织保存方法、原代培养方法、培养液类型、添加细胞生长因子和冷冻保存液配方对野牦牛体细胞分离培养与传代的作用。结果表明,PBS、D/F12和TCM199适合野牦牛皮肤组织的保存,D/F12和TCM199培养液适合组织块培养,组织块成活率达到（86.29±4.62）%,组织块法适合野牦牛成纤维细胞的原代培养;D/F12培养液培养野牦牛成纤维细胞效果较好,群体倍增时间和平台期密度分别为38.47 h和2.075×10⁶/mL,正常二倍体核型百分率为84.33%;表皮生长因子（EGF）和碱性成纤维细胞因子（bFGF）产生了较明显的促增殖作用,平台期细胞密度明显增加;2种冷冻保存液（D/F12添加胎牛血清和二甲亚砜及胎牛血清添加二甲亚砜）均能用于野牦牛细胞冷冻,细胞存活率分别是87.33%和89.00%。     

奶牛子宫内膜细胞体外培养及应用研究概况

子宫内膜细胞体外培养技术在研究动物子宫内膜生理功能、繁殖障碍疾病机制及治疗药物筛选等过程中具有重要的作用和意义。论文就国内外有关奶牛子宫内膜细胞体外培养技术中常用的分离、纯化和鉴定等方法以及该细胞体外模型相关应用进行综述,为探索简便、高效的奶牛子宫内膜细胞体外培养方法及国内有关奶牛子宫内膜生理病理的分子细胞学研究提供参考。     

血细胞免疫研究进展

综述红细胞和白细胞免疫研究进展 ,对于进一步了解血细胞在正常的生理活动中和一些疾病的病理生理发展过程中的作用以及探讨血细胞的免疫调节机制有一定的启发。     

北京鸭视网膜节细胞层细胞的分布

利用 Nissl染色和计算机图像处理的方法 ,研究了 3 0日龄北京鸭 (P3 0 )视网膜节细胞层 (ganglion cell layer,GCL )细胞的形态大小、数量和密度分布。结果表明 ,北京鸭视网膜节细胞层细胞形态多样 ,有圆形、椭圆形和多角形等。不同区域细胞大小差异显著 ,由视网膜中央区向周边部逐渐增大 (CA为 (53 .3 2± 2 0 .53 )μm2 ;NP 为 89.73± 53 .0 1 μm2 ;TP 为1 4 8.71± 86.2 1 μm2 )。细胞数量分布很不均匀 ,在视网膜中央有一个高密度区即中央高密度区(CA约为为 1 0 660个 / mm2 ) ,且由视网膜中央部向视网膜周边部细胞密度逐渐降低 (TP约为53 40个 / mm2 ;NP约为 583 0个 / mm2 )。可见 ,节细胞层细胞由中央区至周边部由小至大递增而细胞密度梯度呈现递减的变化     

Malignant stromal cell tumor of the spleen in a WBN/Kob rat

Primary splenic stromal tumors have rarely been reported in rodents. We report the case of a 90-week-old male WBN/Kob rat with a nodular demarcated mass in the spleen, which was kept as a non-treated animal in a long-term animal study. Histopathology revealed round to short spindle-shaped tumor cells arranged in a solid growth pattern. Invasive growth, anisokaryosis, and high mitotic activity (46 per 10 high-power fields [2.37 mm²]) were observed to be multifocal, but most tumor cells showed mild nuclear pleomorphism. The pattern of silver impregnation corresponded to that of the marginal zone of the red pulp. Immunohistochemistry revealed that the tumor cells were double positive for fascin and desmin and focally positive for Iba-1 and OX-6 expression. These characteristics were similar to those observed in fibroblastic reticular cells and dendritic cells in the marginal zone of the red pulp. These findings suggest that the malignant stromal cell tumor of the spleen in this case had characteristics of both fibroblastic reticular cells and dendritic cells.