香菇产α-半乳糖苷酶的液体发酵工艺优化

以菌丝体干重和发酵液中α-半乳糖苷酶活性为指标,在单因素实验的基础上用响应面法优化香菇(Lentinula edodes)液体发酵工艺。最佳发酵条件为发酵培养基含5.39%葡萄糖、0.6%蛋白胨、0.89%瓜尔豆胶、0.1%磷酸二氢钾、0.05%硫酸镁,培养基初始pH 6,接种量9%,温度26℃,转速160r/min,发酵20d,在此条件下香菇菌丝体干重达1.93g/L,发酵液中α-半乳糖苷酶活性为2.26U/mL,与优化前相比,分别提高了22.15%和29.88%。实验结果为香菇α-半乳糖苷酶的开发提供了科学的数据。     

高活性云芝α-半乳糖苷酶发酵培养基的优化

研究了云芝(Coriolus versicolor)液体发酵过程中不同诱导物及培养基组成对α-半乳糖苷酶活性的影响。采用L_9(3~4)正交设计法对云芝发酵培养基进行了优化,确定了其发酵产酶的最佳培养基。结果表明,云芝发酵生产α-半乳糖苷酶的最佳诱导物是豆粕粉,最优培养基为豆粕粉2%、半乳糖0.5%、KH_2PO_4 0.1%、MgSO_4 0.1%,发酵培养8 d,酶活性为301.6 U·mL~(-1)。     

表面活性剂对产碱性蛋白酶菌株发酵的影响

从大连海域海泥样品中筛选获得的产碱性蛋白酶的海洋细菌入手,选用司班、吐温-80、硬脂酸、羟甲基纤维素钠4种表面活性剂,采用摇瓶发酵,福林酚显色法测粗酶活性,初步确定其中司班-80为最适表面活性剂,司班用量为0.625%时,酶活性为169.8U/m L。设计正交实验,优化发酵条件,用L9(33)正交表,利用SPSS13.0软件处理数据得到最优工艺——培养温度33℃,培养基p H8.0,培养时间48h。可用于后续发酵产酶研究。     

纤维素分解菌ZJW-4产酶条件研究

采用单因素试验法进行不同条件下的液体发酵培养,确定纤维素分解菌ZJW-4的最适产酶条件。结果表明:ZJW-4产纤维素酶的最优发酵条件为以蛋白胨+(NH4)2SO4为氮源的培养基,28℃,pH 6,静置培养48 h。     

桑黄漆酶的发酵条件研究初报

采用液体深层培养方法通过不同碳源、氮源、pH值、温度等因素对桑黄产酶量的影响,研究桑黄合成漆酶的最适发酵条件。采用L9(34)正交设计法对桑黄合成漆酶发酵培养基进行了优化,初步筛选出了桑黄合成漆酶发酵培养基。结果表明,培养基为玉米粉1%、麦麸1%、葡萄糖2%、蛋白胨0.5%、酵母膏0.5%、磷酸二氢钾0.1%、硫酸镁0.05%、添加Cu2+浓度60μmol.L-1,维生素B1 1 mg.100-1.mL-1,漆酶产量最高,为7 666 U.L-1。     

糙皮侧耳以果皮为基质固态发酵产漆酶及其酶学性质的研究

以漆酶活性为指标,利用不同果皮为基质对糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)固态发酵产漆酶的条件进行优化并对所产漆酶进行纯化,研究纯化后漆酶的酶学性质。结果表明:以柚皮为培养基质(5g柚皮、25mL水、20μL吐温-80),30℃固态发酵10d,糙皮侧耳产漆酶的活性最高,比活力为21800U/g;在该条件下将糙皮侧耳所产漆酶的粗酶液用硫酸铵沉淀、透析、浓缩、DEAE-纤维离子交换柱层析得到漆酶蛋白单一条带,SDS-PAGE检测蛋白相对分子质量约66000;该漆酶命名为Lac h2,其最适反应温度为60℃,最适反应pH值为4.5;在30～50℃,pH 4.5～6.0范围内稳定;金属离子Zn~(2+)、Mn~(2+)、Cu~(2+)和Mg~(2+)对纯化的漆酶Lac h2的酶活力有促进作用而Ca~(2+)、Ag~+和Fe~(2+)对Lac h2的酶活力有抑制作用。     

香菇漆酶的纯化及部分性质研究

对香菇漆酶进行了丙酮分级沉降、半透膜透析、DEAE一纤维素及Sephadex G100柱层析纯化,并研究了漆酶的产酶曲线及酶作用最适条件.,结果表明:在该培养条件下,香菇第10天达产酶高峰,峰值酶活为216 U/mL,酶作用的最适pH值为3.6,在pH值3.6～4.6有较强的稳定性.最适酶解温度为30℃,Ba2 、Cu2 对香菇漆酶有激活作用,而Ag 、Fe3 则能明显抑制漆酶活性,其它离子影响相对较小.以邻联甲苯胺为底物的表观Km值为1.68 mmol/L.     

云芝发酵液中α-半乳糖苷酶酶学特性的研究

为了研究云芝(Trametes versicolor)发酵液中α-半乳糖苷酶的生理生化性质,并筛选提高该酶稳定性的共溶剂,将α-半乳糖苷酶在不同p H缓冲液、不同反应温度、不同金属离子溶液以及不同保护剂中孵育一定的时间,并测定酶活。结果表明,α-半乳糖苷酶的最适反应p H为3.0,最适反应温度为60℃;金属离子Pb2+和Fe3+对酶活性有较强的抑制作用,并随着浓度的升高抑制作用有所增强,Cd~(2+)、Cu2+和Hg2+致使α-半乳糖苷酶的活性降低20%~50%,Ca2+、Mg2+、Zn2+和Fe2+等离子对该酶的活性影响不明显;保护剂筛选结果显示,2 mmol·L-1甘露醇对该酶热稳定性的保护效果最好,其次是海藻糖、蜜二糖、棉籽糖、L-半胱氨酸、甘油和黄原胶等。     

酶解法去除云芝菌丝体粗多糖中淀粉的研究

以水提醇沉的方法得到的云芝液体发酵菌丝体粗多糖为原料,通过酶解法去除淀粉的研究,为今后云芝菌丝体粗多糖的进一步分离纯化提供了条件。试验选取酶用量、温度、pH、酶解时间为参数。采用正交试验优化酶解法去除云芝菌丝体粗多糖中淀粉的最佳工艺参数研究,结果表明:耐高温α-淀粉酶在加酶量1 mg/g、pH6.5、温度100℃、酶解时间40 min;糖化酶在加酶量40 mg/g、pH4.5、温度60℃、酶解时间2 h的条件下,能明显酶解去除云芝菌丝体粗多糖中的淀粉。     

吲哚乙酸(IAA)对黑脉羊肚菌胞外SOD活性的影响

为了优化液体发酵环境条件,通过向培养基中添加吲哚乙酸(IAA),改变培养基成分组成的方法,研究吲哚乙酸对黑脉羊肚菌发酵培养产胞外SOD酶以及菌丝体生长的影响。结果表明,黑脉羊肚菌发酵培养过程中,最适菌丝体生长的培养条件为温度28℃,初始p H7,培养时间9 d;最适产酶的培养条件为温度20℃,初始p H5.5,培养时间5 d;IAA添加浓度为1.0μg·m L~(-1)时,菌丝体重量最大为14.03 g·L~(-1),浓度为2.5μg·m L~(-1)时,相对酶活性达到最高。     

复合酶法提取西兰花老茎不溶性膳食纤维

本文以西兰花老茎为原料,采用α-高温淀粉酶和中性蛋白酶复合提取不溶性膳食纤维(IDF)。结果表明:复合酶法提取西兰花老茎不溶性膳食纤维最佳工艺为α-高温淀粉酶添加量7.5μL、酶解温度90℃、pH6、酶解时间60min,中性蛋白酶添加量20μL、酶解温度50℃、pH8、酶解时间60min。在此条件下,西兰花老茎IDF提取率为33.54%。复合酶法提取西兰花老茎不溶性膳食纤维的研究为西兰花老茎资源的综合利用提供了借鉴。     

一株蝉花的ITS序列分析及产纤溶酶条件的研究

以新分离的蝉花(Cordyceps cicadae)CC1504为试材,通过真菌核糖体DNA内转录间隔区(ITS)序列分析确定菌株的分类学地位;利用琼脂糖-纤维蛋白平板法测定蝉花产纤溶酶的能力,通过单因素试验确定其液体发酵产纤溶酶的最适碳源和最适氮源;以正交实验优化菌株产纤溶酶的培养基组成。结果表明:ITS序列进化树分析确定了该菌株的分类地位为蝉花;该蝉花产纤溶酶的最适碳源为乳糖,产酶水平为248.95U·mL~(-1),其次是甘油,为198.94U·mL~(-1);蝉花产纤溶酶的最适氮源为蛋白胨,产酶水平可达240.68U·mL~(-1),其次是酵母膏,为89.23U·mL~(-1);获得的最佳培养基碳氮源组成为:乳糖10g·L~(-1)、蛋白胨10g·L~(-1)、酵母膏3g·L~(-1),可发酵获得的纤溶酶水平达262.05U·mL~(-1)。     

蛹虫草液体培养产纤溶酶条件优化研究

利用蛋白纤维平板法对1株蛹虫草(Cordyceps militaris)菌株液体发酵产生纤溶酶的碳氮条件进行系统优化;通过单因素试验筛选最佳碳源和氮源,再根据单因素试验结果进行正交设计实验优化该菌株产纤溶酶的最佳配方。结果表明:产纤溶酶的最佳碳源为乳糖,纤溶酶活性达118.69U/mL,其次是不加碳源的空白对照,活性为109.12U/mL;蚕蛹粉是该菌株产纤溶酶的最佳氮源,活性可达118.69U/mL,其次是酵母浸膏,活性为29.10U/mL;纤溶酶产量与菌丝体生物量之间无必然相关性;产纤溶酶的最佳培养基为乳糖10g/L、蚕蛹粉10g/L、酵母浸膏5g/L,获得的纤溶酶活性高达142.26U/mL。     

丝瓜过氧化氢酶(Catalase,CAT)酶学特性的研究

为研究丝瓜过氧化氢酶(Catalase,CAT)酶学特性,本研究应用分光光度计开展温度、pH、酶体积、反应底物浓度等对酶反应的影响,为丝瓜酶促褐变的研究提供基础。结果表明,CAT最适反应体系:以H_2O_2为底物,最适底物浓度为0.33 mol/L H_2O_2,Km值为0.1818 mol/L,最适温度为40℃,最适pH值为7.8,最适酶液体积为0.1 ml。     

棉籽壳发酵过程中的一些生物化学变化

在棉籽壳发酵过程中 ,发酵料干重、纤维素和半纤维素含量逐渐减少 ,而木质素含量逐渐增加 ;在发酵期间除胞外HC酶、漆酶和果胶酶活性相对较高外 ,胞外CMC酶、FP酶、β -葡萄糖苷酶、淀粉酶、过氧化物酶和蛋白酶活性均较低且有时为零 ;在发酵后 3～9d期间 ,在每次翻堆后 ,堆心高温区温度稳定在 6 0℃以上的时间均超过 12h ;发酵初期pH下降显著     

美味牛肝菌液体菌种工艺研究

探讨不同碳源、氮源对美味牛肝菌液体发酵的影响，确定美味牛肝菌最适液体发酵的碳源、氨源和培养条件。结果表明：最适碳源为葡萄糖2．0%、蔗糖1.0%最适氮源为牛肉膏0.5％、酵母膏0.5％，并且得到最佳发酵工艺条件为初始pH值55，转速180r/min，250mL三角瓶装液量100mL，接种量10％。     

灵芝液体发酵条件研究及保健饮料的研制

试验对灵芝液体发酵培养基的氮源、碳源及其最适浓度、初始pH、发酵温度、发酵时间和灵芝液体发酵饮料的生产工艺进行了研究。结果表明,灵芝液体最适发酵为：氮、碳源分别为蛋白胨、葡萄糖,碳源浓度为3％,培养基初始pH 6．5,发酵温度为28℃,发酵时问5 d。通过正交实验,确定了灵芝液体发酵保健饮料的最佳配方：灵芝发酵液14．3％,甜味剂5％,柠檬酸0．02％。研制出了符合食品卫生标准的灵芝液体发酵保健饮料。     

哈茨木霉β-葡聚糖酶诱导、纯化及对黄瓜幼苗的促生防病作用

在实验室条件下分别以β-葡聚糖、麦麸和黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum)细胞壁作为唯一碳源诱导哈茨木霉菌(Trichoderma harzianum)Th-30发酵产生β-葡聚糖酶,采用硫酸铵盐析和琼脂糖凝胶色谱柱层析法对β-葡聚糖酶进行分离纯化,以津研4号黄瓜为试验材料,探究β-葡聚糖酶对黄瓜幼苗抗性生理指标、形态指标的影响及黄瓜常见土传病害的防控作用。结果表明：不同诱导条件下木霉Th-30发酵产β-葡聚糖酶活性差异显著,经β-葡聚糖诱导发酵的粗酶液酶活性最高,发酵72 h时达75.63 U·mL^-1;纯化的β-葡聚糖酶比活力为783.56 U·mg^-1,是粗酶液的45.32倍;5倍液和10倍液β-葡聚糖酶可显著提高黄瓜幼苗的根系活力、游离脯氨酸含量、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)活性以及根冠比和壮苗指数;β-葡聚糖酶10倍液处理对黄瓜立枯病、黄瓜枯萎病、黄瓜疫病、黄瓜猝倒病、黄瓜菌核病的防效为50.36%～80.63%。     

羊肚菌液体培养过程中几种胞外酶活性变化研究

摘要测定了编号为M延-10羊肚菌在液体培养基中生长时,培养液pH值、胞外羧甲基纤维素酶、淀粉酶、漆酶、愈创木酚酶、蛋白酶酶活性及蛋白质、糖含量变化。结果表明,在整个培养期内5种酶活性有一定变化规律,但不同酶活性有较大差异,产酶高峰也不尽相同。培养过程中蛋白质、糖含量随时间变化,且与酶活力有关。     

灰树花液体培养特性及胞外酶活性研究

采用完全随机设计对灰树花液体培养特性进行了研究,并测定了其胞外酶活性。结果表明:灰树花液体培养发酵最佳碳源为葡萄糖,最佳氮源为硝酸铵,磷酸二氢钾为其最佳矿质元素,最适初始pH 2～4。灰树花在PDA液体培养基中发酵培养时,淀粉酶、羧甲基纤维素酶、邻苯二酚氧化酶、愈创木酚氧化酶均有活性且活性变化较大。在整个发酵培养过程中,邻苯二酚氧化酶、愈创木酚氧化酶活性较低;羧甲基纤维素酶活性最高,且前期与后期酶活性较中期高;淀粉酶活性随培养时间波动上升。