鸡减蛋综合症油乳剂灭活疫苗的免疫效果观察

将试验鸡分成3组,第一组、第二组和第三组鸡分别接种鸡减蛋综合症油乳剂灭活苗1ml、 1．5ml和2ml。接种疫苗后3、4、5、6、7、9、11、13、15d采取各组鸡血,检测HI抗体。接种2ml油乳剂灭 活苗的组鸡HI抗体效价上升快,效价高,但下降也非常快,较适合于紧急接种。1ml和1．5ml油乳剂 灭活苗接种鸡HI抗体效价上升较慢,产生免疫力的时间较迟,但维持高抗体水平的时间较长,适于 预防接种。     

肠毒素型大肠杆菌F18菌毛对产蛋鸡免疫的原性

提取猪源肠毒素型大肠杆菌(ETEC)标准株和临床分离株F18菌毛,并制备弗氏佐剂苗,分别免疫产蛋母鸡后用间接ELISA法定期检测母鸡卵黄抗体和血清抗体效价.结果表明:无论标准株还是分离株,F18菌毛对产蛋鸡均具有良好的免疫原性,卵黄抗体效价最高可达1∶25600,血清抗体效价高于卵黄抗体效价,最高可达1∶51200.     

猪细小病毒灭活疫苗NJ株毒种分离及鉴定

为防控猪细小病毒病,进行了猪细小病毒灭活疫苗毒种研究。将南京某猪场初产母猪流产胎儿的脾、肺等组织病料处理后接种ST细胞培养,获得了1株猪细小病毒强毒,将分离毒株适当稀释接种ST细胞,经3轮蚀斑纯化获得1株纯净的猪细小病毒NJ株(PPV-NJ株),作为疫苗毒株。将NJ株接种ST细胞培养连续传15代,每代次病毒效价均不低于1 ml 107.25TCID50、血凝素效价不低于29。选择第5代病毒液,灭活后与矿物油佐剂混合乳化制成灭活疫苗,以不同剂量分别免疫豚鼠和后备母猪,用血凝抑制试验(HI)和ELISA检测抗体效价。分别用剂量0.125 ml、0.250 ml和0.500 ml疫苗免疫豚鼠28 d后,各免疫组HI抗体效价均高于28,0.5 ml组HI抗体效价高达211,ELISA抗体均显示阳性(OD630≥0.32),分别用剂量0.5 ml、1.0 ml和2.0 ml疫苗免疫后备母猪后,HI检测结果显示,3个剂量组免疫后1周HI抗体效价高于26,3周后达峰值,至免疫后4个月略有下降,2.00 ml剂量组HI效价最高(211.75)。ELISA检测结果显示,各剂量组在免疫后1周均转阳(OD630≥0.32),免疫后4～18周均维持较高水平。HI抗体效价和ELISA抗体水平与免疫剂量均呈正相关性。结果显示,利用NJ株病毒制备的灭活疫苗具有抗体产生快、效价高等特点,显示出良好的疫苗开发前景。     

免疫增强剂提高禽用多联疫苗在蛋鸡的免疫效力

评价VA5免疫增强剂对禽用多联苗的免疫增强作用。将VA5与新城疫-传染性支气管炎-减蛋下降综合症-H9亚型禽流感(新-支-减-流)四联疫苗合用免疫海兰褐壳蛋鸡和罗曼蛋鸡、与新-支-流三联疫苗合用免疫海兰褐壳蛋鸡,评价免疫后的抗体效价和攻毒后的保护效力。海兰褐壳蛋鸡或罗曼蛋鸡免疫含VA5的四联疫苗、三联疫苗后的第2、第3和第4周,针对新城疫、传支、减蛋综合征和禽流感的血清血凝抑制(HI)抗体效价均持续高于不加增强剂的常规疫苗组,且第3和第4周HI抗体效价均差异显著(P0.05);针对新城疫、传支、减蛋综合征和禽流感的粘膜HI抗体效价均亦高于不加增强剂的常规苗组,且差异极显著(P0.01)。免疫含VA5四联疫苗组的海兰褐壳蛋鸡,在新城疫强毒攻毒后,以临床症状判断,可以100%保护;在禽流感H9变异株攻毒后,可完全抑制不排毒。对上述2种病毒的攻毒保护力均高于常规疫苗。结果表明,VA5免疫增强剂能够提高鸡新-支-减-流四联疫苗、新-支-流三联疫苗对蛋鸡的免疫效力,具有很好的应用前景。     

卵黄抗体测定与鸡新城疯免疫接种的应用研究

利用血凝（ＨＡ）和血凝抑制（ＨＩ）试验，来自同一机体和同一鸡群非同一机体的２７９６只罗曼蛋鸡血样及蛋样进行了鸡新城疫血清和卵黄抗体水平的检测。结果表明：血清和卵黄无论来自同一机体，还是来自同一鸡群，所测抗体效价基本一致，对６１０枚入孵种蛋不同时间卵黄抗体和该批种蛋孵出的６１０只雏鸡不同日龄血清抗体水平进行了检测，发现种蛋卵黄抗体效价与雏鸡血清抗体效价有一定的相关性，用卵黄监测种蛋折抗体水平可以得知     

卵黄抗体测定与鸡新城疫免疫接种的应用研究

利用血凝（ＨＡ）和血凝抑制（ＨＩ）试验，对来自同一机体和同一鸡群非同一机体的２７９６只罗曼蛋鸡血样及蛋样进行了鸡新城疫血清和卵黄抗体水平的检测。结果表明：血清和卵黄无论来自同一机体，还是来自同一鸡群，所测抗体效价基本一致。对６１０枚入孵种蛋不同时间卵黄抗体和该批种蛋孵出的６１０只雏鸡不同日龄血清抗体水平进行了检测，发现种蛋卵黄抗体效价与雏鸡血清抗体效价有一定的相关性，用卵黄监测种蛋的抗体水平可以得知雏鸡出壳后首免时间。     

鸽新城疫病毒HI抗体效价合格率与离散度的相关性分析

为了解鸽新城疫病毒血凝抑制(HI)抗体效价合格率与离散度之间的相关性,本试验采集了不同鸽舍中新城疫免疫鸽的血液,制备了免疫血清,通过血凝抑制试验检测了血清中新城疫病毒HI抗体的效价,计算了HI抗体效价的合格率和离散度,借助软件工具分析了两者之间的相关性。结果表明,不同鸽舍中鸽群的HI抗体效价合格率不同,离散度也较大,HI抗体效价合格率和离散度之间呈极显著性负相关(P<0。001)。说明提高鸽新城疫病毒HI抗体效价合格率,降低HI抗体效价的离散度对预防鸽新城疫具有重要意义。     

抗豪猪大肠杆菌卵黄抗体的制备

采用甲醛灭活的仔豪猪腹泻大肠杆菌为抗原,免疫健康140日龄桃源蛋鸡,刺激机体反应生成血清抗体和卵黄抗体,并采用平板凝集试验检测抗体效价,研究获得含有高效价血清和高免蛋的最佳条件。结果表明,双翼下静脉注射10~(12)CFU/mL大肠杆菌悬浮液的最佳免疫剂量为1 mL/次。在大肠杆菌悬液中添加等量的完全福氏佐剂对免疫应答加强的程度最高。强化免疫程序能大大加强产蛋母鸡的免疫应答强度,其中初免后,每周强化免疫1次,连续4次,效果最好。无菌检测及动物安全性试验表明,制备的卵黄抗体安全可靠。制备的卵黄抗体效价和血清抗体效价变化幅度小、稳定性好、持续时间久,为临床上防治仔豪猪腹泻大肠杆菌病提供了新的手段。     

鸡减蛋综合征油乳灭活苗的制备及其免疫效果的测定

本研究以鸡减蛋综合征(EDS—76)当地流行毒株做为种毒培养病毒,配以油佐剂制奋了鸡减蛋综合征油乳灭活苗。经实验室免疫试验和大田免疫试验证明,该苗在免疫后第10天即可产生坚强的免疫力(HI效价为8.5log2),到第30天血清中HI效价达到高峰(11.25log2),直到第150天,其HI效价仍为(7.5log2)。对所有用苗鸡群(10万余只)跟踪调查10个月,未发现有发病鸡群,免疫效果普遍反映良好。保存期试验证明,该苗在4℃可保存18个月以上,室温阴暗处可保存10个月以上,这些均证明该苗产生免疫力快,强而且持久,可以有效地控制鸡减蛋综合征在本地区的流行,应进行大面积的推广应用。     

卵黄琼扩检测鸡传染性法氏囊病抗体初报

以卵黄代替血清进行琼扩试验，对两个父母代鸡群所产种卵的检测结果表明，氯仿处理后的卵黄抗体效价与血清效价符合率最高，从而证实卵黄琼扩试验是检测鸡传染性法氏囊病抗体水平的有效手段     

应用竞争性酶联免疫吸附试验检测鸡产蛋下降综合症抗体

用鸡产蛋下降综合症(Egg Drop Syndrome-76,EDS-76)灭活油佐剂苗,免疫30周龄产蛋鸡,获取高免血清。提取特异性免疫球蛋白后,用辣根过氧化酶标记,制备成酶标抗体,建立了竞争性酶联免疫吸附试验。该法与血凝抑制试验的平行测定的比较结果为,前者的阳性检出率为71.8%,而后者为59.0%,所以前者明显地优于后者。而且该试验敏感性高,特异性强,具有快速、准确的优点,适用于大规模的检测和检疫。     

鸡产蛋下降综合症(EDS—76)灭活油乳剂苗的研究 Ⅱ.不同单位病毒和佐剂的疫苗及和其它同类产品的免疫比较

在本试验中,我们比较了每头份疫苗含不同血凝单位病毒的免疫效果,结果每头份含2000单位和3000单位的病毒疫苗免疫后HI抗体峰值分别为9.2log_2和9.6log_2,而含1000单位病毒的疫苗HI抗体峰值为6.8log_2.油乳剂苗的免疫后抗体效价显著高于氢氧化铝胶为佐剂的灭活苗。     

用全血平板凝集抑制试验快速诊断鸡减蛋综合症(EDS_(76))

利用鸡产蛋下降综合症(EDS_(76))病毒具有凝集红细胞的特性,建立了全血平板凝集试验。用各种不同血凝价的病毒制备平板抗原,通过方阵试验,确定了全血平板凝集抑制试验抗原的测试单位。该法具有较高的阳性检出率,而且具有比现有的血凝抑制试验(HI)和琼脂扩散沉淀试验(AGP)更快速、更简便易行的优点,适用于基层单位的推广应用,尤其适于净化种鸡群,淘汰阳性种鸡。     

陕西关中地区EDS－76病毒的分离与初步鉴定

采用鸭胚传代的方法，首次从陕西省关中地区ＥＤＳ－７６ＨＩ抗体阳性鸡群的卵巢和输卵管中分离到１株病毒，经血凝与血凝抑制试验、电镜现实、乙醚和氯仿的敏感性试验、核酸型鉴定试验及回归动物试验等，鉴定该分离物为ＥＤＳ－７６病毒。从病原学上证实陕西省已有该病的发生与流行     

双夹心ELISA检测鸡EDS-76病毒抗原的研究

应用鸡抗EDS-76病毒、兔抗EDS-76病毒抗体和羊抗兔抗体,建立了检测EDS-76的双夹心ELISA方法,本试验确定的鸡抗EDS-76病毒抗体、兔抗EDS-76病毒抗体和HRP-羊抗兔抗体的最佳工作浓度分别为1∶160、1∶300和1∶1000。本法对纯化EDS-76病毒的最低检出量约为5 ng/孔。通过对EDS-76病毒试验感染鸡脏器带毒、排毒情况和临床样本的检测,表明双夹心ELISA方法对EDS-76病毒的检测特异性强、敏感度高、适合于成批样本的检测。     

鸡减蛋综合症病毒（EDS—76）的分离与鉴定

采取新疆五家渠某鸡场发病鸡病料，接种鸭胚，分离病毒，病料在鸭胚中盲传至第５代，鸭胚尿囊液ＨＡ效价达２１７，ＨＡ可被ＥＤＳ－７６标准阳性血清抑制。免疫电镜观察到了病毒颗粒，表明该病是由ＥＤＳ－７６病毒所致     

琼扩试验检测鸡传染性法氏囊病卵黄抗体的研究

采用琼脂扩散(AGP)试验检测免疫鸡血清和3种不同稀释液(氯仿、8％柠檬酸钠、16％氯化钠)处理的卵黄样品，结果表明，免疫后的卵黄样品与血清样品的A(；P抗体效价一致，为1：16。氯仿样品的检出率最高，为85％，血清样品的检出率为67％，8％柠檬酸钠和16％氯化钠样品的检出率分别为47％和25％。同时，对AGP检测结果分别在点样后24h、48h和72h进行观察，结果表明，AGP结果的最佳观察时间在24～48h。检测氯仿处理卵黄抗体的AGP可以代替检测血清抗体的AGP，以避免采血造成应激，具有重要的经济意义，     

PCR方法检测鸡减蛋综合征病毒

根据已报道的鸡减蛋综合征(Egg drop syndrome 1976 EDS-76)病毒DNA序列,设计合成了1对能扩增300 bp DNA片段的引物,建立了EDS-76病毒的聚合酶链式反应(PCR)诊断方法。该方法对EDS-76病毒标准株AV-127扩增结果为阳性;对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)、鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)和鸡新城疫病毒(NDV)的扩增结果均为阴性。结果表明该方法特异且敏感,检测的最低病毒DNA含量达到2.5×10-2pg,PCR检测表明,从试验感染鸡的心脏中不能检测出病毒,肝脏和肾脏只有在感染后7~15 d检出,在试验感染后4~21 d的子宫、血液和4~17 d的脾中均能检测到病毒。     

ND-EDS-76异源二联油苗的研制

将鸭源鸡新城疫 (ND)病毒 D1 0 株和鸡减蛋综合症 (EDS- 76 )病毒 GC2 株同时接种于同一鸭胚内复制 ,增殖 96 h收取尿囊液 ,用甲醛灭活后加白油佐剂制成 ND- EDS- 76异源二联油乳剂灭活疫苗。该疫苗生产工艺简单 ,成本低 ,经试用表明可有效地预防 ND和 EDS- 76的发生。