J亚群禽白血病病毒与禽网状内皮增生症病毒共感染对肉鸡生长和免疫功能的抑制作用

1日龄网鸡感染J亚群禽白血病病毒(ALV-J)以及共感染禽网状内皮增生症病毒(REV)后,肉鸡生长发育明显受阻,体重增重明显下降(P＜0.05),法氏囊、胸腺明显萎缩(P＜0.05),在用新城疫疫苗免疫后,感染组血清中新城疫抗体效价显著低于对照组(P＜0.05);在ALV-J和REV共感染后,这种抑制作用更为明显(P＜0.01).ALV J单独感染后,鸡对传染性法氏囊病病毒(IBDV)弱毒疫苗免疫后的抗体反应与对照组没有明显差别,但ALV-J与REV的共感染可明显延缓鸡对IBDV弱毒疫苗免疫的抗体反应.     

J亚群禽白血病病毒与禽网状内皮增生症病毒共感染对肉鸡生长和免疫功能的抑制作用

1日龄肉鸡感染J亚群禽白血病病毒(ALV—J)以及共感染禽网状内皮增生症病毒(REV)后，肉鸡生长发育明显受阻，体重增重明显下降(P＜0．05)，法氏囊、胸腺明显萎缩(P＜0．05)，在用新城疫疫苗免疫后，感染组血清中新城疫抗体效价显著低于对照组(P＜0．05)；在ALV—J和REV共感染后，这种抑制作用更为明显(P＜0．01)。ALV—J单独感染后，鸡对传染性法氏囊病病毒(IBDV)弱毒疫苗免疫后的抗体反应与对照组没有明显差别，但ALV—J与REV的共感染可明显延缓鸡对IBDV弱毒疫苗免疫的抗体反应。     

从J亚群禽白血病肿瘤中检测出禽网状内皮组织增生症病毒

将表现为典型 J亚群禽白血病肿瘤的病料分别接种于鸡胚成纤维细胞和 DF1细胞 ,采用间接荧光抗体试验(IFA)和 PCR方法 ,从这些肿瘤病料中分离和鉴定出 8株 J亚群禽白血病病毒 (AL V- J)。对证明感染了 AL V- J的细胞继续培养 ,并用禽网状内皮组织增生症病毒 (REV)的特异性单抗及引物做 IFA和 PCR,在 8株 AL V- J中 ,有 3株AL V- J的感染细胞中同时有 REV感染。由此表明 ,发生肿瘤的肉鸡中 ,AL V- J和 REV的共感染已相当普遍。将这 3株 REV- SD0 0 0 3、SD0 0 0 4和 SD0 10 2的 3′- L TR用 PCR扩增、克隆和序列比较 ,发现分离的 SD0 0 0 3、SD0 0 0 4和SD0 10 2与国内的另外 2株 REV- SD990 1和 HA990 1的同源性为 96 .7%和 96 .1% ;而与另 1株 REV参考株鸭脾坏死性病毒 (SNV)的同源性高达 99%。     

鸡肿瘤病料中马立克氏病病毒和禽网状内皮组织增生症病毒共感染的研究

采用细胞培养、间接荧光抗体试验(IFA)、聚合酶链式反应(PCR)和斑点杂交(Dotblot)的方法从我国不同地区发生肿瘤的病料中同时进行MDV和REV的分离和鉴定。在分离到的13株MDV野毒株中，有4株培养物既能在IFA中与REV的单抗反应，又可以用PCR扩增出REV的LTR；另有4株培养物能扩增出REV的LTR，但在IFA中却不与REV的单抗反应。结果表明我国MD肿瘤中存在着REV的共感染，且我国MDV某些野毒株的基因组中有可能已经整合进了REV的LTR序列。     

免疫抑制鸡群鸡传染性贫血病毒和网状内皮增生症病毒共感染检测

分别用digoxigenin标记的鸡传染性贫血病毒（CAV)和禽网状内皮增生症病毒（REV）核酸探针以及PCR技术对某种鸡场进行检测，检测结果表明，在20个样品中，CAV和REV感染的阳性率分别为10％和5％，这一结果显示，CAV和REV感染是导致该鸡场发生免疫抑制的主要病因之一。     

禽白血病病毒J亚群感染对五华鸡生产性能和免疫性能的影响

为了解禽白血病病毒J-亚群(ALV-J)感染对安徽省优良地方品种鸡—五华鸡生产性能和免疫性能的影响,在对五华鸡开展ALV-J血清学感染检测调研的基础上,对进入产蛋高峰期的五华鸡ALV-J血清阳性鸡群和阴性鸡群开展了为期18周的试验对比观察研究。结果表明,ALV-J血清阳性(感染或曾经感染)对五华鸡没有造成明显的发病和死亡增高现象;对鸡群新城疫(ND)、禽流感H5和H9疫苗的免疫效果没有呈现明显抑制;但对鸡群的产蛋率和平均蛋重会造成一定程度的下降(对照组平均产蛋率和蛋重分别为56%和0.055 kg,而试验组为53.37%和0.051 kg),料蛋比有一定程度的上升(对照组的料蛋比为3.49∶1,试验组为3.92∶1)。目前ALV-J感染虽然不会造成五华鸡明显的发病、死亡及免疫抑制,但可造成明显的生产性能下降和饲养成本的提高,必须引起高度重视,应及早开展原种鸡的ALV-J净化工作。     

感染网状内皮组织增殖病病毒SPF雏鸡中枢和外周免疫器官的免疫学变化

实验研究了１日龄ＳＰＦ雏鸡感染网状内皮组织增殖病病毒（Ｒｅｔｉｃｕｌｏｅｎｄｏｔｈｅｌｉｏｓｉｓｖｉｒｕｓ,ＲＥＶ）后免疫器官匀浆涂片的免疫学变化。结果发现,雏鸡感染ＲＥＶ后其免疫器官法氏囊、胸腺、脾脏中淋巴细胞数、酯酶阳性（ＡＮＡＥ＋）Ｔ细胞数以及颗粒型和弥散型ＡＮＡＥ＋Ｔ淋巴细胞数显著降低（Ｐ＜０．０５,Ｐ＜０．０１）。表明１日龄ＳＰＦ雏鸡感染ＲＥＶ后,其中枢免疫器官和外周免疫器官的细胞免疫呈现抑制。     

不同饲养方式对贵妃鸡生长性能和免疫器官发育的影响

为研究不同饲养方式对贵妃鸡生长性能和免疫器官发育的影响,选用1日龄初生重相近的贵妃鸡180羽,随机分为散养、地面平养和立体笼养三组,每组3个重复,每个重复20羽鸡,试验鸡日粮全部相同,试验期49d。在不同试验阶段称体重和耗料重,并进行屠宰称量其肝脏、脾脏重。结果表明,散养组鸡的生长性能和免疫器官发育均低于地面平养和笼养,日增重和肝脏器官指数差异显著(P<0.05),料重比和脾脏器官指数无显著差异(P>0.05)。     

溶菌酶对肉鸭生长性能和免疫器官指数的影响

试验用溶菌酶代替常用的抗生素饲喂樱桃谷肉鸭,旨在探讨其对肉鸭生产性能和免疫器官指数的影响。试验采用单因素完全随机分组设计,共设4个处理组(1个对照组、3个试验组),对照组饲喂基础日粮。试验组分别饲喂基础日粮+溶菌酶、基础日粮+吉他霉素和基础日粮+金霉素日粮。每个处理3个重复,每个重复50只。试验结果表明:在采食量方面各试验组与对照组差异不显著(P>0.05);在平均日增重方面,试验组显著高于对照组(P<0.05),但是试验组之间差异不显著(P>0.05);在料肉比和饲料增重成本方面,各试验组均显著低于对照组(P<0.05),试验组之间差异不显著(P>0.05),其中溶菌酶组料肉比和饲料增重成本最低。各试验组与对照组相比,均可以显著提高免疫器官指数(P<0.05),溶菌酶组效果最好。     

糖萜素对雏鸡生长性能及免疫器官的影响

为探讨糖萜素对雏鸡生长性能及免疫器官的影响,选择1日龄海兰褐蛋用雏鸡450只,随机分组成3组,每组设3个重复,每个重复50只。分别为对照组（空白组）、金霉素组（80mg/kg）和糖萜素组（650mg/kg）。结果表明,糖萜素和金霉素与对照组相比：全期平均日增重分别提高13.30%、9.55%;料重比分别降低16.61%、9.19%;雏鸡成活率分别提高5.60%、3.02%;雏鸡免疫器官指数均有不同程度的提高。     

蛋鸡中发现J亚群白血病与网状内皮增生症自然混合感染

发病蛋鸡经组织学、免疫组化检测确诊为J亚群白血病与网状内皮增生症混合感染。与人工接种病例不同的是，在肿瘤组织内还发现一种特殊的细胞——淋巴-巨噬细胞；在骨髓和肿瘤组织中检测到部分髓细胞胞浆内有ALV—J抗原表达。从发病情况、各器官病变程度及免疫组化结果来看，2种病原存在明显的相互协同作用，脾可能是网状内皮增生症的原发器官。但其发病的时间可能不如J亚群白血病早。此次在蛋种鸡发现此混合感染提示，病毒在环境选择压及免疫选择压的作用下，其生物特性、致病作用以及宿主范围均可发生改变。应警惕J亚群白血病和网状内皮增生症混合感染在蛋鸡中的大面积暴发。     

不同砷制剂添加剂量对雏鸡生长性能及免疫器官生长发育的影响

将280只1日龄海兰褐蛋公雏随机分为7组,每组40只,各试验组在基础日粮中分别添加50、100、150、200、250和300mg/kg的阿散酸(对氨基苯砷酸),饲养70天,通过体重和免疫器官指数来测定砷制剂对鸡生长性能及免疫器官生长发育的影响。结果表明:在70日龄时,添加150,200,250和300mg/kg阿散酸组体重和免疫器官指数与对照组相比差异显著(P<0.05),其中200mg/kg组体重及免疫器官脏体比较对照组差异极显著(P<0.01)。因此,雏鸡饲料中添加阿散酸能提高雏鸡的生长性能和免疫器官指数,其最佳添加剂量为200mg/kg。     

鸡J亚群禽白血病病毒与七种常见病毒混合感染的调查

应用PCR方法对2009年6月到2009年9月来自不同地区、不同品种、不同日龄的45个疑似感染J亚群禽白血病病毒(ALV-J)的病鸡病料进行检测,同时对ALV-J与新城疫病毒(NDV)、传染性支气管炎病毒(IBV)、传染性法氏囊病病毒(IBDV)、H9N2亚型禽流感病毒(H9N2 AIV)、包涵体肝炎病毒(IB-HV)、鸡传染性贫血病毒(CIAV)和呼肠病毒(REOV)等病毒的混合感染情况进行了调查。结果表明,采用ALV-J的特异性引物H5/H7,在45份送检病料中,有3份检出ALV-J,阳性率为6.67%。绝大多数病例检测出内源性禽白血病病毒,部分病例检测有其他7种病毒中的一种或几种。混合感染病例中以IBHV和IBV混合感染的比率较高,其中ALV-J与H9N2亚型AIV混合感染多见。     

酵母培养物对雏鸡生长性能、免疫器官发育和血清相关激素的影响

选用7日龄海兰褐蛋用公雏鸡180只,随机分成3组(对照组,试验Ⅰ组、试验Ⅱ组),每组设3个重复,每重复20只雏鸡。对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ、Ⅱ组在基础日粮中分别添加2.5%和5%的酵母培养物,试验期6周,研究酵母培养物对雏鸡生长性能、免疫器官发育和血清相关激素的影响。结果表明,①在日粮中添加酵母培养物可以提高蛋雏鸡的平均日增重(P＜0.05),降低料重比(P＜0.05),并提高成活率(P＞0.05);②酵母培养物能够促进蛋雏鸡免疫器官的发育,提高其器官指数(P＜0.05)。③血清激素含量测定结果表明,添加酵母培养物组鸡血清中三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺激素(T4)水平显著提高(P＜0.05),皮质醇(COR)含量显著降低(P＜0.05),生长激素(GH)含量有所升高(P＞0.05)。     

表达A亚群禽白血病病毒Gp85蛋白的乳酸菌的构建

本研究旨在构建乳酸菌表达载体以研制A亚群禽白血病病毒（Avian leukosis virus subgroup A,ALV-A）的活菌疫苗,用于预防禽白血病。使用锚定表达载体构建2株分别表达gp85和gp85-DCpep基因的重组植物乳杆菌,以感染ALV-A的DF-1细胞的基因组DNA为模板,使用PCR方法扩增ALV-A Gp85蛋白的编码基因gp85,将树突状细胞靶向肽（DC-targeting peptide,DCpep）编码基因与gp85基因进行融合,获得gp85-DCpep基因;使用乳酸菌锚定表达载体pSIP409-pgsA’通过同源重组的方法构建重组质粒pSIP409-pgsA’-gp85-DCpep和pSIP409-pgsA’-gp85;经测序正确后将上述质粒分别电转化植物乳杆菌NC8感受态细胞,获得重组植物乳杆菌;使用SppIP诱导重组植物乳杆菌的表达,收集处于对数生长期的菌体,通过反复冻融获取细胞膜的蛋白样,采用Western blotting技术检测pgsA’-gp85-DCpep和pgsA’-gp85蛋白的表达情况。结果显示,试验成功获得基因片段gp85和gp85-DCpep,构建的重组质粒pSIP409-pgsA’-gp85-DCpep和pSIP409-pgsA’-gp85测序无突变和丢失情况,并成功电转到植物乳杆菌NC8感受态细胞中,使用SDS-PAGE和Western blotting技术在细胞膜蛋白样中检测到蛋白的表达,大小分别为48.3（pgsA’-gp85-DCpep）和47 ku （pgsA’-gp85）。本试验成功构建了重组质粒pSIP409-pgsA’-gp85-DCpep和pSIP409-pgsA’-gp85,获得的重组植物乳杆菌NC8-pSIP409-pgsA’-gp85-DCpep和NC8-pSIP409-pgsA’-gp85中的蛋白均成功表达,且具有反应原性,为后期深入研究重组植物乳杆菌在抗ALV-A感染中的保护机制奠定良好的基础。     

A、J亚群禽白血病病毒感染肉用种鸡的诊断

通过流行病学调查、剖检病变和组织病理学观察,结合PCR技术检测病原核酸,确诊肉用种鸡群发生了由ALV—A和ALV—J感染而导致的淋巴细胞性白血病和骨髓细胞瘤型白血病。在检测的6只病鸡中,6只病鸡均感染了ALV—J,2只病鸡感染了ALV-A.     

肌肽对肉鸡免疫器官发育及ND疫苗免疫效果的影响

研究L-肌肽对肉仔鸡免疫器官发育及新城疫疫苗免疫效果的影响。选用AA肉鸡苗400只,随机均分4组,每组2个重复,在饮水中分别添加0、20、40、60mg/L L-肌肽,每周末各组测定ND抗体效价,胸腺、脾和法氏囊指数。结果表明:肌肽40、60mg/L剂量组能够不同程度地促进免疫器官的发育,提高胸腺、脾和法氏囊指数;增加ND抗体滴度水平。     

禽白血病病毒感染对新城疫和禽流感疫苗免疫效果的影响

为研究禽白血病病毒(ALV)感染对新城疫(ND)和禽流感(AI)疫苗免疫效果的影响,采用ELISA方法对河南省某地方品种鸡场进行ALV-p27抗原检测,同时采集试验鸡的血清样品,检测ND、AI(H_9)和AI(H_5)亚型的免疫抗体水平,并比较了ALV经种蛋垂直传播感染1日龄雏鸡和后期感染对ND、AI疫苗免疫效果影响的差异。结果表明,ALV经种蛋垂直传播感染1日龄雏鸡,能显著降低ND、AI(H_9)和AI(H_5)疫苗免疫的抗体水平,阳性试验组与阴性组相比血清中ND、H_9、H_5(Re-6)、H_5(Re-7)和H_5(Re-8)抗体效价分别降低1.71log2、2.37log2、1.59log2、1.00log2和1.79log2;鸡群后期感染ALV,对ND和AI疫苗的免疫没有明显的抑制作用,阳性试验组与阴性组相比无显著差异。     

禽网状内皮组织增生病病毒和马立克氏病病毒共感染对鸡的致肿瘤作用

用禽网状内皮组织增生病病毒(REV)和马立克氏病病毒(MDV)共感染肉鸡，研究这2种病毒对鸡的致瘤作用，结果表明肉鸡共感染MDV和REV后13d即可发生死亡．接种后100d死亡率达84％。死亡鸡的肝脏、脾脏、肾脏和心脏等可以形成2种外观明显不同的散在的大肿瘤结节和弥漫性的小肿瘤结节。取发病鸡的肝脏、脾脏、肾脏、心脏和腺胃等组织样品做连续石蜡切片，HE染色后发现这些脏器均存在2种不同类型的肿瘤细胞增生。对这些连续切片分别用MDV和REV的单克隆抗体进行间接荧光试验，则同1份样品存在可以与REV和MDV分别呈现阳性反应的肿瘤细胞团，结果表明REV和MDV可以在感染鸡的体内分别诱发形成肿瘤。在接种后14、21、28和42d随机采集3只鸡的全血分离MDV和REV，均可以同时分离到MDV和REV。表明REV和MDV的共感染延长了病毒血症的时间。