鸡包涵体肝炎琼扩抗原的研制

用鸡腺病毒血清型２型、３型和地方株Ａ株、Ｂ株制备的琼扩抗原检测鸡包涵体肝炎，结果表明抗原具有群特异性，但不具有型特异性。     

猪肺脏中鹦鹉热衣原体的分离

从猪肺脏中分离出鹦鹉热衣原体(Chlamydia psittaci)。经SPF鸡胚卵黄囊培养分离,并经属特异性抗原和特异性单克隆抗体免疫荧光技术鉴定,从54例猪肺脏中分离出5株鹦鹉衣原体。其中40例病变肺中分离出3株,14例无明显病变肺中分离出2株。5株衣原体均从小猪肺中分离获得。     

我国牛猪轮状病毒部分分离株的亚组鉴定

利用轮状病毒亚组特异性单克隆抗体进行捕捉法ＥＬＩＳＡ，对我国４株牛轮病毒分离株和４株猪轮状病毒江苏分离株进行了亚组抗原特异性鉴定，结果证实，所有被测试的牛，猪轮状病毒国内分离株，在亚组抗原特异性上均属第Ｉ亚组，未发现有属于第ＩＩ亚组的毒株。     

抗鸡关节炎病毒单克隆抗体介导间接ELISA的建立

利用淋巴细胞杂交瘤技术制备出抗鸡关节炎病毒特异的、具有群反应特性的单克隆抗体,挑选其中ＡＤ８株作为一抗建立检测抗原的间接ＥＬＩＳＡ,该法具有高度的特异性和每感性,不仅适用于大面积检测的需要,而且可用于该病的早期诊断。     

抗鸡关节炎病毒单克隆抗体介导间接ELISA的建立

利用淋巴细胞杂交瘤技术制备出抗鸡关节炎病毒特异的、具有群反应特性的单克隆抗体,挑选其中ＡＤ８株作为一抗建立检测抗原的间接ＥＬＩＳＡ,该法具有高度的特异性和敏感性,不仅适用于大面积检测的需要,而且可用于该病的早期诊断。     

抗H5N1型禽流感病毒单克隆抗体的制备与鉴定

制备抗H5N1型禽流感病毒单克隆抗体并对其进行鉴定.采用纯化抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,筛选分泌抗AIV-H5N1的单克隆抗体细胞株,将阳性细胞株接种小鼠腹腔制备单克隆抗体腹水并对腹水抗体进行纯化,测定抗体亚类,并对其抗原结合位点进行分析.共获得了5株单克隆抗体杂交瘤细胞株,均为抗AIV-H5N1的特异性单克隆抗体,而且与H9N1型禽流感病毒,H13型禽流感病毒,鸡新城疫病毒,产蛋下降综合征病毒,鸡传染性支气管炎病毒均无交叉反应.     

鸡包涵体肝炎病毒内蒙古毒株的分离与鉴定

本试验利用鸡包涵体肝炎自然病例的肝组织，通过SPF鸡胚连续传代和鸡胚肾细胞培养，分离到一株鸡包涵体肝炎病毒HA株。该病毒的核酸型为DNA、无束膜、对乙醚、氯仿具有抵抗力；且其对酸有抵抗力，对热敏感。电镜观察发现，病毒粒子呈球形，直径约80－100nm。有2、3、4、5、8型的标准阳性血清进行中和试验，证明HA株为血清型2型。回归试验表明HA株具有较强的致病性。     

鸡包涵体肝炎病毒内蒙古毒株的分离与鉴定

本试验利用鸡包涵体肝炎自然病例的肝组织，通过SPF鸡胚连续传代和鸡胚肾细胞培养，分离到一株鸡包涵体肝炎病毒HA株．该病毒株的核酸型为DNA、无束膜、对乙醚、氯仿具有抵抗力；且其对酸有抵抗力，对热敏感。电镜观察发现，病毒粒子呈球形，直径约80～100nm。用2、3、4、5、8型的标准阳性血清迸行中和拭验，证明HA株为血清型2型。回归试验表明HA株具有较强的致病性。     

北京地区家畜钩端螺旋体病优势菌型的研究——Ⅰ.部分场猪群钩端螺旋体病优势菌型的研究

共采集了145份猪血清,36份猪肾和31份猪尿。在145份猪血清中,用13群15型单价平板凝集有色抗原分别进行检查,波摩纳型抗原检出阳性反应27例,占18.62%,豕型抗原检出阳性反应6例,占4.13%;在67份猪肾和猪尿中,分离到波摩纳型钩端螺旋体5株,占7.46%,豕型1株,占1.49%。试验结果表明,血清学和病原学试验具有同型特异性。     

禽流感病毒的亚型鉴定及致病力研究

用已知的AIV亚型毒株抗原，采用血清学分型方法和毒力测定试验，鉴定从陕西省不同地区发生AI鸡群中分离的A型AIV的亚型和致病力。结果证明，3株AIV属H9N2（A1，A2，A4）；1株属H11N6（A5）。4株AIV的鸡胚尿囊液分别感染试验鸡后，发病死亡率分别为37.5%、25．0％、37．5％和12．5％，均为中等毒力以下毒株。     

鸡志贺氏菌多价凝集抗原及其标准血清的研制

利用鸡鲍氏志贺氏菌和鸡痢疾志贺氏菌制备多价凝集抗原,确定其最佳反应浓度及比例.选择合适的试验鸡只,用2种鸡志贺氏菌灭活疫苗定期肌肉注射免疫和抗体效价测定,适时采血分离血清.结果显示,鸡鲍氏抗原与痢疾抗原的最佳混合浓度为6×10~9mL~(-1),最佳比例为1:1.制备的鸡鲍氏和鸡痢疾志贺氏菌多价阳性血清,经抗体效价测定均达6log2,阴性血清与鸡志贺氏菌多价凝集抗原作用无凝集现象出现.研制的多价凝集抗原及其标准血清经特异性试验、重复性试验和保存方法试验,具有特异性强、敏感性高、重复性好、易保存等特点,且可省去单价凝集抗原繁琐的检测程序和时间.     

禽脑脊髓炎发病机理和特异性病理诊断的研究

本研究从自然病鸡中分离出一株ＡＥＶ，经鉴定、提纯建立起ＡＥＶ一ＮＨ９３７株，进一步研究结果主要明确了：（１）各类发病雏鸡、感染鸡胚的病变特征、不同病例病变的差异、病理诊断和鉴别诊断，超微结构变化和ＡＥＶ在病变细胞内存在的部位、形式和病毒形态特征；（２）ＡＥＶ抗原动态定位、靶细胞、播散途径和侵及范围；（３）免疫反应细胞类别和数量变化。同时确立了ＡＥ免疫荧光特异性病理诊断的方法，研制了ＡＥ琼扩沉淀抗原和ＡＥ灭活油乳剂疫苗。     

抗鸡传染性支气管炎病毒单链抗体间接ELISA筛选方法的建立

建立一种筛选特异性单链抗体的间接ELISA优化方法.用鸡传染性支气管炎病毒IBV-M41株接种SPF鸡胚,纯化后作为抗原包被96孔板进行间接ELISA,从本实验室构建的原核表达质粒pOPE101-XPscFv/JM109(DE3)中筛选出针对IBV-M41株的scFv,并对各反应参数进行探索,优化筛选方法.通过敏感性实...     

马立克氏病病毒囊膜糖蛋白I原核表达产物单克隆抗体的制备

以重组质粒pGEX-MDgI在大肠杆菌BL21中表达马立克氏病病毒（MDV）特超强毒648A株的囊膜糖蛋白1（gI_完整基因，通过SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳分离相应的蛋白质条带，切下并碾碎后作免疫原免疫小鼠，用以制备针对MDV 648A gI糖蛋白的杂交瘤细胞株，以MDV感染的鸡胚成纤维细胞（CEF）为检测抗原，用间接免疫荧光抗体反应（IFA）筛选到9株杂交瘤细胞株，选其中3株2H7，6F10，2H2制备腹水，其IFA效价均达到1：1500以上，与I型MDV不同现型的毒株CVI988／Rispens,GA,RB1B,Md11株感染的CFF测IFA，均呈现特异性荧光，但反应强度不同，腹水经PBS稀释后与MDV感激的CEF做斑点酶联免疫吸附试验，呈特异性显色，对MDV感染的CEF裂争物做Westernblotting，可检测出1 条特民性条带。     

抗鸡传染性支气管炎病毒单克隆抗体的制备与应用

将鸡传染性支气管炎病毒M41 株尿囊液差速离心纯化 ,制备抗原 ;应用杂交瘤技术建立了 3株分泌抗鸡传染性支气管炎病毒的杂交瘤细胞株 ,其免疫球蛋白亚类分别属于IgG1 、IgG2a、IgG2b。 3株单克隆抗体与鸡新城疫病毒、传染性法氏囊病病毒、产蛋下降综合征病毒及禽流感病毒均无交叉反应 ,YNZ - 55和YNZ - 62可识别多数鸡传染性支气管炎标准毒株及地方分离株 ,其腹水ELISA效价达 1 0 - 5,且识别的抗原位点互不重叠 ,为高亲和力的群特异性单克隆抗体 ,是制备鸡传染性支气管炎快速诊断产品的理想试剂     

鸭源禽流感病毒的分离与鉴定

用灭菌棉拭共采集蛋鸭和肉鸭的泄殖腔样品６２只，鸡胚尿囊腔传代接种法分离到１株病毒，该病毒可凝集鸡红细胞，且不能被ＮＤ，ＥＤＳ－７６阳性血清抑制，用病变绒毛尿囊膜制备抗原与禽流感琼扩标准阳性血清作用，出现明显的白色沉淀线，证明该分离株为Ａ型流感病毒，血凝素亚型分析结果为Ｈ９，电镜负染观察可见典型的禽流感病毒粒子，致病性试验结果表明该分离株对鸡表现为弱致病性，研究结果还表明，环境（特别是水体）贮毒可能     

斑点ELISA检测鸡传染性支气管炎病毒及抗体

采用鼠抗鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）高免血请作第１抗体，利用酶标羊抗鼠ＩｇＧ作第２抗体，建立间接法Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ程序检测ＩＢＶ抗原；利用鸡抗ＩＢＶ血清阻断试验检测ＩＢＶ抗体。试验表明，本程序检测ＩＢＶ抗原及其抗体具有高度过感性和特异性。最低抗原检出量达１０￣（－８）ｇ数量级，阳性检出率９８％，阳性阻断率１００％。     

抗大片吸虫ES抗原单克隆抗体的制备及特异性鉴定

用大片吸虫分泌排泄（ES）抗原免疫BALB/c小鼠，取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合，经筛选和3次克隆化培养后获得2株分泌抗大片吸虫ES抗原单抗的杂交瘤细胞（F5，F9）。经传代、冻存、复苏培养检测和染色体检查，证实其分泌单抗的性质稳定。通过间接ELISA试验证明，F5和F9单抗能与大片吸虫、肝片吸虫的ES抗原发生特异性反应，而不与它们的虫体抗原反应。SDS-PAGE电泳和Westerm-blot显示，F5McAb能与ES抗原的相对分子质量为26000-28000的蛋白条带反应，而不与其可溶性虫体抗原反应。表明F5McAb有ES抗原特异性，是一株具有潜在诊断价值的McAb。     

鸡肾型传染性支气管炎病毒分离鉴定与免疫试验

从两个鸡场采集具有肾型染性支气管炎特征的产现鸡病料，在鸡胚盲传４代分离到Ｈ和Ｚ两株病毒。在两毒株，在鸡胚传代可致胚死亡妆出现典型侏儒胚，能极显地干扰鸡新城疫病毒在鸡胚上增殖。     

鸡传染性支气管炎病毒河南流行毒株S1基因的变异分析

经鸡胚接种、反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)、气管环培养等方法从河南不同地区发病鸡群中先后共分离、鉴定出7株鸡传染性支气管炎病毒(IBV).应用RT-PCR方法对7株病毒以及IBV H120疫苗株的S1基因全序列进行扩增,并对其进行克隆测序及序列分析.结果显示:8株IBV的S1基因全长分为4类,分别是1632、1620、1617和1611 bp;序列相互之间存在多位点变异,同时存在型特异性的插入和缺失;其S蛋白裂解位点序列模式有HRRRR、RRFRR和RRSRR 3种;同源性及遗传进化分析显示Jin-13为呼吸型毒株,YI为ArkDPI型肾型毒株,HN/SG株与国内其他肾型分离株亲缘关系均较远;河南肾型分离株HN/HL、XP/1/09、XP/3、WZL与山东肾型分离株之间的同源性较高且其亲缘关系最近,而与河南HN99株的亲缘关系较远.说明河南地区存在不同的IBV流行毒株,这些漉行毒株在主要保护性抗原蛋白S1基因上发生了一定的变异.