新疆栽培与野生一枝蒿粗多糖对口蹄疫疫苗免疫小鼠的佐剂活性比较

基于总物质量和多糖含量比较栽培/野生一枝蒿粗多糖（cultivated/wild Artemisia rupestris L.crude polysaccharides,CARCP/WARCP）作为口蹄疫灭活疫苗（foot-and-mouth disease inactivated vaccine,FMDV）佐剂对小鼠抗体水平及T细胞亚群的影响,探究CARCP/WARCP的佐剂活性和安全性。CARCP/WARCP配伍FMDV肌肉途径免疫ICR小鼠,检测免疫后小鼠血清中FMDV特异性抗体及分型,脾中T细胞亚群比例,血清中IgE水平,观察临床症状和注射部位反应以及小鼠体重。结果显示,总物质量一致时,CARCP1/WARCP1均能极显著提高FMDV特异性IgG、IgG_2a反应（P<0.01）,极显著促进脾T细胞CD3⁺CD4⁺、CD4⁺CD44⁺、CD8⁺CD44⁺CD62L⁺百分比（P<0.05）,显著提高IgG₁、IgG_2a/IgG₁比值,显著促进CD3⁺CD8⁺、CD8⁺CD44⁺、CD8⁺CD44⁺CD62L^-比例（P<0.05）,且除28 d IgG和IgG₁指标外,CARCP1的佐剂活性显著高于WARCP1（P<0.05）。多糖含量一致时,与FMDV相比,CARCP2/WARCP2均极显著增强了28 d IgG水平、IgG_2a/IgG₁比值（P<0.01）,显著提高了21 d IgG、28 d IgG_2a及CD4⁺CD44⁺（P<0.05）,且CARCP2/WARCP2之间差异不显著（P>0.05）。CARCP/WARCP没有引起小鼠脱毛等临床症状,也没有产生肉芽肿、肿胀等注射部位不良反应;CARCP/WARCP免疫后各组小鼠体重之间差异不显著（P>0.05）;各组小鼠血清均没有检测到IgE抗体（P>0.05）;这些结果表明CARCP/WARCP有一定的安全性。综上,当总物质量一致时,CARCP/WARCP均能增强FMDV免疫小鼠体液和细胞免疫反应,且CARCP的佐剂活性优于WARCP;多糖含量一致时,CARCP/WARCP作为FMDV佐剂的免疫增强效果相当,是安全佐剂候选物。     

禽网状内皮组织增生病病毒感染对SPF雏鸡血液和局部淋巴组织CD4+/CD8+细胞及相关细胞因子表达的影响

旨在探讨禽网状内皮组织增生病病毒（reticuloendotheliosis virus,REV）对SPF雏鸡血液和局部淋巴组织中T淋巴细胞数量以及相关细胞因子表达的影响。将96只1日龄SPF雏鸡随机分为REV感染组和对照组,应用流式细胞术、酸性α-醋酸萘酯酶染色（acid α-naphthyl acetate esterase,ANAE）、荧光定量PCR等方法对上述指标进行检测。试验数据表明,与对照组相比,感染组雏鸡血液CD4⁺T淋巴细胞数量在第7~35天显著降低、CD8⁺T淋巴细胞数量在第7~28天显著升高,CD4⁺/CD8⁺比值在第7~28天显著降低（均P<0.05或P<0.01）;局部淋巴组织哈德尔腺（Hader’s gland,HG）、派伊尔结（Peyer’s patch,PP）和盲肠扁桃体（caecal tonsil,CT）中ANAE⁺T淋巴细胞数量均显著降低（均P<0.05或P<0.01）;GH、PP和CT中细胞因子IL-2、IFN-γ和TNF-α 转录量都有不同程度升高。本研究表明,REV感染引起雏鸡血液中CD4⁺ T淋巴细胞数量降低、CD4⁺/CD8⁺T淋巴细胞比例失衡、局部淋巴组织中T淋巴细胞数量相对减少及细胞因子TNF-α转录持续升高与REV造成感染雏鸡细胞免疫功能显著降低密切相关。     

柔嫩艾美耳球虫对藏鸡和隐性白羽鸡致病性差异分析

为进一步明确柔嫩艾美耳球虫对球虫易感性差异鸡种的致病性,本研究以1×10⁵个柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊的剂量分别感染对球虫具有抗性的藏鸡和易感的隐性白羽鸡,接种后观察记录各组鸡的临床表征、血便记分、死亡率、增重、盲肠病变记分、卵囊产量,并于感染前和感染后3、6和8 d每个品种分别随机选择5只鸡采集抗凝血,应用流式细胞仪（FCAS）检测外周血CD4⁺T和CD8⁺T淋巴细胞亚群数量。结果显示,柔嫩艾美耳球虫感染后藏鸡相对增重率高于隐性白羽鸡,死亡率、血便记分和盲肠病变记分均低于隐性白羽鸡,但卵囊产量高于隐性白羽鸡。外周血T淋巴细胞亚群变化方面,感染前,藏鸡CD4⁺T淋巴细胞数及CD4⁺/CD8⁺比值均高于隐性白羽鸡。感染后第3天,藏鸡CD4⁺、CD8⁺ T淋巴细胞数及CD4⁺/CD8⁺比值下降,隐性白羽鸡CD8⁺ T淋巴细胞数略有下降,CD4⁺T淋巴细胞数及CD4⁺/CD8⁺比值上升,但CD4⁺/CD8⁺比值仍显著低于藏鸡（P<0.05）。感染后第6天,2个品种鸡CD4⁺ T淋巴细胞数及CD4⁺/CD8⁺比值均下降,其中藏鸡表现为显著下降（P<0.05）,而隐性白羽鸡仅CD4⁺/CD8⁺比值显著降低（P<0.05）,隐性白羽鸡CD8⁺ T淋巴细胞数显著升高（P<0.05）。感染后第8天,2个品种鸡CD4⁺/CD8⁺比值显著下降（P<0.05）,藏鸡CD8⁺ T淋巴细胞数显著高于隐性白羽鸡（P<0.05）,但CD4⁺/CD8⁺比值显著低于隐性白羽鸡（P<0.05）。结果表明,球虫对藏鸡和隐性白羽鸡的致病性存在差异,这种差异与T淋巴细胞介导的免疫应答反应密切相关。     

猪圆环病毒Ⅱ型体外诱导3D4/2细胞炎症模型的建立

【目的】通过对猪圆环病毒Ⅱ型（PCV2）体外感染3D4/2细胞浓度、时间与细胞炎症水平进行探讨,建立PCV2体外感染3D4/2细胞炎症反应模型,以期为后期药物调控PCV2诱发3D4/2细胞炎症反应的研究奠定基础。【方法】将3D4/2细胞分为对照组及10⁰、10^-1、10^-2和10^-3 PCV2感染组,每组3个重复。对照组用DMEM培养,各PCV2感染组用不同稀释倍数PCV2液培养,2 h后均更换为含5%胎牛血清（FBS）的DMEM维持液进行培养,培养4、8、12和24 h后分别收集细胞及细胞上清液。采用Griess法检测一氧化氮（NO）水平,DCFH-DA荧光探针法检测活性氧（ROS）水平,酶标法检测还原型谷胱甘肽（GSH）水平,分光光度法检测黄嘌呤氧化酶（XOD）和髓过氧化物酶（MPO）活性,ELISA法测定白细胞介素-1β（IL-1β）、IL-6、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、IL-10、γ干扰素（IFN-γ）、IL-8、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）以及环氧合酶1（COX-1）和COX-2的分泌水平。【结果】10⁰至10^-3 PCV2作用4、8、12和24 h均能够成功感染3D4/2细胞。与对照组相比,10⁰ PCV2在感染3D4/2细胞4、8、12、24 h后ROS水平均极显著升高（P<0.01）,10^-1至10^-3 PCV2感染3D4/2细胞8、12、24 h后ROS水平显著或极显著升高（P<0.05;P<0.01）;10⁰至10^-3 PCV2感染3D4/2细胞8、12、24 h后,细胞内NO浓度及MPO活性显著提高（P<0.05）,细胞上清液中的IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-10、IFN-γ、IL-8和MCP-1水平及COX-1活性均显著或极显著升高（P<0.05;P<0.01）,其中10⁰ PCV2感染3D4/2细胞后,各炎症因子水平上升最显著,且随着时间的延长,NO浓度逐渐升高,XOD活性逐渐降低。【结论】PCV2可诱导3D4/2细胞炎症反应,且10⁰ PCV2体外感染3D4/2细胞4~12 h是建立炎症模型的最佳条件。     

C5a/C5aR信号在微小隐孢子虫感染中的免疫调节作用研究

旨在探究C5a/C5aR信号在微小隐孢子虫感染过程中对宿主CD4⁺ T细胞免疫反应的调控作用。本研究以微小隐孢子虫（Cryptosporidium parvum）为研究对象,以BALB/c乳鼠和C5aR抑制BALB/c乳鼠为感染模型,应用实时荧光定量PCR和免疫组织化学技术检测了C.parvum感染前后乳鼠回肠组织中C5aR的表达变化,利用实时荧光定量PCR检测了隐孢子虫HSP70基因和CD4⁺ T细胞亚群（Th1、Th2、Th17细胞和Treg细胞）主效应细胞因子（IFN-γ、IL-4、IL-17和TGF-β）的转录变化,并通过病理组织切片观察乳鼠回肠黏膜的损伤情况。结果显示：与对照组乳鼠相比,C.parvum感染可以引起乳鼠回肠组织中C5aR的mRNA和蛋白表达水平显著上调（P<0.05）,以及IFN-γ表达水平显著上调（P<0.05）;与C.parvum感染组乳鼠相比,C5aR抑制剂处理可引起C.parvum感染乳鼠回肠组织中Th1细胞、Th2细胞和Treg细胞的主效应细胞因子IFN-γ、IL-4和TGF-β显著下调表达（P<0.05）,以及Th17细胞主效应细胞因子IL-17显著上调表达（P<0.05）。病理学观察发现,抑制C5aR能显著改善C.parvum感染引起的乳鼠回肠组织的绒毛直径和黏膜厚度变化（P<0.05）,但不能改善绒毛长度、绒毛长度与隐窝深度比值。隐孢子虫HSP70基因的mRNA水平检测发现,抑制C5aR能显著影响C.parvum在回肠组织中的增殖（P<0.05）。C5a/C5aR信号可能通过动态调节CD4⁺ T细胞亚群主效应细胞因子的表达来参与宿主与隐孢子虫相互作用的过程,为深入理解隐孢子虫与宿主的互作机制提供了参考。     

表达猪圆环病毒2型cap蛋白的重组罗伊氏乳酸杆菌在小鼠诱导的免疫应答分析

旨在构建表达猪圆环病毒2型（PCV2）cap蛋白的重组罗伊氏乳酸杆菌（Lactobacillus reuteri,L.reuteri）,并评价其在小鼠体内诱导的免疫应答效果。利用PCR扩增实验室分离保存的PCV2b型毒株的cap蛋白基因,以猪源L.reuteri为宿主菌,构建表达cap蛋白的重组菌株pPG-T7 g10-PPT-cap/L.reuteri,通过口服免疫BALB/c小鼠。采用间接ELISA方法测定免疫后小鼠血清中抗原特异性IgG抗体水平,粪便、鼻腔洗液、生殖道洗液、肠黏液中抗原特异性sIgA抗体水平,小鼠血清中各细胞因子水平;MTT法检测小鼠脾淋巴细胞增殖水平;流式细胞技术检测小鼠脾淋巴细胞中CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞的水平;荧光定量PCR检测免疫后攻毒的小鼠体内器官的病毒载量。结果显示,口服免疫重组乳酸菌组小鼠血清IgG抗体水平显著高于对照组（P<0.01）;小鼠粪便、鼻腔洗液、生殖道洗液、肠黏液中sIgA抗体水平显著高于对照组（P<0.01）;小鼠血清中细胞因子水平和对照组相比,IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-12水平升高,IL-10水平降低,IFN-α无显著变化;体外孵育PCV2和小鼠脾淋巴细胞结果表明,重组乳酸菌组小鼠脾淋巴细胞增殖刺激指数显著高于对照组（P<0.01）;流式细胞技术检测结果显示,口服免疫重组乳酸菌组小鼠脾细胞中CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞含量高于对照组;荧光定量PCR结果显示,相比于对照组,口服免疫重组乳酸菌组小鼠体内的病毒载量明显低于对照组。综上所述,本研究成功构建了表达PCV2 cap蛋白的重组罗伊氏乳酸杆菌,经口服途径免疫动物,构建的重组乳酸杆菌能够刺激小鼠产生体液免疫和细胞免疫应答,且具有一定的免疫保护效果。     

鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白抗原表位多肽的预测、鉴定及免疫效果的初步研究

旨在对鸡传染性支气管炎病毒（IBV）H120株S1蛋白的B细胞及T细胞可能的表位进行预测并合成相应的多肽,然后免疫小鼠,并分析其免疫效果,以验证候选表位多肽的免疫原性。利用表位预测软件筛选并化学合成针对IBV H120株S1蛋白的5条表位多肽,然后免疫小鼠,通过间接ELISA、中和试验和流式细胞技术检测各表位多肽诱导的特异性抗体、中和抗体和外周血T细胞亚群。ELISA检测结果显示,5条表位多肽均具有良好的反应原性,免疫小鼠的血清效价高低顺序依次为Pep76-106 > Pep240-257 > Pep511-537 > Pep403-421 > Pep135-172;中和试验结果表明,5条多肽免疫小鼠的血清中和滴度均高于空白对照组,其高低顺序依次为Pep240-257=Pep403-421=Pep511-537>Pep76-106=Pep135-172;流式检测结果表明,5条多肽免疫小鼠在CD3⁺、CD4⁺CD8^-、CD8⁺CD4^- T淋巴细胞水平上均极显著高于空白对照组（P<0.01）,CD3⁺T及CD4⁺CD8^-T淋巴细胞数大小顺序依次为Pep403-421 > Pep240-257 > Pep76-106 > Pep511-537 > Pep135-172,CD8⁺CD4^-T淋巴细胞数大小顺序依次为Pep403-421 > Pep76-106 > Pep511-537 > Pep240-257 > Pep135-172。合成的5条表位多肽中,Pep240-257、Pep76-106和Pep403-421可以诱导体液免疫,Pep403-421可以诱导细胞免疫,其中,Pep403-421可以同时诱导细胞免疫及体液免疫。本研究结果为深入了解S1蛋白的免疫学特性以及研发诊断试剂和有效表位疫苗奠定了基础。     

硒对树突状细胞和巨噬细胞功能的调控作用

旨在探讨硒对树突状细胞（dendritic cells,DCs）和巨噬细胞功能的影响,试验将硒分别与髓源性树突状细胞（bone marrow derived dendritic cells,BMDCs）和腹腔巨噬细胞共同培养后,用流式细胞术检测未成熟BMDCs和巨噬细胞的吞噬活性以及BMDCs上的MHCⅡ、CD86、CD80和CD40的表达量,测定经硒处理后的成熟BMDCs对刺激同种异体淋巴细胞增殖和抗原递呈能力,并用ELISA检测BMDCs和巨噬细胞上清液中细胞因子（IL-12、IL-1β、IFN-γ、IL-6、IL-10、TNF-α、NO）水平的变化。结果显示,当硒的质量浓度在0.18~0.09 mg·L^-1时,BMDCs和巨噬细胞的吞噬活性显著增强（P<0.05）,并且BMDCs上的MHCⅡ、CD86和CD80的表达量显著升高（P<0.05）,对刺激同种异体淋巴细胞的增殖和抗原递呈能力也显著增强（P<0.05）。此外,在BMDCs的上清中,IFN-γ、IL-12和IL-10的含量显著升高（P<0.05）;在巨噬细胞的上清中,IFN-γ、TNF-α和NO的含量显著升高（P<0.05）。结果表明,一定质量浓度的硒可以增强树突状细胞和腹腔巨噬细胞的功能,值得进一步探究硒对免疫功能的影响。     

白细胞介素-10对口蹄疫病毒感染小鼠T细胞增殖及其表达TNF-α、IFN-γ和IL-2的影响

白细胞介素-10(IL-10)增高是口蹄疫病毒(FMDV)感染过程中显著特征之一。本研究旨在探讨IL-10对FMDV感染小鼠外周血T细胞增殖及其表达效应功能相关细胞因子的影响。采用CCK-8和流式细胞术分别检测小鼠外周血T细胞增殖和T细胞表达效应功能相关细胞因子(TNF-α、IFN-γ和IL-2)。结果显示,与对照小鼠相比,FMDV感染小鼠(感染12、24、36和48 h)外周血T细胞对刀豆蛋白A刺激的增殖均显著下降(P<0.05或P<0.01);FMDV感染小鼠的外周血CD4⁺T细胞表达TNF-α和IL-2均显著下降(均P<0.01),CD8⁺T细胞表达TNF-α、IFN-γ和IL-2也显著下降(P<0.01或P<0.000 1)。体内阻断IL-10/IL-10R信号或者敲除IL-10均能显著恢复FMDV感染小鼠外周血T细胞的增殖(P<0.05或P<0.01),但不影响CD4⁺和CD8⁺T细胞表达TNF-α、IFN-γ和IL-2。本研究首次揭示FMDV能抑...     

芹菜发酵液对小鼠溃疡性结肠炎的保护作用研究

本试验旨在研究发酵前后芹菜汁的主要功能成分变化和芹菜发酵液对葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的小鼠溃疡性结肠炎（UC）的防治及免疫调节作用。选取50只4周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组及低、中、高浓度芹菜发酵液组,每组10只。按10 μL/g BW的剂量标准给空白组和模型组小鼠灌胃无菌生理盐水,其他组小鼠则灌胃不同浓度的芹菜发酵液,持续7 d。从第8天开始,除空白组自由饮用无菌水外,其余组连续7 d自由饮用3% DSS溶液;在此过程,每日称量体重,进行疾病活动指数（DAI）评分。在第14天,通过摘眼球取血法获得全血,随后脱颈处死小鼠,解剖取出结肠组织测量长度并通过苏木素-伊红（HE）染色法制作病理切片,进行病理学分析。以流式细胞仪分选技术检测外周血中CD4⁺/CD8⁺T淋巴细胞比值,以酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、γ-干扰素（IFN-γ）和IL-10的含量。结果表明：①芹菜汁经发酵后,总酸、总糖、总多酚、类黄酮、维生素C和超氧化物歧化酶（SOD）等多种活性成分的含量均显著增加（P<0.05）。②与模型组相比,芹菜发酵液高浓度组能减少DSS引起的小鼠体重损失（P<0.01）、结肠缩短（P<0.01）和DAI降低（P<0.05）。③组织病理学分析结果表明,各发酵液组的UC症状均得到不同程度改善,肠腺结构相对完整,杯状细胞轻微减少,仅有少量淋巴细胞和中性粒细胞浸入。④流式细胞仪分析结果显示,相较于模型组,发酵液组全血CD4⁺/CD8⁺T淋巴细胞比值极显著升高（P<0.01）。⑤ELISA检测结果显示,与模型组相比,芹菜发酵液组的IL-6、TNF-α和IFN-γ含量极显著下调（P<0.01）,IL-10的含量极显著上调（P<0.01）。综上,芹菜汁经发酵后主要功能活性成分均得到显著提高,并且发酵芹菜液对DSS诱导的小鼠UC具有一定的防治和免疫调节作用,其作用机制可能与维持外周血中CD4⁺与CD8⁺T淋巴细胞平衡,以及抑制促炎症因子（TNF-α、IL-6和IFN-γ）表达,促进抗炎症因子（IL-10）表达有关。     

免疫细胞在牦牛附睾和输精管的分布规律

旨在研究免疫细胞在健康雄性牦牛附睾和输精管的分布。采用免疫组织化学和实时荧光定量(qRT-PCR)方法对幼龄(5~6月龄)及成年(3~4岁)牦牛附睾(头、体、尾)和输精管中CD68⁺巨噬细胞、CD3⁺ T淋巴细胞、CD79α⁺ B淋巴细胞、IgA⁺和IgG⁺浆细胞的分布特征及其表面标志分子的表达水平进行研究。结果显示：CD68⁺巨噬细胞、CD3⁺ T淋巴细胞、CD79α⁺ B淋巴细胞、IgA⁺和IgG⁺浆细胞主要分布在附睾管和输精管的上皮和间质;另外,CD68和CD3 mRNA和蛋白水平在各年龄组牦牛附睾头和附睾体显著高于附睾尾和输精管(P < 0.05),而CD79α、IgA和IgG mRNA和蛋白水平在附睾尾和输精管显著高于附睾头和附睾体(P < 0.05);此外,在成年牦牛附睾和输精管CD3、CD79α、IgA、IgG、CD68 mRNA和蛋白水平均显著高于幼龄牦牛(P < 0.05)。综上提示,牦牛附睾头可能主要是细胞免疫发生的位点,而附睾尾和输精管则主要进行体液免疫应答,此外,成年牦牛附睾和输精管的局部免疫可能更完善,以上数据为进一步研究高原牦牛局部生殖免疫和病理提供了形态学资料。     

Lentivirus-induced immune dysregulation

FIV/HIV infections are associated with an early robust humoral and cellular anti-viral immune response followed by a progressive immune suppression that eventually results in AIDS. Several mechanisms responsible for this immune dysfunction have been proposed including cytokine dysregulation, immunologic anergy and apoptosis, and inappropriate activation of immune regulatory cells. Studies on FIV infection provide evidence for all three. Cytokine alterations include decreases in IL2 and IL12 production and increases in IFNγ and IL10 in FIV⁺ cats compared to normal cats. The elevated IL10:IL12 ratio is associated with the inability of FIV⁺ cats to mount a successful immune response to secondary pathogens. Additionally, chronic antigenic (FIV) stimulation results in an increase in the percent of activated T cells expressing B7 and CTLA4 co-stimulatory molecules in infected cats. The expression of these molecules is associated with T cells that are undergoing apoptosis in the lymph nodes. As ligation of CTLA4 by B7 transduces a signal for induction of anergy, one can speculate that the activated T cells are capable of T cell–T cell interactions resulting in anergy and apoptosis. The inability of CD4⁺ cells from FIV⁺ cats to produce IL2 in response to recall antigens and the gradual loss of CD4⁺ cell numbers could be due to B7–CTLA4 interactions. The chronic antigenemia may also lead to activation of CD4⁺CD25⁺ T regulatory cells. Treg cells from FIV⁺ cats are chronically activated and inhibit the mitogen-induced proliferative response of CD4⁺CD25⁻ by down-regulating IL2 production. Although Treg cell activation can be antigen-specific, the suppressor function is not, and thus activated Treg cells would suppress responses to secondary pathogens as well as to FIV. Concomitant with the well-known virus-induced immune suppression is a progressive immune hyper-activation. Evidence for immune hyper-activation includes polyclonal B cell responses, gradual replacement of naïve CD4⁺ and CD8⁺ T cell phenotypes with activation phenotypes (CD62L⁻, B7⁺, CTLA4⁺), and the chronic activation of CD4⁺CD25⁺ Treg cells. Thus lentivirus infections lead to severe immune dysregulation manifested as both chronic immune suppression and chronic immune activation. FIV infection of cats provides a number of advantages over other lentivirus infections as a model to study this immune dysregulation. It is a natural infection that has existed in balance with the cat's immune system for thousands of years. As such, the natural history and pathogenesis provides an excellent model to study the long-term relationships between AIDS lentivirus and host immune system function/dysregulation.     

Analysis of Immune Response Induced by Recombinant Lactobacillus reuteri Expressing Cap Protein of Porcine Circovirus Type 2 in Mice

The purpose of this study was to construct a recombinant Lactobacillus reuteri (L. reuteri) expressing the cap protein of porcine circovirus type 2 (PCV2) and evaluate its effect on immune response in mice. The cap protein gene of PCV2b strain isolated and stored in the laboratory was amplified by PCR. A recombinant strain pPG-T7 g10-PPT-cap / L. reuteri expressing the cap protein was constructed using L. reuteri of pig origin as the host strain and explored the immune effect of BALB/c mice with recombinant bacteria orogastrically. Indirect ELISA was used to determine the level of antigen-specific IgG antibodies in the serum of mice after immunization, the levels of antigen-specific sIgA antibodies in stool, nasal wash, reproductive tract wash, and intestinal mucus, and the levels of various cytokines in mouse serum; MTT method was used to detect mouse spleen lymphocyte proliferation levels; flow cytometry (FCM) was used to detect the levels of CD4⁺ T cells and CD8⁺ T cells in mouse spleen lymphocytes; fluorescence quantitative PCR was used to detect the viral load of organs in challenged mice after immunization. The results showed that the serum levels of IgG antibodies in the mice of the oral immune recombinant strain group (OIG) were significantly higher than those in the control group (P<0.01); the levels of sIgA antibodies in the stool, nasal wash, reproductive tract wash, and intestinal mucus of the mice in OIG were significantly higher than those in the control group (P<0.01); Compared with the control group, the levels of cytokines in the serum of OIG were as follows: The levels of IFN-γ, IL-2, IL-4, IL-12 increased, the levels of IL-10 decreased, and the levels of IFN-α did not change significantly; Incubation of PCV2 and mouse spleen lymphocytes in vitro showed that the proliferation stimulating index of spleen lymphocytes in OIG was significantly higher than that of the control group (P<0.01); FCM results showed that CD4⁺ T cells and CD8⁺ T cells were higher than those of the control group; the results of fluorescent quantitative PCR showed that compared with the control group, the viral load in the OIG was significantly lower than that of the control group. In summary, the recombinant L. reuteri expressing the PCV2 cap protein were successfully constructed, and the constructed recombinant L. reuteri can stimulate mice to produce humoral and cellular immune responses after oragastrical immunization, and can exert a certain immune protection effect.