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本研究运用双向电泳方法分析奶牛产前及产后1周血浆蛋白的差异表达,为理解围产期免疫抑制以及分娩前后奶牛的生理状态提供参考。血浆样品经过热SDS法处理后,使用pH4~pH7的胶条,在硝酸银染色的7.5%~17.5%的梯度聚丙烯酰胺凝胶上,利用PDQuest6.0图像分析软件检测到239个蛋白质点。比较奶牛产前及产后1周血浆蛋白差异表达情况发现,表达量变化3倍以上的点有12个。MADIL-TOF/TOF质谱鉴定出2种蛋白:白蛋白和结合珠蛋白。结合珠蛋白在产后1周的奶牛血浆中的含量显著增加,反映了产后奶牛的生理变化。但是需要结合其他标记共同作为疾病诊断的标记。 相似文献
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《畜牧兽医学报》2016,(8)
旨在探索低密度芯片标记的筛选方法并评估不同低密度芯片的准确性。本研究采用BovineHD高密度芯片,检测西门塔尔牛基因组的SNP位点及其与饱和脂肪酸含量的关联性,根据P值或效应值筛选标记构成低密度芯片,使用IBS聚类分组和随机分组进行交叉验证,估计基因组育种值并评估其准确性。结果表明,在14号染色体的MYC基因附近有5个位点与饱和脂肪酸性状显著相关,可考虑作为西门塔尔牛脂肪酸含量的候选基因进行后续研究。根据P值筛选标记并使用IBS聚类分组进行交叉验证时,估计基因组育种值准确性最高,芯片密度达到7K时准确性趋于稳定。因此,本研究发现的标记位点可能对西门塔尔牛的脂肪酸含量存在一定影响,并且为低密度芯片标记位点的筛选提供参考资料。 相似文献
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H5NI型禽流感病毒纳米量子点快速检测方法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
本文介绍了一种用CdSe量子点标记技术用于H5NI型禽流感病毒检测的方法。采用CdSe量子点标记鸡抗AIVIgG,并对标记的抗体量子点复合产物进行了纯化。H5N1型禽流感病毒单克隆抗体作为包被抗体,CdSe量子点标记的鸡抗AIVIgG作为检测抗体,建立了纳米量子点应用于禽流感病毒快速检测的方法。此方法的最佳检测组织为气管和肺,整个检测过程只需3小时。实验结果表明,对已知的阳性样品其敏感性比血凝试验要高出4倍以上,与新城疫病毒、鸭瘟病毒和鸭肝炎病毒等无交叉反应。对65份病料进行检测,结果有5份阳性病例,60份阴性病例,与鸡胚分离法作为比对,结果符合率为98.46%,说明此方法具有较好的特异性和灵敏度,该方法操作简单、检测快速快,在进出口检疫方面有良好的应用前景。 相似文献
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采用ISSR和RAPD标记对8个60Co-γ辐射梯度诱变白刺花(Sophora viciifolia)进行遗传多样性分析。结果表明:20条ISSR和6条RAPD引物的PPL多态率分别为51.37%和21.03%,ISSR的Nei's指数和平均Shannon指数均大于RAPD;ISSR的标记指数(1.28)是RAPD(0.20)的6.4倍,表明ISSR具有较高的标记效率。Mantel检测表明,ISSR+RAPD标记与ISSR标记的结果显著相关(P<0.05)。综合分析表明白刺花用ISSR标记可检测出更高的多态性,更能准确反映白刺花材料间的遗传关系。 相似文献
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用AllGlo探针检测对虾白斑综合征病毒,阳性反应呈典型的S曲线,说明本检测探针和引物设计合理。经灵敏度测定,当样品DNA浓度低至100拷贝/μL时,仍可以有效扩增,但在103/μL之上时结果最佳。同时,经过与传统探针检测对比试验得出:用Taqman标记的探针检测相同量的样品时,AllGlo MAR标记的探针(FAM通道)CT值与FAM标记的探针的CT值没有明显区别,但是MAR标记的探针的荧光信号强度要比FAM标记的探针约高40%,更适合于对虾白斑综合征病毒的检测。 相似文献
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猪病毒性腹泻检测基因芯片的两种样品标记技术比较 总被引:1,自引:0,他引:1
《畜牧兽医学报》2016,(4)
对猪病毒性腹泻检测芯片的两种样品标记方法进行比较。分别选取猪流行性腹泻病毒(PEDV)的S和M基因,猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的N和S基因,A型猪轮状病毒(GAR)的VP7和NSP4基因设计引物,用PCR扩增制备靶基因,纯化后制备猪病毒性腹泻联合检测基因芯片。提取样品核酸,采用Cy3直接标记法和间接标记法进行PCR扩增标记,标记的样品再与芯片杂交、扫描和数据分析,同时对两种标记方法的特异性、敏感性等进行了比较。结果表明,两种方法标记的样品均能与基因芯片特异性杂交,但直接法的中位信号值(median)均高于间接法的中位信号值,直接法的芯片杂交信噪比是用间接法的5倍以上。两种标记方法制备样品特异性好,猪蓝耳病毒、猪瘟病毒、猪乙型脑炎病毒、猪伪狂犬病毒验证检测为阴性;直接法和间接法的最低检测浓度分别为10~5和10~7 copies·μL~(-1),前者的灵敏性是后者的100倍。应用优化的直接标记法处理56份临床样品,进行芯片的检测应用,结果与RT-PCR一致。本研究结果表明直接法荧光标记样品可明显提高病毒性腹泻检测芯片的检测效果。 相似文献
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目的:应用胶体金免疫层析技术建立一种快速检测布鲁氏菌抗体的方法,组装试剂盒并进行初步验证。方法:采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金溶液,标记重组布鲁氏菌BP26抗原和兔抗BP26多抗血清包被在硝酸纤维素膜上分别作为检测线和质控线,确定标记的最佳pH和最佳标记抗原量,检测试剂盒的灵敏度和重复性。结果:该试剂盒最佳标记pH值为6.7,最佳标记抗原量为20 μl,试剂盒的灵敏度和重复性较好。结论:该试剂盒具有较好的灵敏度和重复性,整个检测过程可在15 min内完成,能够快速检测样品血清,适用于现场快速检测。 相似文献
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为建立深县猪种群多样性监测的简化指标体系,试验采集河北省深县猪4个世代179头猪样本,采用联合国粮农组织和国际动物遗传协会联合推荐的27个微卫星标记进行群体遗传多样性分析,对27个微卫星标记进行两阶段、多梯度抽样,并根据抽样群体和总群体的多态信息含量(PIC)值的变化确定适宜抽样微卫星位点数,再以4个世代样本进行验证。结果表明,选取8个微卫星位点时与全部位点的比较相对偏差可控制在5%以内,且以各分世代的验证比较相对偏差在10%左右,通过比较确定以S0155、S0228、SW632、S0090、CGA、S0101、S0227、SW122这8个微卫星位点构成的简化指标体系可较好地反映深县猪种群遗传多样性的变化。因此,深县猪的保种群群体遗传多样性监测可以简化为检测这8个微卫星位点,同时本研究采用的方法也可为其他保种群的遗传多样性监测方法的简化处理提供参考。 相似文献
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