肉碱棕榈酰转移酶基因在绵羊和山羊不同肌肉组织中的表达分析

采用实时荧光定量PCR方法比较分析了肉碱棕榈酰转移酶(carnitine palmitoyl transferase,CPT)基因在绵羊和山羊不同组织中的表达差异。研究结果表明,CPT1A mRNA在绵羊肝脏、脾脏中表达明显高于CPT1B、CPT2,CPT1B mRNA在绵羊腹外斜肌中的表达明显高于CPT1A、CPT2。CPT1A mRNA在山羊脾脏中表达明显高于CPT1B、CPT2 mRNA在山羊脾脏中的表达,CPT1B mRNA在山羊后腿股二头肌、腹外斜肌中的表达明显高于CPT1A、CPT2 mRNA在山羊后腿股二头肌中的表达。CPT1A mRNA在绵羊肝脏中的表达显著高于山羊中CPT1A mRNA的表达(P＜0.05)。CPT1A、CPT1B、CPT2基因在绵羊心脏、脾脏、腰大肌中的表达显著高于在山羊中的表达(P＜0.05),CPT1A、CPT1B、CPT2基因在山羊后腿股二头肌中的表达显著高于在绵羊中的表达(P＜0.05)。CPT1A、CPT1B、CPT2基因在绵羊、山羊各组织中的表达存在差异,可能与各基因表达模式、肌肉组织纤维类型、脂肪沉积含量不同等因素有关。     

肉碱棕榈酰基转移酶2过表达载体构建及在奶牛乳腺上皮细胞中验证

为进一步研究CPT2基因在脂质代谢中的作用,试验构建了绿色荧光CPT2过表达载体,将其转入奶牛乳腺上皮细胞,通过荧光定量方法,检测CPT2基因mRNA的表达水平差异,在细胞水平验证了CPT2过表达载体的表达效率。结果表明:过表达组的CPT2基因mRNA表达量与对照组(空载组)相比有所提高。说明CPT2过表达载体转染奶牛乳腺上皮细胞后,CPT2基因mRNA表达水平显著升高。     

喜树碱对NIH/3T3细胞TLR3表达及活化的影响

为研究喜树碱(CPT)对小鼠成纤维细胞NIH/3T3中Toll样受体3(TLR3)的表达及活化的影响,本实验利用CCK-8试剂盒测定了CPT在不同浓度下、不同作用时间对NIH/3T3细胞的毒性作用,并确定CPT对NIH/3T3细胞的基本无毒浓度为1μg/mL。通过流式细胞术检测CPT作用NIH/3T3细胞表明,TLR3平均荧光强度与对照组相比显著增强,表明TLR3表达增加。此外,ELISA试剂盒检测结果显示CPT作用后IFN-β表达量增加,并高于阳性对照组,差异极显著(p<0.01)。本研究表明CPT对NIH/3T3细胞的TLR3具有显著的激动作用。     

CPT1B基因在灵山香鸡上的时空表达规律研究

本实验旨在阐明CPT1B基因在灵山香鸡上的组织表达和时序表达谱,为研究鸡体内脂肪代谢提供一定的基础资料。选取胚胎期到性成熟时的灵山香鸡为实验材料,在不同发育时间点(9、12、16胚龄,1日龄,1、3、 5、7、10、13、16周龄)采集胸肌、腿肌、心脏、肝脏组织样品,利用实时荧光定量方法分析CPT1B基因在不同组织不同发育阶段的表达规律。结果显示:CPT1B在不同发育阶段4种组织中表达差异性不同,在胚胎期和1日龄,CPT1B基因在肝脏的表达量最高;5、7、10、13周龄时,CPT1B在胸肌的表达量最高;CPT1B基因在4种组织不同发育阶段变化趋势不一致,其在肝脏表达量呈现下降趋势,而在腿肌、胸肌和心脏表达量呈上升趋势,在胸肌的各个发育阶段上升趋势最显著;CPT1B虽然属于肌肉亚型CPT,但不是每个发育阶段在肌肉组织中的表达量最高,在胚胎期,鸡肝脏是CPT1B参与脂肪酸β-氧化的主要场所,而在出雏后到性成熟时期胸肌是CPT1B参与脂肪酸β-氧化的主要场所。     

“花山麻鸡”CPT1A基因时空表达规律研究

试验旨在阐明"花山麻鸡"CPT1A基因的组织表达和时序表达规律,以胚胎期到上市日龄的"花山麻鸡"为试验材料,在不同发育时间点采集胸肌、腿肌、心脏、肝脏组织样品,利用实时荧光定量方法分析CPT1A基因在不同组织不同发育阶段表达规律。在相同发育阶段不同组织差异表达结果显示:在胚胎期(9、12、16日胚龄)和上市日龄(9周龄),CPT1A基因在肝脏的表达量显著高于在心脏、胸肌和腿肌的表达量,在出生后1日龄,CPT1A在心脏表达量最高,1周龄时,CPTA在肝脏的表达量最低;5周龄时,CPT1A在腿肌的表达量最高;7周龄时,CPT1A在腿肌和肝脏的表达量显著高于胸肌和心脏。在同一组织不同发育阶段差异表达结果显示,CPT1A在胸肌、腿肌、肝脏和心脏不同发育阶段表达规律与表达量是不同的。研究表明CPT1A基因在胸肌、腿肌、肝脏和心脏相同发育阶段表达量不同,CPT1A基因在胸肌、腿肌、肝脏和心脏织不同发育阶段表达规律与表达量不同。     

肉碱棕榈酰转移酶1的生物学功能及其对肉品质影响的研究进展

肉碱棕榈酰转移酶1(CPT1)是脂肪酸氧化过程中的一种限速酶,其活性会影响脂肪酸在线粒体基质中β-氧化的进程,同时会通过调节脂质代谢,影响脂肪酸的种类与含量及禽畜脂肪的分布,进而影响肉品质。本文系统地论述了CPT1生物特性、影响CPT1活性的主要因素及其对肉品质的影响,以期为改善肉品质提供理论参考。     

藏猪和杜洛克猪SCD、CPT1B基因表达差异及其与IMF含量相关性分析

为了揭示脂肪型的藏猪和瘦肉型的杜洛克猪肌内脂肪(IMF)沉积相关基因的表达差异,试验采用荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测了两猪种背最长肌中硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)基因、肉碱脂酰转移酶Ⅰ(CPT1B)基因在180日龄的表达差异,分析其表达与IMF含量的相关性。结果表明:180日龄藏猪SCD mRNA表达量极显著高于杜洛克猪(P0.01),而藏猪CPT1B mRNA表达量显著高于杜洛克猪(P0.05)。相关性分析结果显示,SCD、CPT1B mRNA表达量均与IMF含量呈正相关。     

葡萄糖、维生素C浸泡对普安银鲫胚胎发育中乙酰辅酶A羧化酶、脂肪酸合成酶及肉毒碱棕榈酰转移酶Ⅰ活性的影响

为了探究普安银鲫(Carassius auratus gibelio)胚胎发育中乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、脂肪酸合成酶(FAS)和肉毒碱棕榈酰转移酶Ⅰ(CPTⅠ)活性变化及葡萄糖、维生素C浸泡对它们的影响,设置不同浓度的葡萄糖溶液和维生素C溶液用于普安银鲫的孵化,葡萄糖浓度分别为0、5、10、15和20 g/L,维生素C浓度分别为0、20、25、30和35 mg/L。记录出膜时间及孵化率,筛选适宜葡萄糖和维生素C浓度。采用无添加(对照组)、最适葡萄糖浓度(葡萄糖组)和最适维生素C浓度(维生素C组)的溶液用于孵化,测定胚胎发育中ACC、FAS和CPTⅠ活性变化特点。结果表明:1)葡萄糖浓度为15 g/L,维生素C浓度为30 mg/L时能获得最短出膜时间和最高的孵化率。2)胚胎发育过程中,FAS、ACC和CPTⅠ比活力和全活力均呈上升趋势。3)葡萄糖组在原肠中期、晶体出现期和出膜前期ACC和FAS比活力和全活力均显著高于对照组(P<0.05),CPTⅠ比活力和全活力在晶体出现期和出膜前期显著高于对照组(P<0.05)。4)维生素C组ACC、FAS全活力在出膜前期均显著高于对照组(P<0.05)。结果提示,15 g/L葡萄糖和30 mg/L维生素C溶液浸泡能促进普安银鲫胚胎发育过程中ACC、FAS和CPTⅠ的合成与分泌而形成新的代谢水平,以维持胚胎中脂质代谢的动态平衡。     

脂联素对犊牛肝细胞脂氧化关键酶表达的影响

体外原代培养犊牛肝细胞,添加0、16、64和128μg/L脂联素（adiponectin,ADPN）,分别培养4、8h后,提取细胞总RNA。应用实时荧光定量PCR方法,检测脂氧化关键酶脂酰辅酶A氧化酶（ACO）、肝脏脂肪酸结合蛋白（L-FABP）、肉碱脂酰转移酶-Ⅰ（CPTⅠ）、肉碱脂酰转移酶-Ⅱ（CPTⅡ）mRNA表达变化。结果显示,在ADPN作用4h后,ACO、L-FABP、CPTⅠ、CPTⅡ基因mRNA水平均随ADPN浓度的增加而增加,且均显著高于对照组,呈剂量依赖关系;作用8h时,ACO表达也增加,但差异不显著,L-FABP在中高剂量组显著高于对照组,CPTⅠ和CPTⅡ在各ADPN处理组均显著高于对照组。结果表明,ADPN可显著促进脂氧化关键酶的表达,增强肝脏脂氧化作用,减少肝脂储存。     

奶水牛ACSL1基因组织表达分析及其对脂肪酸代谢相关基因表达的影响

本实验通过开展奶水牛长链脂酰辅酶A合成酶1(Long-chain fatty acyl-CoA 1,ACSL1)基因的编码区克隆、组织表达分析、过表达及干扰等实验,旨在探究该基因在乳腺上皮细胞中对脂肪酸代谢相关基因表达水平的影响。组织表达分析结果显示:ACSL1在水牛乳腺组织中的表达量最高,暗示该基因可能与泌乳期水牛乳脂合成有关。鉴于此,本实验成功克隆了水牛ACSL1基因完整的编码序列,由此构建了相应的过表达载体,并合成了干扰片段。水牛乳腺上皮细胞ACSL1超表达和干扰实验发现:与对照组(感染AdpcDNA3.1+)相比,实验组(感染Ad-ACSL1)CLIC1、ELOVL1和PNPLA2显著上升,ELOVL6表达量极显著上升,ACSL1、CPT1B、CPT1C和DDR1表达量极显著上升,FADS2差异不显著;与对照组(感染siRNA-NC)相比,实验组(感染siRNA-ACSL1)ELOVL1和FADS2表达量显著下降,ACSL1、CLIC1、CPT1C、ELOVL6、DDR1和PNPLA2表达量极显著下降,CPT1B差异不显著。这些结果说明ACSL1基因的过表达或干扰可能影响水牛乳腺上皮细胞中部分脂代谢相关基因的表达量变化,从而影响乳脂合成。     

CPT1A基因在广西麻鸡的表达研究

该研究旨在阐明CPT1A基因在广西麻鸡组织表达和时序表达谱,为研究鸡体内脂肪代谢提供一定的基础资料.选取胚胎期到性成熟时的广西麻鸡,在不同发育时间点采集胸大肌、腓肠肌、心脏和肝脏组织样品,利用实时荧光定量方法,分析CPT1A基因在不同组织不同发育阶段表达规律.组织表达结果显示,CPT1A在广西麻鸡不同发育阶段4种组织中...     

短期限饲对家兔肝脏和骨骼肌脂质代谢的影响

本试验旨在研究短期限饲对家兔肝脏和骨骼肌中脂质代谢相关基因表达的影响,以阐明短期限饲下家兔脂质代谢的调节机制。选取40日龄、体重相近、健康状况良好的商品代伊拉肉兔40只,随机分为对照组(自由采食)和试验组(限饲,饲喂量为对照组的70%左右),每组20个重复(公母各占1/2),每个重复1只。试验期为5 d。结果显示:短期限饲显著降低了家兔肝脏指数(P0.05),有降低家兔后腿肌重量的趋势(P=0.074 3),对家兔前腿肌、背腰肌、总肌肉(前腿肌+后腿肌+背腰肌)重量无显著影响(P0.05)。短期限饲显著降低了血浆中甘油三酯(TG)和极低密度脂蛋白(VLDL)含量(P0.05),对肝脏和背腰肌中TG含量的影响不显著(P0.05)。肝脏中,短期限饲显著降低了脂肪酸合成酶(FAS) mRNA的相对表达量(P0.05),显著上调了肉碱脂酰转移酶1(CPT1)、肉碱脂酰转移酶2(CPT2)、G蛋白偶联受体41(GPR41)、G蛋白偶联受体43(GPR43)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα) mRNA的相对表达量(P0.05);骨骼肌中,短期限饲显著上调了脂蛋白脂肪酶(LPL)、脂肪酸结合蛋白(FABP)、G PR41、G PR43 mRNA的相对表达量(P0.05),显著下调了CPT2 mRNA的相对表达量(P0.05),对CPT1、PPARα、脂肪酸转运蛋白(FATP) mRNA的相对表达量无显著影响(P0.05)。由此得出,短期限饲抑制了家兔肝脏中脂质的合成和外运,促进了脂肪酸在肝脏中的氧化利用,GPR41、GPR43和PPARα参与此过程;短期限饲促进了家兔骨骼肌对脂肪酸的摄取和利用,GPR41和GPR43参与此过程。     

苜蓿源miR168b通过靶向肉碱棕榈酰转移酶1A对奶牛乳腺上皮细胞增殖、凋亡和脂滴积累的调控研究北大核心CSCD

本试验旨在探究苜蓿源miRNAs(mtr-miRNAs)对奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)增殖和凋亡的影响。试验首先通过CCK8、5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)、流式细胞术、基因和蛋白定量等方法检测苜蓿源-miR168b(mtr-miR168b)对BMECs增殖、凋亡和周期的影响。然后,敲低mtr-miR168b靶基因肉碱棕榈酰转移酶1A(CPT1A)表达后,检测了BMECs的活力和凋亡。通过诱导转染后细胞,用氟硼二吡咯(Bodipy)染色和油红O染色检测mtr-miR168b和CPT1A基因干扰对BMECs脂滴合成的影响。结果表明:1)mtr-miR168b高表达极显著降低了BMECs活力(P<0.01)。2)mtr-miR168b高表达极显著抑制了BMECs增殖(P<0.01),延长了细胞G1~S期进程,极显著促进了细胞凋亡(P<0.01)。3)mtr-miR168b在BMECs中高表达极显著抑制了细胞增殖基因周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)、增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)和细胞周期蛋白D2(Cyclin D2)的基因的表达水平(P<0.01),极显著增加了凋亡标志基因Bcl2关联X蛋白(BAX)基因的表达水平(P<0.01),极显著抑制了PCNA蛋白表达水平(P<0.01),极显著增加了BAX蛋白表达水平(P<0.01),并且mtr-miR168b显著抑制了蛋白激酶B(AKT)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)基因的表达水平(P<0.05)。4)mtr-miR168b高表达抑制了BMECs中脂滴的积累。5)干扰mtr-miR168b的靶基因CPT1A,对BMECs脂滴积累也有抑制作用。综上所述,mtr-miR168b可通过抑制BMECs增殖,促进细胞凋亡,并通过靶向CPT1A基因抑制BMECs中脂滴的生成。试验结果可为mtr-miRNAs调控牛奶乳脂合成提供分子层面的技术支撑。     

牦牛和犏牛睾丸CPT1a和ETHE1基因mRNA水平比较研究

试验旨在探索牦牛杂交雄性不育后代(犏牛)睾丸脂肪酸氧化特点及其与雄性不育的关联性,阐明犏牛雄性不育的分子机制。以GAPDH和18SrRNA基因为双内参,建立了牦牛和犏牛肝脏型棕榈酰肉碱转移酶1a(CPT1a)和硫双加氧酶1(ETHE1)基因mRNA水平的实时荧光定量PCR检测方法,结果发现,该实时荧光定量PCR方法扩增特异性好,扩增效率为98.5%~107.8%,标准曲线线性关系好。采集成年牦牛(n=9)和雄性不育犏牛(n=7)睾丸和附睾,通过常规组织切片和HE染色检测,证实犏牛睾丸和附睾中无精子,而牦牛睾丸和附睾中有精子。试验进一步从牦牛和犏牛睾丸中提取总RNA,测定睾丸中CPT1a和ETHE1基因的mRNA水平,结果显示,犏牛睾丸中CPT1a和ETHE1基因mRNA水平分别显著和极显著高于牦牛(P0.05;P0.01)。CPT1a基因mRNA水平的提高表明犏牛睾丸中脂肪酸β-氧化能力的加强;而ETHE1基因mRNA水平的增加可促进线粒体呼吸链的电子传递和脂肪酸氧化,或影响其他能量代谢通路,这两种基因mRNA水平的提高均有助于睾丸脂肪酸的β-氧化供能。本研究结果表明,与牦牛睾丸相比,雄性不育犏牛睾丸的脂肪酸氧化供能水平加强,可能对脂肪酸燃料分子有更多的依赖性。     

糖皮质激素和饲粮脂肪水平对肉鸡脂肪代谢的影响北大核心CSCD

本试验旨在研究糖皮质激素——地塞米松(DEX)和饲粮脂肪水平对肉鸡脂肪代谢的影响。选取22日龄体重相近的爱拔益加(AA)肉鸡200只,随机分成低脂饲粮(LFD)和高脂饲粮(HFD)2个处理,每个处理100只,饲喂至38日龄。在35日龄时每个饲粮处理下设2个子处理,分别在皮下注射DEX(2.0 mg/kg BW)和等体积的生理盐水,每个子处理50只,连续注射3 d。结果表明:1)LFD和HFD饲喂条件下,糖皮质激素均显著降低肉鸡体重和腿肌重(P<0.05),显著提高肝脏比重和血液甘油三酯(TG)含量(P<0.05)。2)LFD饲喂条件下,糖皮质激素显著提高腹脂比重及胸肌、腿肌的TG含量(P<0.05)。3)HFD饲喂条件下,糖皮质激素显著提高腹脂和腿肌的肉碱脂酰转移酶1(CPT1)含量(P<0.05),显著降低肝脏和胸肌的CPT1含量(P<0.05)。4)糖皮质激素导致糖皮质激素受体(GR)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)、脂肪酸转运蛋白1(FATP1)m RNA表达量在腹脂和胸肌中呈整体上调趋势,而在肝脏和腿肌中呈整体下降趋势。结果提示,糖皮质激素可能通过GR、PPARα和FATP1调控肉鸡的脂肪代谢,促进脂肪在肌肉和肝脏的异位沉积。HFD可能通过激活腹脂和腿肌的CPT1,促进脂肪酸的氧化利用,从而缓解糖皮质激素导致的脂肪沉积现象。     

糖皮质激素和饲粮脂肪水平对肉鸡脂肪代谢的影响

本试验旨在研究糖皮质激素——地塞米松(DEX)和饲粮脂肪水平对肉鸡脂肪代谢的影响。选取22日龄体重相近的爱拔益加(AA)肉鸡200只,随机分成低脂饲粮(LFD)和高脂饲粮(HFD)2个处理,每个处理100只,饲喂至38日龄。在35日龄时每个饲粮处理下设2个子处理,分别在皮下注射DEX(2.0 mg/kg BW)和等体积的生理盐水,每个子处理50只,连续注射3 d。结果表明:1)LFD和HFD饲喂条件下,糖皮质激素均显著降低肉鸡体重和腿肌重(P0.05),显著提高肝脏比重和血液甘油三酯(TG)含量(P0.05)。2)LFD饲喂条件下,糖皮质激素显著提高腹脂比重及胸肌、腿肌的TG含量(P0.05)。3)HFD饲喂条件下,糖皮质激素显著提高腹脂和腿肌的肉碱脂酰转移酶1(CPT1)含量(P0.05),显著降低肝脏和胸肌的CPT1含量(P0.05)。4)糖皮质激素导致糖皮质激素受体(GR)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)、脂肪酸转运蛋白1(FATP1)m RNA表达量在腹脂和胸肌中呈整体上调趋势,而在肝脏和腿肌中呈整体下降趋势。结果提示,糖皮质激素可能通过GR、PPARα和FATP1调控肉鸡的脂肪代谢,促进脂肪在肌肉和肝脏的异位沉积。HFD可能通过激活腹脂和腿肌的CPT1,促进脂肪酸的氧化利用,从而缓解糖皮质激素导致的脂肪沉积现象。     

钙、磷对免疫抑制仔猪生长性能、血液生理生化指标及矿物元素代谢的影响

本试验旨在研究钙、磷对免疫抑制仔猪生长性能、血液生理生化指标及矿物元素代谢的影响。选取18头22日龄"杜长大"三元杂交断奶仔猪(公母各占1/2),随机分为3组,每组6个重复,每个重复1头猪。其中,对照组和模型组饲喂基础饲粮,试验组饲喂含1.5倍NRC(2012)钙、磷标准的饲粮。试验第23天,模型组和试验组仔猪腹腔注射18 mg/kg BW伊立替康(CPT),连续注射4 d,用于建立免疫抑制仔猪模型,对照组注射等量生理盐水。试验期为28 d。结果表明:1)与对照组相比,腹腔注射CPT显著降低了仔猪的平均日增重(P0.05),显著提高了料重比和腹泻指数(P0.05),饲粮补充钙、磷可显著缓解免疫抑制仔猪的腹泻(P0.05),有助于改善仔猪的生长性能。2)与对照组相比,免疫抑制仔猪血液中白细胞、中性粒细胞和单核细胞等免疫细胞的数量显著降低(P0.05),饲粮补充钙、磷可缓解免疫抑制对血液中单核细胞数量的影响。3)与对照组相比,免疫抑制仔猪血清中铜的含量显著升高(P0.05),结肠食糜中铜的含量显著降低(P0.05),提示机体可能通过提高铜利用率实现免疫功能的修复,是对免疫抑制的一种反馈调节。饲粮补充钙、磷对免疫抑制仔猪的微量元素代谢无显著影响(P0.05)。综上所述,饲粮补充1.5倍NRC(2012)标准的钙、磷可有效缓解CPT所致免疫抑制仔猪的腹泻症状,改善仔猪的生长性能,促进免疫功能的恢复。     

短期限饲对生长肉兔脂肪组织中脂质代谢的影响

本试验旨在研究短期限饲对生长肉兔脂肪组织中脂质代谢相关基因表达和相关信号通路的影响,阐明生长肉兔能量稳态的调节机制。试验选用40日龄、体重相近的伊拉肉兔40只,随机分为2组:对照组(自由采食组)和限饲组(饲喂量是对照组的70%左右),每组20个重复,每个重复1只兔,试验持续5 d。结果表明:1)与对照组相比,短期限饲显著降低了生长肉兔的日增重(P0.05),有降低生长肉兔体内总脂肪沉积量的趋势,对生长肉兔体内肩胛脂肪和肾周脂肪沉积量影响均不显著(P0.05)。2)与对照组相比,短期限饲显著降低了脂肪酸合成酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、脂蛋白脂酶(LPL)的基因表达(P0.05),却显著升高了过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARα、PPARγ)、肉碱脂酰转移酶(CPT1、CPT2)和G蛋白偶联受体(GPR41)的基因表达(P0.05),对激素敏感脂肪酶(HSL)和G蛋白偶联受体(GPR43)的基因表达无显著影响(P0.05)。3)与对照组相比,短期限饲对脂肪中甘油三酯(TG)的浓度和磷酸化的磷酸腺苷激活蛋白酶(AMPK)蛋白表达水平无显著影响(P0.05)。综上,短期限饲可抑制生长肉兔脂肪组织中脂肪酸的合成,促进脂肪酸分解; PPARα和GPR41信号通路可能参与了生长肉兔脂肪组织能量稳态的调节。     

柠檬酸对小鼠脂肪细胞甘油三酯及其代谢产物含量的影响

本试验旨在研究柠檬酸对小鼠脂肪细胞甘油三酯(TG)及其代谢产物含量的影响。将小鼠3T3-L1前脂细胞诱导成成熟的脂肪细胞作为研究对象,在诱导培养第14天,加入含0(对照组)、20(试验Ⅰ组)、50(试验Ⅱ组)、200μmol/L的柠檬酸完全培养基(试验Ⅲ组)培养细胞,于0、36、72 h收集细胞检测TG合成和分解代谢中关键限速酶及代谢产物的含量。结果表明:在36和72 h,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组TG含量显著高于对照组(P0.05);各试验组醛缩酶(FDA)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)和脂肪酸合成酶(FAS)含量均显著或极显著高于对照组(P0.05或P0.01);各试验组激素敏感脂肪酶(HSL)、肉碱脂酰转移酶1(CPT1)、游离脂肪酸(FFA)及乙酰辅酶A含量均极显著低于对照组(P0.01)。结果提示,柠檬酸能够促进小鼠脂肪细胞TG的合成和沉积,能显著或极显著提高TG合成代谢中FDA、ACC、FAS产物的含量,极显著降低TG分解代谢中HSL、CPT1、FFA及乙酰辅酶A产物的含量,20μmol/L为最佳剂量。     

油酸对延边牛前体脂肪细胞分化及成脂相关基因表达的影响

利用胶原酶消化法分离18月龄延边牛前体脂肪细胞进行体外培养和鉴定,用100μmol/L油酸对细胞进行诱导分化,研究油酸对脂肪细胞分化的作用。结果显示,油酸可诱导延边牛前脂肪细胞分化,促进脂滴形成及甘油三酯浓度增加;成脂相关基因PPARγ、C/EBPα、LPL、FABP4、SCD、CPT1β、SREBP1及PLIN2的表达随处理时间不同表现出不同的变化趋势,PPARγ、C/EBPα、CPT1β、SREBP1、FABP4和PLIN2基因的表达量在分化后始终高于对照组(P<0.05),LPL基因的表达先降后升(P<0.05),SCD基因的表达始终低于对照组(P<0.05)。结果表明,油酸可促进延边牛前体脂肪细胞的分化,并对成脂相关基因具有明显的调控作用。