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副猪嗜血杆菌aroA基因自杀载体的构建 总被引:1,自引:0,他引:1
为了构建副猪嗜血杆菌aroA基因插入突变自杀载体,试验采用自杀质粒介导的同源重组方法首先构建了自杀质粒pSD,根据副猪嗜血杆菌aroA基因设计PCR特异性引物,上游引物5'末端加BamHⅠ位点,下游引物5'末端加SalⅠ位点,PCR扩增aroA基因后连接到T载体,经酶切位点分析发现在aroA中有1个HindⅢ位点,将氯霉素表达盒通过该位点,构建T-aroA-cm载体,再通过BamHⅠ和SalⅠ将aroA-cm定向克隆到自杀质粒pSD中。结果表明:成功获得aroA基因插入突变自杀载体。说明进一步进行同源重组,从而构建副猪嗜血杆菌aroA基因插入突变株。 相似文献
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本试验应用PCR方法及PCR-RFLP技术对aroA基因在副猪嗜血杆菌病原检测及基因分型中的作用进行探讨。以针对aroA基因的PCR引物成功检测出18株来自广西各地区猪场的副猪嗜血杆菌,敏感性检测结果表明,该PCR方法可检测的最低菌数为102个。对该18株副猪嗜血杆菌进行aroA基因的序列测定,并进行aroA基因的酶切位点分析,筛选出Hind Ⅲ和FokⅠ两种限制性内切酶,利用PCR-RFLP技术对1株血清5型参考菌株与本研究中18株广西菌株aroA基因的完整编码序列进行Hind Ⅲ和FokⅠ限制酶谱分析,结果显示可分为与毒力相关的3种谱型。本研究结果表明,应用PCR方法及PCR-RFLP技术对副猪嗜血杆菌进行检测分析有助于更好地研究副猪嗜血杆菌的生物学特性及aroA基因的功能。 相似文献
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本试验对分离的5株副猪嗜血杆菌进行了"卫星" 生长试验、生化鉴定和PCR检测。通过对aroA基因序列进行分析,发现这5株菌同标准菌株相比,其核苷酸序列相似性为96.3%~99.8%,氨基酸序列相似性为98.2%~99.5%。此外,还建立了分别针对副猪嗜血杆菌(Hps)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)及猪圆环病毒2型(PCV2)、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒的三重PCR检测方法;敏感性试验表明,三重PCR最低能检出Hps、PPV、PRV、PCV2的DNA分别为12、16、7.6和6.3 pg。 相似文献
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副猪嗜血杆菌病是由猪副嗜血杆菌病引起的猪的一种多发性浆膜炎和关节炎性疾病。文章根据副猪嗜血杆菌病的发病特点、临床症状、病理剖检、实验室诊断,提出了该病的综合防治措施。 相似文献
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猪副嗜血杆菌感染的诊断 总被引:7,自引:1,他引:6
1998年在湖南省娄底、益阳、长沙等地区的部分猪场先后发生了疑似猪副嗜血杆菌 (Hemophilusparasuis,Hps ,旧名为猪嗜血杆菌 )引起的疾病。病理解剖主要表现为胸膜炎和肺炎。此病在湖南省尚未见报道 ,现将长沙某外贸出口猪场送检猪的诊断试验结果报告如下。1 流行情况该猪场有母猪 2 40余头 ,仔猪 10 0 0余头 ,架子猪 70 0余头 ,4月 15~ 16日开始发病。有 10余头母猪不食 ,死了 3~ 4头 ,有的治愈 ,患病率为 3 %左右 ,病死率 3 0 %~ 40 %;仔猪有 10 0余头发病 ,死亡 10 0余头 ,患病率 10 %左右 ,病死率高达 90 %以… 相似文献
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以HPS的16SrRNA中的基因序列设计合成引物,进行PCR扩增,标准菌株NR4、SW124、SW114、SW140和分离株XX、FS在预计的821bp位置上扩增出特异性条带,NJING株、胸膜肺炎(APP)等没有特异性条带产生。这证明PCR检测副猪嗜血杆菌具有较高的特异性和敏感性。 相似文献
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副猪嗜血杆菌(HPS)是猪上呼吸道的一种常见病原菌。在一定的条件下,可引起猪的多发性浆膜炎和关节炎,给养猪业带来很大的损失。为了更加全面的了解该病原菌,论文就近年来副猪嗜血杆菌病的病原学、致病机理、临床诊断和防控等方面做简要的概述。 相似文献
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副猪嗜血杆菌病的诊治 总被引:1,自引:0,他引:1
副猪嗜血杆菌病是由猪副嗜血杆菌所引起的一种泛嗜性细菌性传染病。近年来,我市一些养猪户的生猪常发生此病,病猪主要出现发热、咳嗽、呼吸困难、消瘦、跛行等症状。现将一病例诊治情况报告如下。 相似文献
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副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis)是副猪嗜血杆菌病病原,该病已成为危害全球养猪业发展的一种重要细菌性疾病。H.parasuis的血清型复杂多样,各血清型之间的致病力差异极大,且缺乏交叉保护反应。这使H.parasuis感染的防控十分困难。H.parasuis外膜蛋白(OMP)和毒力与免疫有一定的联系。在H.parasuis全基因组中发现了6个编码主要外膜蛋白的基因,分别为外膜蛋白P1基因,外膜蛋白P2基因,表面抗原D15基因,外膜蛋白P26基因,铁调节外膜蛋白基因,外膜蛋白P5基因。论文对这6个主要的OMP基因的特点和潜在的功能进行综述。 相似文献
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