猕猴桃基因组DNA不同提取方法的研究

4种经优化的DNA提取方法即CTAB区室法、SDS区室法、CTAB常规法、SDS常规法提取猕猴桃嫩叶基因组DNA,效果均好。经综合对比分析,本实验认为CTAB常规法是适于AFLP分析最佳的提取方法,因其步骤简单、快捷,得到的基因组DNA降解少、杂质含量少,能获得高质量的DNA模板。通过对所得到的基因组DNA模板进行AFLP分析,得到了清晰的DNA指纹图谱。     

猕猴桃营养成分的提取工艺研究进展

本文对猕猴桃果实中多糖及蛋白酶,种子中籽油、籽粕蛋白和亚麻酸,以及皮渣中膳食纤维等常见的几种营养成分提取工艺进行了综述,为猕猴桃深加工提供有益思路.     

猕猴桃中SOD提取工艺研究

[目的]寻找一条从植物中提取出较纯净S01）的廉价工艺路线。[方法]利用超氧化物歧化酶（SOD）耐热等性质,对以猕猴桃为原料制备的SOD粗酶液分别进行热变性、等电点、丙酮沉淀处理,以得到纯度较高的SOD酶液。[结果]试验确定了热变性、等电点、丙酮沉淀处理猕猴桃中的SOD粗酶液的最佳提取参数分别为65℃下25min、pH5．0、V丙酮：VSOD酶液=1：1,并且依次用3种方法下的最佳参数进行提取,得到的蛋白样品经分析达到了电泳纯。[结论]研究可为植物中SOD的廉价提取提供参考依据。     

美味猕猴桃中黄酮化合物的提取研究

[目的]优化美味猕猴桃中黄酮类化合物的提取工艺。[方法]对影响美味猕猴桃中黄酮类化合物提取的乙醇浓度、料液比、超声功率、超声时间进行单因素试验及分析,在此基础上,选出对黄酮提取影响较大的3个因素进行3因素3水平的正交试验,确定超声波辅助浸提法提取美味猕猴桃中黄酮化合物的最佳条件。[结果]超声波辅助浸提法提取美味猕猴桃中黄酮化合物的最佳条件为:乙醇浓度70%、料液比1∶5 g/ml、超声波功率70 W、超声波时间5 min,在此最佳工艺条件下黄酮得率最大。[结论]研究可为开发利用美味猕猴桃中的黄酮类化合物提供参考依据。     

菠萝茎蛋白酶的提取及其活性保护研究

本研究结果表明,菠萝茎组织中含有0.54～1.16％的蛋白酶.在酶膏的干燥过程中,45℃烘干使蛋白酶活性下降61.32％,而真空干燥的酶活性只下降18.32％.研究结果发现,硫代硫酸钠和半胱氨酸混用可部分地保护酶活性,使酶活性比对照提高67.37％.在提取中,用氯化钠、醋酸锌、乙二胺四乙酸和抗坏血酸溶液洗涤酶复合物可使酶活性提高110.48％.用0.15～0.25％的丹宁作酶的沉淀剂是适宜的,既可保证酶活性,也可保证有较高的酶产量.     

微波辅助法提取猕猴桃果实多糖的研究

采用微波辅助法提取猕猴桃果实中的多糖,并对料液比、温度、时间3个因素进行单因素试验和正交试验,确定了猕猴桃果实中多糖的最佳提取工艺,即微波预处理30 min后,温度70℃,料液比1∶25,时间3 h。     

草鱼内脏复合蛋白酶提取工艺研究

为充分利用草鱼加工下脚料,以草鱼内脏为原料,以复合蛋白酶酶比活为指标,对草鱼内脏复合蛋白酶的提取、分离、干燥条件进行优化.结果表明,最佳的草鱼内脏脱脂物是工业已烷;最佳的复合蛋白酶提取条件为磷酸盐缓冲液pH值8、提取温度20℃、浸提时间80 min,超声波辅助提取频率15 kHz、功率50 W、时间4 min;最佳的复合蛋白酶分离方法是添加质量浓度为8 g/L的茶多酚;最佳的干燥条件是聚乙二醇终质量浓度20 g/L、装液厚度6 mm、快速冷冻、干燥时间24 h.在此条件下,复合蛋白酶酶比活为4.33 U/mg.     

响应面法优化猕猴桃糖蛋白提取工艺研究

为确定乙醇浸提法提取猕猴桃糖蛋白的最优条件,采用响应面分析法,以液料比、乙醇体积分数、提取温度及提取时间为独立变量进行中心组合设计,以猕猴桃蛋白质提取率为响应值进行数学模型拟合,研究了各独立变量对猕猴桃糖蛋白提取率的影响。结果表明:当液料比为6.5∶1、乙醇体积分数24%、提取温度24℃、提取时间45min时,糖蛋白的提取率最高可达到63.05%,与试验设计结果相符,有助于设计猕猴桃蛋白质提取的最佳工艺。     

猕猴桃基因组DNA提取的研究

[目的]探讨猕猴桃属基因组总DNA的提取方法。[方法]以富含多糖和多酚次生代谢产物的猕猴桃为材料,比较不同品种在不同方法下的基因组DNA抽提效果,并对不同材料部位、抗氧化剂以及DNA纯化方法等对基因组DNA的获得进行研究。[结论]结果表明,以猕猴桃组培苗的茎部为材料,通过CTAB法,在裂解液中加入1％β巯基乙醇,以及在异丙醇沉淀前加入1／2体积的5mol／LNaCl,所得到的猕猴桃基因组DNA的质量较佳。[结论]该研究为今后猕猴桃分子生物学和基因工程研究奠定基础。     

一种大量提取猕猴桃不同组织高质量总RNA的方法

在CTAB法的基础上,经过多方面改进,提取了"红阳"猕猴桃7种组织(果实、雄花、雌花、叶片、种子、皮、根)的总RNA。利用琼脂糖凝胶电泳和超微量核酸蛋白测定仪检测了该方法和试剂盒法提取的RNA的完整性、纯度和浓度。结果显示:采用这两种方法提取到的猕猴桃不同组织的总RNA,能检测到18S和28S两条清晰完整的条带,A₂₆₀/A₂₈₀值在1.8～2.0间,A₂₆₀/A₂₃₀值大于2.0。进一步的RT-PCR验证结果表明采用这两种方法提取到的RNA质量较高,均达到了分子生物学实验的要求。因此,本文改良的CTAB法适用于猕猴桃各组织高质量总RNA的大量提取。     

山豆根总生物碱的超声提取工艺

[目的]筛选山豆根总生物碱的最佳提取工艺。[方法]以山豆根为原料,利用超声波技术提取山豆根总生物碱,通过单因素试验（考察因素：乙醇浓度、料液比、提取时间、提取次数）和L9（34）正交试验设计,对山豆根总生物碱的提取工艺进行优化。[结果]单因素试验结果显示,4个考察因素的最佳工艺为：乙醇浓度40%、料液比1∶25（g/ml）、提取时间2 h、提取2次,此时得到的总生物碱含量最高。正交试验结果显示,影响山豆根总生物碱提取含量的各因素主次顺序为：乙醇浓度（A）〉提取时间（C）〉料液比（B）〉提取次数（D）,超声提取的最佳工艺为：乙醇浓度40%、料液比1∶20（g/ml）、提取时间1.5 h、提取2次,在此条件下,山豆根总生物碱的提取含量为16.713 7 mg/g。[结论]该方法优化了山豆根总生物碱的超声提取工艺,为山豆根总生物碱的进一步研究奠定基础。     

有机溶剂法提取辣椒素的工艺研究

通过单因素实验和正交试验,对有机溶剂法提取辣椒素的工艺进行了研究。确定了以下最佳工艺条件:以70%乙醇为提取溶剂,料液比1∶15(g/mL),浸提温度60℃,浸提时间100 min。在此最佳提取条件下,辣椒素得率达0.359%。     

银杏壳中类黄酮的提取工艺研究

[目的]研究银杏壳中类黄酮的提取工艺条件。[方法]采用乙醇水溶液作提取溶剂来提取银杏壳中的类黄酮,通过单因素试验考察提取时间、乙醇浓度、料液比和提取温度等主要因素对银杏类黄酮提取的影响,并采用正交试验确定传统醇提取法和微波协同萃取法提取银杏壳中类黄酮的最佳工艺条件。[结果]传统醇提取法的最佳条件为:提取温度为60℃,乙醇浓度为75%,料液比为1∶45(W/V,g/ml,下同),提取时间为2 h;在此条件下,类黄酮的得率为0.503 4%。微波法提取银杏壳中类黄酮的最佳条件为:微波温度为60℃,乙醇浓度45%,料液比1∶30,微波提取时间480 s;在此条件下,类黄酮得率为0.815%。[结论]微波提取法操作极为简便迅速,是一种快速、高效、节能的新型提取工艺,与传统醇提法比较,有一定的优越性。     

胡萝卜水不溶性膳食纤维的提取工艺研究

[目的]优化胡萝卜水不溶性膳食纤维的提取工艺。[方法]采用碱浸提法提取胡萝卜中的水不溶性膳食纤维。通过单因素试验考察碱液浓度、提取温度、料液比、提取时间等主要因素对胡萝卜水不溶性膳食纤维提取的影响,并采用正交试验确定碱浸提法提取胡萝卜水不溶性膳食纤维的最佳工艺条件,同时还对其持水力和膨胀度进行测定。[结果]优化得到的胡萝卜水不溶性膳食纤维最佳提取工艺为:碱液浓度4%、提取温度70℃、料液比1∶20 g/ml、提取时间120 min。在此条件下,胡萝卜水不溶性膳食纤维提取率为61.28%,其持水力和膨胀度分别为2.18 g/g、3.47 ml/g。[结论]碱浸提法工艺简单可行,适用于胡萝卜水不溶性膳食纤维的提取。     

黄花忍冬果中总黄酮的提取工艺研究

[目的]研究黄花忍冬果中总黄酮的提取工艺。[方法]采用溶剂浸提法对黄花忍冬果实中总黄酮提取工艺进行研究,以总黄酮产率为指标,探讨溶剂浓度、料液比、提取温度、提取时间和pH值5因素对黄花忍冬果实中总黄酮提取率的影响,从而分析最佳提取工艺条件。[结果]溶剂浸提法的最佳提取工艺条件为:乙醇浓度60%,提取温度80℃,料液比1∶40(W/V,g/ml,下同),提取时间1.5 h,pH值为8,总黄酮的提取率为6.62%。[结论]该方法筛选了黄花忍冬果中总黄酮的最佳提取工艺,结果准确可靠。     

溶剂法提取葡萄籽油的工艺研究

[目的]为葡萄籽油的生产、开发与利用提供试验依据。[方法]采用溶剂法提取葡萄籽油,单因素试验考察提取时间、料液比、提取温度对葡萄籽油提取率的影响,正交试验确定葡萄籽油的最佳提取工艺。[结果]石油醚作溶剂时,葡萄籽油提取率最高。随着提取时间的增加,提取率增加,超过3 h后提取率的增加趋势不明显。料液比为1∶8(g/ml)时,提取率达到最大值。随着提取温度的升高,葡萄籽油提取率增大,50~60℃时增幅较大。各因素对葡萄籽油提取率的影响主次顺序依次为:提取时间>提取温度>料液比。[结论]石油醚作溶剂时,葡萄籽油的最佳提取工艺为:提取时间5 h,料液比1∶8(g/ml),提取温度70℃,该条件下,葡萄籽油提取率为14.85%。     

辣椒素的提取与分析工艺研究

从辣椒粉中提取辣椒素,对比研究了乙醇提取和氢氧化钠溶液提取方法,优化了提取工艺和色辣分离工艺。测定了大孔树脂和强碱离子交换纤维对辣椒素溶液的饱和吸附量。建立了用来对辣椒素样品中辣椒碱和二氢辣椒碱的含量进行快速分析的高效液相色谱分析方法,并对市售5个辣椒素产品进行了分析测试。结果表明,采用95%乙醇提取的方法提取效率高,操作简单,具有工业应用价值。采用0.4%的NaOH溶液溶解,正己烷两次萃取的工艺能够实现色辣分离,工艺流程简单,分离时间短,辣椒素粗品纯度为74.61%。强碱离子交换纤维对辣椒素的饱和吸附量达到70.31 mg/g,吸附速度快,适合作为辣椒素提纯的吸附材料。所建立的分析方法快捷准确,重复性好。     

滁菊花精粉提取工艺研究

[目的]探索以水为溶媒提取滁菊花精粉的工艺条件。[方法]在单因素试验的基础上进行正交试验,从而得出用水提取滁菊花精粉的最佳工艺条件。[结果]随着粒度的减小,滁菊花精粉的提取率增大。当粒度小于850μm时,滁菊花精粉的提取率趋于稳定。随着料液比的增大,滁菊花精粉的提取率增大,当料液比大于1 g∶25 ml时,其提取率的增加不明显。在开始阶段,随着温度的升高,滁菊花精粉的提取率显著增大,80℃时其提取率最大。滁菊花精粉的提取率随着提取时间的延长而增大,50~70 min后提取率趋于稳定。各因素对滁菊花精粉提取率的影响为:料液比>提取温度>提取时间。试验得出的较佳工艺条件为:料液比为1 g∶30 ml,提取温度为80℃,提取时间为60 min。[结论]以水为溶媒提取滁菊花精粉的工艺稳定可行。     

苦豆子根抑菌活性物质回流提取工艺

为建立苦豆子根抑菌活性物质的较优提取工艺，以提取物对番茄灰霉病菌的抑菌活性为指标，在单因素试验的基础上，通过正交试验对提取溶剂、液固比等4个工艺条件进行考察。结果表明，其较佳提取工艺条件为以体积分数为75%的乙醇溶液为提取溶剂，液固比V（溶剂）∶m（植物材料）=10 mL∶1 g，80 ℃加热2 h，共提取3次。所得提取物对番茄灰霉病原菌的有效抑制中质量浓度（EC₅₀）为185.4 mg/L，1 000 mg/L剂量下对番茄灰霉病的药效与500 mg/L的w=50%速克灵可湿性粉剂相当。该工艺条件较为简单，对其放大即可满足苦豆子杀菌剂产品的工业化生产要求。     

萃取法制备辣椒碱提取工艺的研究

为辣椒碱的制备奠定理论基础。以辣椒为原料,研究料液比、乙醇浓度、提取温度及时间对提取得率的影响,采用正交试验设计优化有机溶剂萃取法制备辣椒碱的提取工艺。提取辣椒碱的适宜条件为:乙醇浓度50%~70%,浸提温度60~80℃,浸提时间1 h内,料液比1∶8~1∶15。4个因素对辣椒碱提取得率的影响程度依次为提取温度>乙醇浓度>提取间>料液比。最佳工艺是:70%的乙醇浸提辣椒3次,料液比为1∶10,提取温度80℃,浸提时间1 h,按此工艺,辣椒素得率达0.456%±0.048%。有机溶剂萃取法有效地提取了辣椒碱,且对辣椒中的其他成分没有破坏作用,是制备辣椒碱的好方法。