奶牛乳汁孕酮免疫检测方法研究进展

有关乳汁孕酮的放射免疫检测技术和酶联免疫检测技术，近几十年来不断有报道，并逐渐成熟。但是测试费用、技术人员培养及方法本身的弊端等因素，使得这些项技术的普及受到了限制。这就要求从业人员不断创新，开发更有市场价值、老百姓更易接受的测试方法。胶体金试纸条在医学上应用广泛，已经呈现出了它应用于动物医学中，在激素测定方面乐观的应用前景。     

奶牛乳汁孕酮免疫检测的方法

孕酮(P4)是奶牛和黄牛在发情周期(一般为21天)中由卵巢黄体中产生的激素,可以进入血液、乳汁和唾液中。在母牛配种后21～24天期间采集奶测定孕酮浓度,可以判断牛是否受孕。发情期间奶中孕酮浓度可判断奶牛是否处于发情期。临床上,孕酮     

检测奶牛乳汁孕酮的免疫生物传感器优化

为了完善已建立的孕酮免疫生物传感器的检测性能,本试验应用碳化二亚胺法将11α-羟基孕酮半琥珀酸和OVA制备成孕酮完全抗原,其浓度达0.6 mg/m L。在此基础上建立了以乳汁为基质的孕酮生物传感器的标准曲线(y=-4.9461x+8.7982,R2=0.993 2),进一步确立了检测乳汁孕酮的线性范围为0.31 ng/m L~50ng/m L,检测限为0.31 ng/m L,灵敏度为0.15 ng/m L,而且孕酮与皮质酮、皮质醇、雄烯二酮的免疫交叉反应较低,表明特异性较好。批内、批间变异系数分别为7.7%和7.5%,回收率为95.8%~115.7%,生物传感器稳定性在4℃保存4 d。该优化的奶牛乳汁孕酮免疫生物传感器的性能参数符合规定的标准,为检测妊娠、乏情和繁殖障碍疾病的奶牛乳汁孕酮含量提供了工具。     

奶牛孕酮免疫胶体金快速检测试纸条的研制

为了及时、准确地诊断母奶牛妊娠状态,研究建立了奶牛孕酮(P4)胶体金免疫层析法的快速检测技术.先制备完全抗原(P4-BSA),用其免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体,抗体经亲和纯化后测定其浓度.采用柠檬酸三钠还原法制备颗粒直径为15 nm的胶体金,以P4-OVA和羊抗鼠二抗分别作为检测带和质控带包被在硝酸纤维素膜上,将...     

奶牛早孕诊断乳汁孕酮临界值的确定

随机选择健康荷斯坦母牛６３头，其中发情周期牛５头，配后１８－２４天牛３０头和通过直接确定的怀孕牛２８头，按程序采集末乳乳样。用放射免疫测定法（ＲＬＡ）测定乳汁孕酮（ＭＰ４）浓度。以发情第３天ＭＰ４浓度加上２倍标准差为未孕临界值的土限，以配后１８－２４天怀孕牛ＭＰ４浓度的平均值减去１倍标准差为怀孕临界值的下限。结果表明，奶牛ＭＰ４早孕诊断临界值为：≥７．１９ｎｇ／ｍｌ为怀孕，〈４．７２ｎｇ／ｍｌ为未     

奶牛乳汁孕酮现场快速测定技术的发展

本文描述了近年来奶牛乳汁孕酮现场快速测定技术的发展概况。对测定原理和方法学作了详细论述；讨论了影响测定结果准确性的因素；同时介绍了乳汁孕酮现场快速测定技术研究的新动态及其应用前景。     

应用奶牛孕酮检测提高高产奶牛的繁殖性能

本研究对Dordt学院奶牛群采用ELISA检测奶中孕酮水平对提高奶牛产后繁殖性能的效果进行了评价。试验设计是哺乳期产奶量高于8390kg的奶牛为高产奶量组(40头),产奶量低于8390kg的为低产奶量组(42头)。在高产组中21头和低产组中19头奶牛不接受ELISA检测(为未处理的对照组),两组中其余的牛从产后27天开始,每7天进行一次ELISA检测(为处理组),检测结果是奶中孕酮含量二次高水平和一次低水平,表明奶牛发情周期正常。连续三天检测,如奶中孕酮水平均低(<5ng/ml)的牛被认为具有卵泡囊肿,给予2ml GnRH(Cystorelin,50ug/ml)进行处理;连续三次检测奶中孕酮水平均高(>5ug/ml)的牛被认为具有持久黄体(CL),给予5ml PGF2。(Lutalyse,5mg/ml)无论是高产奶量组还是低产奶量组至产后210天,处理组的奶牛比对照组奶牛均有较高的受孕率(P<0.08)(分别为63.2比31.8％和56.5比42.1％),处理组动物的空怀天数与对照组相比减少41.6天(P<0.05),假如每头牛的空怀天数每减少1天,可节省3美元,处理组每头奶牛可净节省70.42美元。     

酶免疫分析法测定脱脂乳孕酮监控奶牛产后卵巢机能活动

<正> 产后奶牛的卵巢机能障碍和暗发情是造成空怀期延长的主要原因,通过连续测定数次乳汁孕酮含量,就可掌握母牛卵巢机能的变化情况,即根据乳孕酮的消长,就可知道与此相一致的卵泡发育和排卵,黄体的生长和消失,从而识别暗发情牛和各种卵巢机能障碍牛。然而,只有到了80年代,建立了酶免疫分析法(EIA),才使这种连续多次测定的结果能及时得出并指导临床生产。60～70年代建立的放射免疫分析法(RIA),因为有放射性危害,所需仪器昂贵等弊病不能在牧场现场应用,而且其检测时间通常需要24小时以上。我们以前建立的EIA尽管简便实用,但检测时间也需4小时左右,在牧场应用也还嫌麻烦,能否进一步缩短测试时间,加快测试速度,是推广应用EIA技术急待解决的关键问题之一。     

免疫胶体金法现场快速测定乳品中的三聚氰胺的应用研究

为了研究和验证免疫胶体金法快速检测乳制品中的三聚氰胺的效果,通过协同实验的方法,研究该方法的灵敏度、重复性、基质影响、特异性。利用随机于市场抽样乳品120件,分别用免疫胶体金法和国标法进行检测,验证该方法的假阴性、假阳性率。结果表明,用免疫胶体金法测定乳品中的三聚氰胺,检测限为0.5mg/kg,方法的稳定性较好,亚硝酸盐、三聚氰酸、L-脯氨酸对测定结果无干扰,但尿素对测定结果有干扰。免疫胶体金法测定乳品中三聚氰胺的假阴性为0%,假阳性率为0%。可见,免疫胶体金法快速检测乳品中三聚氰胺,方法简便、快速、准确、稳定,可作为乳品中三聚氰胺现场快速检测的一种有效手段。     

奶牛专用脲酶抑制剂复合预混料对奶牛产奶量的影响

对32头健康泌乳奶牛进行了饲喂奶牛专用脲酶抑制剂复合预混料的试验.结果表明,饲喂脲酶抑制剂复合预混料的试验组,泌乳奶牛平均日产标准乳22.81kg/头,对照组泌乳奶牛平均日产标准乳20.12kg/头,产奶量提高13.37%(P＜0.05);饲料转化率提高13.43%(P＜0.05);经济效益提高13.68%,增收效益明显.     

"诱乳素"诱导空怀母牛泌乳的技术研究

采用1∶2.5比例将雌二醇和孕酮制成"诱乳素"处理空怀和泌乳量低母牛.107头供试母牛每日2次注射诱乳素,连续7～8 d.结果表明,处理后2～3 d内出现乳汁,第4 d开始出现正常乳汁,第10～15 d产奶量最高可达10～15 kg.处理后60 d,母牛平均产奶量以对干奶期6个月的母牛处理后为最高(P＜0.05).此外,经诱导泌乳处理后,显著提高了空怀母牛的发情率和受胎率.     

奶牛生化增奶剂研究进展

本文阐述了以微生物制剂为主的奶牛生物增奶剂和化学增奶剂的研究概况。报道了当前酵母茵、乳酸茵、米曲霉、复合茵制剂等国内外研究进展，并对微生物增奶剂的作用机制进行了概述。同时指出化学增奶剂的应用效果取决于所试奶牛日粮营养成分的盈缺，选择适宜时机和剂量才能取得良好效果。     

我国规模牛场奶牛个体生鲜乳乳蛋白水平及影响因素探析

本研究旨在探析我国规模奶牛场奶牛个体乳蛋白的水平、分布和影响因素。利用SAS9．0的GLM过程,统计分析覆盖16省（市、区）,33个规模奶牛场,23351头中国荷斯坦牛,从2007年至2009年连续3年的237430个奶牛个体生鲜乳的乳蛋白率检测记录。分析表明,我国规模奶牛场奶牛个体生鲜乳的乳蛋白率平均3．28±0．22％。其中,乳蛋白率大于等于2．95％的奶牛个体占80．2％,所提供乳蛋白量占群体混合样生鲜乳总蛋白量的79．3％。奶牛的胎次、产奶阶段、产奶量、乳脂率、体细胞数、泌乳季节、泌乳月份都极显著影响奶牛个体生鲜乳的乳蛋白率（P〈0．01）;饲养区域、奶牛场和年度总体显著影响奶牛个体生鲜乳的乳蛋白率（P〈0．05）。我国规模奶牛场奶牛个体生鲜乳的乳蛋白率主要处于2．95％以上（〉80％）,合理调控各种影响因素,可有效提高生鲜乳的乳蛋白率。     

狂犬病病毒G蛋白的克隆表达及其抗体胶体金检测试纸条的研制

狂犬病(Rabies)是一种由狂犬病病毒(RV)引起的急性人兽共患传染病,一旦发病,死亡率几乎为100％.为快速检测狂犬病病毒IgG抗体,本研究首先克隆表达并纯化狂犬病病毒G蛋白,应用G蛋白作为抗原,G蛋白单克隆抗体制备C线,鼠抗犬IgG和鼠抗猫IgG标记T线,经条件优化后,建立了一种能够用于快速检测动物狂犬病病毒血清...     

从牛奶的成分分析奶牛饲养

现在全国各地都在实行牛奶以质论价,乳品厂或收奶站经常抽查化验各户(场)的牛奶成分含量,主要检测牛奶产量、乳脂率、乳蛋白、乳糖和灰分等指标。奶农可充分利用这些数据来分析本户(场)的饲养管理状况和奶牛健康状况。以便及时发现生产中存在的问题,及时调整饲养管理方案,保证奶牛高效健康发展。中国荷斯坦奶牛的乳脂率一般为3.4%~3.6%,乳蛋白率为3.0%~3.2%。如果乳脂率与乳蛋白率相差小于0.4个百分点(如2.9%乳蛋白及3.1%乳脂肪),则可能已发生了瘤胃酸中毒。如果泌乳早期乳脂率较高,则意味着奶牛在快速利用体脂———应检查奶牛是否发生酮病…     

奶牛乳脂合成及其影响因素

乳脂是一种高质量的天然脂肪,是牛乳的主要营养成分。乳脂率是衡量牛奶品质优劣的关键指标,同时也是制约中国奶业发展的重要因素。近年来,随着中国奶牛业的不断发展,奶牛的产奶量日益提高,但乳脂率却未见增长。通常情况下牛奶的乳脂率为3%~4%,产奶量与乳脂率之间呈相互制约关系,如何提高乳脂率一直是学者们研究的热点。为深入研究并解决这一问题,作者介绍了乳脂组成及合成机理,并从日粮、瘤胃微生物及遗传等方面分析了影响奶牛乳脂合成的因素。同时作者还对影响奶牛乳脂合成的重要功能基因（SREBPs、PPARs、CIDEC基因）及mTOR信号通路的作用进行了综述。乳脂合成是一个动态的、复杂的多网络调控的过程,需要大量的基因参与,研究各信号通路间的相互作用可为人工调控乳脂合成提供理论基础,也为日后泌乳生物学研究奠定理论基础。     

奶牛乳脂合成及其关键基因的调控作用

牛奶是提高身体抵抗力、抵抗疾病的最佳营养品.我国奶牛养殖业蓬勃发展的同时,牛奶品质的提高已成为奶业发展的重大课题与挑战.乳脂,作为牛奶主要营养成分之一,不仅为人们提供高质量的天然脂肪,还成为衡量奶牛产奶性能的重要指标,消费者所追求的优质牛奶(营养品)就是乳脂≥3.2％的牛奶.大量的研究报道证明,除了饲养管理与营养因素外...