航天诱变黑曲霉ZM-8菌株固态发酵产β-葡萄糖苷酶的研究

以小麦秸秆和麸皮为原料,利用固态发酵对航天诱变后筛选的黑曲霉ZM-8菌株生产β-葡萄糖苷酶的条件和酶学特性进行了研究.结果表明,ZM-8菌株最佳培养基配方为:小麦秸秆粉与麸皮质量比为8∶2,氮源为4%的(NH4)2SO4,含水量200%;最佳的培养条件为:接种量为6%;初始pH值为6.5;培养温度为28℃;培养时间为144 h.在以上的培养基和培养条件下ZM-8菌株的β-葡萄糖苷酶酶活达到21.74 U/g,约为出发菌种的2.24倍.酶学实验表明,β-葡萄糖苷酶最适作用温度50℃,最适作用pH 5.0.     

黑曲霉β-葡萄糖苷酶水解大豆异黄酮糖苷研究

试验进行了黑曲霉生产β-葡萄糖苷酶研究;该黑曲霉β-葡萄糖苷酶有较高的热稳定性,50℃加热2h后酶活力减少为原来的92%。确立了该黑曲霉β-葡萄糖苷酶水解大豆异黄酮糖苷反应最佳方案;通过与酸水解和苦杏仁β-葡萄糖苷酶水解效率比较,发现该黑曲霉β-葡萄糖苷酶有较好的水解大豆异黄酮糖苷的能力。     

β-葡萄糖苷酶高产菌株的诱变选育及固体发酵条件的研究

以黑曲霉(Aspergillusniger)为出发菌株,经紫外线(UV)、硫酸二乙酯(DES)、60Co诱变,筛选出β-葡萄糖苷酶的活力比原菌株明显提高。并通过单因素和正交实验研究了该酶的固体发酵条件,采用优化配方,使酶活力达到169.2U/ml。     

黑曲霉β—葡萄糖苷酶的活力测定和酶学性质

以Ｐ－ＮＰＧ为底物,为通过底物浓度、反应温度、反应时间、反应ＰＨ的考察,确定了黑曲霉β－葡萄糖苷酶酶酶活的最佳测定条件;并对该酶的ＰＨ稳定性、热稳定性、米氏常数等进行了研究     

微生物发酵生产β-葡萄糖苷酶

分别用土壤分离微生物和现有菌株发酵生产β－葡萄糖苷酶,经酶活力比较,筛选酶活较高的产酶菌株。其产酶条件为：以初始ｐＨ为５．５的麸皮、（ＮＨ４）２ＳＯ４等为发酵培养基,在３０℃条件下,于１４０ｒ／ｍｉｎ摇床转速下培养１２０ｈ,获较高酶产量,酶活达９．１２Ｕ／ｍｌ。     

黑曲霉β-甘露聚糖酶的诱变选育及部分酶学特性

从实验室保藏的数十株真菌、细菌和酵母菌种中,经定向筛选,得到1株产β-甘露聚糖酶酶活较高的黑曲霉菌株MA.以菌株MA为出发菌,经Co60诱变和摇瓶发酵初、复筛,最终获得一株产β-甘露聚糖酶活力高且遗传性能稳定的菌株MA-56,其所产的β-甘露聚糖酶活力稳定在9.31×104 U/g ,较出发菌株提高了64.78%.酶学性质初步研究表明,黑曲霉菌株MA-56所产β-甘露聚糖酶的最适反应温度为70℃,最适反应pH为2.5～3.5;该酶在70 ℃以下具有良好的热稳定性,在pH 2.5～9.0的环境下表现稳定;在供试的10种金属离子中,只有Cu2+对酶活有较强的抑制作用.     

高产β-葡萄糖苷酶菌株的筛选及产酶条件优化

通过七叶苷平板法从腐殖质土壤中筛选得到高产β-葡萄糖苷酶的2个菌株(H_2和H_5),并利用单因素法对这2个菌株的产酶条件进行了优化。经形态学特征初步鉴定,菌株H_2和H_5均为黑曲霉(Aspergillus niger)。H_2的最优发酵条件为:以蔗糖为碳源,以硫酸铵+尿素(1∶1)为氮源,培养5 d,培养温度28℃,初始pH 4.0。H_5的最优发酵条件为:以红糖为碳源,以硫酸铵+硝酸铵(1∶1)为氮源,培养5 d,培养温度28℃,初始pH 4.5。在优化的各因素中,以培养温度对菌株H_2和H_5所产β-葡萄糖苷酶活力的影响最大。     

产β-葡萄糖苷酶罗尔夫青霉发酵条件的优化

为提高罗尔夫青霉(Penicillium rolfsii)HXL菌株产β-葡萄糖苷酶的能力,探明β-葡萄糖苷酶的酶学性质,采用单因素与正交试验方法,对HXL摇瓶发酵条件进行统计学优化研究。结果表明:菌株HXL优化发酵条件为麸皮3%+酵母膏4g/L+KH_2PO_4 0.2%+水杨苷0.05%,接种量6%,装液量75mL/250mL,起始pH 6.0,培养温度30℃,摇床转速180r/min,培养时间144h。在此条件下,菌株HXL产β-葡萄糖苷酶量从原来的1.32U/mL增至21.68U/mL。β-葡萄糖苷酶的最适温度为60~70℃,最适反应pH 3.5~5.0;在60℃以下及pH 3.0~6.0均能保持稳定;Mn2+对酶有激活作用,而Cu2+对酶有明显的抑制作用。     

茶树鲜叶中β-葡萄糖苷酶提取条件的研究

研究了从茶树镁叶中提取β－葡萄糖苷酶时不溶性聚乙烯吡咯烷酮的加入量、缓冲液的选择、多酚类浓度对酶活性的影响及酶的部分特性。结果表明：加入与鲜重量相等的ＰＶＰＰ可获得较高的酶活性;选用０．１ｍｏｌ／Ｌ柠檬酸－柠檬酸钠缓冲液作为提取缓冲液可得到活性较高的酶液;浓度仅为４ｍｇ／Ｌ的茶叶子多酚类物质能使酶完全失活;β－巯基乙醇和ＥＤＴＡ对酶活性有抑制作用;而甘油能提高酶活性,２～２．５ｍｏｌ／Ｌ的甘油效果     

β-葡萄糖苷酶的固体发酵

大豆异黄酮糖苷水解酶菌株米曲霉3042经过单因子及正交试验,确立了产酶的最适培养基配方为:黑豆与麸皮比例为2∶3,培养基中加水量与固体物料比控制在1.5∶1,KH2PO40.1％、MgSO4 0.1％、 (NH4) 2SO4 0.5％、水杨苷0.01％.     

高产β-葡萄糖苷酶菌株的筛选及产酶条件优化

通过七叶苷平板法从腐殖质土壤中筛选得到高产β-葡萄糖苷酶的2个菌株(H_2和H_5),并利用单因素法对这2个菌株的产酶条件进行了优化。经形态学特征初步鉴定,菌株H_2和H_5均为黑曲霉(Aspergillus niger)。H_2的最优发酵条件为:以蔗糖为碳源,以硫酸铵+尿素(1∶1)为氮源,培养5 d,培养温度28℃,初始pH 4.0。H_5的最优发酵条件为:以红糖为碳源,以硫酸铵+硝酸铵(1∶1)为氮源,培养5 d,培养温度28℃,初始pH 4.5。在优化的各因素中,以培养温度对菌株H_2和H_5所产β-葡萄糖苷酶活力的影响最大。     

菌核侧耳β-葡萄糖苷酶研究

实验以菌核侧耳为材料,在不同的液体培养时间内,对其菌丝和发酵液中的β-葡萄糖苷酶活力进行比较。结果表明：酶的活力随发酵时间的增加呈先升高后下降再逐渐稳定的趋势;菌丝的生长速度与酶的活力变化有一定的相关性。     

茶叶中β-葡萄糖苷酶研究进展

对茶叶β-葡萄糖苷酶的分离、纯化、测定方法、酶学特征、基因克隆及其在茶树体内的分布等研究进行了综述,并探讨了今后的研究方向。     

酒酒球菌β-葡萄糖苷酶产酶条件优化及酶学性质研究

【目的】优化酒酒球菌中β-葡萄糖苷酶的产酶条件,分析β-葡萄糖苷酶的性质,为将其应用于葡萄酒生产提供参考。【方法】对12株酒酒球菌进行β-葡萄糖苷酶活性测定,选择其中β-葡萄糖苷酶活性最高的菌株CS-7b作为试验菌株,并以商业菌株31-DH为对照,以菌株催化底物对硝基苯酚-β-葡萄糖苷(p-NPG)生成对硝基苯酚的速度衡量β-葡萄糖苷酶活性高低。然后通过单因素试验和正交试验对菌株产β-葡萄糖苷酶的条件进行优化,并探究葡萄酒环境相关因素(pH值、温度、乙醇体积分数、葡萄糖质量浓度)对β-葡萄糖苷酶活性的影响。【结果】单因素试验确定菌株产β-葡萄糖苷酶培养基的最佳pH值为6.8,最佳碳源为麦芽糖,最佳氮源为酵母浸粉,正交试验进一步确定了各种成分的最佳配比,即每升液体培养基中含麦芽糖7g,酵母浸粉20g,MgSO_4·7H_2O 0.1g,盐酸半胱氨酸0.5g,MnSO_4·4H_2O 0.03g,培养基起始pH值为6.8,在此条件下,β-葡萄糖苷酶活性可由0.359增加到1.319μmol/(g·min)。β-葡萄糖苷酶的酶学性质为:最适pH值为5.0,最适温度为37℃;当乙醇体积分数大于4%、葡萄糖质量浓度大于1g/L时,β-葡萄糖苷酶活性开始受到抑制。【结论】酒酒球菌CS-7b在葡萄酒环境的pH及乙醇体积分数条件下仍可保持一定的β-葡萄糖苷酶活性。     

β-葡萄糖苷酶纯化及酶学性质研究

研究了来源于曲霉No.5.1的β-葡萄糖苷酶的纯化和酶学性质。粗酶液经硫酸铵沉淀、DEAE-chitopearl和Sephadex G-100柱层析得到纯β-葡萄糖苷酶,SDS-PAGE凝胶电泳显示一条带,测得分子量为67.5 kD。该酶最适反应pH6.0,最适反应温度为60℃,在80℃以下、pH3.0~9.0酶活力相对稳定。K 、Na 、Mg2 和Zn2 对酶有激活作用,而Ag 和Fe2 对酶具有明显的抑制作用。该酶对纤维二糖和水杨素的水解能力最强,水解水杨素的Km值为3.09 mmol/L。     

β-葡萄糖苷酶对柑橘汁酶解增香调控及香气成分的影响

为探究β-葡萄糖苷酶对柑橘汁增香调控的最优酶解条件及香气成分的影响,本实验以黄岩蜜柑为材料,通过正交试验,采用二氯甲烷萃取结合气相色谱-质谱(gas chromatography-mass spectrometry, GC-MS)联用技术,来确定最优酶解条件,并对柑橘汁酶解前后的香气物质和含量进行分析。结果表明,酶解处理的最优条件为温度40 ℃、加酶量10 U?mL_^-1、时间80 min。酶处理样品经GC-MS分析检测,共定性出49种香气成分,其中酶解后新增加28种香气物质,酯类(37.7%)、醇类(22.8%)和酸类(15.1%)为主体香气成分。通过聚类分析发现乙酸乙酯、环戊醇等香气物质对柑橘汁天然风味具有明显的贡献。酶解处理柑橘汁对增加香气物质,提高柑橘汁风味具有促进作用。     

茶树β-葡萄糖苷酶基因mRNA的表达

采用原位杂交技术对茶树β-葡萄糖苷酶基因mRNA的表达进行了研究。结果表明，β-葡萄糖苷酶基因mRNA主要在茶树叶片栅栏组织、叶主脉的薄壁组织表达；不同品种之间的表达位置基本相似，但表达信号却有差异，以龙井43号最强，福鼎大白茶、槠叶齐次之，而大叶乌龙、迎霜最弱。结果还显示，不同季节的表达信号以春梢最强，秋梢次之，夏梢最弱。     

β-葡萄糖苷酶的研究进展(综述)

β-葡萄糖苷酶不仅具有纤维素的糖化作用,而且与萜烯类香气前驱体有密切关系.本文详述了该酶在微生物体中的研究概况,特别是在茶树中的研究进展,以及β-葡萄糖苷酶基因的克隆和表达.     

中性β-葡萄糖苷酶基因表达载体的构建

利用RT-PCR方法从芽孢杆菌Bacillus Subtilis CY110中克隆出β-葡萄糖苷酶基因,将此目的基因连接到pBS-T载体后导入大肠杆菌DH5α。测序结果表明,获得的目的基因片段大小为1 398 bp,该序列与Gen-Bank中的β-葡萄糖苷酶基因ABQN01000006.1序列相比同源性达到99.8%,氨基酸序列同源性达到99.5%。将产物与pET-28 a表达载体连接,经双酶切检验,证明原核表达载体构建成功。