剑麻悬浮细胞体系的建立

为了获取良好的剑麻悬浮细胞体系,以剑麻无菌幼苗嫩叶为诱导材料,对剑麻胚性愈伤组织的获得,建立细胞悬浮系和影响悬浮细胞增殖的主要影响因子进行了探讨。结果表明:幼叶在培养基为MS+2.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L 6-BA上诱导的愈伤组织,经1～2次继代培养后获得了颗粒状、浅黄色的胚性愈伤组织;接种于液体培养基接种量为2 g (鲜重),继代周期为7 d,经4～5次继代震荡培养建立了细胞悬浮系,细胞生长符合"S"型曲线,细胞浓度可达6.1×105～4.6×106个/m L以上;在悬浮细胞生长前期,pH值明显下降,在细胞对数生长期,pH值略有升高,并趋于平缓;最适宜的细胞悬浮培养基为(MS+1.5 mg/L 2,4-D+4.0 mg/L6-BA+350 mg/L水解酪蛋白, 30 g/L蔗糖, pH值为5.8)。通过建立剑麻悬浮细胞培养体系的方法,为进一步应用于剑麻悬浮细胞转化体系和多倍体育种等研究。     

木蓝愈伤组织诱导与不定芽分化培养

初步建立了木蓝(Indigofera bungeana Walp.)的离体再生培养体系，为其基因工程育种研究提供前期技术参考。通过种子无菌播种技术获得野生木蓝无菌实生苗，以胚轴、茎段和叶片为外植体，筛选木蓝愈伤组织诱导、不定芽分化、增殖、壮苗培养的最适培养基配方。结果显示，木蓝种子无菌播种发芽率达98%，最适培养基为1/2MS。3种外植体在不同培养基下均能诱导出愈伤组织，根据愈伤组织生长及质地色泽筛选出最适诱导培养基，其中，叶片为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L NAA；茎段为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L NAA；胚轴为MS+0.1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L2,4-D+0.5 mg/L NAA。相比较叶片和茎段，胚轴来源的愈伤组织适于不定芽分化，最适分化培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L NAA和MS+2.0 mg/L 6-BA。不定芽增殖培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA，壮苗和生根的最适...     

总状绿绒蒿组织培养再生体系的建立

本研究以总状绿绒蒿(Meconopsis racemosa)的种子、无菌苗的根及生长点为材料,以2,4-D、NAA、6-BA设置不同的激素配比,以建立其组织培养快繁体系。结果显示,用0.1%升汞溶液为消毒剂,5.5 min为最佳的消毒时间,此时的种子发芽率为56.7%;愈伤组织诱导培养：以种子为外植体诱导愈伤,MS+0.6 mg/L 2,4-D为最佳的培养基。以无菌苗的根为外植体诱导愈伤,进行暗培养,MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA为最佳的诱导培养基。以无菌苗的生长点为外植体诱导愈伤,并进行光培养,MS+2.0 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA为最佳的诱导培养基;愈伤增殖培养：由种子诱导愈伤的最佳增殖培养基为MS+0.6 mg/L 2,4-D。MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA是无菌苗的根诱导愈伤的最佳增殖培养基。MS和MS+2.0 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA为生长点诱导愈伤的最佳增殖培养基;生根培养：由种子、生长点诱导并增殖愈伤的最佳生根培养基为MS。本研究为总状绿绒蒿的快速繁殖和分子育种提供了基...     

不同生长调节物质对丹参愈伤组织诱导效应的研究

以丹参（Salvia miltiorrhiza Bunge）无菌苗的茎、叶为外植体,接种于附加2,4-D、NAA、6-BA及其组合的MS固体培养基上。结果表明：单独使用三种植物生长调节物质在一定浓度范围内均能产生愈伤组织;配合使用外源生长素和细胞分裂素,能获得出愈率高、生长快、质量好的愈伤组织;最佳组合的诱导培养基为MS+2,4-D2.0mg/L+6-BA1.0mg/L;2,4-D对丹参愈伤组织的诱导有促进作用;但当2,4-D的浓度在4 mg/L以上时,对愈伤组织的生长有抑制作用。     

西番莲细胞悬浮系建立与培养条件优化

本研究旨在建立西番莲细胞悬浮培养体系,并优化悬浮系培养条件,为西番莲遗传工程提供基础。本研究以西番莲无菌苗为材料,研究西番莲愈伤组织的诱导和建立细胞悬浮系,并结合单因素试验与正交试验优化悬浮系培养条件。结果表明,西番莲愈伤诱导的外植体最佳选择是幼苗胚轴,愈伤诱导激素选择2 mg/L 2,4-D为宜,出愈率达83.3%。以疏松健康的愈伤组织培养细胞悬浮系,经单因素试验和正交试验,细胞悬浮系培养最佳培养培养基为MS培养基+2 mg/L 2,4-D+0.2 g/L Glutamine+30 g/L蔗糖,培养基pH 6.1,起始细胞用量为6.0 mg/mL,摇床转速为100 r/min,28℃暗培养,此条件下建立的细胞悬浮系均匀一致,细胞生长旺盛,西番莲悬浮细胞生长曲线呈“S”型,继代最佳时期为12~18天。本研究为后续利用细胞悬浮系建立西番莲高效细胞工程及遗传转化技术体系提供良好的材料和技术基础,对加强西番莲种业发展具重要意义。     

剑叶龙血树疏松愈伤组织诱导技术研究

为了获取质地好且松散型的愈伤组织,为进行剑叶龙血树细胞悬浮培养提供材料.本试验以剑叶龙血树种子、芽为外植体,研究不同培养基、不同激素组合对剑叶龙血树愈伤组织诱导和质地的影响.结果表明:以MS为基本培养基,增加适当浓度的2,4-D和6-BA能促进剑叶龙血树愈伤组织诱导率的提高,长势良好,产生的疏松愈伤组织也最多,最佳疏松愈伤组织诱导培养基为MS+ 6-BA 0.5 mg/L+2,4-D1.5～2.0mg/L.     

宁夏主栽水稻品种高频再生体系的建立

通过对宁夏多个主栽水稻品种愈伤组织的培养,结果表明,诱导水稻愈伤组织的最适培养基是:N6+2mg/L 2,4-D+0.5/L水解酪蛋白+0.5g/L L-脯氨酸+8g/L琼脂+30g/L蔗糖;水稻愈伤组织最适分化培养基是:MS+2mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA;水稻的最适生根培养基为:MS+0.5mg/L NAA.筛选出了诱导愈伤组织和愈伤组织分化的最适激素浓度配比和最适分化条件.     

唐古红景天愈伤组织诱导及植株再生

为解决唐古红景天种质资源短缺问题,本研究建立了唐古红景天愈伤组织诱导及再生体系。以唐古红景天幼嫩的叶片、茎段和根为外植体,筛选出最优的外植体灭菌处理方法;探索愈伤组织诱导和增殖,不定芽诱导和扩增的最佳激素配比;观测不定芽的生根情况以及再生苗生长状态。结果表明：唐古红景天诱导愈伤组织的最佳外植体为叶片,愈伤组织诱导的培养基为MS₀+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,诱导率为85.37%;最佳愈伤组织增殖的培养基为MS₀+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,增殖率为62.5%;最佳不定芽诱导、扩增的培养基为MS₀+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,诱导率为66.67%;不定芽在1/2MS生根诱导培养基中的生根率为42.5%,再生苗移栽于混合基质(泥炭∶珍珠岩∶蛭石=2∶1∶1)成活率为24.9%。该研究为唐古红景天种质资源的保存及人工栽培提供了有效的技术参数。     

鲁梅克斯K-1杂交酸模愈伤组织诱导及细胞悬浮系的建立

研究了不同激素组合处理对鲁梅克斯K－1杂交酸模子叶愈伤组织的诱导，试验结果表明，2，4－D配合使用6－BAP时愈伤组织诱导率最高。在附加1.0mg/L2,4-D的液体MS培养基中通过悬浮培养分离出的单细胞，经数次数代后获得良好的悬浮培养体系。     

狭叶红景天种子萌发和愈伤组织诱导最佳培养条件筛选

[目的]以狭叶红景天种子为实验材料,探索其种子萌发和愈伤组织诱导的最佳培养条件.[方法]通过对狭叶红景天种子不同浸泡时间和消毒时间的筛选,获得种子萌发最佳培养条件;并进一步选取狭叶红景天的无菌苗的幼叶为外植体,采用不同植物激素的配比进行愈伤组织诱导培养,最终筛选出狭叶红景天愈伤组织诱导培养的最佳条件.[结果]狭叶红景天种子萌发的最佳培养方式为将未经浸泡的种子,先采用酒精消毒20 s后再经升汞消毒20 min,其种子的染菌率为0％,萌发率为(61.8±0.21)％;狭叶红景天幼叶诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+ 6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 3 mg/L+KT 0.1 mg/L,在培养30 d后愈伤组织诱导率可达98％以上.