不同病毒在SPF鸡胚与普通鸡胚繁殖性能的比较

利用HI和AGP方法检测普通种蛋中ND和IBD的卵黄抗体水平，利用HA和EID50检测方法比较多种病毒(如NDV、IBV、IBDV及AEV)在SPF鸡胚与普通鸡胚上繁殖性能的差异。研究结果表明：普通种蛋中ND及IBD的卵黄抗体水平普遍较高，在SPF鸡胚上新城疫La Sota病毒繁殖量是普通鸡胚的5～20倍，尿囊液血凝效价平均高2.0～2.5滴度。MA5毒株在SPF胚病毒液EID50为普通鸡胚的10倍以上，且每次检测的结果比较接近。IBDV、AEV等病毒在普通鸡胚上几乎不能增殖。     

SPF鸡胚与普通鸡胚繁殖鸡新城病毒的比较试验

利用SPF鸡胚与普通鸡胚分别繁殖新城疫病毒,发现接毒后不同时间SPF胚蛋比普通胚蛋死胚率高,收获毒液血凝价和EID50比普通胚蛋也分别高出0.67和100.33。     

利用鸡胚成纤维细胞培养禽脑脊髓炎病毒的研究

利用鸡胚成纤维细胞 (CEF)培养禽脑脊髓炎病毒 (AEV) ,经过六次盲传发现 :AEV在 CEF上无细胞病变 (CPE) ,但利用 CEF细胞上清接种 SPF鸡胚 ,可产生不同程度的 AE鸡胚病变。分别取不同时间的感染细胞上清 ,测定 AEV浓度 ,结合培养条件 ,进而确定 AEV培养的最佳时机。结果表明 :以 AEV在 CEF上培养 7天最好 ,病毒滴度可达 10 2 .8EID50 / 0 .2 ml。将经 CEF培养的 AEV差速离心 (浓缩约 5 0 0倍 ) ,接种 SPF鸡胚 ,可产生典型的鸡胚病变 ,其滴度为 8× 10 5.0 EID50 / 0 .2 m l。通过 Cs Cl密度梯度离心提纯病毒 ,在电镜下观察到了大小基本一致的病毒粒子 ,病毒直径约为 2 5 nm。利用 AEV感染的 CEF或通过“细胞飞片”制备荧光片 ,建立了间接免疫荧光快速检验 CEF是否感染 AEV的方法。     

ND La Sota毒种在SPF鸡胚中增殖规律初探

为了探索ND La Sota弱毒株在SPF鸡胚中的增殖规律,保证生产用种毒的质量,我们采用不同的时间段来收获ND La Sota弱毒株感染的胚液,然后测定胚液的EID50。结果发现,SP鸡胚在接种病毒后85~100h之间出现死亡高峰期,经病毒含量测定,该时段感染胚液比其他时间死亡的感染胚液病毒含量高出1.5~6倍以上,表明ND La Sota弱毒株的增殖高峰与SPF鸡胚接种后的死亡时间有重要关系。     

鸡胚母源抗体对鸡新城疫病毒增殖影响的研究

试验用SPF鸡胚和普通鸡胚分别测定鸡新城疫LaSota两种不同毒株的EID50:LaSota株Ⅰ在SPF鸡胚的EID50为10-7.75,普通鸡胚的EID50为10-7.25;LaSota株Ⅱ在SPF鸡胚的EID50为10-4.75,普通鸡胚的EID50为10-4.25。两种不同LaSota毒株在SPF鸡胚中的毒力普遍比在普通鸡胚中的毒力强,说明鸡胚母源抗体能影响鸡新城疫病毒的增殖,进而指导疫苗的生产。试验用SPF鸡胚和普通鸡胚分别测定鸡新城疫LaSota两种不同毒株的EID50:LaSota株Ⅰ在SPF鸡胚的EID50为10-7.75,普通鸡胚的EID50为10-7.25;LaSota株Ⅱ在SPF鸡胚的EID50为10-4.75,普通鸡胚的EID50为10-4.25。两种不同LaSota毒株在SPF鸡胚中的毒力普遍比在普通鸡胚中的毒力强,说明鸡胚母源抗体能影响鸡新城疫病毒的增殖,进而指导疫苗的生产。     

禽多元特异性抗体在鸡胚、鸡胚成纤维细胞上对鸡新城疫病毒的抑制性试验研究

利用自行研制的禽多元特异性抗体在鸡胚、鸡胚成纤维(CEF)细胞上对鸡新城疫(ND)病毒的抑制效果进行观察,结果表明:禽多元特异性抗体能有效抑制鸡ND病毒的生长繁殖,且对鸡胚和鸡CEF细胞无任何不良作用,在应用上其预防作用要优于其治疗作用。     

鸡传染性支气管炎病毒M41株鸡胚增殖工艺研究

为研究鸡传染性支气管炎病毒(IBV)M41标准毒株在鸡胚上的最佳生产工艺,试验用IBV M41株分别以不同剂量接种同一胚龄不同鸡胚、不同胚龄普通鸡胚,以及IBV M41株接种普通鸡胚后不同培养时间收获鸡胚尿囊液,比较不同培养条件下制备病毒液的产量及病毒效价。结果显示:IBV M41株接种无传染性支气管炎病毒母源抗体的SPF鸡胚最佳病毒接种剂量为104.5EID50,接种含有IBV母源抗体的普通鸡胚最佳病毒接种剂量为105.1EID50,最佳接种胚龄为11日胚龄,最佳收毒时间为48 h。按照此工艺制备疫苗,免疫SPF鸡,IBV抗体效价均符合规程标准。研究结果为用鸡胚高效、大量生产IBV M41株病毒抗原进而生产合格的IB疫苗提供了数据支持。     

AE油佐剂灭活疫苗对鸡胚和仔鸡的保护力试验

三批禽脑脊髓炎(AE)油佐剂灭活疫苗免疫开产前种鸡,种鸡免疫2~3个月后所产种蛋对禽脑脊髓炎病毒(AEV)鸡胚易感性试验的受保护率达100%,而同期所产种蛋孵出的仔代雏鸡,在出雏后3周内对AEV VR株攻毒的受保护率亦达100%; 种鸡免疫6~7个月后所产种蛋对AEV VR鸡胚易感性试验的受保护率达75%~80%,而同期所产种蛋孵出的仔代雏鸡,在出雏后3周内对AEVVR株攻毒的受保护率达70%~90%。试验结果表明,AE灭活疫苗AEV鸡胚易感性试验的鸡胚保护率与同期雏鸡对AEV VR肌肉途径攻毒的保护率基本相同。     

AE油佐剂灭活疫苗对鸡胚和仔鸡的保护力试验研究

用三批AE（Avian Encephalomyelitis）油佐剂灭活疫苗免疫开产前种鸡，免疫后定期采集种蛋进行孵化，当孵至6日龄时取部分鸡胚，卵黄囊途径接种AEV VR株，进行鸡胚AE易感性试验，余鸡胚孵化出雏，分别为1、7、14、21日龄雏鸡采用肌肉途径攻击AEV VR株，攻毒后观察不同日龄仔代雏鸡AE的保护能力。结果疫苗免疫后2－3个月的种鸡所产种蛋的鸡胚AE易感性试验的保护率达100％，而同期所产种蛋孵出的仔代雏鸡，在出雏后3周内对AEV工VR株攻毒的保护率亦达100％，免疫后6－7个月种鸡所产种蛋的鸡胚AEV VR易感性试验的保护率达75％－805，而同期所产种蛋孵出的仔代雏鸡，在出雏后3周内对AEV VR株攻毒的保护率达70－90％。试验结果表明，鸡胚AE易感笥试验的鸡胚保护率与同批种蛋孵出雏鸡对AEV VR肌肉途径攻毒的保护率基本相同。     

新城疫病毒在鸡胚中增殖特性的研究

本研究将接种到9～10日龄鸡胚中的鸡新城疫病毒(NDV)La Sota或V4株弱毒培养24h,病毒滴度可增加106以上,培养108 h,病毒滴度则增加至10 10倍以上.NDV在有NDV母源抗体的普通鸡胚与无抗体的SPF鸡胚中的增殖无显著差异;盲传对于检验NDV没有意义.La Sota或V4株病毒悬液在理论上稀释至每胚接种量只有数个或1个病毒时,仍可引起鸡胚感染.低毒量条件下固定病毒的数量,随着接种胚数的增加,感染率随之下降,但感染数在一定范围内波动,没有减少趋势.以上结果证实数个甚至1个活的NDV粒子即可引起鸡胚感染,这对现地检测NDV具有重要意义.     

季节对杜泊羊体内胚胎生产与移植效果的影响

为了研究季节对杜泊羊体内胚胎生产效率及胚胎移植妊娠率的影响,于2016年选取内蒙古赛诺草原羊业有限公司种羊场经产纯种杜泊母羊作为供体,采用同期发情、超数排卵及腹腔镜人工输精等方法对供体羊进行处理后,利用手术冲胚的方法获得纯种杜泊羊胚胎,同时对受体羊进行同期发情处理和胚胎移植。经统计分析,2016年全年该公司共有放栓供体4 241只,超排处理4 180只,配种供体4 131只,冲胚供体3 987只,供体可用率为94.01%;冲出胚胎总数为23 516枚,可用胚胎18 002枚,胚胎可利用率为76.55%,平均每只供体能获得可用胚胎4.52枚。供体在10月、11月、12月冲胚所获得的平均冲胚数和平均可用胚数明显高于4月、5月、6月(P<0.05),其中10月的平均冲胚数和平均可用胚数最高(P<0.01),分别为7.04枚和5.62枚。将获得的部分胚胎用于胚胎移植,移植单胚怀孕受体数为4 446只,妊娠率为53.67%;移植双胚怀孕受体数805只,妊娠率65.02%。此外,受体在1月、3月、6月、12月受胎率较其他月份高(P<0.05)。该研究可为杜泊种羊超数排卵、胚胎移植和肉羊的产业化生产提供一定的数据参考。     

胚胎植入研究概况

胚胎植入已成为生殖医学研究领域中尚未解决的热点问题。胚胎植入是一个非常复杂的过程,需要胚泡和子宫内膜之间的通讯和相互协同作用,被认为是调控雌性生育和发展避孕方法最理想的靶点和最关键的环节,与人类生殖健康关系极其密切。虽然最近在胚胎植入过程、影响因素、调控因子及细胞与分子机理等研究方面已取得了一些进展,但仍存在不少技术难题有待于进一步深入研究。文章简要综述了胚胎植入的概念、过程以及影响因素与调控因子,在此基础上介绍了胚胎植入的细胞与分子机理方面的研究概况,并对胚胎植入的研究和发展方向进行了探讨。     

小鼠胚胎的玻璃化冷冻研究

用不同冷冻载体(玻璃管、塑料管和0.25 mL细管)及不同冷冻方法(程序化冷冻和玻璃化冷冻)对小鼠3.5 d~4 d桑椹胚和囊胚进行冷冻保存,并与不做任何冷冻保存处理直接培养进行对比。结果表明,使用玻璃管、塑料管和0.25 mL细管作为胚胎的承载材料进行玻璃化冷冻,效果差异不显著;采用程序化冷冻与OPS玻璃化冷冻法,对小鼠胚胎进行冷冻保存可以取得较好的结果。从而得出,用不同材质的冷冻载体进行玻璃化冷冻,可以获得与程序化冷冻相同的良好效果。     

Embryo transfer in subfertile mares

Four subfertile mares (at least 2 barren years) were used as donors in an embryo transfer program. The embryo recovery rate was 50%, varying between 0-100. The transfer of 9 embryos resulted in the pregnancy rate of 44%. The efficiency of embryo transfer using subfertile mares is low. In this material 20% of flushings resulted in a pregnancy.     

小鼠胚胎计数方法的研究及应用

胚胎细胞计数是评定胚胎活力,检验胚胎体外操作方案和培养效果的常用方法。实验以昆明小鼠体内发育胚胎和体外聚合囊胚为实验材料,对几种细胞的计数方法及应用进行了详细的研究。结果表明:（1）低渗压片法的实验效果最佳。（2）根据形态学观察,结合细胞计数,可以把小鼠8-细胞以后胚胎划分为:8-细胞晚期[细胞数目为（11.9±0.65）个];同一时间收集的桑椹胚和早期囊胚细胞数目相似;不同时间收集的囊胚细胞有明显差异。（3）细胞计数分析表明:8-细胞聚合胚发育形成聚合囊胚时,其细胞数目未发生调整。     

波尔山羊胚胎移植试验

应用FSH对8只供体波尔山羊进行了超排处理。在放栓的第9～12天,连续4d采用递减量肌肉注射FSH。结果有6只发情,同期发情率为75%。这6只羊配种后均采胚成功,共采胚83枚,只均13.8±7.36枚,其中可用胚75枚,只均12.5±5.99枚,可用胚胎率为90.36%(75/83)。将36枚可用胚移植受体奶山羊32只,妊娠18只,妊娠率56.25%(18/32)。     

动物胚胎工程技术研究进展

动物胚胎生物工程是用人工方法对动物卵母细胞或胚胎进行改造的技术,在育种中可使优良的种质特性和遗传潜力得到充分发挥,是家畜繁殖领域的一次技术革命.论述了目前国内外胚胎生物工程的研究成果.     

哺乳动物胚胎冷冻技术研究进展

胚胎冷冻保存已广泛用于胚胎移植，动物克隆以及动物资源保护。此技术的应用需保证胚胎在冷冻一解冻后具有较高的成活率。自1972年小鼠胚胎冷冻获得成功以来，许多学者在简化冷冻程序，缩短冷冻时间等方面进行了深入研究，试图寻找一种可用于生产的冷冻方法。本文全面地比较了不同的冷冻方法及其结果，籍此为该领域工作者提供一定帮助。     

胚胎植入及其分子机制研究进展

哺乳动物的胚胎植入是生殖过程的一个重要环节,是妊娠的关键。包括胚胎对母体子宫内膜的识别、黏附、侵入等过程。正常情况下,胚胎仅在一个极短的时间内有机会附着到子宫内膜上,即胚泡滋养层达到侵入状态,子宫内膜达到接受状态,且两者同步发生,胚泡才会成功植入。胚胎植入的成功必须具备许多条件,需要足够的激素分泌,合体滋养层细胞形成,以及胚泡与子宫内膜同步发育与相互配合等。这一过程的调控机制十分复杂,至今仍是生殖医学领域中尚未解决的问题。文章就胚胎植入的基本过程及其分子机制做简要综述。     

山羊胚胎移植研究进展

概述了山羊胚胎移植技术的研究进展，包括同期发情，超数排卵，胚胎移植，胚胎分割，胚胎冷冻，体外受精，胚胎的性别鉴定，克隆山羊等研究方面。