紫花苜蓿愈伤成苗高频再生体系的建立及其影响因子的研究

 对秘鲁苜蓿等品种的子叶和下胚轴愈伤再生植株过程进行了系统研究。经筛选获得了以改良的SH大量元素 +MS微量元素及铁盐 +水解酪蛋白 +VB19.9mg·L-1+VB69.5mg·L-1+尼克酸 4 .5mg·L-1+琼脂 8g·L-1为基本成分的愈伤成苗高频再生体系。其中 ,诱导愈伤和保持愈伤的培养基加 2 .0mg·L-12 ,4 -D +0 .0 2 5mg·L-1KT ;诱导再生植株分化的培养基加 0 .4mg·L-1KT +2 0g·L-1的蔗糖 ;诱导生根的培养基为 1/ 2MS ,其中蔗糖浓度为 10 g·L-1。秘鲁苜蓿子叶愈伤组织分化率达 10 0 % ,下胚轴愈伤组织分化率达 92 %以上。以该体系完成苜蓿愈伤植株再生具有高效、快速的特点 ,完成植株再生仅需 6 0～ 70d。     

日本结缕草成熟种子愈伤组织诱导及植株再生的影响因子分析

 【目的】优化日本结缕草的组织培养体系，提高其植株再生率，建立高频植株再生体系。【方法】以日本结缕草的成熟种子为外植体，分析激素、基本培养基、培养条件、脯氨酸、Cu2+等因子对愈伤组织诱导及植株再生的影响。【结果】（1）培养基中添加脯氨酸能提高愈伤组织诱导率，而BA降低愈伤组织的诱导率，低浓度的NAA(0.1～0.2 mg·L-1)能促进愈伤组织的形成，愈伤组织诱导的最佳培养基为ND＋2,4-D 3.0 mg·L-1＋NAA 0.2 mg·L-1+L-Pro 500 mg·L-1，愈伤组织诱导率达57.3%；（2）愈伤组织继代的最佳培养基为MSD+ 2,4-D 1.0 mg·L-1；（3）愈伤组织分化的最佳培养基为MSD＋NAA 0.3 mg·L-1+KT 0.5 mg·L-1+BA 0.05 mg·L-1 + L-Pro 500 mg·L-1，分化率达36.7%。【结论】优化了日本结缕草的组织培养体系，初步找到了影响其成熟种子愈伤组织诱导及植株再生的主要因子。     

果蔗组织培养快繁技术研究

采用蔗株的茎尖培养出绿苗或茎梢嫩叶诱导出愈伤组织,再分化出绿苗,均有较好效果.茎尖培养用MS+6-BA2. 0 mg·L-1+NAA 0.3 mg·L-1附加活性炭0.05%;MS+2,4-D 1.0～3.0 mg ·L-1对诱导愈伤组织效果较佳,但含2,4-D 1.0 mg·L-1的处理对黑皮果蔗仅能诱导生根而无法诱导出愈伤组织;MS +6-BA 1.0 mg·L-1+KT 1.0 mg·L-1+NAA 0.3 mg·L-1对分化绿苗及其增殖效果最好;生根培养基选用1/2MS+IBA 1.0 mg·L-1+NAA1.0 mg ·L-1附加活性炭0.05%.具有根系的完整植株的组培苗移到苗圃假植,待苗高20 cm 以上,分单株定植大田,成活率90%以上,若将丛苗再分单株袋栽成活后定植大田,成活率可达100%.     

百合基因转化胚性愈伤组织受体系统的建立

为建立稳定高效的胚性愈伤组织基因转化受体系统,以麝香百合Liliumlongiflorum花丝为外植体进行了愈伤组织诱导、植株再生研究以及抗生素敏感性试验。结果表明:愈伤组织诱导增殖培养基为MS+NAA1 0mg·L-1+BA0 5mg·L-1,分化培养基为MS+KT1 0mg·L-1+NAA0 2mg·L-1。抗生素敏感性试验表明,百合基因转化胚性愈伤组织的卡那霉素选择压为75mg·L-1,潮霉素的选择压为20mg·L-1,头孢霉素选择压为250mg·L-1。表4参10     

毛泡桐体细胞胚胎发生及植株再生研究

以毛泡桐(Paulowniatomentosa)无菌苗叶片和茎段为外植体,在附加NAA0.3mg·L-1或2,4 D0.3mg·L-1与6 BA5～20mg·L-1植物生长调节物质组合的MS培养基上进行体细胞胚胎发生及植株再生的研究.结果表明,毛泡桐叶片和茎段在不同植物生长调节物质组合的12种培养基上愈伤组织诱导率可达100%,但在2,4 D与6 BA植物生长调节物质组合的MS培养基上,叶片和茎段胚性愈伤组织诱导率为0,而在MS+NAA0.3mg·L-1+6 BA17mg·L-1培养基上,叶片和茎段的胚性愈伤组织诱导率分别达到88.3%和46.7%.胚性愈伤组织在该培养基上可发育为成熟的体细胞胚胎,进而成为完整植株.     

辽东楤木的离体培养及植株再生研究

以MS为基本培养基,通过调节6-芐氨基嘌呤(6-BA)、3-吲哚丁酸(IBA)、1-萘乙酸(NAA)、3-吲哚乙酸(IAA)等4种生长素的配比和浓度,成功地用组织培养的方法获得辽东楤木茎尖、茎等部位诱导产生的愈伤组织和再生植株,结果表明:辽东楤木离体培养的愈伤组织诱导、分化成苗和分化生根的最佳激素配比为NAA0.01mg·L-1+6-BA0.5mg·L-1、NAA0.02mg·L-1+6-BA0.5mg·L-1和NAA0.01mg·L-1+IBA1.5mg·L-1,应用该技术体系的愈伤组织诱导率、分化率和再生植株成活率分别为94%、22.5%、98%,该技术体系为国内外同类研究的首次报道。     

小麦成熟胚再生体系及基因枪转化的初步研究

以小麦品种晋麦2148的成熟胚为外植体,消毒后用解剖刀刨碎,接种于MS+VB5+11.2g·L-1葡萄糖+2mg·L-12,4D+8g·L-1琼脂糖的培养基中诱导愈伤组织,将诱导3周的成熟胚愈伤组织接种到胚状体成熟培养基(MS+VB5+11.2g·L-1葡萄糖+0.2mg·L-1IAA+8g·L-1琼脂糖)中培养4-8周,然后转接到再生培养基(1/2MS+VB5+30g·L-1蔗糖+8g·L-1琼脂糖)中进行再生成苗.接种1200块成熟胚,得到1123块愈伤组织,最终形成258株再生苗,再生率为21.5%.在建立了再生体系的基础上,用基因枪介导法将GUS基因导入成熟胚愈伤组织,Xgluc染色表明,GUS基因已经在小麦成熟胚愈伤组织中表达.将100块愈伤组织用Xgluc染色,29块愈伤组织出现肉眼可见的蓝色小点.     

变异假酸浆嫩茎组织无性系建立的研究

为保存假酸浆有利变异的种质,满足栽培对种苗的需要,以变异植株嫩茎为材料,进行了嫩茎的愈伤组织诱导和分化培养、分化不定芽生根培养、试管苗生根继代培养、试管苗的移栽和定植的研究,建立起变异植株的无性系。结果表明:MS+6-BA0.2mg·L-1+2,4-D1.2mg·L-1培养基是变异假酸浆嫩茎愈伤组织诱导培养和继代培养的理想培养基;MS+GA30.5mg·L-1+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.1mg·L-1培养基是假酸浆嫩茎愈伤组织分化培养的理想培养基;White+IAA0.1mg·L-1+IBA0.4mg·L-1培养基是假酸浆不定芽生根培养的理想培养基;定植的试管苗生长旺盛,保持了假酸浆的所有生物学性状和花期延长的有利观赏变异性状。     

太子参生长点离体培养与快速繁殖

利用太子参0.2～0.5 mm大小的生长点进行离体培养获得了再生植株,通过正交试验和单因子试验,确定了茎尖诱导成芽初代培养基为MS+6-BA 2 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1+GA3 0.1～0.2 mg·L-1+蔗糖30g·L-1;适于愈伤组织及不定芽增殖的继代培养基为MS+6-BA 1.5 mg·L-1+NAA 0.01 mg·L-1+蔗糖30g·L-1;再生植株的快速繁殖可通过愈伤组织不断分化不定芽和单茎节切段繁殖2种途径进行;单茎节切段快繁培养基为MS基本培养基;适于试管微形参形成的培养基为MS+蔗糖60 g·L-1,pH 6.0,最适培养条件为20℃,光照16 h·d-1;生根培养基为MS+蔗糖30 g·L-1.在气温15～20℃、空气相对湿度90%条件下,试管苗定植于细沙土中的成活率达98.6%;太子参茎尖组培苗田间花叶病发病率比普通苗低94.75%.     

玉米植株再生体系建立及其主要影响因素的优化

研究选取11个东北地区主栽玉米品种的自交系,以幼胚为外植体诱导愈伤组织,应用正交实验设计方法探讨了2,4-D、BA、L-脯氨酸、水解酪蛋白4个因素及不同浓度组合对II型愈伤组织诱导的影响。结果表明,MS培养基中添加4mg·L-12,4-D、0.5mg·L-1BA、750mg·L-1L-脯氨酸和250mg·L-1水解酪蛋白时,II型愈伤组织诱导率最高,为49.66%。2,4-D是诱导II型愈伤组织的关键因素。优化了不定芽分化培养基和生根培养基,探讨了3个基因型愈伤组织的不定芽分化率及平均外植体出芽数,甜1品种都为最高,分别为93.14%和1.35%。初步确定了蛭石附加1/8MS营养液为再生植株移栽的最佳条件。     

影响黄瓜直接不定芽诱导的品种等因素研究

以黄瓜(CucumissativusL.)子叶节为外植体,研究了品种、6-苄氨基嘌呤、外植体大小及硝酸银对黄瓜直接不定芽诱导的影响。结果表明:不同黄瓜品种直接不定芽数量诱导存在显著差异,但长度诱导无显著差异;6-苄氨基嘌呤对直接不定芽数量和长度的诱导作用显著,其中4.0mg/L为数量诱导适宜浓度,其出芽率和每外植体出芽数达到最高,分别为100.0%和11.1,0.5mg/L为长度诱导适宜浓度,其平均芽长12.0mm;外植体的大小对直接不定芽数量和长度均具显著影响,随着子叶的增大诱导直接不定芽的数量和长度增加,其中单片完整子叶为最适宜大小,其出芽率、每外植体出芽数和平均芽长分别达到100%、6.7和17.1mm;硝酸银也对直接不定芽数量诱导影响显著,其中2.0mg/L为适宜浓度,出芽率和每外植体出芽数分别达到97.2%和4.2,但对芽长有抑制作用。     

马卡丛生芽培养条件优化及玻璃化控制研究

优化了南美产十字花科植物马卡丛生芽诱导和继代过程中的培养条件,使玻璃化现象得到了控制,提高了丛生芽的存活率。优化后的丛生芽诱导条件为:MS(pH 5.85~5.90)附加1~2 mg/L 6-BA,0.25 mg/L NAA,蔗糖30~35 g/L,琼脂6 g/L,诱导温度20~25℃,光照强度24μmol/(m2.s),光照时间16 h/d;优化后的丛生芽继代条件为:MS(pH 5.85~5.90)附加2 mg/L6-BA,0.25 mg/L NAA,培养温度15℃,光照强度24~41μmol/(m2.s),光照时间16 h/d。     

菊花茎尖克隆体外繁殖研究

[目的]研究不同因子对菊花芽苗体外繁殖的影响。[方法]以秋菊品种＂绣球＂和＂妃子笑＂的顶芽或半木质化茎段为外植体,研究不同激素及组合对菊花芽苗体外繁殖的影响。[结果]在MS＋BA 0.5 mg/L＋IBA 0.1 mg/L的诱导培养基上两品种均能诱导分化出芽。在芽的生长增殖阶段,接种到MS＋BA 1.5 mg/L＋IBA 0.5 mg/L＋GA 0.1 mg/L的增殖培养基上,＂红绣球＂和＂妃子笑＂的增殖系数分别可达6.8和6.4,芽苗生长速度快,生长健壮。在1/2 MS＋IBA 0.5 mg/L的生根培养基上,生根所用时间短,根系数量大且粗细始终,移栽成活率较高。[结论]该研究为＂绣球＂和＂妃子笑＂菊花品种的组培快繁提供了理论与技术支持。     

梨防治抽条保护性材料筛选研究

以‘早酥’和‘黄冠’为试材,选择9种保护性材料,研究不同保护性材料对梨1 a生枝条失水、抽条和发芽的影响,筛选出防止梨树抽条效果好的保护性材料。结果显示：（1）不同保护性材料均能降低梨1 a生枝条失水量。‘早酥’石硫合剂、液态地膜、N-羟甲基丙烯酰胺和黄腐酸处理失水量分别低于对照23.55%、 12.36%、11.55%和9.30%。‘黄冠’液态地膜、石硫合剂、N-羟甲基丙烯酰胺、羧甲基纤维素、腐殖酸钠、黄腐酸和腐殖酸铜处理失水量分别较对照低17.62%和17.47%、16.36%、14.94%、14.27%、12.28%和12.09%。（2）不同保护性材料均能降低抽条指数。‘早酥’石硫合剂、液态地膜、N-羟甲基丙烯酰胺和腐殖酸铜处理抽条指数分别比对照低30.42%、26.08%、21.73%和21.73%。‘黄冠’液态地膜、石硫合剂、羧甲基纤维素、 N-羟甲基丙烯酰胺和腐殖酸钠处理抽条指数分别比对照低39.28%、35.71%、28.58%、28.57%和21.43%。（3）N-羟甲基丙烯酰胺对‘早酥’和‘黄冠’1 a生枝条发芽率与对照相比分别降低46.3%和26.8%。其他处理与对照发芽率差异不显著。可见,不同保护性材料均能减少梨1 a生枝条水分散失,降低抽条指数,其中石硫合剂和液态地膜效果最好,其次是羧甲基纤维素、腐殖酸钠、腐殖酸铜和黄腐酸。     

不同物质对唐菖蒲继代培养试管苗芽增殖的影响

[目的]探讨不同物质对唐菖蒲继代培养试管苗芽增殖的影响.[方法]在唐菖蒲试管苗芽增殖过程中,添加不同植物生长调节剂、碳源、活性炭,考察不同物质对芽增殖影响.[结果]浓度0.5 mg/L奈乙酸与浓度1.0 mg/L的6-苄基腺嘌呤植物生长调节剂组合下,苗增殖效果好而且苗较壮,增殖倍数为5.0.2％的活性炭,在30 d内有利于试管苗株高的增加,但对芽的诱导无明显作用.[结论]用50 g/L市售白糖代替40 g/L纯蔗糖作为培养基的碳源是可行的,这样降低了配制培养基的成本,而且对试管苗的增殖和质量无影响.     

新疆石榴新梢生长动态研究

[目的]研究新疆石榴新梢的生长动态。[方法]对南疆特色果树新疆阿图什石榴的新梢生长动态进行调查。[结果]结果表明,石榴新梢粗度和长度分别在4月下旬和5月上旬出现第一次生长大高峰;6月下旬,长度和粗度都出现一次生长小高峰,且基本重合。[结论]该研究结果为新疆石榴丰产、稳产,制定科学有效的栽培措施提供依据。     

羽衣甘蓝丛生芽诱导和植株再生研究

以羽衣甘蓝的幼叶、茎尖和下胚轴为外植体,进行不定芽诱导试验,研究了不同外植体、激素浓度配比对其离体培养效果的影响。结果表明:不同外植体对不定芽诱导效果影响很大,其中茎尖出芽率最高,下胚轴次之,幼叶最差;以MS+6-BA2.5 mg/L+NAA0.l mg/L,诱导成苗率最高,芽苗健壮;芽在继代培养中,以MS+6-BA2.0 mg/L+IAA0.1 mg/L增殖率最高;在生根阶段,以1/2MS+IBA0.5 mg/L生根效果最好,生根率可达100%。     

芳香樟插条育苗研究

本文论述芳香樟插条育苗技术和成年期香樟复壮方法和技术。 芳香樟插条育苗技术要点:取直径0.4—0.9cm液芽饱满半木质化的健壮带叶枝条作材料。三月扦插前插条用200ppm木素酸钠处理,八月扦插前用1％H_2O_2处理后再沾用1000ppm1:1的IBA+NAA粉剂。扦插后注意保持插壤湿润、空气流通,相对湿度保持在80％以上,气温一般不得超过30℃。三月扦插,八月上旬移植;八月扦插可到翌年二月前移植。 芳香樟复壮方法,可使用室内舌接法及室外切接法。     

干旱对夏玉米根冠生长的影响

利用大型活动式防雨旱棚,人工严格控制不同的土壤含水量,全生育期系统研究了夏玉米根冠生长对水分的响应,结果表明:干旱并不影响夏玉米根系、冠层干物质累积、株高增加、茎(基)粗增大等过程的总趋势。但随胁迫的增强,根、冠干物质累积速率、干物质累积总量降低,根条数变少、株高降低、茎(基)粗变细,但它们并不呈线性相关关系;水分供应量的减少延长了夏玉米的生育周期,随胁迫的增强,根系生物量最大值、最大根条数、冠层最大株高出现的时间延后;根冠比(R／S)随土壤水分的改变而改变;不同水分处理的夏玉米,R／S值影响最小的时期是开花-灌浆盛期,最大的时期是在拔节-抽雄,此阶段充分供水处理H的R／S是严重水分胁迫处理L的125.77％。充分供水的处理则有最大的根冠比(R／S=0.173)。在干旱条件下,协调夏玉米根冠平衡,最大程度发挥根系和地上部叶片的功能,才有利于提高产量。     

影响草莓茎尖快繁因素的分析

[目的]分析几种影响草莓茎尖快繁的因素。[方法]以"童子1号"草莓为试材,对草莓茎尖培养快繁中茎尖取材大小、生长调节剂、碳源等影响因素进行分析。[结果]以0.5 mm大小的茎尖接种,脱毒率最高,成活率最理想。诱导"童子1号"草莓茎尖成活与生长的最适培养基、最优增殖培养基均为MS+BA 0.5 mg/L。IBA浓度为800 mg/L时,组培苗瓶外生根不仅有较高的生根率和生根数,而且获得了较壮的生根苗。蔗糖和白砂糖作碳源时,繁殖系数较理想,以白砂糖最为适宜。[结论]草莓茎尖快繁应以0.5 mm大小的茎尖为材料,诱导分化培养基、继代增殖培养基均为MS+BA 0.5 mg/L,组培苗瓶外生根蘸取的最佳生长调节剂为800 mg/L IBA。