凤尾草乙醇提取物体外抑菌试验方法的筛选

为了筛选凤尾草乙醇提取物体外抑菌试验最佳方法,通过打洞法、牛津杯法、干、湿纸片法、二倍稀释法测定乙醇以及中药凤尾草乙醇提取物对大肠杆菌的体外抗菌效果。结果二倍稀释法中乙醇的最低抑菌浓度为6.25%;无水乙醇在打洞法、牛津杯法、纸片法、二倍稀释法中均无抑菌圈;凤尾草乙醇提取物在打洞法、牛津杯法、湿纸片法中抑菌圈直径分别为20±1 mm、14±1 mm、13±2 mm;凤尾草乙醇提取物在干纸片法中无抑菌圈。表明无水乙醇可作中药提取物的溶剂用于打洞法、牛津杯法、湿纸片法;打洞法用于凤尾草乙醇提取物的体外抑菌试验重复性好,抑菌圈质量高。     

10种中药对鸡白痢沙门菌的体外抗菌活性测定

本试验采用煎煮法提取中药中的有效成分,通过测定大青叶、鱼腥草、黄芩、黄连、穿心莲、黄柏、乌梅、大黄、金银花和连翘共10种中药对鸡白痢沙门菌的抑菌圈直径和最低抑菌浓度(MIC),比较各中药对鸡白痢沙门菌的体外抑菌效果,并测定pH值对黄连、黄芩和乌梅3种中药提取物抑菌效果的影响.结果表明,黄连、黄芩和乌梅3种中药对鸡白痢沙门菌的抑菌效果最好,抑菌圈直径分别为12.78士2.63 mm和14.58士3.45 mm;乌梅对鸡白痢沙门菌的抑菌效果随pH值的升高而降低,黄连的抑菌效果随pH值的升高而略有升高,黄芩的抑菌效果随pH值变化不明显.     

22味中药对犊牛腹泻大肠杆菌的体外抑菌试验

开展了乌梅、白头翁、黄连、穿心莲等22味中药对犊牛腹泻大肠杆菌的体外抑菌试验。按照常规法制备中药水提物,采用平板打孔法和微量稀释法测定了22味中药对犊牛腹泻大肠杆菌的抑菌圈直径、最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果显示,22味中药中有10味中药对犊牛腹泻大肠杆菌有抑菌作用,其中乌梅、诃子、五倍子和半边莲对犊牛腹泻大肠杆菌的抑菌作用最佳,抑菌圈直径为15 mm以上,为高度敏感;其次是黄连、秦皮、穿心莲、连翘、金银花、石榴皮,抑菌圈直径均大于10 mm,为中度敏感;黄柏、紫花地丁等12味中药对犊牛腹泻大肠杆菌无抑菌作用。对五倍子、乌梅、诃子和半边莲等抑菌作用较好的中药可进一步开展研究。     

复方乌梅汤对禽大肠杆菌病的防治试验

孙荣华等以复方白头翁散（含有白头翁、秦皮、诃子、乌梅、白芍、黄连、大黄等）,潘树桥等以黄芩散,杨富业等以黄连、黄柏、秦皮、白头翁、白芍、茯苓制成汤剂,胡功政等以黄连、黄芩、黄柏、金银花、板蓝根、蒲公英制成丸剂,用来防治禽大肠杆菌病均获得显著疗效.     

15种中药水煎法与乙醇回流提取法体外抑菌试验比较

为将水煎法和乙醇回流法对醋五味子等15种中药进行提取,通过琼脂打洞法比较体外抑菌效果研究。试验选用15种中药(醋五味子、千里光、石榴皮、地榆、石菖蒲、吴茱萸、秦皮、姜厚朴、白头翁、升麻、忍冬花、马齿苋、葛根、大青叶、鱼腥草),分别采用水煎法和乙醇回流法提取制备出生药浓度为1 g/mL,以琼脂打洞法测定不同中药对大肠杆菌的抑制作用。结果表明,水煎法除地榆、千里光、忍冬花、石榴皮、醋五味子提取物对大肠杆菌有抑制作用外,其余中药对大肠杆菌均表现为不敏感,所测得平均抑菌圈大小分别为7.33 mm、10.67 mm、8.83 mm、6.5 mm、16.17 mm;乙醇回流提取法中醋五味子、石榴皮、大青叶和千里光对大肠杆菌有抑制作用,所测得的平均抑菌圈直径分别为24.33 mm、11.67 mm、8.33 mm和6.67 mm,其余中药提取物对大肠杆菌表现为不敏感。说明同一种中药分别通过水煎法和乙醇回流提取对大肠杆菌的抑菌效果不同,15种不同中药通过同一种方法提取对大肠杆菌抑菌程度不同,选用中药最优的提取方法和提取工艺来全面有效地发挥中药的抑菌活性。     

抗菌中草药筛选试验方法研究

采用常规中药敏感试验打孔法、平皿稀释法及试管法,选用地榆、黄连、知母、板蓝根、藿香等12种中药,对鸡O5型大肠杆菌、鸡未定型大肠杆菌和猪链球菌进行体外抑菌试验。结果表明:地榆、板蓝根、黄连、大黄、乌梅对猪链球菌效果比较好。地榆、乌梅、大黄、黄连、蒲公英对鸡未定型大肠杆菌效果比较好,地榆、乌梅、大黄、知母、黄芩、对鸡O5型大肠杆菌效果比较好。其它药物对鸡未定型及O5型大肠杆菌和猪链球菌效果较差或无抑制作用。     

16味蒙药对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌O8的体外抑菌效果研究

为筛选对奶牛乳房炎主要致病菌金黄色葡萄球菌（S.aureus）和大肠杆菌O8（E.coli O₈）具有良好抑菌作用的蒙药,本试验采用牛津杯法测定金银花、黄连、何首乌、地榆、五味子、秦皮、穿心莲、甘草、蒲公英、夏枯草、虎杖、柴胡、黄柏、苦参、石榴皮、板蓝根16味蒙药的抑菌圈直径,微量稀释法和平板法测定蒙药的最小抑菌浓度（minimal inhibitory concentration,MIC）和最小杀菌浓度（minimal bactericidal concentration,MBC）,棋盘法测定敏感蒙药对E.coli O8和S.aureus的协同指数（fractional inhibitory concentration index,FICI）。结果显示,黄柏、金银花、黄连、五味子、蒲公英、秦皮6味蒙药对S.aureus的抑菌圈直径为10.22~22.44 mm,MIC为15.6~250 mg/mL;五味子、金银花、黄连、秦皮4味蒙药对E.coli O8的抑菌圈直径为11.29~26.41 mm,MIC为15.6~500 mg/mL;黄柏与黄连联合用药对S.aureus的FICI为0.36,为协同作用,黄连与地榆联合用药对E.coli O8的FICI为0.48,为协同作用。综上所述,金银花、黄连、五味子、秦皮、蒲公英、黄柏6味蒙药对S.aureus综合抑菌效果达极敏或高敏;金银花、黄连、五味子、秦皮4味蒙药对E.coli O8综合抑菌效果达极敏或高敏,黄柏、黄连、秦皮在抑制S.aureus的组方中可优先考虑,黄连与地榆在抑制E.coli O8的组方中可优先考虑。     

16味蒙药对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌O8的体外抑菌效果研究

为筛选对奶牛乳房炎主要致病菌金黄色葡萄球菌(S.aureus)和大肠杆菌O8(E.coli O8)具有良好抑菌作用的蒙药,本试验采用牛津杯法测定金银花、黄连、何首乌、地榆、五味子、秦皮、穿心莲、甘草、蒲公英、夏枯草、虎杖、柴胡、黄柏、苦参、石榴皮、板蓝根16味蒙药的抑菌圈直径,微量稀释法和平板法测定蒙药的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)和最小杀菌浓度(minimal bactericidal concentration,MBC),棋盘法测定敏感蒙药对E.coli O8和S.aureus的协同指数(fractional inhibitory concentration index,FICI)。结果显示,黄柏、金银花、黄连、五味子、蒲公英、秦皮6味蒙药对S.aureus的抑菌圈直径为10.22～22.44mm,MIC为15.6～250mg/mL;五味子、金银花、黄连、秦皮4味蒙药对E.coli O8的抑菌圈直径为11.29～26.41mm,MIC为15.6～500mg/mL;黄柏与黄连联合用药对S.aureus的FICI为0.36,为协同作用,黄连与地榆联合用药对E.coli O8的FICI为0.48,为协同作用。综上所述,金银花、黄连、五味子、秦皮、蒲公英、黄柏6味蒙药对S.aureus综合抑菌效果达极敏或高敏;金银花、黄连、五味子、秦皮4味蒙药对E.coli O8综合抑菌效果达极敏或高敏,黄柏、黄连、秦皮在抑制S.aureus的组方中可优先考虑,黄连与地榆在抑制E.coli O8的组方中可优先考虑。     

36种中药提取物对罗非鱼大肠杆菌和华纳葡萄球菌的抑菌效果研究

研究36种中药对罗非鱼大肠杆菌和华纳葡萄球菌的体外抑菌效果。采用水提法提取芦根、地榆、苦参、黄芩、大青叶、黄柏、丁香、蛇床子、连翘、金银花、栀子、山楂、黄连等36种中药有效成分,采用肉汤二倍稀释法测定中药提取物对大肠杆菌和华纳葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC),选择抑菌效果较好的单药进行联合抑菌试验。结果表明,山楂对罗非鱼大肠杆菌抑菌效果最佳,MIC值为31.250 mg/mL;栀子、地榆、丁香对罗非鱼华纳葡萄球菌抑菌效果较好,MIC值为62.500 mg/mL。联合用药结果显示,在对大肠杆菌的体外抑菌试验中,大青叶与地榆、大青叶与黄连、大青叶与山楂、地榆与丁香、地榆与山楂、丁香与黄连、丁香与山楂、黄连与山楂等药物联合均为拮抗作用(FIC指数>2.000),其余发生沉淀反应;在对华纳葡萄球菌的体外抑菌试验中,只有山楂和黄连联用时有相加作用,其FIC值为1.000,其余均为无关作用或发生沉淀反应。由此可见,两种中药进行联合用药有可能产生无关甚至拮抗等作用,反而导致抑菌活性降低。     

15种中药对猪大肠杆菌的体外抑菌试验

为了探讨黄连等15种中草药对猪大肠杆菌的体外抑菌作用,试验采用琼脂扩散法和微量二倍稀释法应用15种中草药水提取物对猪大肠杆菌进行体外抑菌试验,测定抑菌圈直径和最小抑菌浓度(MIC)。结果表明:黄连、大黄均对大肠杆菌O101呈高度敏感,抑菌圈直径分别为20.8,20.3 mm,其MIC值为7.813 mg/m L,抑菌效果最好;黄芩、黄柏、金银花呈中度敏感,其MIC值为31.25 mg/m L;而苦参、马齿苋、败酱草等不敏感,其MIC值为500 mg/m L,抑菌效果差。     

单味中草药提取物对猪源沙门氏菌的抑菌效果

本试验旨在探讨黄连、苦参、黄柏、黄芪、甘草五种中草药对猪源沙门氏菌的抑菌效果。试验制备黄连、苦参、黄柏、黄芪、甘草五种中草药提取物后,采用牛津杯法测定五种中草药提取物对猪霍乱沙门氏菌的抑菌作用,并采用梯度稀释法测定其最小抑菌浓度(Minimum Inhibitory Concentration,MIC),观察其对沙门氏菌的体外抑制作用。结果表明,空白对照组无抑菌圈,阳性对照组抑菌圈直径为(20.13±1.47)mm;与对照组相比,苦参、黄芪组抑菌作用差异显著(P>0.05),敏感程度均为高敏;黄连、黄柏、甘草组的差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01),敏感程度为高敏或中低敏;黄连、苦参、黄柏、黄芪、甘草五种中草药的MIC浓度分别为20g/L、10g/L、80g/L、20g/L、160g/L。试验显示,黄连、苦参、黄柏、黄芪、甘草五种中草药均可一定程度地抑制猪源沙门氏菌,苦参抑制作用最强,与抗生素效果一致,其次分别为黄芪、黄连、黄柏、甘草。     

几种抗菌中草药体外抗菌效果比较

本试验旨在了解单味中草药及复方中草药对于大肠杆菌的抗菌效果,从而在临床上更有效地使用中草药治疗大肠杆菌病。试验选用了5种单味中草药(板蓝根、黄柏、忍冬花、蒲公英、黄连)和1种复方中草药制剂(板青败毒口服液),选择一定浓度的大肠杆菌菌液在培养基上培养形成菌落,分别采用5种单味中药制剂、1种复方中药制剂、5种单味中草药液混合以及5种单味中草药混合液和板青败毒口服液的联合使用来做抑菌试验,试验结果显示,板蓝根、忍冬花、蒲公英、黄连、黄柏、硫酸庆大霉素注射液、板青败毒口服液、5种单味中草药混合以及5种中草药与复方制剂混合液的抑菌圈直径分别为21 mm、15 mm、16 mm、20 mm、14 mm、9 mm、28 mm、26 mm和30 mm。根据判定标准得出结论:板蓝根、黄连、板青败毒口服液、5种单位中草药混合以及中草药与复方制剂混合液对大肠杆菌为极度敏感;忍冬、蒲公英和黄柏为低度敏感。培养基扩散法得5种单味中草药、1种复方中草药制剂和抗生素对大肠杆菌抑菌效果,由强到弱依次为5种中草药与板青败毒口服液混合液>板青败毒口服液>5种单味中草药混合液>板蓝根>黄连>蒲公英>忍冬花>黄柏>硫酸庆大霉素注射液。     

单一中药提取物对大肠杆菌和沙门氏菌的体外抑菌效果研究

试验旨在研究鱼腥草、五倍子、连翘、金银花、紫花地丁、蒲公英、板蓝根、黄连等8种中草药的提取物对鸡源性大肠杆菌和沙门氏菌的体外抑菌效果。试验分别采用煎煮法和乙醇浸提法获得单一中草药提取物,采用琼脂平板打孔法进行大肠杆菌和沙门氏菌抑菌圈直径的测定,采用2倍稀释法测定最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果显示,煎煮法所得的蒲公英提取物对大肠杆菌的抑菌和杀菌效果最强,其次是五倍子提取物;乙醇提取法所得的五倍子提取物对大肠杆菌的抑菌和杀菌效果最强,其次是鱼腥草提取物;煎煮法所得的五倍子提取物对沙门氏菌的抑菌和杀菌效果最强,其次是板蓝根,而鱼腥草、连翘、紫花地丁、金银花、蒲公英等提取物对沙门氏菌的抑制效果较差;乙醇提取法所得的五倍子提取物对沙门氏菌的抑菌和杀菌效果最强。研究表明,8种中草药对大肠杆菌和沙门氏菌均具有不同程度的抑制效果,对大肠杆菌的抑制效果比沙门氏菌的抑制效果更好,其中五倍子提取物对大肠杆菌和沙门氏菌均具有不错的抑菌效果。     

20味中药对大肠杆菌的体外抑菌作用

研究苏木、黄连、石榴皮等20味中药对大肠杆菌的体外抑菌作用。采用水提法制备20味中药的提取物,通过试管二倍稀释法测定20味中药水提取物对大肠杆菌的最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC);再将20味中药组成药对,进行联合抑菌,测定药对的MIC和MBC,计算其部分抑菌浓度指数(FIC)。结果表明,20味中药中,黄连、苏木抑菌效果最佳,MIC均为6.250 mg/mL,茯苓、山楂、火麻仁抑菌效果最差,其MIC和MBC均大于400.000 mg/mL。联合抑菌的28组药对中,苏木与石榴皮、石榴皮与黄柏、石榴皮与黄芩、地榆与苏木、地榆与乌梅、地榆与花椒、地榆与黄柏、火麻仁与旋覆花、旋覆花与山楂等9组药对均呈现协同作用,石榴皮与黄连、石榴皮与乌梅均呈现拮抗作用,其他药对呈现相加或无关作用。说明对大肠杆菌抑菌作用强的单味中药与其他中药联合,其抑菌效果未必会增强。     

18种中药水煎剂及其提取物浓缩粉对貂源肺炎克雷伯菌的体外抑菌作用研究

为研究连翘、白头翁、丹皮等18种中药水煎剂及其提取物浓缩粉对貂源肺炎克雷伯菌的抑菌作用,试验采用琼脂平板打孔法测定抑菌圈直径观察药物的体外抑菌作用。结果表明:中药水煎剂中,黄连、黄芩和薄荷对肺炎克雷伯分离株的抑菌效果最好,抑菌圈直径达10 mm以上,属于中度敏感。中药提取物浓缩粉中,丹皮酚对肺炎克雷菌的抑制作用最强,达到高度敏感。黄连、连翘、山豆根、白芍、薄荷和黄芪多糖6种中药提取物浓缩粉对肺炎克雷伯菌也具有较强的抑菌作用,抑菌圈直径达10 mm以上,属于中度敏感。说明18种中药水煎剂及其提取物浓缩粉对肺炎克雷伯菌有不同程度抑菌作用。     

中药及组方对产气荚膜梭菌的体外抑菌作用

采用二倍稀释法和药敏试验,观察10种单味中药及3味复方中药对产气荚膜梭菌的体外抑制效果。试验表明:黄连、黄柏、乌梅散对产气荚膜梭菌的生长有明显的抑制作用,且黄连的抗菌活性最高,其最小抑菌浓度(MIC)为0.98mg/mL,抑菌圈直径为33mm。     

12味中药对鸡血清型O_(78)大肠杆菌的抗菌活性观察

本研究旨在观察乌梅、芦荟等12味中药的水煎液对鸡致病性大肠杆菌O78的抗菌活性。选取乌梅、芦荟等12味中药加水煎煮以获得中药水提取物,测定其对鸡致病性大肠杆菌O78的最低抑菌浓度(MIC)与最小杀菌浓度(MBC),并对体外抑菌效果较好的单味中药进行体内试验。乌梅、芦荟、白头翁抗菌活性较好,桔梗、连翘、大黄、白芍、白术几乎无抗菌活性,其中乌梅、白头翁与芦荟水提取物对鸡致病性大肠杆菌O78的MIC分别为2.57、2.06和2.31mg/mL。乌梅、芦荟、白头翁具有一定的抗鸡致病性大肠杆菌O78的作用,将为开发新的抗鸡致病性大肠杆菌的药物奠定理论基础。     

20种单味中草药对鸡源多杀性巴氏杆菌的体外抑菌试验

为了研究20种单味中草药对鸡源多杀性巴氏杆菌QHP-1株的体外抑菌效果,试验采用平板琼脂打孔法测定抑菌圈直径大小,改良微量二倍稀释法测定最小抑菌浓度(MIC)。结果表明:鸡源多杀性巴氏杆菌QHP-1株对五味子、黄连、石榴皮、乌梅4种药物极敏,对五倍子、白头翁、黄芩、沙棘、鱼腥草、夏枯草、穿心莲、车前草、黄柏9种药物高敏,对公丁香、苏木、大黄中敏,对薄荷、陈皮、马齿苋、甘草4种药物不敏感。说明五味子、黄连、石榴皮、乌梅4种中草药可以作为防治鸡源多杀性巴氏杆菌复方中草药复方制剂进行进一步的研发。     

防治家禽腹泻的复方中药筛选及其提取工艺研究

为筛选能够有防治家禽腹泻的复方中药,选择对大肠杆菌有抑菌效果的单味中药,配置14种复方,结合对金黄色葡萄球菌、致病性沙门菌的抑菌能力,筛选出一个复方中药,通过正交试验确定该复方中药最佳提取工艺。结果显示:筛选的复方中药乙醇提取物(1 g/mL,200μL)对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、鸡大肠杆菌、鸭大肠杆菌、鸡致病性沙门菌、鸭致病性沙门菌(指示菌浓度1×10^8cfu/mL)的抑菌圈直径分别为24.21mm、31.36mm、25.19mm、24.12mm、25.00 mm、25.49 mm;硫酸新霉素对上述致病菌的抑菌圈直径分别为23.61 mm、26.52 mm、14.69 mm、16.00 mm、24.11 mm、25.49 mm。经正交试验优化的最佳提取工艺为:15倍溶剂、提取时间60 mim、乙醇浓度90%、提取2次。优化后提取物体外抑菌试验(O78)的抑菌圈均值为26.65 mm。研究表明:筛选的复方中药对引起家禽腹泻的主要致病菌具有良好抑菌、杀菌作用,正交试验确定的提取工艺稳定可行。     

20种中草药提取物对4种常见病原菌体外抑菌试验

为了观察中草药对病原菌的体外抑菌效果,本试验采用水煎煮法提取大黄、黄连和黄芩等20种中草药活性成分,利用试管二倍稀释法分别测定中草药提取物对4种常见病原菌(猪链球菌、金黄色葡萄球菌、巴氏杆菌和大肠杆菌)的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果显示,大黄、黄连、黄芩、地锦草、石榴皮和白头翁等对大肠杆菌的体外抑菌效果较好,其中大黄和黄连的效果最好;大黄对巴氏杆菌的体外抑菌效果较好,MIC为62.5 mg/ml;黄连、黄柏和白头翁对猪链球菌的体外抑菌效果较好,其中黄连的MIC1.95 mg/ml,MBC为31.25 mg/ml;黄连、黄柏、大黄和柴胡对金黄色葡萄球菌的体外抑菌效果较好,其中黄连和黄柏的MIC分别为3.91和15.6 mg/ml。