EoNPV 不同品系的致病力及增效作用的研究

测定了两品系 EoNPV 对信阳茶尺蠖种群幼虫的毒力及茶皂素和卵磷脂对其的增效作用．结果表明：W‐EoNPV （湖北省农业科学院果茶研究所提供）的毒力强于 Z‐EoNPV（中国农业科学院茶叶研究所提供） ．用1,2,4 mg／mL 茶皂素和 EoNPV 混用,最高质量浓度（4 mg／mL）可显著提高 Z‐EoNPV 和 W‐EoNPV 对茶尺蠖的毒力,接种14 d 后,其死亡率比单用病毒分别提高了16.34％和13.22％．2 mg／mL 茶皂素对 Z‐EoNPV 有显著的增效作用,14 d 后的防治效果提高了12％,但对 W‐EoNPV 的效果不明显．而茶皂素最低质量浓度（1 mg／mL）对2株病毒基本无增效作用．卵磷脂各质量浓度可提高 W‐EoNPV 对茶尺蠖的致死率,接种14 d 后,质量浓度由高至低分别使死亡率提高16.25,6.25和4.1个百分点,而卵磷脂对 Z‐EoNPV 的增效作用极不明显．茶皂素和卵磷脂的最高质量浓度与 EoNPV 混合使用均可缩短 LT50,但低质量浓度不明显．     

苏云金杆菌与EoNPV混用的增效作用

采用生物测定方法测定茶尺蠖核型多角体病毒(Ectropis obliquanuc leopolyhedrovirus,EoNPV)和苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis,B t)的联合作用。5组不同含量EoNPV制剂(1.50×107PIB/m l、1.25×107PIB/m l、1.00×107PIB/m l、7.50×106PIB/m l和5.00×106PIB/m l)中混合2 000 IU/mg B t制剂后共毒系数在106.02至128.03之间,表明B t与EoNPV混用具有增效作用。其中以1.00×107PIB/m l EoNPV制剂与2 000 IU/mg B t制剂混用增效作用最明显,LC50为817.03μg/m l。对2龄茶尺蠖的杀虫速度,EoNPV B t制剂(1.00×107PIB/m l EoN-PV 2 000 IU/mg B t)的LT50较单独使用EoNPV(2.00×107PIB/m l)缩短了2 d,且EoNPV B t制剂对茶尺蠖具有拒食作用,茶尺蠖对EoNPV B t制剂处理茶树的食叶量比单独使用EoNPV制剂的食叶量减少65.9%。EoNPV B t制剂对茶刺蛾、茶银尺蠖等茶树鳞翅目害虫的兼治作用分别达85.8%和88.7%。多点田间药效试验结果表明,EoNPV B t制剂药后10 d对茶尺蠖防效达81.80%~93.24%。     

茶皂素对茶尺蠖毒性作用初步研究

为研究茶皂素的生物活性及对昆虫作用机理,测定了茶皂素对茶尺蠖卵及幼虫的毒性作用。结果表明：施用浓度为0.1、0.2、0.4、0.8、1、2、4、8 mg/mL茶皂素后,卵孵化率分别为21.9%、16.2%、18.2%、11.7%、7.7%、6.2%、5.4%、5.9%,随着茶皂素浓度的提高,杀卵作用增强,高浓度茶皂素(?1 mg/mL)对茶尺蠖卵具有较强的杀卵作用。1、2、4、8 mg/mL茶皂素溶液处理茶尺蠖3 龄幼虫并饲养5 天后,无幼虫死亡,说明茶皂素对茶尺蠖3 龄幼虫没有明显的触杀作用,对茶尺蠖的直接毒杀活性较弱。不同浓度的茶 皂素对茶尺蠖3 龄幼虫均有一定的拒食作用,随着浓度的增加,拒食效果增强,4、8 mg/mL 的茶皂素拒食作用较强,分别达到80.0%、85.7%。取食过茶皂素的3 龄、4 龄、5 龄幼虫虫体长度和重量与未取食的没有明显差异,饲喂8 mg/mL及以下浓度茶皂素的茶尺蠖生长发育均未受到明显影响。     

茶尺蠖核型多角体病毒SalI 1.1 k片段的克隆及gp41部分序列分析

茶尺蠖核型多角体病毒(EoNPV)是尚未完成基因组测序的一种杆状病毒.为了解其基因组的信息,从病虫中分离纯化了茶尺蠖NPV,提取基因组DNA,构建了EoNPV DNA的SalI酶切片段文库,并对阳性克隆进行测序,获得了EoNPV gp41基因的部分序列.序列同源性分析结果表明,EoNPV与LdMNPV之间gp41基因的同源性较高,而与AcMNPV及BmNPV的同源性较低.     

茶尺蠖核型多角体病毒制剂的研制

茶尺蠖核型多角体病毒（EoNPV）是茶尺蠖的主要病原微生物。试验研制了3种EoNPV制剂，分别是EoNPV乳剂、EoNPV-Bt乳剂、EoNPV-溴氰可湿性粉剂。3种制剂在室内和田间对茶尺蠖的防治效果均在90％以上。茶园示范应用1万hm^2，经济效益和生态效益明显。并对3种制剂的田间使用技术进行了研究和讨论。     

EoNPV对茶尺蠖两近缘种的毒力差异

茶尺蠖核型多角体病毒(Ectropis obliqua nucleopolyhedrosis virus,EoNPV)是一种重要的病原微生物,为进一步明确该病毒对茶尺蠖两近缘种的毒力差异,采用叶盘法对3龄茶尺蠖和灰茶尺蠖幼虫进行了EoNPV的毒力测定。研究显示,EoNPV对灰茶尺蠖的半致死剂量LD₅₀(median lethal dose)为茶尺蠖的28.9倍,EoNPV对灰茶尺蠖的致死中时间LT₅₀(median lethal time)大于茶尺蠖。结果表明,EoNPV对茶尺蠖两近缘种间的毒力存在差异,EoNPV对茶尺蠖具有更高的致病力,研究结果对EoNPV田间防治茶尺蠖两近缘种具有现实指导意义。     

襄阳市茶区茶尺蠖绿色防控试验初报

在湖北省襄阳市采用不同浓度茶核·苏悬浮剂、0.6%苦参碱、30%茶皂素开展防治茶尺蠖(Ectropis obliqua Prout)幼虫试验。结果表明,0.6%苦参碱、30%茶皂素、茶核·苏悬浮剂对茶尺蠖均有一定防治效果,3 000 mL/hm~2茶核·苏悬浮剂对茶尺蠖防治效果最好,综合防效达到83.0%;各处理药剂对茶树鲜叶和害虫天敌均没有造成危害。     

山苍籽油与茶皂素对茶炭疽病菌的毒力

为明确山苍籽油和茶皂素对茶炭疽病病原的活性,采用菌丝生长速率法、Horsfall 方法和共毒系数法测定了山苍籽油、茶皂素及其混剂对茶炭疽病菌的室内毒力、两成分混用的增效配比以及共毒系数。结果表明：处理后96 h,山苍籽油和茶皂素对茶树炭疽病菌的 EC50分别为（142．79±0．51）mg/L 和（1129±8．58）mg/L;山苍籽油和茶皂素 EC50体积比为8∶2、6∶4、3∶7和2∶8时对菌丝生长的校正毒力比均明显大于1,且8∶2和3∶7的共毒系数大于120而表现增效作用。     

茶尺蠖对不同品系EoNPV敏感性的地理差异研究

就8个省份(湖北、河南、浙江、江西、福建、安徽、湖南和贵州)茶尺蠖种群对2个品系EoNPV-Z(中国农科院茶叶研究所提供)和EoNPV-W(湖北农科院果茶研究所提供)的敏感性差异进行研究.结果表明,浙江种群接种EoNPV-Z后死亡速度最快,接种13d后,死亡率达到100％,致死中浓度(LC50)为1.78×104pIB/mL,而河南种群对EoNPV-Z的敏感性最低,与浙江种群的差异性达553.4倍；浙江种群对EoNPV-W亦最敏感,致死中浓度(LC50)为3.73×104 PIB/mL,而贵州种群的抗性最强,LC50是浙江种群的163.5倍；对两株病毒的致死中时间(LT50)进行比较,EoNPV-W除对贵州种群的LT50大于EoNPV-Z外,对其他种群的LT50均小于EoNPV-Z.综合考虑LC50和LT502个参数,EoNPV-Z对浙江和贵州两种群茶尺蠖的致病效果较好；而EoNPV-W对其他6个种群茶尺蠖的致病力相对较强.     

荧光增白剂对春尺蠖核型多角体病毒的增效作用研究

以荧光增白剂VBL作为春尺蠖核型多角体病毒(AciNPV)的增效剂,对春尺蠖2～3龄幼虫进行生物测定,试验结果表明,浓度为1.0%(W/V)的荧光增白剂VBL对春尺蠖核型多角体病毒有显著的增效作用.荧光增白剂VBL的加入不仅将春尺蠖死亡率提高了20%～35%,而且使春尺蠖死亡高峰期提前了1 d以上,半致死时间(LT50)提前了2 d,AciNPV的半致死浓度(LC50)降低了22倍多,有效地降低了AciNPV的施用浓度.     

可感染茶尺蠖的重组家蚕核型多角体病毒的构建

【目的】构建能够感染家蚕和茶尺蠖的重组家蚕核型多角体病毒（rBmNPV）,解决EoNPV扩增困难而不易获得的难题。【方法】通过Bac-to-Bac系统构建具备BmNPV的多角体蛋白基因（polh）表达盒和EoNPV的解旋酶基因（hel）表达盒的重组家蚕核型多角体病毒。【结果】家蚕或家蚕细胞扩增的rBmNPV可以感染茶尺蠖并致病,表明rBmNPV的宿主域拓展至茶尺蠖。【结论】成功构建了能够感染茶尺蠖的rBmNPV,为利用家蚕作为宿主来生产重组病毒杀虫剂打下基础。     

博落回生物碱与茶皂素对2种茶叶病原菌的联合毒力测定

为探明博落回生物碱与茶皂素混配对茶树轮斑病(Pseudopestalotiopsis camellia-sinensis)和茶树炭疽病(Colletotrichum gloeosporioides)的联合毒力，通过生长速率法测定了博落回生物碱和茶皂素对2种茶叶病原菌EC₅₀、毒性比率，以及最佳配比的联合毒力。结果表明：博落回生物碱对茶树轮斑病和茶树炭疽病的EC₅₀分别为6.219、51.674μg·m L^-1；茶皂素对茶树轮斑病和茶树炭疽病的EC₅₀分别为416.435、453.925μg·mL^-1；通过毒性比率筛选和联合毒力测定，博落回生物碱与茶皂素质量比为1∶28.7的混剂对茶树轮斑病菌表现为增效作用，增效系数为1.545；博落回生物碱与茶皂素质量比为1∶3.8、1∶5.9、1∶8.8、1∶13.2的混剂对茶树炭疽病菌表现出较好的增效作用，增效系数分别为2.698、2.345、2.974、1.533。综上可知，博落回生物碱与茶皂素复配对茶树轮斑病和茶树炭疽病具有明显的协同增...     

茶皂素体外抗红色毛癣菌研究

为了研究茶皂素是否能抑制红色毛癣菌真菌生长以及抑制程度,采用牛津杯法,通过抑菌圈大小判断茶皂素是否存在抑制红色毛癣菌作用,结果表明红色毛癣菌对茶皂素敏感程度为高度敏感,后通过立体显微镜进一步验证茶皂素能破坏菌丝结构,导致菌丝断裂、自溶,茶皂素存在抑制红色毛癣菌作用.然后采用体外抑菌方法研究茶皂素抑制红色毛癣菌机制,茶皂素最小抑菌浓度(MIC)为50 mg/mL.茶皂素溶液浓度与菌丝径向生长抑制率成正比,100、50和25 mg/mL茶皂素溶液浓度径向生长抑制率分别为96.10％、76.90％和57.60％.茶皂素溶液浓度与孢子萌发率成反比,茶皂素溶液浓度为25、50和100 mg/mL时,孢子萌发率分别为47.82％、31.43％、11.70％.     

抗茶轮斑病病原菌(Pestalotiopsis trachicarpicola)生物农药复配组合筛选

【目的】探明对茶轮斑病病原菌(Pestalotiopsis trachicarpicola)联合毒力表现为增效作用的复配生物农药组合,为茶树茶轮斑病生物防控和茶产业的健康绿色发展提供技术支持。【方法】采用菌丝生长速率法,测试5种生物农药在不同浓度下对茶轮斑病的抑制率及EC_(50),筛选活性较高的中生菌素和四霉素按不同比例进行复配,并测定其对茶轮斑病的抑制率、EC_(50)、共毒系数及联合毒力。【结果】5种生物农药在100～6.75μg/mL浓度下对茶轮斑病的抑制率均随药剂浓度的减小而降低,且各浓度间均达极显著差异;5种生物农药对茶轮斑病病原EC_(50)以枯草芽孢杆菌最优,为4.07μg/mL。中生菌素和四霉素按不同比例复配的9组药剂中,以中生菌素∶四霉素=9∶1复配药剂对该病原的抑制率最高,为90.97%;EC_(50)最低,为12.03μg/mL;共毒系数最高,为310.51;联合毒力表现为增效。【结论】中生菌素∶四霉素为9∶1复配药剂的EC_(50)(12.03μg/mL)优于单一中生菌素(15.19μg/mL)和四霉素单剂(44.24μg/mL),活性增效明显,可参考用于茶园茶轮斑病生物防控。     

天然寄主替代茶叶增殖EgNPV的方法

本研究采用接骨草代替茶叶饲养灰茶尺蠖幼虫,并增殖灰茶尺蠖核型多角体病毒。结果表明,接骨草饲养的灰茶尺蠖生长正常,形成完整的生活史。室内病毒增殖试验表明,用接骨草饲养灰茶尺蠖增殖病毒的适宜时期为3龄幼虫,适宜浓度为5.0×10⁶ PIB·mL^-1,且以灰茶尺蠖第1、2、3和6代增殖病毒效果最佳。毒力回归方程为y=-4.152 3+1.53 x,LC₅₀=5.25×10⁵PIB·mL^-1,接骨草饲养的产毒量略高于茶叶饲养的产毒量。     

EoNPV对灰茶尺蠖的致病特性及高效毒株筛选

茶尺蠖核型多角体病毒(Ectropis obliqua nucleopolyhedronviruses,Eo NPV)是茶尺蠖的重要天敌。灰茶尺蠖(Ectropis grisescens Warren)是茶尺蠖的近缘种,也是茶树主要害虫。为了探明应用Eo NPV防控灰茶尺蠖的效果,发挥其对灰茶尺蠖的生物防治作用,通过生物测定,研究了Eo NPV对灰茶尺蠖的致病特性,并进行了高效毒株的筛选。结果表明,Eo NPV对灰茶尺蠖1龄幼虫致病力最强,2×104~2×108PIB·m L-1处理对1龄幼虫的致死率达82.7%~100%;对灰茶尺蠖2龄幼虫的LC50值为2.32×106PIB·m L-1(饲毒后9 d);对不同代别灰茶尺蠖的致病力有明显差别,以第2代为最高。从用灰茶尺蠖连续增殖5代的病毒样品中,筛选出高效毒株QF4,该毒株对灰茶尺蠖致死率比原始毒株提高51.5%,致死中时间缩短1.5 d。研究表明,应用Eo NPV防治灰茶尺蠖最适宜在第2代1龄期施用;QF4可作为病毒生产用毒株。     

茶尺蠖高毒力Bt菌株02-85的筛选

采用分离、接种、复壮等方法筛选的Bt新菌种02-85对茶尺蠖的毒力较生产菌种Yz-2毒力提高了2倍；利用生物因子PuGV可以显著增强该菌株毒力，共毒系数达14l。     

茶皂素对Bt防治小菜蛾的增效作用

在明确了茶皂素对Bt细菌的生长无影响后,测定了茶皂素与微生物农药Bt防治蔬菜害虫小菜蛾的联合作用。茶皂素在l000mg／L和2000mg／L浓度下对Bt有显著的增效作用,对小菜蛾3龄和4龄幼虫的共毒系数分别为168．10、260．93和408．15、543．68。田间小区试验的结果也显示,加入l000mg／L茶皂素到Bt药液中,可明显提高对小菜蛾的防治效果,施药3d以后,Bt3000倍加茶皂素处理的防治效果与Bt单剂1000倍无显著差异,表明茶皂素对Bt防治小菜蛾具有显著的增效作用。这在生产实际中有一定的应用价值。     

茶皂素对联苯菊酯防治白蚁增效作用的研究

为考察茶皂素联合联苯菊酯对白蚁进行灭治是否具有增效作用,采用浸纸法分别测定茶皂素、联苯菊酯及不同比例、浓度的混剂作用于圆唇散白蚁的毒力活性。结果表明,单独使用茶皂素处理白蚁,毒杀效果不明显;单独用联苯菊酯处理白蚁,具有较强的毒杀效果,LC50为7.038 mg·L-1;而将联苯菊酯和茶皂素按不同比例混合作用于白蚁,其增效作用明显,混剂的毒杀作用明显高于茶皂素或联苯菊酯的单独处理。当混剂按5:5配比时,其LC50为2.144 mg·L-1,共毒系数达到最大,为328.26。可见茶皂素对联苯菊酯防治白蚁有明显的增效作用。     

7种杀虫剂对灰茶尺蠖2龄幼虫的毒力评价

为筛选出防治暴食性害虫灰茶尺蠖的有效应急药剂,采用浸叶法,测定了7种杀虫剂对灰茶尺蠖2龄幼虫的毒力。结果表明:杀虫剂较低浓度处理48 h比24 h的校正死亡率高,毒杀效果明显。虫螨腈处理24 h对灰茶尺蠖毒力最高,拟除虫菊酯类杀虫剂次之,茚虫威和唑虫酰胺毒力较低。本研究可为茶园夏秋季应急防治灰茶尺蠖的合理用药提供参考。