肉鸡大肠杆菌多价灭活蜂胶苗的研制

从分离鉴定的49株大肠杆菌中筛选出5株致病力强、免疫原性好、具有优势血清型的大肠杆菌作为制苗菌株，经培养灭活后，以蜂胶为佐剂，研制出的肉鸡大肠杆菌多价灭活蜂胶疫苗，使用安全，免疫效果好。用该苗免疫后150d的保护率为100％，无不良反应。该苗4C下保存1年不失效。田间试验结果表明，该苗性能好，免疫后对肉仔鸡、肉种鸡的生产性能无不良影响，鸡群大肠杆菌病的死亡率明显下降。     

兔大肠杆菌病二价蜂胶灭活疫苗的研究

从分离鉴定的15株致病性大肠杆菌中，筛选出2株流行广泛，致病力强，免疫原性好，具有血清型（0103、085）代表性的大肠杆菌作为制苗菌株，以蜂胶为佐剂，研制出的兔大肠杆菌病二价蜂胶灭活疫苗，使用安全，免疫效果好，保护率达87％以下。该苗在4℃保存其为8个月以上。在黑龙江、辽宁两省免疫2万只家兔，1～2年的观察表明，用苗后兔群未出现不良反应，且用苗后仔兔成活率由50％左右提高到85％以上，疫苗使用不影响敏殖母兔的妊娠过程。     

鸡大肠杆菌多价蜂胶灭活苗的研制

从分离鉴定的48株致病性大肠杆菌中,筛选出4株流行广泛、致病力强、抗原性好,且为不同血清型的大肠杆菌作为制苗菌株;以蜂胶这一新型佐剂作为免疫佐剂,研制出的鸡大肠杆菌多价蜂胶灭活菌苗,使用安全,免疫效果好,近期保护率为100％,免疫期为6个月,疫苗制作简单,用苗后鸡群无不良反应。田间应用后鸡群发病率、死亡率下降,增重快,产蛋率增加,饲料利用率提高。     

猪大肠杆菌融合菌株R2灭活苗的研制及免疫试验

为了研究猪大肠杆菌融合菌株R2蜂胶灭活苗的免疫效果,试验以猪大肠杆菌原生质体融合菌株R2为菌种制备蜂胶灭活苗,采用肌肉注射方式免疫SPF小白鼠,以间接ELISA方法检测血清中IgG抗体水平,同时用2种不同血清型的猪大肠杆菌亲本菌株与免疫血清做玻片凝集试验,并对小白鼠进行攻毒保护试验。结果表明:该疫苗免疫性能较好,在免疫小白鼠后的第28,35天左右机体内的抗体水平达到最高值,融合菌株R2蜂胶灭活苗可对2种不同血清型的猪大肠杆菌亲本菌株的攻毒试验产生保护,而且安全性能良好,是一种效果较好的菌苗。说明融合菌株R2蜂胶灭活苗作为一种新型疫苗防控猪大肠杆菌病将成为一种可能。     

肉鸡大肠杆菌的分离鉴定

从豫、鲁、冀接壤地区部分肉鸡场送检的病料中分离出49株大肠杆菌，确定42株菌分属11个血清型，其中O2、O78、O1、O74、O11为主要血清型，分别占分离株的26.2％、19.0％、11.9％、9.5％和9.5％，表明该地区血清型复杂。药敏试验结果表明，所分离的49株大肠杆菌对丁胺卡那霉素、氟本尼考、头孢噻呋最敏感，高敏菌株达94％ ～100％，可作为防治肉鸡大肠杆菌病的首选药物。     

辽宁省部分地区禽大肠杆菌血清型分布及禽大肠杆菌病防治措施初探

2001年7月至9月辽宁省动物防疫站从全省9个市病死禽中分离28株大肠杆菌,定型27株。其中10株O78型,占定型菌株的37％;4株O109型占定型菌株的14．8％：O45、O33和O4、18、142型各2株,分别占定型菌株的7．4％;O157、O1、O91、O32、P80、O26型各1株分别占定型菌株的3．7％。由此可见O78型为绝对优势菌株。辽宁省动物防疫站与山东宾州华宏生物制品有限责任公司合作,用辽宁省分离的大肠杆菌制成了大肠杆菌蜂胶灭活苗及大肠杆菌与新城疫二联蜂胶灭活苗。自2002年2月该疫苗应用于辽宁省禽大肠杆菌病预防,在肉仔鸡、商品蛋鸡、肉种鸡、蛋种鸡等各种禽类中应用,均收到理想效果。     

辽宁省禽大肠杆菌血清型分布与大肠杆菌病防治措施研究

以病原菌分离、血清型鉴定及本动物致病性试验对流行于辽宁省致病性禽大肠埃希氏菌的血清型分布、致病性以及用蜂胶苗防治该病进行了研究。2001至2005年从14市的病死禽和死胚中分离出大肠杆菌226株,定型105株,其中078型占29．52％（31／105）;0109型占10．48％（11／105）。结果证明078、0109血清型是流行于本省致病性禽大肠埃希氏菌的绝对优势血清型。致病性试验研究证明,0109型菌对鸡的致病性强于01、02、078居第一位。用2001年分离的优势菌株的11个血清型大肠杆菌蜂胶苗和大肠杆菌新城疫二联蜂胶苗对鸡免疫,从2005年分离的优势菌株中选078、0109、01、0142、093型菌分别以致死量进行攻毒,保护率均达100％。免疫鸡与发病鸡同居感染试验,100％健康存活。     

烟台市肉鸡大肠杆菌分离及血清型鉴定

从烟台市规模化肉鸡场疑似病鸡和祖代、父母代肉种鸡场1日龄雏鸡卵黄囊、死亡鸡胚共696例肉鸡样品中,分离鉴定出169株大肠杆菌,总分离率为24.28%,疑似病鸡、死胚、雏鸡卵黄囊的分离率分别为45.7%(143株)、38%(19株)、2.1%(7株);通过平板凝集和微量凝集方法对169株分离菌进行O抗血清定型,137株分离菌分属17个O血清型,定型菌株占全部菌株的81.07%,其中O24、O161、O18、O78、O11、O1血清型数量最多,共96株,占定型菌株的70.07%,占全部分离菌株的56.80%,这6种血清型为烟台市肉鸡大肠杆菌的优势血清型。     

鸡源大肠杆菌的血清型分布与耐药性监测

对180株鸡源大肠杆菌分离菌株进行O血清型鉴定，鉴定出171个分离菌株的O血清型40种，占分离菌株的95％，其中O36血清型的菌株最多，有40株，占定型菌株的23．9％，为优势血清型菌株。采用微量稀释法药敏试验监测了180株鸡源大肠杆菌分离菌株对20种抗菌药物的耐药性，结果表明，除头孢曲松、头孢氨噻肟、头孢噻呋、阿米卡星、氟苯尼考外，分离菌株对其余15种抗生素均呈现出不同程度的耐药性，其中，172株大肠杆菌分离菌株对两种或多种抗生素有耐药性，对萘啶酸的耐药率最高(93．3％)，其次是四环素(88．9％)、氨苄青霉素(72．8％)、阿莫西林(7l、7％)、罗比沙星(64.4％)、沙拉沙星(62．8％)。大多数分离株对氟喹诺酮类药物有很高的耐药率(52．9％～93．3％)，并表现出多重耐药性，124株分离株表现为对2种以上氟喹诺酮类药物的耐药性。     

鸡大肠杆菌多价蜂胶灭活苗的免疫效果试验

选择鸡大肠杆菌现地菌株制成蜂胶灭活苗，用该苗免疫肉仔鸡２９组共３１５００只，结果表明，该苗安全，免疫后无不良反应，免疫后１４天，３０天，４０天监测，抗体凝集价达１：３２并逐渐上升到１：２５６。其中有２８组共３０５００只鸡未发生大肠杆菌病；只有１组（１０００只鸡）有４％发生了大肠菌病，且由于漏免所致，采取２～３个免疫量紧急接种，３天后鸡群停止死亡，免疫的鸡生产性能不受影响，而且增重快，生长发育良好，     

陕西省鸡胚源性大肠杆菌的分离鉴定

从陕西关中六个种鸡场的１９８只死胚及出壳弱雏中分离出９８株大肠杆菌,平均分离率为４９．５％。通过小鸡致病力试验,筛选出６３株具有致病力的菌株,占分离菌的６４．３％。生化鉴定表明,这些致病菌均符合大肠埃希氏菌的生化特性。血清型鉴定可确定６种,其中以Ｏ１、Ｏ２、Ｏ７８为主,分别占鉴定菌的４４．４％（２８／６３）、３３．３％（２１／６３）和９．５％（６／６３）,另三种为Ｏ２２、Ｏ７５、Ｏ８９共占８．０％（５／６３）。有３株未定型,占４．８％（３／６３）。用１６种抗生素进行药敏试验,对先锋霉素Ｖ和恩诺沙星高度敏感,对羧苄青霉素、氨苄青霉素、氯霉素、卡那霉素、磺胺嘧啶、新霉素、链霉素中度敏感。     

原场鸡大肠埃希氏菌多价灭活苗的制备及应用效果观察

用从豫北地区一家大型个体养鸡场分离到的致鸡大肠埃希氏菌病8个血清型菌株O1、O2、O78、O36、O11、O88和O50以及未知菌株的培养物,经0.4%的福尔马林灭活48h,制成原场大肠埃希氏菌多价灭活苗,含菌量为150亿/ml。分别免疫批10日龄鸡只,剂量0.2ml/只,使鸡只获得对原场大肠埃希氏菌株比较高的免疫力。该灭活苗的安全性和免疫原性良好,对同型菌株攻毒后对鸡只的保护率达90%以上,对鸡大肠埃希氏菌病有较强的预防作用。     

肉鸡大肠杆菌的分离鉴定

从豫、鲁、冀接壤地区部分肉鸡场送检的病料中分离出49株大肠杆菌,确定42株菌分属11个血清型,其中02、078、01、074、011为主要血清型,分别占分离株的26.2%,19.0%,11.9%,9.5%和9.5%,表明该地区血清型复杂.药敏试验表明,所分离的49株大肠杆菌对丁胺卡那霉素、氟本尼考、头孢噻呋最敏感,高敏菌株达94%～100%,可作为防治肉鸡大肠杆菌病的首选药物.     

interactions between escherichia coli and Newcastle disease virus in chickens

We investigated the interaction between Newcastle disease virus (NDV) and Escherichia coli in cell cultures, embryonated eggs, and 8-wk-old chickens. We measured the interactions on the basis of bacterial adherence and NDV hemagglutination titer in chickens, chicken embryos, and chicken embryo cell culture. Depending on the inoculation order of E. coli, a significant alteration of the growth of NDV was observed in both chickens and chicken embryos. When certain strains of E. coli were given before NDV exposure, the virus titers were lowered. In chickens, the mean virus titer was significantly (P < 0.05) lowered in the crop, the proventriculus, the gizzard, and the jejunum. However, there were no significant differences (P < 0.05) between the two groups for NDV titers in the duodenum, ileum, and cecum. In chicken embryos, when E. coli serotypes O78 and O119:B14 were inoculated before NDV exposure, the mean NDV titers were significantly (P < 0.5) lowered. However, there were no significant differences (P < 0.05) in NDV titer between the two groups when E. coli serotypes O78:K80:NM and O1ab:K NM were inoculated 24 hr before NDV exposure. When NDV was given prior to E. coli exposure, NDV titer was higher in both chickens and chicken embryos. In chickens, when NDV was given 48 hr before E. coli inoculation, NDV was detected in the proventriculus, gizzard, jejunum, ileum, and cecum, whereas no virus was detected in the control groups (NDV only). In the crop, NDV was detected at a significantly (P < 0.05) higher titer in the E. coli-inoculated group when compared with the control group that received NDV alone. In chicken embryos, virus titer was significantly (P < 0.05) higher when NDV was given 24 hr before E. coli inoculation for all three NDV strains used (Ulster and V4 strains). Adherence of E. coli to chicken embryo kidney (CEK) cells was significantly higher (P < 0.05) when the CEK cells were infected first with NDV and then by E. coli. The mean bacterial count per microscopic field in NDV-uninfected monolayers was eight compared with 112 for the NDV-infected monolayers. In approximately 10% of the fields in NDV-infected monolayers, the bacteria were too numerous to count.     

陕西某种鸡场大肠埃希菌血清型调查与灭活苗研制

为控制大肠埃希菌病的危害,对从陕西某种鸡场分离鉴定的20株鸡大肠埃希菌进行了血清型调查,结果O2型5株、O6型3株、O78型4株,未定型8株,表明鸡场的大肠埃希菌有了新的流行菌株O6出现。用定型的分离菌株研制的自家灭活菌苗免疫接种雏鸡,7 d后可检测到抗体,14 d产生免疫保护力。29日龄二免,90 d后抗体水平仍在5log2以上。119日龄三免,免疫后5个月抗体水平仍维持较高,但6个月后,抗体水平已在5 log2以下,失去保护力。通过3年的应用,该场种鸡大肠埃希菌病的平均死亡率由6.7%下降至1.6%,雏鸡死亡率由4.2%下降至1.8%,差异极显著(P<0.01)。     

滨海地区鸡致病性大肠埃希菌的分离鉴定

为了控制滨海地区鸡大肠埃希菌病的发生,对大肠埃希菌污染严重的部分鸡场进行了病原分离培养、血清型鉴定以及田间试验.结果表明,14株分离菌中有11株属于大肠埃希菌;分离株血清型主要有O78、O24、O93和O11 4种;免疫保护试验使大肠埃希菌病死率降低了6％.     

鸡胚中新城疫强毒的分离、鉴定与生物学特性研究

将来自有产蛋下降表现的一个肉用型父母代种鸡群的种蛋在实验室内孵化,每日观察鸡胚死亡情况。在孵化的24个鸡胚中有2个在孵化后8~9 d死亡,尿囊液有血凝性。在HI试验中,NDV单因子血清呈现26的HI滴度,对H9和H5亚型AIV单因子血清不呈血凝抑制活性,由此确定为新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV),分别命名为Tengz060104和Tengz060107。对该2个NDV分离株的生物学毒力指标进行测定,Tengz060104株的MDTI、CPI和IVPI分别为56.4 h、1.88和2.67,Tengz060107株的MDTI、CPI和IVPI分别为40.8 h、1.88和2.79。在6周龄SPF鸡攻毒后产生典型的ND症状的病变。表明来自鸡胚的2个分离株属强毒力、速发型NDV毒株。交叉HI中Tengz060104和Tengz060107相互间的同源性为100%,而与经典NDV毒株F48E8的同源性比较分别是66.7%和57.7%。从鸡胚中分离到新城疫强毒株在国内尚未见报道。     

抗菌肽CecropinB对人工感染大肠杆菌雏鸡的治疗效果研究

以1日龄来航蛋雏鸡为试验对象,研究重组抗菌肽CecropinB治疗雏鸡大肠杆菌感染的效果.120只雏鸡分6个组,每组20只,其中不同剂量抗菌肽治疗组又分为口服和肌内注射两个不同的处理,每个处理10只.致死剂量大肠杆菌肌内注射24 h后,肌内注射和口服不同浓度的重组CecropinB抗菌肽,连续治疗5 d.结果表明,重组抗菌肽CecropinB对大肠杆菌病有较好的治疗效果.其中高剂量(0.75 mL)口服组的效果最佳,治愈率达到80%,中剂量(0.5 mL)口服组与高剂量肌内注射组治愈率同为70%.中剂量肌内注射组与环丙沙星组效果一致,治愈率达到60%,低剂量抗菌肽治疗组治疗效果不如上述所有治疗组.与感染对照组相比,所有组别的雏鸡死亡率显著降低.