1株植物病原真菌拮抗细菌的鉴定

从泰山土壤中分离获得1株细菌4’531,对其进行了形态特征观察、生理生化特征测定及16S rDNA序列分析,并构建了包括其在内的10株相关种属菌株的系统发育树,最后研究了其对烟赤星病(Alternariaalternate)、黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum)、棉立枯病菌(Rhizoctonia solani)3种植物病原真菌的拮抗作用。结果表明,4’531菌株属于类芽孢杆菌属(Paenibacillus),与其亲缘关系较近菌株Paenibacillus polymyxa(AJ320493)的同源性达98%;结合形态和生理生化特征,鉴定该菌株为多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa),该菌株的16S rDNA序列已在GenBank中注册,登录号为DQ279739;4’531菌株对3种供试植物病原真菌均有明显的拮抗作用。     

细菌P-FS08的鉴定及其对几种植物病原真菌的拮抗作用

从油菜茎秆内油菜菌核病菌（Sclerotinia sclerotiorum）菌核上分离得到拮抗菌P-FS08，根据其形态特征和生理生化特性以及该细菌的16SrDNA部分序列的进化树分析，鉴定其为多粘芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa）。经平皿测试表明，多粘芽孢杆菌P-FS08菌株及其无菌滤液对烟草赤星病菌（Alternaria alternata）、小麦赤霉病菌（Fusarium graminearum）等多种植物病原真菌均有抑制作用。P-FS08培养液通过70％硫酸铵沉淀得到具有拮抗活性的蛋白粗提液，其具有良好的热稳定性；对蛋白酶K和胃蛋白酶均不敏感；能够使小麦赤霉病菌菌丝断裂，原生质浓缩。     

灰葡萄孢拮抗细菌的种类鉴定及生长条件研究

经形态和生理生化鉴定,对灰葡萄孢（Botrytis cinerea Pers.）拮抗能力强、防病效果好的3株细菌进行分类,W10为地衣芽孢杆菌[Bacillus licheniformis(Weigmann)Chester],W3和Y2－11－1为多粘类芽孢杆菌[Paenibacillus polymyxa(Prazmowski)Ash et al]。这2种对蔬菜灰霉病的高效拮抗菌为中国首次报道和应用。3株拮抗细菌的生长条件基本一致,最适培养时间为24－72h,最适生长温度是27－30℃,最适培养液pH值为7－8。     

多粘类芽孢杆菌LRS-1对番茄青枯病害根际土壤细菌群落的影响

通过对健康阴性对照(CK)、番茄青枯菌阳性胁迫处理(RS)和生防菌LRS-1+番茄青枯菌处理(LRS1)3个处理的盆栽番茄根际土壤样品16S rRNA基因的V3-V4区进行高通量测序,结合生物信息学相关分析,就多粘类芽孢杆菌LRS-1对番茄青枯病态根际土壤细菌多样性及互作网络的影响进行研究.结果表明:与健康土壤相比,青...     

甜瓜角斑病拮抗菌的鉴定及生长条件研究

G-14是从新疆昌吉及吐鲁番甜瓜根际土壤中筛选得到的一株革兰氏阴性生防菌,管碟法测定结果表明,它对3种甜瓜细菌性病原菌具有明显拮抗作用。根据形态观察、培养性状并结合微生物自动鉴定仪及对G-14的16SrDNA基因序列比对,对该菌株进行了鉴定。结果表明:拮抗菌G-14属于多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa),在第4 h进入对数生长期,最适生长温度为25~28℃,最适pH值6~7,为兼性厌氧菌。     

细菌P-FS08的鉴定及其对几种植物病原真菌的拮抗作用

从油菜茎秆内油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)菌核上分离得到拮抗菌P-FS08,根据其形态特征和生理生化特性以及该细菌的16S rDNA部分序列的进化树分析,鉴定其为多粘芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa).经平皿测试表明,多粘芽孢杆菌P-FS08菌株及其无菌滤液对烟草赤星病菌(Alternaria alteraata)、小麦赤霉病菌(Fusarium graminearum)等多种植物病原真菌均有抑制作用.P-FS08培养液通过70%硫酸铵沉淀得到具有拮抗活性的蛋白粗提液,其具有良好的热稳定性;对蛋白酶K和胃蛋白酶均不敏感;能够使小麦赤霉病菌菌丝断裂,原生质浓缩.     

灰葡萄孢拮抗细菌营养与发酵配方的研究

对新筛选的灰葡萄孢生防细菌即地衣芽孢杆菌（B acillus licheniformis)W10和多粘类芽孢杆菌（Paenibacillus polymyxa)W3、Y2-11-1的营养要求及发酵培养基配方进行了研究。结果表明：3株拮抗细菌的最佳发酵配方,菌株W10为1%麦芽糖、4%黄豆饼粉、0.2%NaNO3、0.02%K2HPO4和0.05%酵母膏,菌株W3为2%蔗糖、4%黄豆饼粉和0.4%酵母膏,菌株Y2-11-1为1%麦芽糖、2%黄豆饼粉、0.2%NaNO3、0.02%K2HPO4以及0.2%酵母膏。     

一株植物病原真菌拮抗细菌的分离与鉴定

从泰山土壤中分离获得一株对多种植物病原真菌具有拮抗作用的细菌。经过形态观察、生理生化特征分析及16S rDNA碱基序列测定和同源性分析,鉴定该菌株为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus),该菌株的16S rDNA序列已在GenBank中注册,登录号为AY756511。     

烟草黑胫病菌的拮抗根际细菌的筛选

 从重病田健株采集根际土样13份,分离根际细菌753株,室内平皿对峙筛选到拮抗烟草黑胫病菌的菌株98株,占分离菌株的12.7%。温室测定发现有20个菌株防治效果达40.0%以上,超过药剂对照的有4个菌株,防治效果分别为75.7%,78.6%,78.6%,79.3%。其中,大部分菌株对烟草有不同程度的促生作用。     

台湾蝴蝶兰上一种病原细菌的初步鉴定

从来自台湾的蝴蝶兰病叶上分离到一种引起叶斑症状的病原细菌.该病原菌为革兰氏阴性杆菌,1根或几根极生鞭毛,在蘑菇菌盖上引起凹陷斑点.经致病性测定、菌体形态、培养性状、生理生化特性和16S rDNA序列同源性以及系统发育学等方面的分析鉴定,确定该病原菌为托拉斯假单胞杆菌(Pseudomonas tolaasii Paine 1919).     

植物内生菌G-1菌株的鉴定及其拮抗物质的初步研究

[目的]G-1菌株为1株对多种病原真菌具有拮抗活性的植物内生细菌,本研究旨在明确G-1菌株的分类地位及其抗菌物质的主要类型。[方法]首先,采用平板对峙法分析其抑菌谱,然后通过形态学观测与分子检测相结合界定G-1菌株的分类地位,再进行理化性质测定的同时通过脂肽类抗生素编码基因簇分析,进一步研究该菌株代谢物中抗菌物质的主要类型。[结果]G-1菌株具有较强的抑菌活性(抑菌率69.1%～83.14%),是较广的抗菌谱(对9种病原菌均有抑制作用)。在形态分析的基础上,综合16SrDNA、gyrA和gyrB基因数据集分析,发现G-1菌株与甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)的相似度最高,达91%。菌株的理化特性分析发现,G-1菌株抗菌粗提物在热稳定性、酸碱稳定性及抗紫外辐射方面都有较好的表现,如121℃处理30 min后对番茄灰霉病菌的抑菌率为81.76%,与对照相比仍保持其86.7%的活性。特异引物扩增分析发现,G-1菌株拥有分泌ituA、fenA、srfC的能力,表明G-1菌株可能是通过分泌抗菌脂肽类物质达到抑菌的作用。[结论]菌株G-1为1株具有开发潜力的拮抗菌株,研究结果可为后期生防菌制剂的研发奠定基础和数据支撑。     

一株杀虫单降解细菌的筛选与生物学特性研究

从农药厂废水排放沟污泥中分离到一株对杀虫单有较强降解能力的细菌 ,编号为S 3。该菌能够以杀虫单为惟一氮源生长 ,初步鉴定为邻单胞菌 (Plesiomonassp .)。S 3具有广泛的碳源和氮源利用谱 ,其生长的最适 pH值为 7,最适温度范围为 35～ 4 0℃。杀虫单经S 3作用后 ,分析其残留物可能为沙蚕毒素。质粒检测未发现S 3有质粒。     

高效纤维素分解菌的分离鉴定及堆肥效果研究

采用CMC-Na平板法和刚果红染色法从自然发酵的牛粪中分离获得高效纤维素分解菌,通过形态学观察、生化试验及16S rDNA分子生物学对菌株进行鉴定,采用单因素法确定菌株的最佳培养条件,最后接种牛粪进行堆肥发酵观测其效果。结果表明:获得的菌株Y2鉴定为枯草芽孢杆菌;经产酶条件优化后,菌株Y2的滤纸酶活力(FPA)为15.83 u·mL~(-1),羧甲基纤维素酶活力(CMCA)高达100.81 U·mL~(-1),分别是优化前的1.3、2.76倍。堆肥试验结果表明:接种Y2组和EM菌剂组均在第3 d进入高温期(50℃),且高温期分别维持了9 d和8 d,接种Y2组纤维素降解率达到42%,而EM菌剂组为35%,接种无菌水组只有10.5%。菌株Y2在堆肥发酵方面具有较大的应用潜力。     

枯草芽孢杆菌YZU-S149的分离鉴定及对西瓜枯萎病的生防作用

西瓜枯萎病是由尖孢镰刀菌西瓜专化型(Fusarium oxysporum f.s p.niveum)引起的一种土传维管束病害,是西瓜(Citrullus lanatus)的主要病害之一.为筛选高效防治西瓜枯萎病的拮抗细菌,采用稀释涂布法和平板对峙法从对节白蜡(Fraxinus hupehensis)的根部及根际分离和筛选西瓜枯萎病菌的拮抗菌株,并测定其抑菌谱、生防特性以及盆栽防效,通过形态特征和16 S rDNA序列对其进行鉴定.结果共筛选得到有效菌株50株,其中YZU-S7、YZU-S149和YZU-S146这3株细菌拮抗效果较强,对西瓜枯萎病的抑菌率分别为68.90％、73.51％和75.34％,均具有广谱的抑菌作用和产纤维素酶、蛋白酶及嗜铁素的能力,对水稻纹枯病菌、小麦赤霉病菌、玉米茎基腐病菌、马铃薯晚疫病菌具有良好的抑菌效果.用菌株YZU-S7、YZU-S149和YZU-S146的发酵液灌根接种西瓜植株,其中YZU-S149对西瓜枯萎病的防治效果最为显著,其第3次灌根后18d时西瓜植株的病情指数为17.09,而对照植株的病情指数为70.83,其防效达到75.87％.经形态学和16S rDNA分析,将菌株YZU-S149初步鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis).结果显示菌株YZU-S149对西瓜枯萎病具有良好的生防潜力和开发应用前景.     

二甲基硫醚氧化菌的分离鉴定及其对猪粪堆肥的影响

从污水处理厂活性污泥中分离得到一株二甲基硫醚(DMS)氧化菌AM2,经16S rDNA检测鉴定其为那不勒斯硫杆菌(Thiobcillus neapolitanus)。AM2的最适生长温度为30℃最适pH为7.0。以猪粪和秸秆粉为原料进行肥料堆肥试验,通过检验菌株AM2对堆肥过程中DMS排放量、堆肥温度、可培养微生物和酶活性的影响,来探究菌株AM2对堆肥的影响。结果表明:接入菌株AM2的实验组DMS释放量显著(P0.05)少于对照组,在30 d的实验中有20 d减少60%以上;显著提高了(P0.05)可培养微生物数量,同时将物料温度高于50℃的天数延长至13 d;实验各组的脲酶、脱氢酶、过氧化氢酶、蛋白酶和纤维素酶酶活都显著高于对照组。综合判断,菌株AM2能够有效降低堆肥过程中DMS的排放量并促进肥料腐熟。     

夏秋栽培耐热优质西瓜品种筛选试验

在夏秋设施栽培条件下对引进的5个西瓜品种进行试验,比较抗逆性、丰产性、适应性、早熟性及品质等农艺性状。试验结果表明,5个品种中春光不适合江、浙、沪地区夏秋播大棚覆盖栽培;夏玲和秀玲的耐热性最好,果实的畸形率、裂果率及紫瓤率较低,适合夏秋季大棚覆盖栽培;秋红玉和秋丰适合江、浙、沪地区在7月中旬以后大棚覆盖栽培。5个品种中以夏玲的综合农艺性状表现最好。     

高产几丁质降解酶菌株的分离鉴定及其酶学性质研究

从海南热带海洋红树林土样中分离得到一株高产几丁质酶菌株HN12,经形态、生理生化和16S rDNA基因手段鉴定,其为一新种,命名为Chitiniphilus haikoumanggrovensis(GenBank No.HQ877498,type strain CGMCC No.5142)。单因素试验研究菌种酶学性质,结果显示:其最适酶反应温度为50℃,但在此温度下酶活力下降较快,综合酶的温度耐受性,酶促反应温度定为40℃;最适酶促反应pH值为7.0;在测试的9种金属离子中,未发现有金属离子能提高酶活力;酶解产物主要为几丁四糖;在优化后的酶解反应条件下测定酶活力达到2.1 U/mL。     

棉花黄萎病拮抗芽孢杆菌S12的筛选鉴定及拮抗机制的分析

[目的]近年来,新疆棉田由于长期连作导致棉花黄萎病呈逐年加重的趋势,筛选适合新疆特殊地理环境的高效拮抗菌株对防治棉花黄萎病尤为重要.[方法]采用平板对峙和琼脂平板扩散法从生长健康的棉花根际土壤中筛选拮抗细菌,利用常规PCR方法扩增拮抗细菌16S rRNA基因序列,应用BLAST进行同源性搜索,通过构建系统发育树并结合生理生化检测对拮抗细菌进行鉴定.用底物水解法检测其产生水解酶的能力,PCR方法检测其产生抗菌肽的潜力.[结果]枯草芽孢杆菌S12对大丽轮枝菌(Verticillium dahliae Kleb.)的抑菌率为56％,抑菌圈直径为20 mm,其发酵液对病原菌孢子萌发抑制率为95.93％,表现出较好的抑菌能力;菌株S12能合成蛋白酶,含有srfAA、spaS、bacA抗菌肽合成基因,具有一定的生防潜力.[结论]获得了可抑制大丽轮枝菌的芽孢杆菌菌株S12,并分析了其拮抗机制,为新疆棉花黄萎病的生物防治提供菌株资源和理论指导.     

海洋细菌N-LY-1菌株的农用功能活性研究及其种属鉴定

【目的】明确海洋细菌N-LY-1菌株的抑菌、促生作用及其促生机理,确定其分类学地位,为该菌株进一步开发为农用微生物制剂提供参考。【方法】以前期从江苏连云港海域鲈鱼肠道内分离获得的海洋细菌N-LY-1菌株为材料,采用平板对峙法、牛津杯法及室内盆栽试验测定N-LY-1菌株对12种植物病原真菌的抑菌作用及其对黄瓜的促生防病作用;通过测定N-LY-1菌株的解磷、解钾、固氮作用以及产吲哚乙酸（IAA）和铁载体能力,探明菌株的促生长作用机理;通过形态学观察、生理生化试验和16S rDNA序列分析,对菌株进行种类鉴定。【结果】N-LY-1菌株及其无菌发酵液对供试的12种植物病原真菌的抑菌带宽度均大于5.00 mm,均具有明显的抑菌作用,其中,其无菌发酵液对苹果轮纹病菌、小麦赤霉病菌、草莓灰霉病菌、苹果腐烂病菌、番茄早疫病菌和黄瓜枯萎病菌的抑制作用较强,抑菌带宽度在16.00 mm以上;其发酵液能促进黄瓜幼苗生长,在供试浓度范围内对黄瓜枯萎病的防治效果最高达81.5%;该菌具有固氮和解有机磷作用,能产生IAA和铁载体。结合菌落形态学观察、生理生化特征及分子生物学鉴定结果,将NLY-1菌株鉴定为海胆鞘氨醇单胞菌（Sphingomonas echinoides）。【结论】N-LY-1菌株是一株具有较强抑菌、防病及促进植物生长作用的海胆鞘氨醇单胞菌;固氮、解有机磷及产IAA和铁载体是该菌株的促生作用机制。N-LY-1菌株具有进一步开发为农用微生物制剂的潜力。