小反刍兽疫疫苗研究进展

小反刍兽疫是由小反刍兽疫病毒引起的一种严重的烈性、接触性重大跨国动物疫病.目前,该病在我国已经发生,给我国畜牧业经济造成了巨大损失.同多数病毒性疾病的防制相同,对小反刍兽疫PPRS的防制仍以疫苗免疫预防为主.文章对小反刍兽疫的各类疫苗进行综述,以期为疫苗的合理应用提供技术帮助.     

小反刍兽疫研究进展

小反刍兽疫是由小反刍兽疫病毒引起的一种急性接触性传染病,又称羊瘟、伪牛瘟等.小反刍兽疫自发现起在非洲、中东以及亚洲大范围流行,为发展中国家的养羊业带来了巨大的灾难,也影响了这些国家的经济.FAO-OIE于2015年发布了《PPR全球控制和根除战略》,目标为到2030年在全世界范围内消除小反刍兽疫.文章就小反刍兽疫的发现...     

小反刍兽疫研究进展

小反刍兽疫(PPR)是由小反刍兽疫病毒(PPRV)引起的急性或亚急性传染病,为世界动物卫生组织(OIE)法定报告的动物疫病,易感动物以山羊、绵羊等小反刍动物为主。目前,小反刍兽疫主要流行于西非、中非、中东、阿拉伯半岛及南亚等地区。敏感特异的检测方法和高效的预防性疫苗将为该病的防控奠定良好的基础。论文对小反刍兽疫全球流行现状、诊断技术及疫苗研究进展进行了综述。     

小反刍兽疫研究现状

小反刍兽疫(Peste des petits ruminants,PPR)是由小反刍兽疫病毒(Peste des petits ruminants virus,PPRV)引起的一种主要感染小反刍动物的急性、接触性传染病,发病率、死亡率高.近年来,小反刍兽疫(PPR)呈扩散的趋势,成为重要的跨国动物传染病之一,我国周边国家频繁器发该病.2007年7月25日暴发于西藏自治区日土县的我国首例小反刍尊疫疫情,更是对我国如何做好该病的防控工作提出了新的要求和挑战.为了增强广大兽医工作者和相关人士对本病的认识,文中就小反刍兽疫的病原学、流行病学、临床症状、病理特征以及诊断方法等方面的研究现状进行了综述.     

浅析小反刍兽疫及其防控策略

小反刍兽疫又俗称羊瘟,是由小反刍兽疫病毒引起的一种急性、接触性、病毒性传染病,主要感染绵羊、山羊等小反刍动物,在我国属于一类传染病,主要特征是发热、腹泻、口腔黏膜糜烂、流泪和肺炎.该病的发病率和病死率很高,曾在中国、印度、孟加拉国等多地暴发疫情,导致大量羊死亡淘汰.但是很多人对该病并不是很了解,因此,本文主要对小反...     

小反刍兽疫疫情的防控

对小反刍兽疫的流行病学、临床症状、剖检变化及诊断要点进行了总结,并介绍了相关防控措施,以期为临床有效防控小反刍兽疫提供参考。     

小反刍兽疫根除战略及现状分析

小反刍兽疫是由小反刍兽疫病毒引起的急性、烈性、高度传染性疾病,是WOAH法定报告动物疫病,对全球的畜牧业造成了严重的损失。FAO和WOAH联合制定了小反刍兽疫全球控制与根除战略。本文对小反刍兽疫全球控制与根除战略的内容和可行性进行了解读,并对我国小反刍兽疫防控情况进行分析,以期为我国小反刍兽疫的控制与根除提供参考。     

小反刍兽疫的研究进展

概述了小反刍兽疫的易感动物、临床症状及病原的理化特征和基因组结构，重点阐述了病毒6种结构蛋白的大小和组成、小反刍兽疫病毒的分离培养、血清学及分子生物学诊断技术，并对其传统疫苗以及新型基因工程疫苗的研制进行了详细论述，以为该病的流行病学研究、诊断和免疫防制提供参考。     

吉林省某羊群暴发小反刍兽疫

2014年3月底,从吉林省某羊群发生的临床以发热、流涎、口腔黏膜严重溃疡、呼吸困难、严重腹泻和高死亡率为特征的羔羊体内检测到130¹50nm的病毒粒子,该病毒命名为GZL-14毒株。应用RT-PCR从病羊体内扩增出小反刍兽疫病毒的基因序列。序列分析发现,GZL-14毒株N蛋白基因的核苷酸序列与国外分离株INDIA_1994和PRADESH_95的同源性最高,为99.3%,而与国内分离毒株China/Tib/07的同源性为99%;GZL-14毒株F蛋白基因的核苷酸序列与Izatnagar-94和Morocco-2008毒株的同源性最高,为98.1%,而与国内分离株China/Tib/07的同源性为97.2%,表明GZL-14株可能为新近由国外传入国内的毒株。本研究应用分子生物学手段,从病毒核酸水平首次确定吉林省某羊群新近发生的临床上以发热、流涎、口腔黏膜严重溃疡、呼吸困难、严重腹泻和高死亡率为特征的疫病为小反刍兽疫。     

小反刍兽疫流行状况及分子诊断技术研究现状

小反刍兽疫(PPR)是一种主要感染山羊和绵羊的传染病,病原为副黏病毒科麻疹病毒属的小反刍兽疫病毒(PPRV).PPRV基因组由6个基因组成,依据N和F基因可将PPRV分为4个谱系或者基因群,我国流行的PPRV属于谱系Ⅳ.2007年我国首次报道发生PPR疫情,在2014年大流行后,农业农村部加强了 PPR的防疫措施.目前...     

喷雾-复凝聚法制备小反刍兽疫缓释微囊疫苗的研究

建立了喷雾-复凝聚法制备灭活PPR微囊疫苗的工艺方法,并对制备的疫苗进行了主要性能指标测定和动物试验。结果显示：三批微囊形态均呈不规则长囊状,平均包埋率为42%,包埋前后灭活PPRV抗原活性得到较好保持。制备的灭活PPR微囊疫苗在免疫绵羊后1个月,中和抗体滴度均能达到1∶20以上,均高于小反刍兽疫弱毒疫苗1∶10的质量标准,最高可达到1∶160;且中和抗体滴度至少能持续7个月,呈现出良好的缓释效果,是一种具有广阔应用前景的新型疫苗。     

贵州山区小反刍兽疫综合防控措施

小反刍兽疫又被称为羊瘟或伪牛瘟,是小反刍兽疫病毒引起的山羊及绵羊的一种急性接触性传染病,以发热、口炎、腹泻、肺炎为特征,该病发病率和病死率均较高,严重阻碍畜牧业高质量发展,研究该病的诊断及防控有着十分重要的意义。本文从该病的流行病学、临床症状、病理变化、实验室诊断方法以及综合防控措施等方面进行阐述,为广大养殖户提供参考。     

小反刍兽疫的流行动态及疫苗的研究进展

小反刍兽疫（Peste des petits ruminants,PPR）是由副黏病毒科麻疹病毒属的小反刍兽疫病毒（Peste des petits ruminants virus,PPRV）引起的包括一些野生动物在内的小反刍动物的一种急性、烈性、致死性、高度接触性传染病。自从首次发生以来一直呈扩大趋势,成为了严重危害畜牧业生产安全的重大跨国动物疫病之一。疫苗接种是预防和控制小反刍兽疫的重要手段。本文阐述了该病的流行动态,并介绍了几种小反刍兽疫疫苗的研究进展,为该病的研究和有效防控提供理论依据。     

小反刍兽疫诊断方法的研究进展

小反刍兽疫（Peste des petits ruminants,PPR）是由副黏病毒科麻疹病毒属的小反刍兽疫病毒（Peste des petits ruminants virus, PPRV）引起的包括一些野生动物在内的小反刍动物的一种急性、烈性、致死性、高度接触性传染病,是严重危害畜牧业生产安全的重大跨国动物疫病之一。近年来,全球PPR疫情复杂,我国周边多个国家呈地方性流行态势。我国近期也陆续在多个省份发现疑似和确诊疫情。2014年3月27日,农业部宣布针对小反刍兽疫疫情启动一级响应。加强小反刍兽疫诊断工作、加快新型诊断试剂研发工作是当下做好防控小反刍兽疫的必要前提和必然要求,本文介绍了几种小反刍兽疫诊断方法的研究进展,为该病的诊断和有效防控提供理论依据。     

小反刍兽疫病毒核衣壳蛋白抗原性与特异性的比较

为筛选建立小反刍兽疫病毒N蛋白双抗原夹心ELISA抗体检测方法的抗原原料,本研究通过优化大肠杆菌密码子、优化蛋白表达与纯化条件等方法,分别在pET-30a与pET-32a两个不同原核表达载体中成功获得了可溶性的小反刍兽疫核衣壳蛋白(N)。分别对重组大肠埃希氏菌pET-30a-(N)-BL21(DE3)株与pET-32a-(N)-BL21(DE3)株种子批的P7代与P20代进行蛋白诱导表达与抗原提取纯化,共获得6批小反刍兽疫病毒pET-30a-(N)蛋白与pET-32a-(N)蛋白,并对蛋白的浓度、纯度、抗原性和特异性进行检验。结果表明两个纯化后的重组抗原与羊小反刍兽疫病毒阳性血清有明显反应,具有较好的反应性,而与羊痘病毒阳性血清、羊口蹄疫病毒阳性血清、山羊关节炎/脑炎病毒阳性血清等特异性血清均无交叉反应,具有较好的特异性。本研究结果为今后以N蛋白为基础建立相应的抗原捕获ELISA方法,竞争ELISA检测方法、间接ELISA检测方法以及双抗原夹心ELISA抗体检测方法打下了坚实的基础。     

中国西藏小反刍兽疫的发生状况与防控

2007年7月,我国首次在西藏自治区阿里地区发生了小反刍兽疫疫病流行.从2007年7月9日到11月15日,先后在阿里地区革吉、日土、札达、改则4个县出现疫情,共20个疫点,羊发病6122只,死亡1888只.2008年6月,在那曲地区尼玛县双湖区再次发现小反刍兽疫疫情,病羊及同群羊合计6690只.为消灭该病,采取了扑杀、...     

小反刍兽疫病毒H蛋白原核表达的研究

小反刍兽疫病毒属副粘病毒科麻疹病毒属,为一不分节段的负链RNA病毒。本研究以灭活的检测用抗原为材料,抽提基因组RNA作为模板,根据GenBank下栽的序列及载体的需要设计其主要的抗原基因H基因的编码序列的RT—PCIL扩增引物;然后将扩增基因片段与T载体连接克隆测序,再与原核表达载体pET100／D—TOPO连接、诱导表达。结果显示所设计引物对模极有预期扩增,序列测定表明为正确片段;片段经纯化与表达载体连接,已挑到阳性克隆。H基因的表达菌经IPTG诱导,SDS—PAGE电泳。结果显示：H基因有预期分子量大小的蛋白表达;用Anti—His抗体已检测到相应融合蛋白的表达,其原核表达的相应蛋白抗原性状况正在试验研究中,表达产物具有潜在的诊断抗原和免疫原价值。     

携带小反刍兽疫病毒H基因的重组山羊痘病毒构建和鉴定

将小反刍兽疫病(PPRV)毒糖蛋白基因H插入到山羊痘病(GPV)毒通用转移载体PtkPgpt-egfpP启动子P7.5的下游,构建了重组山羊痘病毒转移载体PtkPgpt-egfpPpprv-H。该重组转移载体转染感染山羊痘病毒疫苗株的绵羊睾丸细胞中,通过同源重组获得小反刍兽疫病毒H基因重组山羊痘病毒,通过纯化和PCR鉴定,证明小反刍兽疫病毒H基因插入到山羊痘病毒基因组中。本研究为进一步研究PPRVH基因重组山羊痘病毒的免疫原性奠定了基础。     

Selection and identification of single-domain antibody against Peste des Petits Ruminants virus

BackgroundPeste des petits ruminants (PPR) is an infectious disease caused by the peste des petits ruminants virus (PPRV) that mainly produces respiratory symptoms in affected animals, resulting in great losses in the world''s agriculture industry every year. Single-domain variable heavy chain (VHH) antibody fragments, also referred to as nanobodies, have high expression yields and other advantages including ease of purification and high solubility.ObjectivesThe purpose of this study is to obtain a single-domain antibody with good reactivity and high specificity against PPRV.MethodsA VHH cDNA library was established by immunizing camels with PPRV vaccine, and the capacity and diversity of the library were examined. Four PPRV VHHs were selected, and the biological activity and antigen-binding capacity of the four VHHs were identified by western blot, indirect immunofluorescence, and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) analyses. ELISA was used to identify whether the four VHHs were specific for PPRV, and VHH neutralization tests were carried out. ELISA and western blot analyses were used to identify which PPRV protein was targeted by VHH2.ResultsThe PPRV cDNA library was constructed successfully. The library capacity was greater than 2.0 × 10⁶ cfu/mL, and the inserted fragment size was approximately 400 bp to 2000 bp. The average length of the cDNA library fragment was about 1000 bp, and the recombination rate was approximately 100%. Four single-domain antibody sequences were selected, and proteins expressed in the supernatant were obtained. The four VHHs were shown to have biological activity, close affinity to PPRV, and no cross-reaction with common sheep diseases. All four VHHs had neutralization activity, and VHH2 was specific to the PPRV M protein.ConclusionsThe results of this preliminary research of PPRV VHHs showed that four screened VHH antibodies could be useful in future applications. This study provided new materials for inclusion in PPRV research.