高效液相色谱法同时测定饲料中5种合成类抗氧化剂含量

本文旨在建立同时测定饲料中没食子酸丙酯(PG)、特丁基对苯二酚(TBHQ)、乙氧基喹啉(EQ)、丁基羟基茴香醚(BHA)和二丁基羟基甲苯(BHT)5 种合成类抗氧化剂含量的高效液相色谱法。 试样经超声波辅助乙腈直接提取,提取液经有机相针式滤器过滤净化后,采用十八烷基键合相(C₁₈)柱为色谱柱 (长 150 mm×内径 4.6 mm,粒径 5 μm),乙腈-2%乙酸溶液(65 + 35,V₁+V₂)为流动相 ,流速为 0.5 m L/min,检测波长为 280 nm,柱温为 20 ～ 30℃。 在此实验条件下,PG 在质量浓度 0.50 ～ 25.00 μg/mL,TBHQ、EQ、BHA 和 BHT 在质量浓度 1.00 ～ 50.00 μg/mL 内均与峰面积呈良好的线性关系(相关系数 r² > 0.999);PG、TBHQ、EQ、BHA 和 BHT 的检出限分别为 1.8、1.9、2.0、1.9、5.0 mg/kg,定量限分别为 8.8、8.6、8.9、8.7、10.0 mg/kg;PG、T...     

高效液相色谱法测定复方非泼罗尼滴剂中抗氧剂的含量

建立高效液相色谱法(HPLC)测定复方非泼罗尼滴剂中抗氧剂叔丁基对羟基茴香醚(BHA)与二丁基羟基甲苯(BHT)含量。采用高效液相色谱法,色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18(250×4.6 mm, 5μm),流动相A为乙腈-甲醇-水(47∶21∶32),混合前在水中加入1%冰醋酸,流动相B为乙腈,线性梯度洗脱;检测波长为285 nm;流速为0.9 mL/min;柱温为30℃;进样量为20μL;采用外标法计算BHA、BHT含量。在建立的色谱条件下,空白溶液、阴性样品对BHA、BHT的测定均无干扰;BHA、BHT的检测限分别为0.08μg/mL和0.19μg/mL,定量限分别为0.31μg/mL和0.77μg/mL,分别在5.13～15.39μg/mL与2.56～7.66μg/mL范围内线性关系良好;平均回收率分别为98.5%和99.9%(n=9)。所建立的方法简单易行、专属性强、准确度高、灵敏度好,可用于复方非泼罗尼滴剂中抗氧剂的含量测定。     

凝胶渗透色谱净化-气相色谱法同时测定饲料中4种抗氧化剂

本文建立了凝胶渗透色谱净化(GPC)-气相色谱法(GC)同时测定饲料中2,6-二叔丁基对甲酚(BHT)、叔丁基羟基茴香醚(BHA)、叔丁基对苯二酚(TBHQ)和乙氧喹(EQ)4种抗氧化剂方法。4种抗氧化剂在10～400mg/L时与峰面积有良好的线性关系(r2>0.9999),检出限(3S/N)为0.37～0.46 mg/kg,添加回收率为82.7%～98.8%,相对标准偏差(n=5)为1.7%～4.3%。     

抗氧化剂的制备及其应用

本文介绍了饲用抗氧化剂乙氧基喹啉、二丁基羟基甲苯(BHT)、丁基羟基茴香醚(BHA)、没食子酸丙酯的制取方法、生产现状及其应用。     

毛细管胶束电动色谱法检测饲料中防腐剂

建立了同时分离测定山梨酸(SA)、苯甲酸(BA)、对羟基苯甲酸甲酯(MP)、对羟基苯甲酸乙酯(EP)、对羟基苯甲酸丙酯(PP)、对羟基苯甲酸丁酯(BP)6种防腐剂的胶束电动毛细管色谱方法。以十二烷基硫酸钠(SDS)-磷酸盐-硼砂缓冲体系为缓冲液,pH为7.73,电压为20 kV,于245 nm波长下对样品进行检测。结果表明,6种防腐剂均在14 min内实现很好分离,SA、BA的线性范围分别为0.5～150μg/mL和15～200μg/mL,MP、EP的线性范围均为2～200μg/mL,PP的线性范围为5～200μg/mL,BP的线性范围为1～200μg/mL,线性相关系数为0.9987～0.9995,平均回收率为89.7%～96.7%,RSD≤5.91%,检测限为0.25～10μg/mL。     

气相色谱法测定饲料中的特丁基对苯二酚

利用乙酸乙酯直接提取猪饲料和鱼粉中的抗氧化剂特丁基对苯二酚(TBHQ),并用气相色谱法 测定其含量.采用安捷伦ECTM-1毛细管柱(30 m×直径0.25 mm),氢火焰离子化检测器,外标法定量测量,试验结果表明:标准曲线在10～250μg/mL范围内相关系数＞0.999 3,最低检出限为0.002 g/kg,样品加标回收率为95 %～103%,标准偏差分别为2.49%和1.88%,方法具有操作简便、灵敏度高和重现性好等优点.     

生大黄和大黄炭中5种化学成分的变化规律研究

为建立大黄及大黄炮制品大黄炭中芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚及没食子酸5种化学成分测定的高效液相色谱(HPLC)方法,分析这5种化学成分含量的变化规律并探讨炭制对大黄中5中化学成分的影响,采用HPLC色谱法,色谱柱C18,流动相为1 mL/L磷酸水(A)-甲醇(B)梯度洗脱,流速为1.0mL/min,检测波长为254nm(没食子酸为260nm),柱温为40℃(没食子酸为25℃),进样量为20μL。结果表明,芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚及没食子酸检测进样量线性范围分别为0.766 9μg～12.279μg(r=0.999 95)、0.426μg～6.816 9μg(r=0.996 82)、0.768 3μg～12.292 8μg(r=0.999 95)、5.852μg～94.856 9μg(r=0.995 61)、4.751μg～76.025μg(r=0.999 02);精密度、稳定性、重复性试验RSD<5%。大黄经过炒碳以后芦荟大黄素增加1.755倍、大黄酸增加1.323倍、大黄素增加1.344倍、大黄酚增加2.473倍、没食子酸增加了1.044倍。说明生大黄经过炒碳以后会发生化学成分含量的明显改变。     

气相色谱法测定饲料中BHT和EQ两种抗氧化添加剂

建立了饲料中BHT(2,6-二叔丁基对甲酚)和EQ(乙氧基喹啉)两种抗氧化剂的气相色谱检测方法。经过前处理优化后,样品经过异丙醇超声提取4 h,用气相色谱氢焰离子化检测器(GC-FID)测定。结果表明,在50~900 mg/L浓度范围内,BHT和EQ的峰面积均与其浓度呈线性相关,R2≥0.999,BHT和EQ方法检出限分别为0.015%和0.02%,添加回收率为77.89%~90.53%,相对标准偏差为2.27%~8.35%。     

合成抗氧化剂对尼罗罗非鱼免疫系统的影响

乙氧基喹啉（6-乙氧基-1，2-二氢化-2，2，4-三甲基喹啉，EQ）是合成抗氧化剂的一种，能避免脂类氧化过程中自由基的生成，广泛应用于动物商业饲料，如鱼类、畜禽、宠物等。在鱼粉运输过程中也用干预防变质。日本对动物饲料合成抗氧化剂的使用规定与欧洲联盟（EU）一致，单独使用或者与其它抗氧化剂（二丁基羟基甲苯，BHT；丁基羟基茴香醚，BHA）混合使用时最大量为150mg／kg。     

高效液相色谱法同时测定饲料中多种酚类抗氧化剂和尼泊金酯类防腐剂

实验建立了同时测定饲料中4种酚类抗氧化剂(没食子酸丙酯、丁基羟基茴香醚、二丁基羟基甲苯、特丁基对苯二酚)和3种尼泊金酯类防腐剂(尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、尼泊金丙酯)的高效液相色谱方法。样品以甲醇-乙腈溶液(30∶70,V/V)超声提取后经Inertsil ODS-sp C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分离,用甲醇/乙酸铵溶(pH=3.5)作流动相梯度洗脱,分别在波长256 nm和280 nm进行检测,外标法定量。结果表明,7种物质浓度为0.1～100.0μg/mL时与峰面积呈良好的线性关系,相关系数均大于0.9999,检出限(3S/N)为0.027～0.102 mg/L,平均回收率为79.62%～112.29%,相对标准偏差(n=6)为2.65%～8.38%。     

高效毛细管电泳检测牛奶中氨苄青霉素和阿莫西林残留方法的建立

建立了高效毛细管电泳同时检测牛奶中残留氨苄青霉素和阿莫西林的方法。牛奶样品采用三氯乙酸溶液沉淀蛋白,在30 mmol/L硼砂缓冲液,pH 7.8,检测波长198 nm,运行电压18 kV,温度25℃的电泳条件下,两种药物完全分离。氨苄青霉素在10μg/mL~100μg/mL的浓度范围内线性良好相关系数为0.998 9,阿莫西林在5μg/mL~100μg/mL的浓度范围内线性良好相关系数为0.999 8。两种药物的平均加标回收率范围为80%~92%,变异系数(CV)范围为3.02%~10.11%。该方法检测牛奶中残留的氨苄青霉素和阿莫西林较为快速、简便。     

高效毛细管电泳法同时检测饲料中七种防腐剂

建立酸性条件下同时分离测定山梨酸(SA)、苯甲酸(BA)、脱氢乙酸(DHA)、对羟基苯甲酸甲酯(MP)、对羟基苯甲酸乙酯(EP)、对羟基苯甲酸丙酯(PP)、对羟基苯甲酸丁酯(BP)七种防腐剂的高效毛细管电泳法。本试验用甲醇:水=1:1(体积比)的混合液作为提取剂提取饲料样品中防腐剂;以40 mmol/l磷酸二氢钾(KH2PO4)和100 mmol/l十二烷基硫酸钠(SDS)的1:1体积比混合液(pH=4.00)作为缓冲液,采用高效毛细管胶束电动色谱法测定样品中七种防腐剂。该方法在19 min内实现了七种防腐剂的分离;SA、BA的线性范围分别为1～500μg/ml和3～500μg/ml,DHA、MP、PP、BP、PP的线性范围均为5～500μg/ml,线性相关系数≥0.999 5。SA、BA、DHA和四种对羟基苯甲酸酯类防腐剂的检测限分别为0.5、1.5、3.0、2.5μg/ml;样品平均回收率为80.8%～107.0%,相对标准偏差≤5.0%。该方法高效快速分离了多种防腐剂,并且可以应用到各种饲料样品的检测。     

高效液相色谱法检测饲料中的着色剂

实验建立了同时分离检测饲料中叶黄素、斑蝥黄、β-胡萝卜素3种着色剂的高效液相色谱法。样品用乙腈-丙酮提取,以甲醇-二氯甲烷为流动相在1.2 mL/min的流速下进行梯度洗脱。该方法在6 min内实现了3种着色剂的基线分离,叶黄素、斑蝥黄的线性范围为0.05～200μg/mL,β-胡萝卜素的线性范围为0.5～200μg/mL,线性相关系数≥0.9991。叶黄素、斑蝥黄、β-胡萝卜素的检测限分别为0.025、0.020、0.25μg/mL;样品平均回收率为80.1%～105.0%,相对标准偏差<5.00%。     

饲料中油脂过氧化值检测方法的研究

本文通过对饲料中油脂提取方法进行优化,建立了检测饲料中油脂过氧化值的有效方法。优化后的过氧化值测定方法为:将TBHQ(m(TBHQ)=饲料重×饲料含油率×200 mg/kg)添加到饲料中搅拌均匀,称取50 g含TBHQ的饲料到500 mL圆底烧瓶中,加入150 mL[料液比(g/mL)=1∶3]正己烷。在30℃搅拌下回流浸取0.5 h。反应结束后,在4500 r/min下离心5 min,然后旋蒸,旋蒸脱溶后按GB/T 5538-2005中方法测定过氧化值。结果表明,过氧化值为3~20 mmol/kg,线性关系良好,线性相关系数为0.9981,多次实验平均过氧化值(PV)回收率为95.56%~106.83%,且不受饲料含油率影响。     

大豆黄酮对多氯联苯引起的鸡胚下丘脑星形胶质细胞损伤的缓解作用

实验建立了鸡胚下丘脑星形胶质细胞体外培养模型,研究了大豆黄酮对多氯联苯Aroclor 1254(A1254)引起的下丘脑星形胶质细胞损伤的缓解作用。结果表明:0.1～1μg/mL的A1254引起的细胞损伤不显著,高剂量时(10μg/mL)能引起星形胶质细胞大量死亡。抗氧化剂大豆黄酮10μg/mL能明显缓解A1254对星形胶质细胞的损伤作用。     

6种新型抗氧化剂及组合清除自由基活性的研究

试验采用DPPH·法测定6种抗氧化剂及组合的抗氧化活性.结果表明,6种抗氧化剂及组合均有较高的抗氧化活性,其中茶多酚、朝鲜蓟多酚和6%水溶性迷迭香提取液的IC50分别达到1.18、27.34μg/mL和0.23mg/mL,并且抗氧化剂浓度与其抗氧化活性间有良好的量效关系.抗氧化剂组合中茶多酚 TBHQ组合抗氧化活性最高,茶多酚 VC组合次之.     

没食子酸对猪精液常温保存的效果及浓度筛选

本实验旨在研究不同浓度没食子酸(GA)对猪精液常温(17℃)保存效果的影响并筛选没食子酸的浓度范围。在猪精液稀释剂中分别添加不同浓度(0、5、6、7、8、9、10μg/mL)没食子酸,于不同保存时间测定猪精子的活率、A+B级精子数、质膜完整率及顶体完整率指标。结果表明,保存第1～3 d各浓度组间指标无明显差异(P0.05),保存第5 d, 6、9μg/mL组除组质膜完整率极显著高于对照组(P0.01),保存第5、7 d时,7、9μg/mL组精子活率显著高于对照组(P0.05);保存至第9 d时9μg/mL组活率显著高于对照组(P0.05)。综上表明,一定浓度范围的没食子酸有助于提高常温(17℃)保存下猪精液的质量,并延长保存时间。     

不同抗氧化剂对猪精液冷冻保存效果的影响

在LEY冷冻稀释液基础上分别添加不同浓度维生素C(0、5、10、20、40、60 mmol/mL)、维生素E(0、0.2、0.5、1.0、2.5、5.0 mg/mL)、SOD(0、100、200、400、600 IU/mL)、CAT(0、50、100、200、300 IU/mL)、GSH(0、1、5、10 mmol/mL)等抗氧化剂,检测冷冻-解冻后精子活力、活率、质膜完整率、顶体完整率、平衡后和解冻后精子MDA含量,以观察5种抗氧化剂对猪精液冷冻保存效果的影响。结果表明:在冷冻稀释液中联合添加100 IU/mLSOD和200 IU/mL CAT明显提高冷冻-解冻后精子活力、活率、质膜完整率和顶体完整率(P<0.01)。     

银杏叶复方对脾虚小鼠小肠淋巴细胞体外增殖的影响

为了探究不同浓度的银杏叶复方在脂多糖(LPS)或植物血凝集素(PHA)刺激下对脾虚小鼠小肠淋巴细胞体外增殖的影响,试验用不同浓度的银杏叶复方(200μg/mL、100μg/mL、10μg/mL、1μg/mL、0.1μg/mL)同LPS或PHA刺激小肠淋巴细胞分裂增殖的方法研究对小鼠淋巴细胞体外增殖的影响。结果表明:对于脾虚小鼠小肠B淋巴细胞,以200μg/mL、100μg/mL的浓度刺激效果最佳(P0.05);相比于1μg/mL、0.1μg/mL浓度,浓度为200μg/mL时更有利于正常小鼠小肠B淋巴细胞增殖(P0.05);对于脾虚小鼠小肠T淋巴细胞,以100μg/mL浓度最佳(P0.05),浓度为200μg/mL和100μg/mL时对正常小鼠小肠T淋巴细胞的刺激增殖效果显著(P0.05)。说明银杏叶复方浓度为200μg/mL、100μg/mL时能有效刺激正常和脾虚小鼠的小肠淋巴细胞分裂增殖。     

利用酶法简捷测定鸡蛋总胆固醇含量研究

本文利用商品血清胆固醇试剂盒(酶法)建立了一种快速、简单、准确测定鸡蛋总胆固醇含量的方法。取全蛋液约500 mg(蛋黄液约200 mg)用5 000μL乙醇旋涡振荡提取1 min,离心10 min(10 000 r/min),取200μL上清夜与2 000μL测定试剂混匀,37℃保温10 min,测定500 nm的吸光值。本方法线性范围为0～120μg胆固醇,测定极限约0.40μg、0.15μg,在1 h内可以测出鸡蛋胆固醇含量。利用本文建立的方法对3种鸡蛋胆固醇含量进行了测定,每克可食部分含量为3.88～3.95 mg,每枚含量范围为198.9～210.1 g,平均为206.4 mg。