絮凝剂产生菌M-2的紫外诱变选育及发酵条件研究

以絮凝剂产生菌Galactomyces sp.M-2为出发菌株,通过紫外诱变选育出一株产絮凝剂的高效菌株UVM8,其絮凝活性可达92.8％.稳定性试验结果表明该菌株稳定性良好.研究发酵液的碳氮比、pH值等培养条件,发现发酵液中碳源和氮源比为20 g/L∶2 g/L、pH值为7或8时最有利于UVM8菌株产微生物絮凝剂.     

絮凝剂高产菌株的离子注入诱变选育

[目的]提高生物絮凝剂的絮凝活性。[方法]以絮凝剂产生菌FJ-15为出发菌株,采用低能N＋注入的方法对其进行诱变处理,从突变体中筛选高絮凝活性、性能稳定的菌株,并检测其絮凝活性。[结果]N＋注入剂量为2×10^14ions/cm^2时,菌株存活率较低,随N＋注入剂量增加,菌株存活率呈上升趋势,当N＋注入剂量为8×10^14ions/cm^2时,菌株存活率最高（75.34%）,当N＋注入剂量为1×10^16ions/cm^2时,正突变率较大;通过初筛试验,得到了193株正突变菌株;通过复筛试验,得到了3株高絮凝活性的菌株FJM-10、FJM-19、FJM-29,其絮凝率分别为93.81%、86.64%、83.65%,平均较原菌株的絮凝活性（64.55%）高20%左右。其中,FJM-10菌株的稳定性最好,絮凝活性最高。[结论]FJM-10菌株的最佳发酵碳源和氮源分别为葡萄糖（或麦芽糖）和蛋白胨（或尿素）。     

微生物絮凝剂产生菌的选育及条件优化

煤矿废水处理是当前的研究热点,为了考察微生物絮凝剂在生物处理方面的应用前景,采用常规微生物分离方法从土壤中筛选出一株具高效絮凝活性的真菌(3716),同时对其培养条件进行研究。结果显示:其最佳的碳源为葡萄糖,最佳氮源为蛋白胨,最适生长条件为25℃,初始值为6.0,摇床转速为150 r/min,培养时间为144 h,絮凝率最高可达91.71%。     

紫杉醇产生菌的紫外诱变

紫杉醇是一种抗癌的特效药,对各类癌症具有显著疗效。由于紫杉醇原料的不足是限制应用的难点。在紫杉醇的生产工艺中,利用微生物发酵法具有一定优势。但是利用此种方法生产的紫杉醇产量较低,所以关键在于高产菌株的筛选。实验以经初部诱变和生物工程选育的J1-3、Z35-845s作为出发菌株。经紫外诱变选育,紫外灯为18W,照射距离2lcm,分别在45、90、120s3点诱变,观察诱变后的致死百分率、突变百分率、正变百分率和层析结果,选育出高产菌株。     

紫外诱变选育高效降酚菌及其降酚性能研究

[目的]从自然土壤中筛选出以苯酚为唯一碳源的高效降酚菌并研究其降酚特性。[方法]采用逐量分批驯化筛选降酚菌,通过紫外诱变技术,进一步提高苯酚降解能力。[结果]筛选出1株可降解高浓度苯酚的菌株,经鉴定为酵母菌（Pityrosporum sp．）,菌株最高耐酚浓度为1800mg／L。同时研究了不同条件如培养温度、pH值、转速、接种量等对苯酚降解的影响。结果表明,最佳温度为28℃、pH值6．0、转速130r／min,在有氧条件下,48h内对500mg／L苯酚降解率可达96．3％,经过紫外诱变后36h内可将500mg／L苯酚完全降解。采用正交试验设计方法确定了该菌株的最佳降酚条件为温度28℃,pH值6．0,NaCl浓度1．0g／L,装瓶量50ml。[结论]经过紫外诱变技术构建的高效苯酚降解菌其降酚性能比野生菌株有较大提高,可为合酚废水的工业处理提供理论依据和试验基础。     

微生物絮凝剂产生菌的筛选及其絮凝特性研究

采用高岭土悬浊液法从土壤和活性污泥中筛选出一株高絮凝活性的菌株,通过测定其16S rDNA基因序列鉴定该菌为弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter Freundii)。研究发现,该菌不仅能分泌具有絮凝活性的代谢产物,而且菌体自身具有一定的絮凝能力;在培养48 h能达到最大絮凝活性为79.16%,最大絮凝活性可持续到发酵后96 h。Ca2+是该菌最好的助凝剂,终浓度为300 mg/L时,絮凝效果最好。在pH为8时,该菌絮凝率高达89.80%,并在pH 5~10时能保持较高絮凝率。     

微生物絮凝剂产生菌培养基的优化

本研究以松花江附近树根土为试验材料,筛选出具有絮凝活性的微生物菌株16 株,其中编 号为S-2 的菌株絮凝活性最高,达到76.8%。使用单因素与正交试验对其培养基碳源、氮源种类与浓 度和pH 进行优化,最优培养基组成为葡萄糖3.5%,蛋白胨0.2%,NaCl 0.5%,pH 值7.5,在此条件下,絮 凝剂产生菌S-2 絮凝活性可达92.8%。     

高效絮凝剂产生菌的分离选育及培养条件优化

为了研究微生物产絮凝剂的最佳培养条件,由此提高微生物絮凝剂的絮凝率。以采集于山西省晋阳湖湖心岛和平定县玉米地10~15 cm深处土壤为试验样品,通过常规细菌分离和高岭土悬浊液法,从中筛选出编号为PY-M3和PY-F6絮凝活性较高的2株菌株。优化培养试验表明,菌株PY-M3的最佳培养条件为:培养时间72 h,碳源为葡萄糖,含量为2 g/50 mL,氮源为复合氮源,培养基初始p H值为7.0,培养温度为30℃,摇床转速180 r/min,碳氮比值45,接种量2%;在最佳培养条件下,其发酵液絮凝率从92.57%提高到94.43%。菌株PY-F6的最佳培养条件为:培养时间72 h,碳源为葡萄糖,含量为0.5 g/50 mL,氮源为酵母膏,培养基初始pH值为7.0,培养温度为30℃,摇床转速140 r/min,碳氮比值30,接种量3%;在最佳培养条件下,其发酵液絮凝率从95.95%提高到98.61%。     

微生物絮凝剂产生菌的筛选及其絮凝特性初步研究

从浓缩污泥中筛选到1株微生物絮凝剂产生菌,初步探讨了培养基不同碳源和氮源、不同接种量、培养时间对絮凝活性的影响,并对该菌进行生理生化鉴定、絮凝活性分布、替代培养基试验。试验结果表明,该菌在最佳培养条件下对高岭土悬浊液的絮凝率为87.14%;革兰氏阳性杆状细菌,属于固氮菌;微生物絮凝剂主要分布在发酵液离心后的上清液中,且絮凝效果优于0.1%聚丙烯酰胺;该菌能在沼液中生长,且发酵液絮凝率为76.82%。     

中生菌素产生菌的紫外诱变育种

以中生菌素产生菌C5为出发菌株,经过紫外诱变处理,获得突变株UV-69,其摇瓶发酵效价比出发菌株提高30.2%。传代试验表明,该突变株的高产性能遗传特性较稳定。在15t发酵罐上连续5批验证,平均发酵效价比原生产水平提高47.8%。     

生物絮凝剂产生菌的筛选及絮凝活性研究

从活性污泥中经过初筛复筛得到了一株絮凝率为94.3%的絮凝剂产生菌。对该菌株所产的生物絮凝剂单因素试验结果表明,最佳絮凝条件为:静置时间为3~5 min,生物絮凝剂投加量为2 mL,温度为20℃,pH为7~8、CaCl_2加入量为0.5 mL。对该菌株所产生物絮凝剂的正交试验结果表明,最佳絮凝条件为:发酵液投入量为3 m L、CaCl_2投加量为1 mL,pH为7。同时该絮凝菌在对污水的实际处理中有较好的效果,对COD及NH_3-N去除率分别达到62.35%和61.67%,并且可提高活性污泥沉降性能及脱水率,脱水率可达42%。     

纤维素酶高产菌株的诱变育种

采用黑曲霉LH24为出发菌株,经紫外线和硫酸二乙酯诱变处理,选育出一株生产菌LH2466.在适宜条件下,LH2466产纤维素酶平均为18910 U.g-1.     

N+注入中性蛋白酶高产菌株诱变选育的研究

    利用低能N+注入技术对产中性蛋白酶的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)进行诱变选育.以提高该菌株的产酶能力.试验结果表明,茵株的存活率曲线是典型的"马鞍型"剂量一效应曲线,在注入剂量为(30-50)×1014ions.cm-2的区域内具有高的正突变率.在注入能量为30 keV、注入荆量为50×1014ions.cm-2的条件下,经过筛选最终获得l株遗传稳定性良好的高产茵株NP131,其所产中性蛋白酶活力稳定在15230 U.mL-1左右,较出发茵株提高了71.2%.比较突变茵株NP131与出发菌株的产酶曲线,发现2条曲线的变化规律一致.说明离子注入技术是一种比较理想的微生物茵种选育方法.     

链霉菌BM10菌株的诱变选育

链霉菌BM10菌株是中国热带农业科学院热带生物技术研究所从海南原始森林土壤中分离得到的一株生防菌,其代谢产生的抗菌物质对多种植物病原真菌具有较强抑制作用。以此菌株为出发菌株,进行紫外(UV)、微波(MW)、亚硝基胍(NTG)、硫酸二乙酯(DES)和氯化锂(LiCl)诱变处理,采用平板对峙初筛和摇瓶培养复筛,均能筛选到拮抗活性明显提高的突变菌株,尤以亚硝基胍诱变效果最好,其次是紫外线诱变、硫酸二乙酯诱变、氯化锂诱变和微波诱变。经传代实验,高效突变株N1-45-9对香蕉枯萎镰刀菌的拮抗效果比原始菌株提高69.4%,且遗传稳定性良好。     

高絮凝活性芽孢杆菌的筛选及其絮凝特性研究

采用平板分离法从土壤中分离芽孢杆菌,以发酵液对高岭土悬液絮凝效果为指标筛选高絮凝活性菌株,并通过细菌形态、生理生化特性和16S rDNA序列分析进行鉴定;同时考察发酵液加入量、Ca2+浓度和pH对絮凝效果的影响以及微生物絮凝剂在发酵液中的分布.结果表明:从土壤中分离筛选到1株具有高效絮凝活性的芽孢杆菌MBFF6,其絮凝率可达95.7％;根据细菌菌落形态、生理生化特性和16S rDNA序列分析,确定该菌株为巨大芽孢杆菌;其最佳絮凝条件为加入的菌液体积分数2％,Ca2+浓度4.5 mmol· L-1,pH 7.0;该微生物絮凝剂是细菌在生长过程中产生的胞外代谢产物,存在于发酵液中.     

空间诱变育种研究进展及其在辣椒中的应用

通过简要介绍空间诱变育种的方法和诱变育种机理,综述了在空间环境影响下,植物体在形态学、细胞学、生理生化和遗传物质等方面发生的变化和空间诱变育种在粮食和经济等作物育种中取得的成就,并介绍了空间诱变育种技术在辣椒育种上的应用。     

具群体感应抑制作用短小芽孢杆菌F3-1菌株的诱变育种

[目的]获得群体感应(QS)信号分子降解能力更强的突变短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus),增强其在水产细菌性病害防治中的效果,为水产养殖业利用细菌QS淬灭机制防治细菌性疾病提供借鉴.[方法]以具有降解QS信号分子特性的短小芽孢杆菌F3-1为出发菌株、紫外线和亚硝酸钠(NaNO2)为诱变剂进行诱变选育;以紫色杆菌(Chromobacteria violaceum ATCC12472)为报告菌株筛选正向突变,经连续传代25代后测定其遗传稳定性;采用单因素试验测定培养时间、pH、盐度和温度对突变菌株降解QS信号分子能力的影响,同时通过扩增QS抑制基因aiiA及SDS-PAGE分析验证突变菌株的蛋白表达情况.[结果]两种诱变方法共获得205株突变菌株,以紫色杆菌为报告菌株通过紫外诱变筛选出具有QS抑制作用的正向突变株4株,编号分别为FF1-2、FF3-2、FF3-3和FF4-1.其中,突变菌株FF1-2的蛋白产量达47.48±2.87μg/mL,约是出发菌株F3-1的3.12倍,对紫色杆菌的褪色圈直径是出发菌株F3-1的2.96倍,抑制紫色素的能力较出发菌株F3-1提高64%,说明该突变菌株具有很强的QS抑制能力;连续传代25代后,突变菌株FF1-2的产蛋白能力及对紫色素的抑制作用无显著变化(P>0.05).突变菌株FF1-2在培养时间为40 h、温度30℃、盐度0.5%、pH 7.0时,紫色素褪色效果最佳.从出发菌株F3-1和突变菌株FF1-2中均能扩增获得753 bp的aiiA基因,且通过SDS-PAGE分析验证二者在28 kD处均呈现出特异条带.[结论]采用诱变育种技术筛选得到的突变菌株FF1-2能显著提高QS抑制能力,且该抑制能力能稳定遗传,即通过诱变育种技术提高短小芽孢杆菌的产酶量及酶活力具有可行性.     

碱性脂肪酶高产菌株yz-145的筛选及产酶条件

从蚕茧浸渍腐化水中分离获得一株产碱性脂肪酶菌株,通过紫外线和硫酸二乙酯多次诱变,选育出一株高产菌株yz-145.该菌株经发酵研究表明,其最适培养基为:蚕蛹粉5%,蔗糖1.0%,橄榄油0.5%,(NH4)2SO4 0.5%,MgSO4·7H2O 0.2%,K2HPO4 0.05%.最佳产酶条件:初始pH 9.0～9.5,30℃培养48h,产碱性脂肪酶活力高达1615 U/ml.经5代培养,该菌株产酶活力稳定,并对其酶的性质进行了研究.     

黄色叶构树的选育及应用

彩叶植物品种——黄色叶构树,是2006年开始通过芽接、枝插、埋根、根蘖等无性繁殖技术成功选育的。该树种具有生命力强、适应性广、抗污染、经济价值高等特点,是兼备观赏及多种经济用途的乔木类型黄色叶品种。经过多年繁殖,其子代植株叶片黄色,具有稳定性、一致性,生长势良好。该树种现已通过成果鉴定。     

化学诱变及其在蔬菜育种中的应用

化学诱变因其点突变比例和突变频率高、特异性强等特点,被广泛应用于诱发育种。近年来,用此方法获得的突变材料,成为基因组学等研究的重要基础,进而成为研究热点。文章介绍了化学诱变的特点与发展历史,总结分析了诱变材料、诱变剂种类以及诱变方法如浓度、时间、温度等对诱变效率的影响,综述了化学诱变技术在国内外蔬菜育种研究中的进展及成果。