不同灭菌条件对蓝果忍冬组培苗成活率的影响

[目的]研究不同灭菌条件对蓝果忍冬组培苗成活率的影响,筛选适宜蓝果忍冬组培苗生长的灭菌流程和方法,为批量生产蓝果忍冬组培苗提供参考.[方法]以蓝果忍冬蓓蕾、长白山1号、阿尔泰1号、蓝鸟4个不同品系冬眠枝条萌发芽(芽尖)为外植体,用75%酒精、0.1% HgC12和2% NaC1O进行不同消毒剂组合及不同消毒时间灭菌处理.[结果]单独使用75%酒精消毒30 s、0.1% HgCl2消毒时间≤6 min消毒效果较好,2% NaClO灭菌时间不宜超过6 min.75%酒精(30 s)+0.1% HgCl2(6 min)处理蓓蕾蓝果忍冬成活率最高,长白山1号蓝果忍冬对75%酒精反应敏感,75%酒精消毒可提高其外植体成活率,2% NaClO对阿尔泰l号蓝果忍冬有明显的消毒效果,而蓝鸟蓝果忍冬对2% NaClO反应不敏感,2% NaClO消毒对其外植体成活率没有明显影响.综合污染率、成活率等因素,不同品系的蓝果忍冬采用75%酒精(30 s)+0.1% HgCl2(6 min)灭菌效果较好.[结论]蓝果忍冬芽尖外植体最佳灭菌流程为:75%酒精(30 s)→3次无菌水冲洗→0.1% HgCl2(6 min)→6次无菌水冲洗.     

植物外植体灭菌技术研究进展

外植体污染一直是植物组织过程中极难解决的问题,外植体的灭菌效果直接关系着植物组织培养能否成功启动。本文通过研究近几年报道的植物组织培养成功案例,发现在干旱季节或连续的晴朗天气时采取外植体,污染率最低;外植体在进行表面灭菌之前先进行冲洗、黄化、热水浴等处理,一定程度上可以降低污染率;外植体的表面消毒可以使用氯化汞和次氯酸钠等消毒剂;当外植体有严重的内生菌时,则可以使用四环素、链霉素等抗生素进行抑制;此外,纳米材料也已经越来越多地用于植物组织培养中污染物的抑制。     

木薯组织培养外植体选择和灭菌研究

以木薯品种华南205为材料,研究外植体类型与不同灭菌方法对其组织培养的影响。试验结果表明:9—10月份室外取材灭菌效果最理想,Hg Cl2灭菌处理7—8月份取的外植体的时间需控制在10 min内,而灭菌处理9—10月份取的外植体的时间需控制在5 min。此外,室内水培木薯茎段和室外茎段的中部均可作为组织培养的良好材料。     

玉竹组织培养外植体灭菌研究

以邵东玉竹芽为外植体,研究经不同杀菌剂,不同杀菌剂组合、不同处理时间对其灭菌的效果。筛选出适合玉竹组织培养的外植体灭菌体系,为加快玉竹种苗快繁提供科学依据。结果表明：升汞对玉竹外植体上的病原菌有较好的杀灭和抑制作用,所以含有升汞的灭菌组合效果更佳。当2种杀菌剂复合使用时比单一杀菌剂的灭菌效果好。初次灭菌处理用10%次氯酸钠浸泡15min,二次灭菌用0.1%升汞浸泡15min效果最佳,玉竹组培苗污染率为1.67%,成活率为96.67%。另外,在灭菌处理后用超声波清洗仪清洗15min可有效加强除菌效果。初次灭菌处理用0.2%多菌灵浸泡15min,二次灭菌用10%次氯酸钠浸泡15min,再用超声波处理15min,污染降为3.67%,成活率为95.00%,可作为不使用升汞灭菌的替代方案。外植体浸泡杀菌剂的时间在10～15min为宜。     

外植体选择和灭菌对杧果组织培养影响的初步研究

该文以杧果为试验材料,研究了不同外植体与不同灭菌方法对杧果组织培养的影响。试验结果表明:杧果组织培养适宜外植体为室内沙培杧果带腋芽茎段;最适灭菌处理为酒精30s+0.1%Hg Cl2灭菌8min。     

红腺忍冬外植体灭菌与芽诱导研究

【目的】探讨影响红腺忍冬外植体消毒灭菌和芽诱导效果的因子,为开发红腺忍冬组培快繁技术提供依据。【方法】以红腺忍冬带腋芽茎段为外植体,按不同灭菌时间（10、12、14、16 min）、外植体取材季节（春、夏、秋、冬）、茎段直径大小（0.79、0.51、0.27 cm）和处理部位（未木质化、半木质化、完全木质化）分别进行腋芽诱导。【结果】以0.1%升汞加吐温灭菌14 min的外植体芽诱导率最高,为41.19%;未木质化茎段的芽诱导率最高,为41.36%;春季和秋季是比较理想的取材季节,外植体的芽诱导率分别为41.61%、39.42%;以平均直径为0.79 cm的茎段进行初代培养,芽诱导效果最好,诱导率为41.81%,芽平均高度为2.35 cm,平均叶片数为6.06张。【结论】选择未木质化、直径大小为0.79 cm左右的茎段,在春季和秋季取外植体,以0.1%升汞加吐温灭菌14 min,均可获得较理想的外植体芽诱导效果。     

红腺忍冬外植体灭菌与芽诱导研究

【目的】探讨影响红腺忍冬外植体消毒灭菌和芽诱导效果的因子,为开发红腺忍冬组培快繁技术提供依据。【方法】以红腺忍冬带腋芽茎段为外植体,按不同灭菌时间（10、12、14、16min）、外植体取材季节（春、夏、秋、冬）、茎段直径大小（O．79、0．51、0．27cm）和处理部位（未木质化、半木质化、完全木质化）分别进行腋芽诱导。【结果】以0．1％升汞加吐温灭菌14min的外植体芽诱导率最高,为41．19％;未木质化茎段的芽诱导率最高,为41．36％;春季和秋季是比较理想的取材季节,外植体的芽诱导率分别为41．61％、39．42％;以平均直径为0．79cm的茎段进行初代培养,芽诱导效果最好,诱导率为41．81％,芽平均高度为2．35cm,平均叶片数为6．06张。【结论】选择未木质化、直径大小为0．79cm左右的茎段,在春季和秋季取外植体,以0．1％升汞加吐温灭菌14min,均可获得较理想的外植体芽诱导效果。     

云南龙竹种子外植体适宜灭菌时间筛选试验

以云南龙竹的成熟种子为试验材料,采用75%酒精配合0.01%升汞作消毒灭菌剂,并设置0.01%升汞的不同消毒灭菌时间处理的对比。结果表明:在用75%酒精处理15 s后,再用0.01%升汞消毒灭菌处理,其适宜的消毒灭菌处理时间为3 h。在此消毒灭菌时间处理情况下,龙竹种子外植体的污染率已较低,为16.7%;而发芽率仍较高,可达到72.0%。     

省沽油组培过程中外植体灭菌技术的研究

[目的]寻求省沽油组织培养中适宜的外植体灭菌方法。[方法]研究了70%乙醇、0.1%HgCl2、0.1%HgCl2+70%乙醇组合在不同灭菌时间内对外植体生长的影响。[结果]适宜的外植体灭菌技术:茎尖用1%HgCl2+70%乙醇处理时间分别为5 min+50 s,成活率100%;茎段用1%HgCl2处理时间为15 m,成活率95%;幼叶用1%HgCl2处理时间为12 min,成活率85%。[结论]1%HgCl2+70%乙醇、1%HgCl2是省沽油外植体的有效灭菌剂。     

紫苏不同外植体组培灭菌条件研究

分别以紫苏种子、子叶、下胚轴、叶片为外植体,采用不同酒精、升汞、NaClO灭菌时间进行处理,探讨不同处理对外植体污染和生长的影响以及不同外植体的最适灭菌条件。结果表明,不同酒精、升汞、NaClO灭菌时间对不同外植体的影响较明显,综合发芽率、污染率或愈伤组织的诱导和生长情况,紫苏种子较好的灭菌方法为：75％酒精20s＋0．1％升汞10min,污染率和发芽率分别为50％、36％;子叶、下胚轴较好的灭菌方法为：75％酒精20s＋0．1％升汞4min,其污染率和愈伤组织诱导率分别为：7％、8％和40％、36％;适于叶片灭菌的条件为：75％酒精30s＋0．1％升汞7min,其污染率和愈伤组织诱导率分别为10％、7％。该结果为紫苏再生体系的建立和快速繁殖技术研究奠定基础。     

提高芋外植体灭菌效果的研究

研究了芋脱毒培养时降低外植体污染率的方法。结果表明,芋茎尖脱毒时,通过调整灭菌前芽的长度和灭菌时间,能达到比较理想的灭菌效果,大幅度降低污染率,获得较高的转绿率。即灭菌前剥去外部叶鞘,仅保留2-3层,芋芽长度小于1cm,氯化汞灭菌时间缩短为8rain,污染率可降至26.6％以下,转绿率提高至66.7％以上。     

金银花组织培养外植体灭菌方法探索

为了寻求金银花外植体的最佳灭菌方法,以灰毡毛忍冬新品种＇金翠蕾＇为材料,选用5种不同灭菌处理方法,对组培过程中的污染率、萌芽率、褐变率进行调查统计。结果表明,紫外灯照射配合使用75%碱化乙醇消毒处理能显著降低外植体污染率、提高萌芽率;75%碱化乙醇在降低污染率中起主导作用;试验筛选出最佳消毒方法为：紫外灯照射30min,75%碱化乙醇处理30s,0.1%升汞灭菌8min。     

玉米外植体的制备和灭菌技术

植物细胞具有全能性，任何组织、细胞、器官都能再生植株，但事实上，不同品种、器官之间的分化能力差异很大，外植体的制备和培养又是建立在无菌操作基础上的一门技术，选择适宜的外植体是确保外植体培养成功的一个重要因素，把好材料的灭……     

文山三七外植体灭菌处理培养研究

本试验以文山三七的成熟种子为试验材料,用不同浓度的升汞溶液对其进行不同时长的灭菌处理,观察和筛选适宜的升汞浓度和适宜的灭菌处理时间。结果表明,用0.01%升汞溶液对带种皮种子或去种皮种子进行灭菌处理时,适宜的处理时间均为30 min,处理的种子外植体的污染率不高,且能保障不污染种子有一定的发芽率;用高浓度的升汞溶液处理去种皮的三七种子,对种子的伤害较严重,致使不污染的种子发芽率较低。     

植物组织培养污染原因分析及外植体的消毒

归纳了组织培养中污染原因及不同污染原因所造成的表观现象,并概括了解决外植体引发污染的方法.     

不同外植体对兰州百合组织培养的影响

以兰州百合的鳞片、叶片、根的不同部位为外植体成功获得再生植株,并建立了快速无性繁殖体系.在组织培养中不同外植体不同部位在培养时诱导分化能力是不同的.本试验以MS为基本培养基加不同的植物生长调节剂配比进行培养,发现不同外植体不同部位分化能力存在差异,其差异由强到弱为:鳞片、根、叶片.同时鳞片不同部位的分化能力由强到弱为:下＞中＞上,叶片不同部位的分化能力由强到弱为:叶片基部＞中部＞叶尖,根的不同部位分化能力由强到弱为:根基部＞根尖＞根中部.     

金线莲不同外植体组织培养成苗技术探讨

以金线莲的顶芽、中部茎段和基部茎段为外植体,研究金线莲组织培养快繁成苗技术。结果表明,初代培养阶段在MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基中,以顶芽为外植体,诱导率、增殖倍数最高;芽苗增殖阶段,在MS+6-BA 1.5~2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L培养基中,3种外植体的芽苗增殖倍数都较高,其中顶芽增殖倍数达到7.5倍;细弱芽苗在MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+10%马铃薯+2%蛋白胨培养基中可长势健壮;最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/L+2%活性炭+10%香蕉泥。     

水果型番木瓜外植体灭菌方法研究

以水果型番木瓜成龄株顶芽和侧芽为外植体,研究不同灭菌剂组合和灭菌时间、抗生素组合对外植体的灭菌效果。结果表明,3种灭菌剂组合对外植体的灭菌效果优于两种灭菌剂组合;3种灭菌剂组合中以采用0．1％KMnO4浸泡10min→5％NaClO浸泡10min→0．1％HgCl2浸泡8min的灭菌效果最好,外植体成活率最高,为47．27％。经不同抗生素组合灭菌,外植体平均污染率和成活率分别为28．57％～45．16％、54．84％～71．43％,灭菌效果明显优于对照,说明抗生素组合可以有效降低水果型番木瓜外植体的内源菌污染,提高其成活率,其中以MS＋6-BA1．5rag／L＋庆大霉素80mg／L＋头孢噻肟钠500mg／L的效果最好,利于获得番木瓜无性系。此外,以幼苗顶芽作为外植体进行灭菌培养的效果优于侧芽,利于促进外植体的萌动生长和形成丛生芽。     

风信子不同外植体及其年龄对试管鳞茎诱导的影响

以风信子的叶片、花被片和鳞茎作为外植体，并将它们分为5个年龄级，研究风信子不同外植体及其年龄对试管鳞茎诱导的影响。结果表明：外植体年龄越小，鳞茎的诱导率越高，鳞茎的质量(平均鲜重)也越好，叶片外植体在年龄1和年龄2时均有较高的鳞茎诱导率，平均鲜重也较高；花被片外植体年龄1、2和年龄3之间诱导鳞茎的能力差异不大，而鳞茎外植体年龄1的鳞茎诱导率明显比年龄2的高，叶片外植体的鳞茎诱导能力要大于花被片和鳞茎。     

东方百合不同外植体愈伤组织诱导效果

对东方百合Tiber品种的多种外植体进行了组织培养试验,研究结果表明,在不同激素浓度条件下,东方百合Tiber品种不同外植体的组织培养效果不同,诱导形成愈伤组织在数量、质量和时间上具有明显的差异,形成愈伤能力大小依次为:幼嫩鳞茎>花托>鳞片>叶柄>叶片。