关于动物抗病毒药物的应用研究

从兽医临床方面来看,动物病毒性疾病是治疗难度最大的疾病类型,在很大程度上制约了禽类和畜类养殖产业的发展。但基于病毒的特性,目前还没有能够彻底治疗动物病毒性疾病的药物。文章分别论述了病毒的感染机制以及抗病毒药物的作用机制,并进一步阐述了兽医临床中常用的动物抗病毒药物的应用,以供相关人员参考。     

苦参碱抗肿瘤作用及其抗性机制的研究进展

苦参碱(matrine,MA)是传统中药苦参的有效成分,具有多方面的肿瘤抗性机制,主要包括抑制肿瘤细胞增殖、浸润、转移和诱导肿瘤细胞凋亡等。近年来,对苦参碱抗肿瘤机制的研究又有了新的进展,相关研究已经深入到分子和基因水平。本文就近几年来苦参碱抗肿瘤作用机制的相关研究进行了综述,为其进一步的研究和应用提供参考。     

翻译起始因子4E及其异构体与植物病毒感染的联系

近年来,对植物隐性基因抗病毒感染的研究取得了一些新的进展。从植物抗病毒与感病,eIF4E及其异构体对植物抗病毒感染作用的影响及机制,以及在此理论基础上设计抗病毒的新策略作一阐述。     

苦豆籽炒制中氧化苦参碱与苦参碱转化实验

在不同炒制温度和炒制时间下对苦豆籽中氧化苦参碱和苦参碱含量间转化情况进行分析研究。在115~215℃内设置了11个炒制温度,并设定了5min、10min、15min3个不同的炒制时间对苦豆籽进行处理,共得处理样33个。33个样品经煎煮后采用HPLC法测定苦豆籽中氧化苦参碱和苦参碱的含量,从而比较分析氧化苦参碱和苦参碱之间的转化情况。结果显示:在不同炒制温度下,随着温度的升高氧化苦参碱转化为苦参碱的量也在逐渐升高,而随着炒制时间的增加,氧化苦参碱和苦参碱的总量也在分别呈现缓慢下降和上升趋势,而炒制温度165℃为其突出温度。通过两者数据变化显示,氧化苦参碱并未完全转化为苦参碱,其转化机制还需进一步研究。     

苦参碱对H9N2 AIV感染小鼠NLRP3炎性体信号通路的影响

【目的】流感病毒感染引发机体的炎症反应及免疫稳态失衡，由此产生的细胞因子风暴（CS）是引起感染宿主死亡的主要原因。通过探究苦参碱对H9N2 AIV感染小鼠的保护作用及其调节NLRP3炎性体信号通路的特点及作用机制，可进一步完善中药抗病毒的理论依据，为新型抗病毒药物的研发奠定基础。【方法】72只8周龄BALB/c小鼠随机分为空白组（0.1 mL无菌鸡胚尿囊液）、病毒组（0.1 mL 4×10⁵PFU/mLH9N2 AIV）、金刚烷胺组（0.1 mL 4×10⁵PFU/mLH9N2 AIV+100×10^-6 99%金刚烷胺）、苦参碱高浓度治疗组（0.1 mL 4×10⁵PFU/mLH9N2 AIV+40 mL·kg^-1苦参碱）、中浓度治疗组（0.1 mL 4×10⁵PFU/mLH9N2 AIV+20 mL·kg^-1苦参碱）和低浓度治疗组（0.1 mL 4×10⁵PFU/mLH9N2 AIV+10 mL·kg^-1苦参碱），每组12只，含病毒鸡胚尿囊液滴鼻构建小鼠病毒性肺炎模型，灌服或饮水给药治疗连续5 d，试验共进行7 d，观察不同组小鼠的体重变化。在第1、3、5、7天分别取3只小鼠无菌采血并处死，取小鼠肺组织进行病理组织学观察，RT-PCR检测小鼠肺组织中H9N2 NA、NLRP3 NLR基因表达情况，Western Blot检测苦参碱治疗后H9N2感染小鼠肺组织NLRP3炎性体信号通路相关蛋白表达量的变化，小鼠血清用ELISA法测定细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-10表达量的变化。【结果】与病毒组相比，苦参碱高浓度治疗组病理组织学观察中H9N2 AIV感染小鼠肺部水肿的区域明显减少，红细胞渗出减少，炎性细胞数量减少，效果接近金刚烷胺组。7 d时苦参碱高浓度治疗组小鼠肺泡壁完好，肺泡之间分界清楚，肺组织内炎性细胞、浆细胞数量大量减少，与空白组无异;苦参碱中浓度治疗组肺组织少量出血，肺泡内无渗出液，肺泡间隔完好;苦参碱低浓度治疗组可见肺泡内红细胞渗出，大量浆细胞募集，肺泡之间出现融合现象。经过苦参碱和金刚烷胺治疗的各组小鼠肺组织中H9N2病毒基因表达量在3、5和7 d极显著降低（P<0.01）。经治疗3、5 d时，苦参碱高浓度治疗组和金刚烷胺组的NLRP3基因和蛋白表达量、TNF-α、IL-1β蛋白表达量极显著降低（P<0.01）;7 d时，苦参碱高、中、低治疗组小鼠肺组织中NLRP3基因表达量极显著降低（P<0.01）;5 d时苦参碱低浓度治疗组NLRP3蛋白、Caspase-1蛋白和中浓度组Caspase-1蛋白表达量显著降低（P<0.05）;3 d、5 d时苦参碱中、低浓度治疗组TNF-α和IL-1β蛋白表达量极显著降低（P<0.01），苦参碱中浓度治疗组IL-10表达量极显著降低。【结论】苦参碱可在体内抑制H9N2 AIV的表达，通过下调NLRP3炎性体信号通路相关蛋白，下调TNF-α、IL-1β和IL-10的表达，减轻炎症反应，有良好的抗病毒、抗炎作用。     

兽用抗菌抗病毒中草药的研究进展

综述了抗菌抗病毒中草药的有效成分、作用机理以及提取分离技术,并对抗菌抗病毒中草药在兽医临床上的应用进行了阐述。     

兽用抗菌抗病毒中草药的研究进展

综述了抗菌抗病毒中草药的有效成分、作用机理以及提取分离技术。并对抗菌抗病毒中草药在兽医临床上的应用进行了阐述。     

几种植物源药剂防治枸杞木虱药效试验

选用苦参碱水剂、印楝素·苦参碱超微乳油以及烟碱·苦参碱乳油3种植物源药剂进行枸杞木虱药效防治试验。结果表明,3种植物源药剂与对照阿维菌素具有同样相近的防治效果。可以替代生产中使用的化学药剂。     

苦参碱农用活性及其结构修饰研究进展

研究证明苦参碱具有多种农用活性,是当前少数最具推广应用前景的天然植物源农药之一。从苦参碱的杀虫活性,抑制真菌、细菌活性以及生长调节活性3个方面对其农用活性研究进行综述,同时对苦参碱衍生物的修饰合成进展进行概述。     

苦参碱逆转人结肠癌细胞株(HT-29)奥沙利铂耐药性的作用及机制研究

目的 研究苦参碱对结肠癌耐药细胞HT-29/奥沙利铂（Oxaliplatin,OXA）耐药性的逆转作用并探讨其可能的作用机制。方法 采用逐步增加药物浓度的方法建立奥沙利铂耐药结肠癌细胞株HT-29/OXA;CCK-8法测定苦参碱对HT-29/OXA细胞的耐药性逆转作用,流式细胞术检测细胞凋亡、周期变化;实时定量PCR检测各组细胞肺耐药蛋白（lung resistance protein LRP）和P-glycoprotein（P-gp）mRNA表达水平;Western blot检测各组细胞LRP和P-gp蛋白的表达水平。结果 苦参碱使HT-29/OXA细胞对奥沙利铂的敏感性增加,耐药性得到部分逆转。奥沙利铂（0.5 μg/mL）和苦参碱（3.0 μg/mL）单独用药对结肠癌耐药细胞株HT-29/OXA细胞周期以及细胞凋亡没有影响;联合用药对HT-29/OXA生长增殖具有明显抑制作用并且能够通过改变细胞周期引起凋亡（P<0.05）。奥沙利铂（0.5 μg/mL）和苦参碱（3.0 μg/mL）单独用药对HT-29/OXALRP和P-gp mRNA以及蛋白的表达没有影响;联合用药作用后LRP mRNA和P-gp mRNA表达水平降低（P<0.01）,同时下调了LRP和P-gp蛋白表达（P<0.01）。结论 苦参碱部分逆转HT-29/OXA细胞对奥沙利铂的耐药性,其机制可能与细胞内LRP和P-gp表达降低有关。     

球孢白僵菌与苦参碱混配对烟粉虱的毒力与田间防效

旨在探讨球孢白僵菌与8种杀虫剂的相容性以及球孢白僵菌与苦参碱混配对温室烟粉虱的防治效果。首先进行8种杀虫剂与球孢白僵菌的相容性试验,然后选择相容性较高的苦参碱与球孢白僵菌的LC_(50)浓度以9∶1、4∶1、1∶1、1∶4和1∶9体积比进行混配,以共毒系数对其毒力进行评价。结果表明:苦参碱与球孢白僵菌的相容性最好,尤其在10倍稀释度下,苦参碱对球孢白僵菌孢子萌发、菌丝生长及产孢抑制率分别为14.44%、10.17%和12.63%。苦参碱与球孢白僵菌体积比为4∶1时,共毒系数为293,增效作用最明显。综上所述,苦参碱与球孢白僵菌在LC_(50)浓度下以4∶1体积比混配具有极显著的增效作用。     

植物病毒病传播与防治机制研究进展

植物病毒病是植物重要病害之一,分析了病毒的传播途径以及植物自身的抗病毒机制,综述了近些年来对病毒防治的研究进展.     

3种植物次生代谢物质对舞毒蛾的杀虫活性分析

为探究苦参碱、氧化苦参碱和山奈酚对舞毒蛾3龄幼虫的杀虫活性以及杀虫机理,本研究通过生物测定、离体和体内酶活性实验,分析了上述3种植物次生代谢物质对舞毒蛾的杀虫效果及对其谷胱甘肽S-转移酶(GST)、乙酰胆碱酯酶(AChE)和羧酸酯酶(CarE)活性的影响。实验结果表明:苦参碱、氧化苦参碱和山奈酚均对舞毒蛾3龄幼虫有良好的杀虫效果,其中苦参碱杀虫效果最强,致死中质量浓度(LC₅₀)为0.420 mg/mL;离体酶活性实验发现,3种植物次生代谢物质对舞毒蛾离体GST、AChE和CarE活性均有抑制效果,其中氧化苦参碱对GST和AChE抑制作用最强,抑制中质量浓度(IC₅₀)分别为0.928和0.717 mg/mL,而苦参碱对CarE抑制作用最强,IC₅₀为0.436 mg/mL;而体内酶活性实验结果显示,苦参碱对GST抑制作用最强,在处理后48 h,GST活性达到最低,仅为同时期对照组的39%;而氧化苦参碱对AChE和CarE抑制作用最强,在处理后72 h,AChE和CarE活性最低,分别为对照组的44%和40%。以上结果表明苦参碱、氧化苦参碱和山奈酚对舞毒蛾幼虫GST、AChE和CarE活性的抑制作用是其具有杀虫活性的原因之一。      

苦参碱对金黄色葡萄球菌入侵BMECs的干预作用

【目的】研究苦参碱在金黄色葡萄球菌入侵奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)过程中的干预作用及其原因,为苦参碱的临床应用奠定基础。【方法】用CCK-8法检测苦参碱对BMECs增殖的影响,用庆大霉素保护试验检测苦参碱对金黄色葡萄球菌入侵BMECs的影响;并在苦参碱干预金黄色葡萄球菌感染BMECs后,分别采用RT-qPCR检测BMECs中抗菌肽基因的表达,Greiss法检测NO的分泌,Western blot检测NF-κB通路蛋白p65的表达。【结果】25～100μg/mL苦参碱均能促进BMECs的增殖,并能抑制金黄色葡萄球菌入侵BMECs;苦参碱干预能显著下调BMECs中抗菌肽基因TAP和BNBD5 mRNA的表达,抑制NO的分泌和NF-κB的活化,并呈剂量依赖性。【结论】苦参碱通过抑制NF-κB的活化来抑制金黄色葡萄球菌入侵BMECs,并可显著下调金黄色葡萄球菌感染的BMECs中抗菌肽基因的表达。     

1%苦参碱可溶性液防治草原蝗虫田间药效试验

苦参碱是1种新型的生物防治制剂,具有对人畜安全、不污染环境、易于就地取材、节约开支、使用经济等优点。为了确定苦参碱是否对草原蝗虫具有良好的防治效果,2010～2011年连续2 a以常用药剂4.5%高效氯氰菊酯乳油为药剂对照,在天然草场上测试了1%苦参碱可溶性液使用量4.5 g/hm2、6.0 g/hm2和7.5 g/hm2对草原蝗虫的防治效果。结果表明：1%苦参碱可溶性液4.5～7.5 g/hm2处理对草原蝗虫表现出了较好的防治效果,2 a防治效果均在90%以上。本研究结果可为1%苦参碱药剂的产品登记以及为生产上选择适于防治草原蝗虫的药剂提供科学依据。     

苦瓜MAP30蛋白研究现状及应用前景分析

苦瓜MAP30蛋白属于Ⅰ型核糖体失活蛋白,具有广谱的抗病毒、抗肿瘤活性,并且具有良好的特异性,对正常细胞无毒副作用。总结了MAP30蛋白结构、抗病毒活性、抗肿瘤活性及相关机制,并对其应用前景进行了分析,为进一步深入研究MAP30蛋白抗病毒、抗肿瘤机制及开发相关药物提供科学依据和理论基础。     

磺基水杨酸苦参碱的合成

以苦参碱和磺基水杨酸为原料合成磺基水杨酸苦参碱,并优化合成工艺,磺基水杨酸苦参碱产品收率达94%,化学结构经TCL、IR、MS等确证。合成磺基水杨酸苦参碱工艺简单易行。     

苦参碱及氧化苦参碱对番茄灰霉菌的抑制效果

为研究苦参碱及氧化苦参碱对番茄灰霉菌菌丝体和孢子的抑制作用,以番茄灰霉菌(Botrytis cinerea野生型菌株38B1)为供试靶菌,采用平皿法测定了不同浓度苦参碱(Matrine)和氧化苦参碱(Oxymatrine)对灰霉菌孢子萌发及菌丝体生长的抑制效果。结果表明:接菌培养时间相同,苦参碱和氧化苦参碱对灰霉菌丝体生长的最佳抑制浓度为8和10mg·mL-1。处理8h后,苦参碱浓度为3mg·mL-1、氧化苦参碱为4mg·mL-1时即能抑制孢子萌发。苦参碱及氧化苦参碱浓度、处理时间相同时,孢子悬浮液的滴加体积为0.06mL,孢子萌发率最低。     

植物抗病分子机制及抗病基因工程研究进展

本文从植物与病原物互作的遗传基础角度讨论了植物抗病分子机制以及植物抗病毒、真菌、细菌和线虫病基因工程的主要研究进展,并对有关进展作了简单评析。     

苦参碱人工抗原的合成与鉴定

【目的】合成并鉴定苦参碱人工抗原,以获取具有特异性和高亲和性的苦参碱多克隆抗体,为建立苦参碱的酶联免疫分析方法奠定基础。【方法】通过对槐果碱不饱和双键进行亲核加成、叠氮化、催化氢化合成苦参碱半抗原13氨基苦参碱(ST),并经MS、NMR法对其结构进行鉴定;采用戊二醛法将半抗原与载体蛋白偶联合成苦参碱的人工抗原(ST-BSA和ST-OVA),经紫外光谱扫描法、SDS-PAGE法、红外光谱扫描法对人工抗原进行鉴定;将制备的苦参碱人工抗原免疫健康新西兰大白兔获得苦参碱的多克隆抗体,通过间接非竞争ELISA方法测定其效价。【结果】成功合成了一种苦参碱半抗原13-氨基苦参碱(ST),与载体蛋白BSA、OVA偶联后得到了免疫原(ST-BSA)和包被原(ST-OVA),免疫新西兰大白兔获得多克隆抗体,效价达到128 000。【结论】成功合成了苦参碱人工抗原,为苦参碱免疫分析方法的研究提供了条件。