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调查了中国西北和东部地区不同生境的拂子茅属Calamagrostis植物中Neotyphodium属内生真菌的分布。采样范围包括新疆、青海、甘肃、江苏、安徽、浙江、上海7省（市、区）,共采集拂子茅属植物样品426株。调查发现西北3省（区）所有276个拂子茅属植物样品中都不含有内生真菌;而采集自东部的样品中,南京的无性系拂子茅属植物和黄山的拂子茅C. epigeios含菌率为100%。但是,采自南京抽穗的拂子茅却完全不含内生菌。通过研究分离菌株的形态学特征,发现南京与黄山的菌株都具有Neotyphodium属内生真菌的典型特征,而它们之间在菌落形态、生长速度、孢子大小等方面又存在较明显差异。以上结果说明我国拂子茅属植物及其中的禾本科植物内生真菌具有一定的生物多样性,拂子茅属植物中的内生真菌含量受地理环境以及宿主植物种类的影响十分明显。     

麦角菌的研究进展

麦角菌(Claviceps)属于麦角菌科真菌,其产生的生物碱毒素易引起人和动物中毒,同时也具有多种生物活性,在医学上得到了广泛应用。本文就国内外近年来对麦角菌的相关研究进展进行了扼要综述,以期为麦角菌的防控和利用提供借鉴。麦角菌起源于上白垩纪时期的南美洲,主要通过昆虫向新的区域或新寄主传播,现在全球的分布范围主要有6个区域:非洲、南美洲、欧亚大陆、北美、澳大利亚和印度;麦角菌可以侵染7个科或亚科的70多属的400余种植物。麦角菌主要寄生在粮食作物及禾草的穗部,家畜采食受侵染的谷物易引起中毒,历史上已有无数次麦角中毒事件发生。麦角病的主要防治方法有选用花期较短的抗病品种,在寄主花期喷施杀菌剂以及及时收获菌核,减少初侵染来源。麦角菌产生的生物碱在医学上得到了广泛的应用,早在1474年的德国处方就已经记载药用,在医学上主要用于治疗偏头疼、产后出血、乳腺病、帕金森病、脑血管系统和癌症等疾病。目前,国内外研究的重点主要包括麦角菌的遗传进化和其产生的生物碱在医学上的应用。未来,培育抗麦角病禾谷类作物和牧草新品种,筛选高产碱量菌株,揭示麦角菌、内生真菌与寄主植物的互作机制可能会成为相关研究的热点之一。     

牛心朴子内生真菌分离及其抑菌活性分析

为了解荒漠植物牛心朴子(Cynanchum komarovii)内生真菌多样性及其抑菌活性特征,通过组织块法分离其内生真菌,并选择5种植物病原真菌和4种人体病原细菌作为指示菌测定抑菌活性。结果表明:分离的25株内生真菌以茎部最多,根部次之,叶部最少,经形态学初步鉴定归于2目3科11属,曲霉属(Aspergillus)为优势菌属;84%的分离菌株对2种以上病原真菌,以及60%的分离菌株对1种以上病原细菌有不同程度的拮抗作用,2株高活性菌株CKEFL003和CKEFS001对多种病原菌拮抗作用明显,均为曲霉属。牛心朴子内生真菌在根茎叶组织器官中数量分布存在差异,种群构成具有多样性特征,对植物和人体病原菌具有不同程度的拮抗作用,抑菌资源较为丰富,高活性菌株为曲霉属,抗菌谱较宽。     

部分禾本科植物Neotyphodium属真菌的分布和形态特征

2006年3-7月从上海、江苏、安徽和山西等省(市),采集鹅观草Roegneria、早熟禾Poa、黑麦草Lolium、羊茅Festuca、雀麦Bromus和拂子茅Calamagrostis等冷季型禾本科植物共计1 487株。内生真菌的总检出率为54.3%,江苏省和山西省禾本科植物的检出率分别高达55.5%和69.0%。这些省市的许多禾本科植物都含有Neotyphodium属真菌,说明Neotyphodium属真菌在我国分布广泛,资源丰富。以分离自纤毛鹅观草R. ciliaris 12株Neotyphodium属真菌为材料,详细研究了我国干旱地区Neotyphodium属真菌的形态学特征：在PDA平板上生长很快,21 d生长12.5～37.2 mm;分生孢子梗长14.9～23.2 μm,基部宽1.9～3.1 μm,顶端小于1 μm,通常基部或近基部有隔膜;分生孢子无色透明,卵圆形或肾形,单个顶生,(4.6～5.9) μm×(2.1～3.4)μm,与其它已知Neotyphodium属真菌形态差异显著,需要进行更深入的研究。     

禾本科植物内生真菌研究10——内生真菌共生体的苗期生物学特性

有些禾本科植物内生真菌能为宿主植物带来抗病虫害、抗旱、促进苗期生长和分蘖等性能。研究利用种子中Neotyphodium属内生真菌含菌率不同的苇状羊茅Festuca arundinacea、多年生黑麦草Lolium perenne和野生鹅观草Roegneria kamoji进行了室内发芽试验、室外和人工气候箱内的盆栽试验以及室内外蚜虫接种试验,调查了内生真菌对其宿主苗期生物学特性的影响。发现种子含菌率比较高的苇状羊茅和多年生黑麦草分蘖多,幼苗抗虫性明显提高;种子含菌率比较高的鹅观草发芽率高,出苗整齐,生长快,分蘖多,但幼苗无明显的抗虫性。研究结果进一步说明了禾本科植物内生真菌在农业上具有广阔的利用前景。     

醉马草致草食家畜中毒研究进展

醉马草[Achnatherum inebrians (Hance) Keng]是我国北方地区常见的多年生禾本科植物,感染Neotyphodium属内生真菌后成为醉马草内生真菌共生体,共生体植株能产生麦角类生物碱,草食家畜过量采食引起中毒。中毒牲畜出现共济失调、神情呆滞或烦躁不安等神经症状,中毒严重者可致死。由于醉马草内生真菌共生体具有较强的抗阻逆特性,因此针对其抗性机理的研究已成为国际上禾草-内生真菌共生体研究领域的重要内容。文章主要概述了醉马草危害及防控、产毒机制和开发应用研究进展。     

兰州市五泉山公园草本植物真菌病害调查及防治建议

对兰州市五泉山公园草本植物真菌病害的发生及危害情况进行了全面调查。结果表明:共有32种病原真菌引起39种真菌病害;病害寄主属11科19属,以菊科和禾本科植物为主;病原菌以半知菌纲和子囊菌纲为主。多种病害在公园内发生普遍,且部分病害发生与危害较为严重。气候及植物配置与养护管理对病害发生影响较大,并据此提出了综合防治建议。     

药用植物柽柳内生真菌分离及其抑菌活性初步研究

为探明药用植物柽柳内生真菌资源的多样性及其抑菌活性特征,通过组织块法对内生真菌进行了分离,并选择小麦全蚀病菌、枸杞黑果病菌、番茄灰霉病菌、黄瓜枯萎病菌、黄瓜立枯病菌5种植物病原真菌和枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌4种细菌作为指示菌,采用对峙法和改进的菌块法测定其抑菌活性。结果显示,从柽柳不同组织器官中分离出18株内生真菌,茎部最多,根部次之,叶部最少;经形态学初步分类鉴定归于2个目,3个科,7个属;有11株菌对2种或多种植物病原真菌有不同程度的抑制作用,占菌株总数的61.1%,有8株内生真菌只对金黄色葡萄球菌具有明显抑制作用,占分离菌株总数的44.4%;活性内生真菌菌株TCEFL001分别对枸杞黑果病菌、小麦全蚀病菌以及金黄色葡萄球菌具有明显抑制作用,属于组丝核菌属。药用植物柽柳具有较为丰富的内生真菌资源,其开发和利用值得进一步探究。     

苦马豆素生物合成研究进展

苦马豆素(SW)是苦马豆属、棘豆属、黄芪属、番薯属和黄花稔属等某些有毒植物的主要毒性成分,动物采食该类植物后,会发生以神经系统功能紊乱为特征的中毒病。研究表明,豆类丝核菌、金龟子绿僵菌和疯草内生真菌均可以产生苦马豆素。植物和真菌中苦马豆素的生物合成研究可为人类从根本上解决含有SW有毒植物引起的动物中毒问题和促进SW的医学研究及应用提供重要的科学依据。论文根据近年来的最新研究,重点围绕植物和真菌中苦马豆素的生物合成及其相关研究进行综述,以期为该类研究的开展提供思路。     

耕牛“蹄腿肿烂病”病原诊断研究

陕西省汉中地区的耕牛发生一种原因不明的“蹄腿肿烂病”,伴发耳、尾尖坏死,严重病例可使蹄子脱落。发病率高,波及面广,病程长,死残严重。通过调查与研究,排除了传染病、伊氏锥虫病、麦角中毒、农药中毒、营养性水肿以及冻伤等因素。采集发病生产队的霉稻草饲喂健牛8头,引起5头发病。从186份霉稻草中分离出真菌30个属;主要有镰刀菌属、青霉属、曲霉属、头孢霉属、芽枝霉属、交链孢霉属等。选用以上有关产毒真菌的玉米粉培养物作菌饲料饲喂健牛,结果:饲喂木贼镰刀菌菌料的3/5、饲喂半裸菌菌料的2/5出现了“蹄腿肿烂病”症状。     

原料乳中耐冷菌群及其产酶特点

耐冷菌及其分泌的耐热酶是原料乳中常见污染物,会导致乳制品腐败。通过16S rRNA基因测序分析了分离自上海地区原料乳的耐冷菌群,以及通过平板法研究不同耐冷菌的蛋白酶和脂肪酶活力。结果表明:所有的分离株属于9个菌纲,含33个菌属,其中数量占主要的菌属是假单胞菌(Pseudomonas)(55％)、不动杆菌(Acinetobacter)(10％)和黄杆菌(Flavobacterium)(5％),其余30个菌属占所有菌株数的30％。耐冷菌产酶能力平板法实验显示,大部分的耐冷菌都有产蛋白酶或脂肪酶的能力,不同菌属之间产酶特点存在差异。假单胞菌和黄杆菌主要表现为产蛋白酶活性,克雷伯氏菌(Klebsiella)主要表现为产脂肪酶活性,而大多数的不动杆菌没有产蛋白酶或脂肪酶活性。     

新疆草地药用及毒害植物的霜霉菌研究

对新疆草地药用植物及有毒有害植物的霜霉进行了系统的分类研究，采自新疆天山及平原绿洲的９７份草地药用及毒害植物霜霉菌标本，共鉴定出分别寄生于１５科３６属４４种寄生植物上的５属３４种霜霉菌，包括２个新种，７个全国新记录种有５个新寄主记录，其中寄生于２６属３４种草地药用植物上的霜霉菌５属２５种，寄生于１０属１１种草地毒害植物上的霜霉菌２属１０种，从生物多样性的保护和持续利用及生态系统的角度出发，在挖掘我     

安西自然保护区木本植物区系特征

探究安西自然保护区木本植物区系特征,能为该区木本植物资源的保护和利用提供科学依据。本研究在相关文献和网络资料查阅和收集以及野外调查基础上,对甘肃省安西自然保护区木本植物种类构成、区系地理特征和特有种分布进行系统分析。结果表明,1)该区共有木本植物21科48属120种;其中,裸子植物两科两属5种,被子植物19科46属115种;乔木3科4属7种,灌木14科19属55种,半灌木9科24属58种。2)植物区系地理成分较复杂,在科级水平有5个分布类型两个变型,属级水平有9个分布类型及4个变型,中国特有种33种。3)木本植物起源较古老,温带和地中海性质明显,与泛热带有一定关系。4)该区木本植物更能体现地中海性质,而草本植物更能体现世界分布和热带分布性质。     

致病性鹅源新城疫病毒对鸡胚成纤维细胞的致病变特性

选择4株鹅源新城疫病毒(NDV)接种鸡胚成纤维细胞(CEF)培养物,研究鹅源NDV对CEF的致病变特性,并与鸡源及鸽源NDV进行比较。结果显示,鹅源NDV接种次代CEF后24h开始有病变产生,表现为少数细胞变圆、皱缩,折光性增强,随后病变缓慢进展,感染细胞形成大量合胞体,到84～144h时,CEF单层彻底破坏;鸡源和鸽源MDV接种CEF后也在24h左右开始有病变产生,最初病变与鹅源毒株导致的病变相似,但病变进展迅速,细胞显著裂解并导致单层的严重破坏,60～84h时细胞单层即彻底破坏。对病毒接种后不同时间段培养物上清血凝(HA)效价的测定结果表明,鹅源NDV接种后84～120h培养物上清HA效价达到高峰,为5～8 log2,鸡源和鸽源NDV接种后60～84h HA效价即可达到高峰,但其最高效价只有4 log2。     

山羊瘤胃和粪便中厌氧真菌的分离及发酵粗饲料能力初探

本研究旨在分离山羊瘤胃及粪便中的厌氧真菌,并比较其对粗饲料的降解能力。分别采集2头饲喂青干草的南京本地山羊的瘤胃液与新鲜粪便,采用厌氧培养法,进行厌氧真菌的分离鉴定。实验从山羊瘤胃中分离到4类厌氧真菌,分别归于Neocallimastix、Piromyces、Orpinomyces和Anaeromyces属;从粪便中分离到二类厌氧真菌,归于Neocallimastix和Piromyces属。以稻草、麦秸、玉米秸为底物,对所分离的代表性厌氧真菌进行发酵降解试验。结果表明,所获菌株对稻草秸的干物质降解率大于30%,而对玉米秸的降解率低于25%。与所分离的瘤胃厌氧真菌相比,来源于粪便的厌氧真菌发酵上述3种底物时,所得的产气量和表观干物质消失率均较低。结果说明,本研究分离所得的厌氧真菌对不同底物的降解能力不一致,这可能与菌株自身的理化特性及底物的营养组成不同有关。     

青贮玉米蠕形菌的分离鉴定及其致病性分析

本研究为初步明确引起青贮玉米(Zea Mays L.)叶斑病的蠕形菌种类,采集疑似病斑叶片样本,对病原菌进行分离纯化,形态特征观察,ITS-rDNA序列和GADPH基因序列系统发育分析及致病性测定。形态学和分子生物学鉴定结果表明分离得到的142株病原菌为3属6种真菌,其中麦根腐平脐蠕孢(Bipolaris sorokiniana)和玉米生平脐蠕孢(B.zeicola)为优势病原菌,分别为77株和48株;其次为大斑病菌(Exserohilum turcicum)9株,疣状弯孢(Curvularia verruculosa)2株,新月弯孢(C.lunata)3株,穗状弯孢(C.spicifera)3株。致病性测定发现麦根腐平脐蠕孢和玉米生平脐蠕孢对青海省8个主栽青贮玉米品种均有致病性,其余4种病原菌的致病性各有差异。本研究初步明确引起青贮玉米叶斑病的蠕形菌种类及其致病性,为后续开展病害诊断及其综合防控奠定了基础。     

Serological characterisation of Haemophilus parasuis isolates from Australian pigs

A total of 31 isolates of Haemophilus parasuis obtained from Australian pigs were serotyped by the Kielstein-Rapp-Gabrielson scheme. The isolates were assigned to serovar 1 (1 isolate), serovar 2 (1 isolate), serovar 4 (4 isolates), serovar 5 (7 isolates), serovar 9 (2 isolates), serovar 10/7 (4 isolates), serovar 12 (1 isolate) and serovar 13 (6 isolates). The remaining 5 isolates could not be assigned to a serovar. Two different serovars (5 and 13) were detected in one herd. The only 2 isolates obtained from clinically normal pigs (from the same herd) were serovar 9. The common serovars were isolated from pigs with pneumonia as well as from pigs with conditions of the Glässer's disease type. The serological heterogeneity amongst Australian isolates of H parasuis has important implications for the use of vaccines to control Glässer's disease.     

贵州尾矿区野生豆科牧草根瘤菌及其抗性测定

为了筛选获得对复合重金属具有耐受能力且能在本地豆科植物根系内定殖共生的抗性根瘤菌,本研究从贵州省内的锰矿区、铅锌矿区采集野生豆科牧草根瘤样品,经分离纯化、菌体形态观察、16S rRNA基因序列比对分析,获得71个根瘤菌保存菌株。系统发育和区系分析结果表明,分离菌株分属7属28种,其中根瘤菌属(Rhizobium)的分布频率高达54.93%,为优势属,木兰根瘤菌(R.indigoferae)的分布频率最高(15.49%),为优势种。选择来自不同尾矿区、不同种类的根瘤菌17株,采用重金属平板法测定各供试菌株对贵州尾矿土分布较多的Pb²⁺,Zn²⁺,Cr⁶⁺,Mn²⁺,Cd²⁺五种重金属的耐受性,结果发现17个菌株对3种或3种以上的重金属都具有不同程度的耐受能力,其中HMZT039-6,HSST042-6,HSST042-1,ZHQT052-1和HXTT050-1对5种重金属离子均有耐受能力,为筛选出的最优抗性根瘤菌株。本研究结果可为本地区土壤重金属污染的修复治理提供共生微生物资源。     

Use of repetitive sequence-based polymerase chain reaction for molecular epidemiologic analysis of Streptococcus equi subspecies equi

OBJECTIVE: To determine whether repetitive sequence-based polymerase chain reaction (rep-PCR) could be used to differentiate Streptococcus equi isolates, to examine S equi isolates from throughout the world, and to determine whether a horse had > 1 subtype of S equi during an outbreak of disease. SAMPLE POPULATION: An initial group of 32 S equi isolates, 63 S equi isolates from various geographic areas, and 17 S equi isolates obtained during outbreaks of disease. PROCEDURE: An aliquot of S equi genomic DNA was amplified, using enterobacterial repetitive intergenic consensus primers. Gel electrophoresis was performed on 1.5% agarose gels, and a computed-assisted program was used to compare rep-PCR results. RESULTS: Use of these primers to analyze 100 ng of S equi genomic DNA resulted in patterns of 6 to 14 bands. The 32 initial isolates were separated into 7 rep-PCR subtypes. There were 30 rep-PCR subtypes found among 29 S equi isolates obtained from Minnesota, Michigan, Canada, and Australia and 34 S equi isolates obtained from Kentucky and other sources. Furthermore, the same clone was identified in several horses during an outbreak of disease. Infected horses on the same farm all had a single clone of S equi. CONCLUSION AND CLINICAL RELEVANCE: Analysis of these results suggests that rep-PCR is useful for delineating S equi into rep-PCR subtypes. Results revealed that isolates with the same geographic source or similar date of collection did not always have the same rep-PCR subtype. A single clone of S equi usually predominated during an outbreak of disease.     

Oral associated bacterial infection in horses: studies on the normal anaerobic flora from the pharyngeal tonsillar surface and its association with lower respiratory tract and paraoral infections

Two hundred and seventy bacterial isolates were obtained from the pharyngeal tonsillar surface of 12 normal horses and 98 obligatory anaerobic bacteria were characterised. Of these, 57 isolates belonging to 7 genera (Peptostreptococcus (1); Eubacterium (9); Clostridium (6); Veillonella (6); Megasphera (1); Bacteroides (28); Fusobacterium (6)) were identified, and 16 of these were identified to species level (P. anaerobius (1); E. fossor (9); C. villosum (1); B. fragilis (1); B. tectum (2); B. heparinolyticus (2)). Three hundred and twenty isolates were obtained from 23 samples from horses with lower respiratory tract (LRT) or paraoral (PO) bacterial infections. Of the 143 bacteria selected for detailed characterisation, obligate anaerobes accounted for 100 isolates, facultative anaerobes for 42 isolates and obligate aerobes for one isolate. Phenotypic characterisation separated 99 of the isolates into 14 genera. Among the obligately anaerobic species, Gram-positive cocci including P. anaerobius comprised 25% of isolates, E. fossor 11% and other Gram-positive rods (excluding Clostridium sp.) 18% of isolates. The Gram-negative rods comprised B. fragilis 5%, B. heparinolyticus 5%, asaccharolytic pigmented Bacteroides 3% and other Bacteroides 13%, while a so-far unnamed species of Fusobacterium (7%), and Gram-negative corroding rods (3%) were isolated. Among the facultatively anaerobic isolates, S. equi subsp. zooepidemicus accounted for 31% of isolates, followed by Pasteurella spp. 19%, Escherichia coli 17%, Actinomyces spp. 9%, Streptococcus spp. 9%. Incidental facultative isolates were Enterococcus spp. 2%, Enterobacter cloaceae 2%, Actinobacillus spp. 2% and Gram-negative corroding rods 5%. On the basis of the similarities (as determined by DNA hybridization data and/or phenotypic characteristics) of some of the bacterial species (e.g. E. fossor and B. heparinolyticus) isolated from both the normal pharyngeal tonsillar surfaces and LRT and PO diseases of horses, it is considered that the most likely source of bacteria involved in these disease processes is flora from the oral cavity.