心肌型脂肪酸结合蛋白在早期心肌梗死中的应用

心肌型脂肪酸结合蛋白是新推荐的急性心肌梗塞的血浆生化标志物。其血浆动力学同肌红蛋白相似。急性心肌梗塞后3h内发现其血浆浓度升高。通常12～24h内回到正常。这就使得心肌型脂肪酸结合蛋白对早期评价或排除急性心肌梗塞成为一个有用的生化标志物。心肌型脂肪酸结合蛋白还在再灌注疗法后对梗死相关动脉再通的判断和对心肌梗死面积的推测方面起到重要的作用。     

心肌型脂肪酸结合蛋白在早期心肌梗死中的应用

心肌型脂肪酸结合蛋白是新推荐的急性心肌梗塞的血浆生化标志物,其血浆动力学同肌红蛋白相似。急性心肌梗塞后3 h内发现其血浆浓度升高,通常12~24 h内回到正常,这就使得心肌型脂肪酸结合蛋白对早期评价或排除急性心肌梗塞成为一个有用的生化标志物。心肌型脂肪酸结合蛋白还在再灌注疗法后对梗死相关动脉再通的判断和对心肌梗死面积的推测方面起到重要的作用。     

心肌型脂肪酸结合蛋白的纯化及亲和配体的研究

利用盐析、G-75凝胶过滤层析和DEAE-葡聚糖纤维素离子交换层析技术,从牛心中分离出心肌型脂肪酸结合蛋白,经SDS-PAGE鉴定与免疫印迹(Western blot)分析,获得了纯品H-FABP。采用噬菌体随机展示七肽库,以H-FABP为靶标,对其亲和配体进行筛选,结果获得了与H-FABP有特异性亲和作用的配体序列,为其临床检测急性心肌梗塞新方法的建立奠定了基础。     

中国环颈雉心脏型脂肪酸结合蛋白基因的cDNA克隆及序列分析

运用RT-PCR技术,克隆了中国环颈雉心脏型脂肪酸结合蛋白基因的序列,并对其进行了测序及生物信息学分析。结果表明:中国环颈雉H-FABP基因cDNA序列长为402bp,开放阅读框为399bp,编码132个氨基酸,推测的蛋白相对分子质量为14.64KD,等电点为6.30。中国环颈雉H-FABP基因与已报道的鸡、鸭、珍珠鸡等禽类动物的核苷酸和编码氨基酸序列具有很高的相似性。     

心脏型脂肪酸结合蛋白基因多态性在湖北白猪中的初步研究

利用PCR—RFLP技术,对心脏型脂肪酸结合蛋白基因3个位点在湖北白猪中的的多态性进行了初步研究。结果表明,(1)在HinfⅠ—RFLP位点上,湖北白猪与报道的外来猪种和地方猪种的检测结果不同,全部为HH纯合子型;(2)在HaeⅢ—RFLP位点上,湖北白猪主要为dd型,d等位基因频率为0．947;(3)在MspⅠ—RFLP位点上,主要为aa型,α等位基因频率为0．615。检测结果为进一步分析H-FABP基因在湖北白猪中的遗传变异及与肌内脂肪含量的关系和该分子标记在湖北白猪育种中的应用,开展湖北白猪优质系选育及优质猪配套组合的筛选奠定了基础。     

重组鸡细胞外脂肪酸结合蛋白的原核表达及鉴定

细胞外脂肪酸结合蛋白(Extracellular Fatty Acid-Binding Protein,Ex-FABP)是一种鸡胚发育过程中表达于肥大软骨、肌肉纤维和血粒细胞中的脂蛋白,大小约为21 ku。试验通过构建Ex-FABP原核表达载体,以实现Ex-FABP蛋白的大量表达,并对其进行纯化及鉴定;以艾维茵肉鸡胫骨软骨总RNA为模板,RT-PCR扩增ExFABP基因,连接pGEM-T克隆载体后,再与载体pET-28a连接并转化,获得含pET-28a-Ex-FABP重组表达质粒的Escherichia coli BL21(DE3)表达菌株;使用IPTG诱导表达蛋白,SDS-PAGE鉴定表达情况,利用镍柱亲和层析法纯化蛋白,对纯化蛋白进行Western Blot鉴定。结果表明,试验成功构建重组表达载体pET-28a-Ex-FABP;表达产物经SDS-PAGE和Western Blot鉴定,结果显示,目的蛋白在24 ku附近出现特异性条带,表明表达蛋白正确。试验成功表达了大量纯度比较高的Ex-FABP蛋白,可为后续的动物试验以及家禽疾病的研究提供理论依据。     

猪心脏脂肪酸结合蛋白基因的克隆和测序分析

 根据GeneBank发表的猪心脏脂肪酸结合蛋白（heart fatty acid-binding protein,H-FABP）基因序列,设计合成一对引物,从杜长大三元杂交猪的腰大肌中提取总RNA,对H-FABP基因进行RT-PCR扩增,产物经琼脂糖电泳分析,呈现一条约124 bp的条带,回收纯化后,将其克隆至pMD18-T质粒载体中,然后进行核苷酸序列分析。与GeneBank中报道的H-FABP基因比较后发现,该基因片段与其它的核苷酸的同源性为94%～100%,推导的氨基酸的同源性为100%.     

慢性充血性心力衰竭患者血清心肌肌钙蛋白I和C-反应蛋白的变化

目的；探讨慢性充血性心力衰竭（CHF）患者心功能改善前后血清心肌肌钙蛋白I（cTnI）及C-反应蛋白（CRP）的变化及意义。方法：37例慢性充血性心力衰竭（NYHA分级Ⅲ～Ⅳ级）患者分别于入院d2和心功能改善至Ⅰ～Ⅱ级后抽取血清作cTnI、CRP测定。结果：治疗前患者血清cTnI阳性率54．1％，CRP超正常范围占78．4％。经治疗心功能改善后患者血清cTnI阳性率21．6％（P〈0．01）,CRP超正常范围占35．1％（P〈0．01）。结论：部分慢性充血性心力衰竭患者心功能恶化时存在心肌损伤或坏死．此过程随心功能改善而改变．部分可能与其它因素有关。     

瓦氏黄颡鱼脂肪酸结合蛋白基因cDNA片段的克隆及分析

采用简并引物扩增得到瓦氏黄颡鱼肝型和心型脂肪酸结合蛋白cDNA片段,长度分别为335、425 bp;获得的111、114个氨基酸残基与鲤鱼(Cyprinus carpio)肝型、斜齿鳊(Rutilus rutilus)心型脂肪酸结合蛋白的氨基酸序列同源性分别达到81%和85%,表明克隆所得序列均为瓦氏黄颡鱼脂肪酸结合蛋白.定量PCR分析表明,肝脏和腹腔脂肪组织均是肝型和心型脂肪酸结合蛋白表达的主要场所.     

血清4型禽腺病毒penton蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

【目的】制备和鉴定血清4型禽腺病毒（FAdV-4）五邻体（penton）蛋白单克隆抗体,为深入探究penton蛋白在FAdV-4感染致病机制中的作用及为抗原检测试剂研发提供抗体材料。【方法】以原核表达的FAdV-4 penton重组蛋白免疫6～8周雌性BALB/c小白鼠,加强免疫3次后,取鼠脾脏细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行细胞融合,通过penton-酶联免疫吸附剂测定（ELISA）和FAdV4 virus-ELISA方法分别筛选阳性杂交瘤细胞株,对筛选出的单克隆抗体杂交瘤细胞株进行亚类鉴定、特异性和广谱性鉴定及间接免疫荧光和稳定性试验。【结果】亚类鉴定结果表明,筛选获得7株能稳定分泌抗FAdV-4 penton蛋白的杂交瘤细胞株（1D11、2B3、2C4、2C9、6B3、8F12和8G11）,其轻链均为Kappa链,重链3株为IgG1,4株为IgG2b;特异性检测结果表明,7株单克隆抗体只与FAdV-4反应,不与其他11种血清型FAdV及NDV、ARV、EDSV和IBV等常见禽病病原体发生交叉反应;广谱性鉴定结果表明,7株单克隆抗体均可与19株FAdV-4分离株结合,广谱性好;间接免...     

HMBi对肉牛肉品质、血清生化指标和肌肉组织H-FABP基因mRNA表达水平的影响

选择平均年龄4-5岁、体重相近的徐州黄牛16头进行配对,随机分为对照组和试验组,每组8头,在相同的条件下饲养.试验组分别在每头肉牛的精料中添加8 g·d-1蛋氨酸羟基类似物异丙醇酯(HMBi),对照组的精料不添加HMBi.试验结束后统一屠宰,并测定相关指标,研究HMBi对肉牛胴体品质、血清生化指标、肌内脂肪含量以及心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)基因mRNA表达水平的影响.结果表明:在肉牛胴体品质方面,与对照组相比,试验组肉牛的肌肉色、脂肪色、剪切力和蒸煮损失均无显著差异(P>0.05);但大理石花纹等级高于对照组(P>0.05).在血清生化指标方面,试验组肉牛血清的甘油三酯含量在试验后极显著低于对照组(P<0.01);尿素氮浓度在试验后较试验前极显著降低(P<0.01),且试验期间试验组低于对照组(P>0.05);试验组葡萄糖浓度高于对照组(P>0.05),而脂肪酶活性,高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇和总胆固醇浓度则无显著变化(P>0.05).试验组肉牛背最长肌和臀中肌的肌内脂肪含量高于对照组(P>0.05).试验组肉牛背最长肌H-FABP基因mRNA的表达量高于对照组(P>0.05).可见,在日粮精料中添加8 g·d-1HMBi能降低肉血清甘油三酯水平,有提高大理石花纹等级的趋势,对肌内脂肪含量以及背最长肌H-FABP基因mRNA的表达量无显著影响.