维生素B12解冻牛冷冻精液效果探析

用ＶＢ１２液在３５℃,４０℃,７０℃三种解冻温度下,解冻牛冷冻精液,并与Ｔｒｉｓ－果糖液和２．９％柠檬酸钠液作解冻效果比较。结果表明：三种解冻液解冻后精子的活力相近,经过保存后ＶＢ１２液显著高于２．９％柠檬酸钠液（Ｐ〈０．０５）。而与Ｔｒｉｓ－果糖液相近,不同解冻液解冻后的精液作精子上游法测定,在第２、第３段中所含精子数,Ｔｒｉｓ－果糖液和２．９％柠檬酸钠解冻液解冻的每段递减３０％￣９０％,而ＶＢ     

维生素B_（12）注射液解冻牛的冻精试验

用ＶＢ１２注射液解冻牛的冻精与用０．９％氯化钠溶液、复方氯化钠溶液和２．９％柠檬酸钠溶液解冻牛的冻精进行比较，精子活力提高１６．２３％（Ｐ＜０．０１）、１５．４３％（Ｐ＜０．０１）和１２．６７％（Ｐ＜０．０５）；顶体完整率提高１４．１２％（Ｐ＜０．０１）、１３．０３％（Ｐ＜０．０１）和１１．０７％（Ｐ＜０．０５）；而精子畸形率和精清中ＧＯＴ活性均明显地降低（Ｐ＜０．０５）；精子存活时间延长。试验结果表明，用ＶＢ１２注射液解冻牛的冻精对精子形态结构有保护作用．是一种较理想的解冻液。     

VitB12和0.9%NaCl溶液替代牛冻精解冻液的试验报告

为了便于在农村开展牛冷冻精液人工授精工作，充分发挥现有技术设备的作用，加快黄牛品种改良的进程，提高情期受胎率。针对农村地区自制解冻液较为困难，依据国内外对VitB。和0．9％NaCI溶液可作替代牛冷冻精液的解冻液的报导，于1998年3月一1998年7月历时4个月开展了以医用＼TitBIZ和0．9％NaCI溶液作牛冷冻颗粒精液解冻液的试验，目的在于摸索农村地区安全、卫生、经济、简便而有效的解冻液应用技术，促进农村地区牛杂交改良工作的进展。州旧l。和0．9竹地问溶液在农村乡镇医院可购得，使用方便。将试验结果报告如下：l材料和方法1…     

鸡精液稀释输精效果的研究报告

以ＢＰＳＥ，ＢＪＪＸ，１％ＮａＣｌ，ＮＡＵＰＥ四种稀释液１：１稀释鸡精液及原精液的输精效果表明，稀释精液和原精液之间以及不同稀释液之间，种蛋的受精率均无显著差异（Ｐ＞０．０５）；以１％的ＮａＣｌ溶液稀释鸡精液，每次输入精子数为０．２５，０．５０，０．７５，１．０亿／只的输精效果表明，每次输入７５００万／只精子即可在输精间隔为５天时确保种蛋必要的受精率。     

解冻精液渗透压的序列测定

用中药解冻液与２．９％柠檬酸钠液解冻牛冷冻精液后，在保存期内精液渗透压序列的一致性与精子活力的巨大反差，给保护液的组成提供了一些新的思路。     

双优解冻液

双优解冻液是牛羊冷冻精子的良好复苏剂,其解冻质量的各项指标均比其它解冻液高。我们用2.9％的柠檬酸钠、维生素B_(12)注射液和双优解冻液分别对牛羊颗粒冷冻精作了解冻效果比较,并用解冻精液对内蒙古乌盟冷冻站的奶牛进行了输精试验。结果,双优解冻液解冻的精液比用上述二种溶液解冻的精液精子活力提高26.4％(20％～     

应慎选VB_(12)注射液作牛的冻精解冻液

为加快杂交肉牛的改良步伐，大力发展肉用牛，我县自１９９６年在全县的７个肉牛生产的重点乡镇，建立了牛的杂交改良人工授精点，推广黄牛冷配技术。几年来，我们一直采用ＶＢ１２注射液为主作为牛的冻精解冻液。此间，我们先后使用过１０多家厂家生产的ＶＢ１２注射液，发现各厂家生产的ＶＢ１２解冻精液后，精子活力和室温存放维持活力时间以及配种授精母牛的受胎率有显著的差异。同时我们还自配了葡萄糖、柠檬酸解冻液与ＶＢ１２解冻作了比较，认为还是使用ＶＢ１２各方面优于自配解冻液。现将我们在使用过程的测试对比和母牛受胎效果情…     

Percoll法处理牛精子对体外受精胚胎发育的影响

牛冷冻精液解冻后，在Ｐｅｒｃｏｌｌ梯度液中４００ｇ离心２４ｍｉｎ有效地获得了５７．８７％±８．０％的精子回收率；对照组上游法精子回收率仅为１５．８７％±１．９％（Ｐ〈０．０５）。Ｐｅｒｃｏｌｌ和上游２种方法分离的精子在受精液中８，１８ｈ后的活率，分别为６０％，１０％和７０％，２０％，２种浓度Ｐｅｒｃｏｌｌ法分离的精子对不同成熟处理的卵母细胞体外受精子（ＩＶＦ）卵裂率的影响，精子最终浓度为２×１０＾     

牛卵泡卵母细胞冷冻保存后发育潜力的研究

对用３种不同方法（Ａ法：１．０ｍｏｌ／Ｌ甘油平衡，从２０℃开始以１℃／ｍｉｎ的速度降至－℃，植冰，１０ｍｉｎ后以０．３℃／ｍｉｎ降至－３０℃，再以０．１℃／ｍｉｎ降至－３３℃，投入液氮；Ｂ法：１．６ｍｏｌ／Ｌ丙二醇＋０．ｌｍｏ１／Ｌ蔗糖平衡，５℃冰箱中保存１５ｍｉｎ，从Ｏ℃开始按Ａ法中的程序降温；Ｃ法：即玻璃化法）冷冻保存的牛ＧＶ期卵母细胞的发育潜力进行了研究。解冻后，Ｃ组卵母细胞形态正常率显著高于Ａ、Ｂ两组。３种方法冷冻的卵母细胞成熟培养后，平均卵丘扩展率为６０％，其中Ｃ组最高（６９．９％）。卵丘扩展的卵母细胞中，７９．３％发生ＧＶＢＤ，但大多数没有达到ＭＩ期。３组冷冻卵母细胞的体外成熟率、体外受精率分别为１４．２％、８．３％、２０．０％和１０．０％、７．１％、１２．１％，其中Ａ组中有１枚卵裂。     

天然水质与精细胞的体外衰老

用有整体性的机能特征指标测定表明，我省农村所有的６种天然水质，经简便处理、配制的中试解冻液（Ｗ－ＴＣＭＴＳ），解冻牛的颗粒冷冻精液并在３７－３８℃下培养后，精细胞的体外生存期、维持０．３活率时间及生存指数。可极显著地（Ｐ〈０．０１）或显著地（Ｐ〈０．０５）优于双重蒸馏水和化学纯的２．９％柠檬酸钠制备的通用解冻液，我省现有多种天然饮用水，可不经传统的蒸馏制备方法，用于Ｗ－ＴＣＭＴＳ的配制。     

奶牛半胚裸露冷冻保存试验

本试验研究了不同冷冻方法，半胚冷冻前不同培养时间及不同冷冻保护液对奶牛７日龄半胚裸露冷冻效果的影响，结果以１０％（Ｖ／Ｖ）甘油＋１０％（Ｗ＋Ｖ）葡聚糖（Ｔ－５００）＋０．１Ｍ蔗糖＋２０％ＦＣＳ－ＰＢＳ溶液为冷冻保护液，裸露冷冻前培养１．０小时的半胚，获得了８２．４％（１４／１７）的较高存活率。试验结果表明，半胚冷冻前培养时间及不同保护液对奶牛半胚裸露冷冻有显著影响。     

奶牛胚胎分割与半胚裸露冷冻保存试验

本试验研究了①Ａ、Ｂ、Ｃ三个质量等级胚胎的分割效果；②五种不同冷冻方法冷冻裸露半胚的存活情况；③冻前培养３．０、１．５～２．０、１．０小时的裸露半胚存活率。结果①Ａ、Ｂ、Ｃ级胚胎的分割成功率分别为９５．８％（９２／９６）、７且．４％（７０／９８）、３０％（６／２０），三者间差异极显著（Ｐ＜０．０１）；②半胚冷冻前以２０％ＦＣＳ－ＰＢＳ液培养３．０小时后，以五种不同冷冻方法冷冻，均未获得存活半胚；③半胚冷冻前培养３．０、１．５～２．０、１．０小时后，以添加１０％而聚糖的１０％甘油＋０．１Ｍ蔗糖／ＰＢＳ液冷冻，分别获得了０％（０／４５）、６８．８％（１１／１６）、７５．０％（９／１２）的存活率。结果表明，胚胎质量是影响胚胎分割成功率的关键因素，半胚冷冻前的培养时间是影响裸露半胚存活的重要因素。     

用含果糖成分的解冻液解冻牛颗粒冷冻精液的效果试验

目前、我区在牛的冷冻精液配种过程中,一般都使用2.9%柠檬酸三钠液作为解冻液,由于此液成分单纯,满足不了精子代谢的营养需要,使用这种解冻液一般只能现配现用,给生产应用带来了许多不便.为了进一步提高牛颗粒冷冻精液的解冻效果,我们在解冻液小加入能被精子直接利用的果糖成分,以期达到提高配种受胎率的目的,特进行本试验.     

受精用液种类对牛狼母细胞体外受精的影响

比较了应用改良Ｔｙｒｏｄｅ＇ｓ液与０．６％ＢＳＡ－ＴＣＭ１９９作为受精液（实验１）、这两种受精液的不同配比作为受精液（Ｔ：ＢＴ分别为３：１、１：１和１：３；Ｔ为对照组，实验２）和在不同精时间采用不同受精液（先用Ｔ，ＩＶＦ２４ｈ后改用ＢＴ或ＴＣＭ１９９＋１０％发情牛血清，实验３），对经体外成熟培养（ＩＶＭ）后的牛卵母细胞体外受精（ＩＶＦ）效果的影响，结果，应用成分复杂的ＢＴ作为受精液，可以提高受精卵     

~(60)CO-γ射线辐照和高压熏蒸对SPF鸡饲料营养成分的影响

采用３．０Ｍｒａｄ６０ＣＯ＿γ射线辐照和高压熏蒸（１２１℃，２０ｍｉｎ）ＳＰＦ鸡饲料，并对处理后饲料营养成分于试验后７天进行分析。辐照后７天粗蛋白、ＶＡ、ＶＤ３、ＶＥ、ＶＢ１、ＶＢ２、ＶＢ６、ＶＢ１２、Ｃｕ、Ｆｅ、Ｍｎ、Ｚｎ、Ｓｅ的损失率（％）依次为１．１、４．４、２．３、５．３、５．０、６．７、１０、０、０、０、０、０。辐照后ＶＢ６、ＶＢ１２含量与对照组比较，差异显著（Ｐ＜０．０５）。熏蒸后粗蛋白、ＶＡ、ＶＤ３、ＶＥ、ＶＢ１、ＶＢ２、ＶＢ６、ＶＢ１２、Ｃｕ、Ｆｅ、Ｍｎ、Ｚｎ、Ｓｅ的损失率（％）依次为９．７、１１．５、１５．３、２６．７、２０、１０、１３．３、２０、０、０、０、０、０。熏蒸后粗蛋白、ＶＡ、ＶＤ３、ＶＥ、ＶＢ１、ＶＢ２、ＶＢ６、ＶＢ１２含量与对照组比较，差异显著（Ｐ＜０．０５）。     

^60CO—γ射线辐照和高压熏蒸对SPF鸡饲料营养成分的影响

采用３．０Ｍｒａｄ＾６０ＣＯ－γ射线辐照和高压熏（１２１℃，２０ｍｉｎ）ＳＰＦ鸡饲料，并对处理后中料营养成分于试验后７天进行分析，辐照后７天粗蛋白、ＶＡ、ＶＤ３、ＶＥ、ＶＢ１、ＶＢ２、ＶＢ６、ＶＢ１２、Ｃｕ、Ｆｅ、Ｍｎ、Ｚｎ、Ｓｅ的损失率（％）依次为１．１、４．４、２．３、５．３、５．０、６．７、１０．０、０、０、０、。辐射后ＶＢ６、Ｃｕ、Ｆｅ、Ｍｎ、Ｚｎ、Ｓｅ的损失率（％）依次为９．７、１１．５     

碱茅（Puccinellia tenuiflora）对盐胁迫及渗透胁迫的适应性反应

盆栽条件下对碱茅在等渗的盐（ＮａＣｌ）及渗透胁迫（ＰＥＧ模拟）下的生长，水分含量，离子（Ｋ＋、Ｎａ＋）吸收与选择性以及渗透反应进行了比较研究。结果表明，在－０．０１～－１．５ＭＰａ渗透势范围内，随渗透势降低植株的干重及水分含量均迅速降低，ＰＥＧ胁迫比等渗的ＮａＣｌ胁迫下降幅更大。ＮａＣｌ及ＮａＣｌ＋ＰＥＧ胁迫下，随溶液渗透势的降低（或ＮａＣｌ浓度的增大）植株Ｎａ＋浓度，Ｎａ＋／Ｋ＋及对Ｋ＋（相对于Ｎａ＋）的选择性均迅速增大，而Ｋ＋浓度未显著变化。植株Ｎａ＋主要是被动吸收的结果，而Ｋ＋则是主动的选择性吸收的结果。植株渗透势随胁迫溶液渗透势降低而线性降低，ＮａＣｌ胁迫下植株渗透势约比等渗的ＰＥＧ胁迫下低－０．１４～－０．２０ＭＰａ。ＮａＣｌ胁迫下，当渗透势高于－０．９ＭＰａ时，植株渗透势的降低（渗透反应）主要可归于由Ｎａ＋积累引起的渗透调节与脱水；渗透势－０．９～－１．５ＭＰａ时，渗透调节可解释植株渗透反应的７２％～７８％（其中，由Ｎａ＋引起的渗透调节占总渗透调节的５６％～７３％），脱水可解释２２％～２８％。ＰＥＧ胁迫下，当溶液渗透势高于－０．７ＭＰａ时，植株的渗透反应主要是脱水引起的；渗透势－０．７～－１．５     

维生素B12当解冻液的精子活力及受胎效果

维生素Ｂ１２当解冻液的精子活力及受胎效果我市自１９７８年开展黄牛冻精配种以来，受胎率一直徘徊在８０％左右。其主要原因是解冻液品种多，个别质量差，解冻后精子活力低，影响母牛受胎率。为此，我们对维生素Ｂ１２等解冻液进行筛选及配种试验，发现ＶＢ１２解冻液对...     

有VP12稀释鲜精后精子存活时间及输精试验报告

ＶＢ１２注射液不仅可以延长绵羊精液在室温条件下的存活时间，而且可以提高精子活力、存活时间及配种效果。试验结果表明，试验组比对照组稀释后的有效精子存活时间提高１２．９％（Ｐ〈０．０１），配种率比对照组提高１６％（Ｐ〉０．０１），用ＶＢ１２注射液稀释绵羊精液对精子有保护作用，因此可作为绵羊鲜精稀释液。     

提高细管冻精解冻后活力的试验

细管精液具有卫生、使用方便、标记清楚等优点,在世界上它早已成为牛冷冻精液的最主要剂型。在我国,也将由颗粒冻精转向细管冻精。我们从1979年就开始进行牛细管精液的冷冻试验,但早期细管冻精的解冻后活力很不理想。经过长期的试验改进,现在细管精液的解冻后活力已经赶上或超过了我站颗粒精液的水平。现在年产细管精液20万支,受胎效果好,用户满意。在试验改进过程中,我们发现,通过对基础液配方、甘油浓度、每支细管分装精液量和冷冻速度这四个方面的改进,可使牛细管精液的解冻后活力得到明显提高。为了验证