亚硒酸盐增菌基在食品沙门氏菌检验中的应用和改进

为了提高分离食品或外环境标本中沙门氏菌属的阳性率,必须先进行增菌培养(预增菌→选择增菌或直接选择增菌)。可用于沙门氏菌的增菌培养基很多,其中最常用者为亚硒酸盐类培养基。亚硒酸盐胱氨酸肉汤(简称SC)是美国食品药品局推荐的作为食品沙门氏菌检验的标准选择增菌培养基,亚硒     

进口鱼粉中沙门氏菌的分离和鉴定

1986年3月,从一批秘鲁进口的鱼粉中分离出一株沙门氏菌,经鉴定为E1群中的法尔肯泽血清型(Serogroup E1 Falkensee),这个菌型目前在我国尚未见过报道。现将分离鉴定过程介绍如下:一、接种与培养每份鱼粉样品称取两个12.5g分别接种在盛有125ml四硫磺酸盐增菌液(T.T.增菌液)和125ml亚硒酸盐增菌液(S.F.增菌液)的2个250ml广口瓶中,震荡器震荡10分钟左右,37℃培养24小时后,分别挑取T.T.和S.F.增菌液一环,划线接种于SS平板,37℃     

小肠结肠炎耶氏菌增菌方法的研究

小肠结肠炎耶氏菌(以下简称耶氏菌)一般检查标本含有菌数少,直接培养阳性率不高,多要求增菌后分离培养。到目前曾经使用过的增菌培养基有普通的磷酸盐缓冲盐水、亚硒酸盐增菌液、硫代羟乙酸盐肉汤、胰胨黄豆肉汤、葡萄糖肉汤、普通胨水或生理盐水等,其中使用较多的是磷酸盐缓冲盐水和亚硒酸盐增菌液,但究竟那一种方法好,     

出口蝮蛇中三相鞭毛抗原沙门氏菌的分离鉴定

1987年10月,我们从出口的蝮蛇中检出一株具有三相鞭毛抗原的波茨坦(S.Potsdan)沙门氏菌变种,这在国内外尚未见过报道,现将分离鉴定情况报告如下: 一、分离培养 活剖蝮蛇样品,无菌采取肠道,直接投入亚硒酸盐煌绿增菌液内增菌后,划线接种SS琼脂平板,37℃培养24小时,挑取园整、光滑中等大小的可疑菌落     

拱北所首次从拟进口的肉骨粉中检出沙门氏菌

1988年8月,广东省中山市某单位拟从澳门某屠宰场进口肉骨粉24吨,经产地抽样检疫,发现沙门氏菌,现将检疫结果报告如下: 一、实验步骤 1.采样:产地随机抽样4份,每份约1000克,以抽样袋密封送实验室检验。 2.分离培养:从抽样袋中称取检样,每份15克,加入亚硒酸盐增菌液中,37℃增菌     

进口鱼粉肠道致病菌检验方法的比较试验

在对进口鱼粉进行肠道致病菌(沙门氏菌属和志贺氏菌属)的检验过程中发现,按照《动物检疫操作规程》(简称《规程》)中的进口鱼粉肠道致病菌的检验(试行)方法,在用亚硒酸盐增菌培养基进行选择性增菌时,由于鱼粉呈酸性,致使增菌液的pH值偏酸(在增菌培养基中加入被检样品后,经测     

黄芩提取物治疗肉仔鸡白痢效果

<正>黄芩为唇形科植物黄芩的根,具有清热燥湿、泻火解毒、抗病原体、抗炎、调节免疫功能、镇静、保肝、利胆、促凝血、安胎等功效。1对鸡白痢的治疗试验1.1鸡白痢沙门氏菌标准血清、鸡白痢沙门氏菌标准抗原(作对照用)。1.2亚硒酸钠增菌培养基、三糖铁培养斜面、S.S.培养基自备。1.3黄芩提取物由华北制药有限公司提供。     

从澳大利亚进口牛肉中检出伊斯坦堡沙门氏菌

1990年12月底,上海太平洋大酒店从澳大利亚进口牛胸脯肉16箱,计388.5公斤.经我所抽样检验,检出一株伊斯坦堡抄门氏菌(S.istanbul).现将检疫结果报告如下. 一、样品来源在酒店对澳大利亚进口牛肉开箱后随机取样. 二、检验步骤及结果 1、增菌培养:按常规在无菌条件下把牛肉样品剪碎放入亚硒酸盐胱氨酸增菌液(S.C).置37℃培养24小时.增菌液出现少量气泡,变为棕红色。     

天津某猪场沙门氏菌的分离鉴定

利用亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)、沙门氏-志贺氏属琼脂培养基(SS)、科玛嘉(ECC)沙门氏菌显色培养基和分子生物学方法对猪场疑似沙门氏菌感染的仔猪腹泻粪样进行沙门氏菌的分离鉴定。根据SS选择性培养基上菌落形态选取疑似沙门氏菌菌落进行革兰氏染色,确定是否符合沙门氏菌的革兰氏染色形态,并将疑似菌落涂布于科玛嘉(ECC)沙门氏菌显色培养基,当长出紫色菌落时可初步确定为沙门氏菌,最后进行PCR鉴定。将分离出的阳性沙门氏菌进行玻片凝集试验鉴定血清型。经鉴定,分离株的血清型主要有鼠伤寒沙门氏菌与德尔卑沙门氏菌两种。药敏试验结果表明,沙门氏菌对青霉素类的氨苄西林、阿莫西林及第1代喹诺酮类药物萘啶酸表现出明显的耐药性,对磷霉素、头孢类药物敏感。     

猪霍乱沙门氏菌的快速分离鉴定

猪霍乱沙门氏菌是引起仔猪副伤寒的主要病原菌,给养猪业造成重大危害。本文旨在建立一套细菌快速分离鉴定方法,为该病流行病学调查提供有效手段。从临床初诊为仔猪副伤寒的病猪采集粪便,接种亚硒酸盐亮绿增菌液增菌后,划线于SS琼脂培养基,挑无色透明菌落纯化。纯化菌落用美国B IOLOG自动细菌鉴定仪GN2肠杆菌鉴定板鉴定,同时用常规生化鉴定管鉴定,结果符合猪霍乱沙门氏菌的生化特征。PCR扩增invA基因,测序鉴定PCR产物,结果与猪霍乱沙门氏菌参考序列同源性达99%以上。分离菌株接种小白鼠,证明其对小白鼠有致病性。用沙门氏菌属标准血清检测证实其抗原式为6,7∶c∶1,5,符合猪霍乱沙门氏菌的抗原特征。应用以上方法从全国各地病料中分离鉴定了40多株猪霍乱沙门氏菌,为猪霍乱沙门氏菌病的流行病学调查提供了依据,同时证明该方法切实可行。     

广东10个屠宰场猪肉中3种食源性致病菌的检测

为了解肠出血性大肠埃希氏菌O157:H7、沙门氏菌和空肠弯曲菌等3种食源性致病菌在生猪屠宰场的污染情况。采集广东惠州和清远两地共10家生猪屠宰场498头猪肉样品,分别经改良EC新生霉素增菌肉汤、SC(亚硒酸盐胱氨酸增菌液)和Bolton肉汤增菌,用大肠埃希氏菌O157:H7、沙门氏菌和空肠弯曲菌的特异性引物进行PCR扩增及测序检测,阳性菌液再分别涂抹于山梨醇麦康凯平板、DHL(胆硫乳琼脂)和Skirrow血琼脂,挑取疑似菌落再次PCR验证,计算检出率。结果显示,检出大肠埃希氏菌O157:H7阳性样本2份,检出率0.4%,检出沙门氏菌阳性样本70份,检出率14.06%,空肠弯曲菌未检出。结果表明,惠州和清远两地屠宰场均存在食源性致病菌污染情况,其中沙门氏菌污染较为严重,惠州地区检出率高于清远地区。提示屠宰场应加强屠宰过程中环境和加工用具的消毒,以保证屠宰环节的食品安全。     

从进口冷冻海贝中检出病原性大肠埃希氏菌

大肠埃希氏菌是人和动物的重要致病菌,也是主要食物中毒菌之一,能污染水源、食品、饲料,因而是食品卫生的检测对象。今年3月我省某饭店从香港转口一批日本产的冷冻海鲜品,经检验从贝肉中分离出致病性大肠埃希氏菌,现报道如下: 1 预增菌和增菌培养 1.1 以无菌操作称取试样25g,剪碎、碾磨后加入225ml缓冲蛋白胨水,置36±1℃温箱预增菌4小时。 1.2 取预增菌液10ml加入100ml亚硒酸盐胱氨酸增菌液中,36±1℃增菌24小时。 2 分离培养与菌落形态 2.1 用接种环取增菌液划线于胆疏乳琼脂平板,36±1℃培养24小时。 2.2 菌落圆形,突起,表面光滑,呈浅粉红色;     

种鸡饲养环境和死胚中沙门菌的分离及其对药物和噬菌体的敏感性测定

为了解某肉种鸡场沙门菌感染来源、类型及其对药物和噬菌体的敏感性,研究对种鸡场内外养殖环境和孵化场死胚进行了沙门菌采样检测.样品通过亚硒酸盐胱氨酸增菌液增菌培养后接种显色培养基进行沙门菌分离,并通过生化试验、PCR和血清型进一步鉴定;通过MIC测定了解沙门菌分离株对10种抗菌药物的药敏性;通过双层平板法检测了一株沙门菌噬...     

从盐水火腿中检出多种肠道致病菌

近期我们从一批盐水火腿中检出大肠杆菌、沙门氏杆菌、枸橼酸杆菌属和克雷伯氏菌属致病菌,现报告如下: 一、细菌分离鉴定 1.细菌分离:随机抽取一批待检盐水火腿样品10份(含复检4份),分别接种营养肉汤和亚硒酸盐煌绿(SBG)增菌液,置37℃温箱孵育24h后,再分别接种S—S琼脂板,37℃温箱24h培养,见多种色泽,形态不一的菌落。     

艾叶挥发油体外抗菌试验

本试验采用超声波萃取方式提取河南蕲艾艾叶挥发油。用麦康凯琼脂培养基、HE琼脂培养基及营养琼脂培养基对大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌进行复苏培养,并将复苏后的菌种接种营养肉汤于37℃振荡培养箱中进行4 h增菌培养。吸取菌液2 mL到营养琼脂平板,菌液平板中贴3张彼此有一定间距的滤纸纸片(Φ:5 mm),每种菌做6个梯度(5.00、2.50、1.25、0.60、0.30、0.15μL/L),每个梯度做3个重复,并做相应对照(氟苯尼考、庆大霉素、空白)。每张纸片中央用微量移液器加上等量艾叶提取物,置37℃恒温培养箱中培养,测定大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌在加入艾叶提取物后的抑菌圈的大小。试验结果表明:提取物浓度越高,抑菌作用越明显。艾叶提取物对大肠杆菌的效果最好,对鸡白痢沙门氏菌相对较差。5.00μL/L组效果最好、2.50μL/L组次之,1.25、0.60μL/L组对大肠杆菌有抑菌作用,但对鸡白痢沙门氏菌无抑菌作用,0.60μL/L以下浓度对大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌均无抑菌作用。     

沼泽红假单胞菌与鸡肠源沙门氏菌颉颃作用的研究

为了探索和研究沼泽红假单胞菌及代谢物对鸡肠源沙门氏菌生长繁殖的抑制或颉颃作用,试验采用不同培养方式分别观察沼泽红假单胞菌全菌液、菌体及代谢混合物与鸡肠源沙门氏菌和甲型副伤寒沙门氏菌标准菌株的颉颃或抑菌现象,检测其最小抑菌浓度,并测定其繁殖生长曲线以定量评价其抗菌活性。结果表明:沼泽红假单胞菌全菌液、菌体及代谢混合物对鸡肠源沙门氏菌分离株和甲型副伤寒沙门氏菌都具有抑制或颉颃作用。相比较而言,萃取得到的沼泽红假单胞菌菌体及代谢混合物的抑菌作用更明显。说明沼泽红假单胞菌是一个不错的治疗和控制鸡肠源沙门氏菌感染的益生菌。     

从进境急冻花胶中检出沙门氏菌的报告

２００１年４月，增城某海产制品厂鸟干达进口急冻花胶一批共１６．７２５吨，１１１５箱，现场检疫时，发现其中约４０％包装破损，且有腐蚀变质现象；立即分别对包装完好和包装破损的花胶进行抽样检验，其中包装破损的花胶检出山夫顿堡沙门氏菌。兹将分离与鉴定结果报告如下。１ 增菌与分离培养 将该批抽取的样品分别编号为包装破损且有腐蚀变质现象的花胶ＺＣ０１；包装完好，无变质现象的花胶 ＺＣ０２；再各随机取样品 ２５０ ｇ置室温下解冻，用无菌操作将其剪碎后于亚硒酸胱氨酸增菌液中 ３７℃培养 ２４ ｈ。然后在 Ｓ．Ｓ琼脂平板…     

基于等位基因特异性PCR原理建立鸡白痢沙门氏菌PCR方法

根据鸡白痢沙门氏菌与鸡伤寒沙门氏菌的rfbS基因在第237和598位碱基的不同,设计和合成等位基因特异性PCR引物,建立快速检测鸡白痢沙门氏菌的PCR方法,并应用该法对鸡白痢沙门氏菌临床分离样品进行了PCR鉴定。结果显示,该PCR方法能特异性地鉴定鸡白痢沙门氏菌,检测灵敏度达18 pg/μL DNA,4.7×10⁴ CFU/mL菌液,表明建立的等位基因特异性PCR方法能准确而快速地鉴定鸡白痢沙门氏菌。     

有机硒在家禽研究上的进展

目前,饲料中所用的硒源主要有无机硒(亚硒酸盐、硒酸盐)、有机硒(硒蛋氨酸、硒赖氨酸、硒酵母)等。传统的补硒方法是在日粮中添加亚硒酸钠、硒酸钠等形式的无机硒。无机硒虽价格低廉、含硒量高,但毒性大、使用剂量难掌握且吸收转化率低。     

氦氖激光辐射对鸡白痢沙门氏菌的影响

将鸡沙门氏菌增殖后,稀释,用功率为30毫瓦的氦氖激光照射,将细菌分为空白对照组和实验组,实验组用的氦氖激光照射,将照射后的菌液接种培养基,根据实验组和对照组菌落数差别判定杀菌效果。同时将在平板上培养的细菌进行照射,进行生化实验,检验氦氖激光照射对鸡白痢沙门氏菌的生化特性的影响。结果显示：氦氖激光照射前后活细菌数存在显著变化,数量减少,说明氦氖激光照射可以抑制鸡白痢沙门氏菌。