一株鸭源大肠杆菌的分离、鉴定以及药敏试验

从佛山市三水区某鸭养殖场送检的疑似大肠杆菌病的病死鸭中,采集病死鸭的肝脏、脾脏进行细菌的分离培养、染色镜检、生化鉴定,分离鉴定出鸭大肠杆菌。生化试验结果表明,该菌可分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖和乳糖;对尿素反应呈阴性;硝酸盐反应呈阴性;枸橼酸盐反应呈阴性;硫化氢反应呈阴性。对该菌株采用PCR技术对16SrRNA进行扩增,并且对扩增结果进行测序分析,结果显示,该菌株与大肠杆菌的相似性为99%以上,所以判定该分离菌为大肠杆菌。经药敏试验后,结果表明,该菌株对头孢曲松、头孢噻肟、丁胺卡那、氯霉素等7种药物高度敏感,而对临床上常用的青霉素、阿莫西林、利福平等抗菌药物有较强的耐药性。综合上述结果,该病例可初步确诊为大肠杆菌病,且该菌具有多重耐药性。本研究为临床防治鸭大肠杆菌提供一定的理论依据,并为制备鸭大肠杆菌自家苗奠定基础。     

某鸡场大肠杆菌和沙门氏菌病病原的分离鉴定及药敏试验

为了摸清某鸡场2004年夏季鸡死亡的病因,对死亡鸡心血、卵黄进行了细菌分离、革兰氏染色镜检、生化试验、药敏试验、致病力测定。结果显示:分离菌革兰氏染色阴性、呈单个、成对或成丛排列。生化试验表明分离菌为大肠杆菌和沙门氏菌;药敏试验结果,分离的大肠杆菌对头孢氨苄、头孢曲松、哌拉西林、壮观霉素、多粘菌素B等药物高度敏感,氨苄青霉素、链霉素、四环素、乙酰螺旋霉素、复方新诺明等药物产生耐药;沙门氏菌对氧氟沙星、壮观霉素、新霉素、阿米卡星、头孢曲松、哌拉西林、氟罗沙星等药物高度敏感,麦迪霉素、杆菌肽、交沙霉素、万古霉素等药物耐药。分离的大肠杆菌和沙门氏菌接种小白鼠,能引起死亡,显示具有致病性。     

仔猪水肿病的分离鉴定与防治

仔猪水肿病是由溶血性大肠杆菌毒素所引起的断奶仔猪眼睑或其它部位水肿、出现神经症状为主要特征的疾病,试验对山西省吕梁地区某猪场送检的疑似仔猪水肿病的猪通过临床症状、病理剖检变化观察,细菌分离培养、生化试验、致病性试验、大肠杆菌O抗原血清型鉴定,结果显示,该病原菌是致病性大肠杆菌O138,通过药敏试验筛选出敏感药物头孢噻肟钠,和中药联用综合治疗,取得很好的疗效。     

鸡致病性大肠杆菌分离鉴定及药敏试验

以干海乡一生态鸡鸡苗场中分离得到的鸡致病性大肠杆菌病原菌为试验对象,采用细菌形态学观察以及生化试验、动物试验和血清学试验等方法,表明所分离到的5个菌株为致病性大肠杆菌。用氨苄青霉素、庆大霉素、四环素、磷霉素、新霉素、土霉素、链霉素、红霉素、氟苯尼考、氧氟沙星、头孢曲松、阿莫西林等12种药物对5个不同菌株进行药敏试验比较。结果表明:5个菌株均对新霉素、阿莫西林、头孢曲松和磷霉素高度敏感。对庆大霉素、四环素、土霉素等抗菌药物耐药性极强。     

雏鸭混合感染鸭疫里默氏杆菌和大肠杆菌的诊断和防治

不少鸭场和农户散养的鸭群,常在2～3周龄发病,死亡率较高.我们从养殖户送检的病鸭和死鸭的肝脏、心血、脑等部位分离出了两种可疑细菌.经病理剖检、接种专用培养基、染色镜检、生化鉴定,确诊为鸭疫里默氏杆菌和大肠杆菌的混合感染.经动物试验证实了分离菌的致病性,并对分离菌进行药物敏感性试验,现将结果报道如下.     

祁县地区奶牛乳房炎病原菌的分离与鉴定

为了了解祁县地区奶牛乳房炎的主要致病菌及其耐药情况,对部分奶牛场采样进行致病菌的分离鉴定和药物敏感试验。结果表明,金黄色葡萄球菌、链球菌和大肠杆菌为该地区奶牛乳房炎的主要致病菌,且大肠杆菌对大多数药物不敏感,已产生了较强的耐药性;而金黄色葡萄球菌和链球菌对大多数药物敏感。     

金鱼竖鳞病病原菌的分离鉴定及药敏试验

为进一步了解引起金鱼竖鳞病的原因和病原,从患竖鳞病的濒死金鱼体内分离出3株细菌,经细菌形态、培养特征、生理生化特性鉴定,3株细菌均为嗜水气单胞菌。感染试验证实,分离菌具有较强的致病性。药敏试验结果显示,该菌对氟苯尼考、菌必治、左氧氟沙星、氯霉素、新霉素、恩诺沙星等药物高度敏感。     

新疆昌吉地区鸡大肠杆菌部分菌株分离鉴定及防治研究

从新疆昌吉州地区10个发生疑似大肠杆菌病的商品肉鸡场，无菌采取病鸡、死鸡的心血、肝、脾、肺、肾等组织进行病原菌的分离培养，经过培养特性、形态、染色特性和生化试验，鉴定出21株大肠杆菌，分离株对7日龄雏鸡均具有致病性。从21株致病性大肠杆菌中共鉴定出8种血清型，分别为O1、O3、O6、O36、O88和O103。其中O1、O2和O78为优势血清型，占分离菌株的77．39％。采用13种常用抗菌药物进行药敏试验，四种药物敏感率在90％以上。但21个分离菌株均具有多重抗药性，至少可以抵抗6种以上抗攻药物的杀菌或抑菌作用，而且同一血清型的菌株其药物的敏感性也不同。在药敏试验基础上，选用敏感药物采用不同方案对5个发生大肠杆菌病的鸡场进行了临床治疗试验，取得了良好的使用效果，治愈率达到94％以上。为建立该地区鸡大肠杆菌病的药物防治模式奠定了基础。     

雏鸭大肠杆菌病病原的分离鉴定及药敏试验

从荣昌县死亡雏鸭肝、心血分离到一种细菌,革兰氏染色阴性、单个、成对或成丛排列。接种小白鼠能引起死亡。生化试验结果显示该菌对葡萄糖,麦芽糖,赖氨酸等均能发酵。不发酵蔗糖,棉籽糖,尿素,不能产生H2S。显示该菌为致病性大肠杆菌。药敏实验结果表明分离菌对头孢曲松、头孢他啶、呋喃妥因等药物高度敏感。对庆大霉素、青霉素、链霉素、氨苄西林等产生耐药。     

新疆昌吉地区鸡大肠杆菌部分菌株分离鉴定及防治研究

从新疆昌吉州地区10个发生疑似大肠杆菌病的商品肉鸡场,无菌采取病鸡、死鸡的心血、肝、脾、肺、肾等组织进行病原菌的分离培养,经过培养特性、形态、染色特性和生化试验,鉴定出21株大肠杆菌,分离株对7日龄雏鸡均具有致病性。从21株致病性大肠杆菌中共鉴定出8种血清型,分别为O1、O2、O6、O26、O36、O78、O88和O103。其中O1、O2和O78为优势血清型,占分离菌株的77.39%。采用13种常用抗菌药物进行药敏试验,四种药物敏感率在90%以上。但21个分离菌株均具有多重抗药性,至少可以抵抗6种以上抗菌药物的杀菌或抑菌作用,而且同一血清型的菌株其药物的敏感性也不同。在药敏试验基础上,选用敏感药物采用不同方案对5个发生大肠杆菌病的鸡场进行了临床治疗试验,取得了良好的使用效果,治愈率达到94%以上。为建立该地区鸡大肠杆菌病的药物防治模式奠定了基础。     

84株仔猪黄、白痢E.coli的体外药敏试验

从四川省不同规模化猪场临诊发生典型仔猪黄、白痢猪只的肛试粪样及死亡猪只的心血和肝脏中分离出致病性大肠杆菌８４株。用１２种常用抗菌药物对分离菌株进行了体外药敏测定，结果表明：大肠杆菌存在广泛的耐药性，以多重耐药性为主。庆大霉素、链霉素、痢特灵和喹诺酮类（环丙沙星、蒽诺沙星、诺氟沙星）等药物较为敏感。药敏试验结果为规模化猪场合理用药提供了科学依据     

试验性抗菌药对仔猪水肿病治疗效果

保定市某猪场暴发疫病,经病理剖检、病原分离、生化试验、毒力试验等诊断方法获知此次疫情为致病性埃希氏大肠杆菌引起的猪水肿病。药敏实验表明,细菌分离物对青霉素、链霉素等常用抗生素有耐药性,对氟苯尼考、卡那霉素、环丙沙星等药物极敏。感染猪选用氟苯尼考治疗后康复。     

鸡致病性大肠杆菌油乳剂灭活苗的制备

从山西某地3家鸡场分离出6株鸡大肠杆菌。将分离菌株分别接种试验动物,对小白鼠致死率达83.33%。选择全部致死小白鼠的菌株制成每毫升含100亿个大肠杆菌的油乳剂灭活苗。经试验证明,本疫苗安全、有效。每只鸡免疫接种0.5mL,临床无不良反应,对地方性鸡大肠杆菌病有较好的预防作用。     

鸡大肠杆菌和沙门氏菌混合感染的分离鉴定及药敏试验研究

无菌采取某鸡场送检的病死鸡的心血、肝、肾,进行病原菌的分离、鉴定、生化试验和药敏试验。结果显示引起该鸡场鸡只发病的病原除大肠杆菌外,还伴有沙门氏菌。药敏试验结果显示,此次分离的大肠杆菌对庆大霉素、氟哌酸、氯霉素高度敏感,对复方磺胺、链霉素、环丙沙星中度敏感,对阿莫西林、利福平、卡那霉素不敏感。此次分离的沙门氏菌对氯霉素、阿莫西林、卡那霉素高度敏感,对庆大霉素、复方磺胺、氟哌酸、环丙沙星中度敏感,对利福平、链霉素不敏感。     

对虾白斑综合征病毒VP28酵母表面展示

以pYD1为载体,制备以酒精酵母为载体的基因工程免疫制剂。参照GenBank中对虾白斑综合征病毒VP28基因序列设计引物,PCR扩增得到预期长度的产物,双酶切插入用于酒精酵母表面展示的穿梭质粒载体pYD1,转化大肠杆菌TOP10,提取阳性质粒转化酒精酵母菌株EBY100,诱导表达后,用免疫荧光检测外源蛋白的表达。结果获得VP28酵母表面展示菌,测得最佳诱导时间为36～48h。以此展示酵母活细胞分设两个浓度组,腹腔注射螯虾,检测其毒性。结果表明,此重组酵母对螯虾是安全的,该研究为下一步对虾用活载体免疫制剂效果的研究奠定了基础。     

微波辅助萃取生姜中的有效成分及其抑菌作用研究

本实验以生姜为原料,先用乙醚、正己烷、乙酸、乙酸乙脂、丙酮、乙醇为供试溶剂,确定了乙醇为生姜提取的最佳溶剂。分别以40%、50%、60%、70%、80%的乙醇进行了单因素实验,确定了70%乙醇为最佳提取浓度;再以功率为160w、320w、640w的微波,固液比为1∶10、1∶13、1∶16,对生姜进行150s、180s、210s的辐射处理。所进行的正交实验表明:生姜提取的最佳工艺条件分别为:乙醇浓度70%、微波功率320w、固液比1∶16、提取时间180s。所得生姜提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母和黑曲霉的抑菌实验表明:供试菌的抑菌圈分别为:金黄色葡萄球菌12.3mm、大肠杆菌11.7mm、枯草芽孢杆菌12.1mm、酿酒酵母13.5mm、黑曲霉15.2mm,生姜提取物对供试菌的抑菌效果依次为:黑曲霉>酿酒酵母>枯草芽孢杆菌>金黄色葡萄球菌>大肠杆菌。得到各种供试菌的最低抑菌浓度分别为:金黄色葡萄球菌10.938mg/mL、大肠杆菌43.75mg/mL、枯草杆菌43.75mg/mL、酿酒酵母菌5.469mg/mL、黑曲霉为2.734mg/mL。     

猪胎盘丙种球蛋白的制备及对仔猪大肠杆菌性腹泻的防治试验

采取大肠杆菌多价疫苗重复免疫法,收集母猪胎盘,提纯胎盘丙种球蛋白。并进行了仔猪大肠杆菌性腹泻的防治试验。结果:胎盘丙种球蛋白能明显抑制大肠杆菌的生长(P<0.01);能显著增强不吃初乳仔猪的抗感染能力(P<0.05);对大肠杆菌性腹泻的预防效果优于普通球蛋白(P<0.01),治愈率高于痢特灵(P<0.05)。表明猪胎盘丙种球蛋白对仔猪大肠杆菌性腹泻有显著的预防效果和较强的治疗作用。     

鲑鱼甲病毒E1基因高保守区融合表达及免疫特性的分析

根据Gen Bank中公布的鲑鱼甲病毒(salmonid alphavirus,SAV)SAV 1、SAV 2和SAV3三个基因型中E1基因,选择高保守序列702 bp(436-1137)合成基因,命名为SAV E1,将其克隆到原核表达载体p Cold TF中构建重组质粒。然后将重组质粒转化到大肠杆菌感受态细胞BL21中,经终浓度为1.0 mmol/L的IPTG诱导表达,SDSPAGE和Western blot鉴定,重组蛋白均获得了表达,表达E1重组蛋白约95 k D。用镍离子亲和层析柱纯化重组蛋白,制备抗血清。间接ELISA结果显示,鼠抗重组蛋白E1血清效价为1∶25 600;间接免疫荧光结果显示,鼠抗重组E1蛋白血清可与SAV发生特异反应,由此表明表达的E1重组蛋白具有良好的免疫原性和免疫反应性,为SAV检测方法的建立提供理论依据。     

栉孔扇贝血清中的免疫因子的研究↑（*）

本文对栉孔扇贝血清的细菌凝集活性、抑菌活性和溶菌活性进行研究。选用２４种细菌和真菌进行凝集试验,发现栉孔扇贝血清能够对金黄色葡萄球菌和代远洋弧菌产生凝集作用,血清的细菌凝集作用经数种细菌刺激没有发生改变,说明这种凝集作用是不可诱导的。栉孔扇贝的血清对某些细菌的生长有一定的抑制作用,但在体外彻底杀灭细菌的效果极差,经大肠杆菌和副溶血弧菌刺激后,抑菌效果基本不变。栉孔扇贝血清还具有一定的溶菌作用,而且大肠杆菌的刺激可以明显提高这种溶菌作用。