托盘根水溶性多糖的分离纯化及初步研究

托盘根经热水煮提、醇析、脱淀粉、冻融离心、蛋白酶解、Sevagc法脱蛋白、超滤、凝胶柱层析方法纯化得水溶性多糖RCP，经比旋光度测定、高效液相色谱(HPLC)分析证明RCP为均一组分，分子量7000左右；气相色谱(GC)分析其单糖组成主要为葡萄糖和迹量的鼠李糖。说明RCP是一种中性杂多糖。     

微波协同酶法提取巴戟天多糖工艺研究

[目的]研究微波协同酶法提取巴戟天多糖的工艺条件。[方法]采用单因子试验和正交试验设计确定微波协同酶法提取巴戟天多糖的最佳提取工艺条件。[结果]微波协同酶法提取巴戟天多糖的最佳提取工艺条件为:料液比1∶40 g/ml、800 W微波处理时间2min、pH 5.0、酶用量0.10%、酶解温度40℃、酶解时间40 min,此工艺条件下多糖提取率为7.26%。[结论]微波协同酶法为巴戟天多糖提取的有效方法。     

蜜环菌水溶性多糖的分离、纯化及组成分析

目的从蜜环菌子实体中分离水溶性粗多糖,进一步纯化,得到组分均一的多糖AMP,并研究其组成和性质。方法粗多糖经反复冻融、酶法和Sevage法联合脱蛋白、乙醇分级、柱层析等方法分离纯化得级分AMP。经Sephadex G-100、DEAE-Sephadex A-25、HPLC和比旋光度法验证,AMP分子量及极性均一。结果AMP为均一组分,气相色谱分析多糖组成表明,AMP由Glc、Gal、Man和Fuc组成,其摩尔比为9.98∶3.57∶1.34∶1.00。结论AMP为中性杂多糖。     

无多糖巴戟天基因组DNA提取物的制备

由于巴戟天(Morinda officinalis How)植株中多糖含量较高，故其总DNA的提取明显存在着多糖干扰的问题。多糖可以抑制多种生物学酶类(如聚合酶、连接酶、限制性内切酶等)的活性，对DNA的浓缩也有影响；受多糖污染的DNA呈粘稠的胶状，不便于后续的DNA分子生物学实验操作。笔者在对比多种DNA提取方法的基础上，确定先对材料进行一定的预处理，再用CTAB法提取基因组DNA。这种方法，不但有效地解决了巴戟天基因组DNA受多糖干扰的问题，而且仅需使用常用试剂，实验成本低，简便易行。     

紫菜多糖提取分离及纯化技术研究

在微波浸提与传统热水浸提对比的基础上,研究了紫菜多糖除蛋白、浓缩、沉淀与干燥对品质的影响,以及紫菜多糖组成鉴定.结果表明:微波提取优于热水提取,微波+冻融提取最高值达7.45%;紫菜粗多糖采用蛋白酶水解后再用Sevag法去除蛋白,效果最好;真空冷冻干燥的紫菜多糖质量最佳;紫菜多糖组份由半乳糖、甘露糖、葡萄糖和木糖组成.     

竹叶多糖分离纯化及抗氧化能力的研究

对超临界CO2流体萃取技术提取的竹叶粗多糖采用分级醇沉、脱蛋白质及纤维素柱层析等技术分离纯化,研究分离纯化后的竹叶多糖产物的物化指标。研究结果表明:经超临界CO2流体萃取技术提取得到的毛竹叶粗多糖,采用体积分数为70%的乙醇沉淀,得到预纯化产物,预纯化产物得率17.75%,多糖含量9.586 mgg,总抗氧化能力2.556 mgg VC;预纯化产物再经Sevag法脱蛋白质及DEAE-52纤维素层析柱层析,获得一种中性竹叶多糖,其平均分子量为5.051×104,IC50值为0.178 mgg竹叶多糖,与VC(IC50值为0.158 mgg)相比,具有较好的DPPH清除能力。      

灰树花多糖的分离、纯化与理化性质

灰树花子实体用热水提取，乙醇沉淀，透析冻干得灰树花多糖粗品，再经Sevag法脱蛋白，DEAE－Sephadex A-25柱层析纯化得到4种多糖分别为PGF－1，PGF－2，PGF－3和PGF－4。4种多糖经纸层析，Sephadex G-200柱层析及聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。结果表明都为单一均匀组分：PGF－1经纸层及气相色谱分析证实它是一种葡萄糖；凝胶渗透色谱测定其分子量为11万。红外光谱揭示PGF－1含β－型糖苷键。     

响应面法优化巴戟天多糖提取工艺

为确定巴戟天多糖热水浸提的最佳工艺,以多糖提取率为考察指标,选取液料比、浸提时间、浸提温度3个因素进行单因素试验和基于Box-Behnken设计的响应面试验,利用Design-Expert软件对多糖提取率的二次多项式回归模型进行分析,结果表明:浸提时间对巴戟天多糖提取率影响最为显著,巴戟天多糖提取的最佳工艺为液料比为25∶1 m L·g~(-1),浸提温度为81℃,浸提时间为3.1 h;该条件下多糖提取率为11.282 4%,与模型预测值接近,相对误差仅为0.38%,说明采用响应面法优化巴戟天多糖提取工艺合理可行。     

柳蒿芽多糖的提取及分离纯化

联合采用热水浸提法和微波处理方法提取柳蒿芽多糖,结果表明:当功率480W,液固比25∶1,微波处理15min后,于90℃热水浴,提取时间为4h条件下的提取率最高,可达到8.63%。利用Cellulose-DEAE-52柱进行分离纯化,得到了3个组分多糖PSWP-1、PSWP-2和PSWP-3。     

海藻多糖的分离纯化和组成分析

从海藻水提取液中得到一种多糖粗提物 ,经DEAE -Cellulose -5 2和Superdex 2 0 0柱层析分离纯化得到均一的多糖组分LJ-S -a ,高效液相色谱法测定其多糖的分子量为 6.8× 10 4 ,气相色谱分析其单糖组成为鼠李糖、葡萄糖和半乳糖 ,其摩尔比依次为 :4.3 0∶1.0 0∶1.88。     

巴戟天的组织培养及快速繁殖

以巴戟天苗的叶片、茎尖、茎段为外植体,通过诱导出不定芽进行快速繁殖。比较了不同外植体在添加不同浓度BA和NAA培养基上的诱导效果,结果表明:带节的茎段在MS 6-BA1.0mg/L NAA0.5mg/L上的不定芽诱导率为95%,不定芽在不添加任何激素的MS培养基上生根率为85%,移栽成活率为90%。     

近红外光谱法对巴戟天药材中水分含量的快速测定

建立了巴戟天(Morinda officinalis How.)药材中水分含量的近红外定量模型,可快速测定巴戟天中水分含量.按照《中华人民共和国药典》(2010版)规定采用烘干法测定166批巴戟天药材的水分含量,采集并用多元散射校正法、二阶导数法预处理近红外光谱,结合偏最小二乘法建立了近红外水分定量分析模型.所建立的校正模型的内部交叉验证决定系数为0.985 5,内部交叉验证均方差为0.402 7,校正均方差为0.169,预测均方差为0.180.结果表明,该近红外水分定量模型稳定、准确,可快速进行巴戟天药材中水分含量的测定.     

南药巴戟天毛状根诱导条件优化研究

为探索巴戟天毛状根的诱导条件,该研究选择不同发根农杆菌ATCC15834、AR10、Msu440菌株诱导巴戟天无菌苗的幼芽、叶片、叶柄、茎段等外植体形成毛状根,并研究了共培养时间和乙酰丁香酮(AS)浓度等因素对巴戟天毛状根转化率的影响。结果表明:巴戟天毛状根的最佳诱导条件为:以幼芽为外植体,ATCC15834为转化菌,侵染时间20 min,并在培养基中添加300μmol/L乙酰丁香酮条件下,巴戟天毛状根的诱导转化率最高,可达36.7%。     

微波提取巴戟天中草药中蒽醌含量的应用研究

[目的]优化微波提取巴戟天中蒽醌的提取工艺。[方法]以氯仿为溶剂,微波法提取中药材巴戟天中的蒽醌,以1,8-二羟基蒽醌为对照品,采用分光光度法测定其含量,正交试验研究料液比、提取功率、提取时间对蒽醌提取效果的影响,确定最佳提取条件,并与水浴加热回流法进行比较。[结果]各因素对蒽醌提取效果的影响由大到小依次为:料液比>提取功率>提取时间。与传统提取法相比,微波法分解速度快,试剂用量少,提取效率高,所测结果的准确度和精密度好,经t检验和F检验,2种方法的结果没有显著性差异。[结论]微波法提取巴戟天中蒽醌的最佳提取条件为:料液比1∶7(g/ml),提取功率616W,提取时间8min。     

巴戟天遗传多样性的ISSR分析

利用ISSR技术对福建和广东7个种源的巴戟天材料进行遗传多样性及亲缘关系分析.从100条ISSR引物中筛选出16条能产生稳定多态性的引物用于ISSR分析,共扩增出151个位点,其中多态性位点119个,占总数的78.81％.结果表明,7个种源的巴戟天在分子水平上具有较高的遗传多样性.使用POP-GENE32软件进行聚类分...     

IBA激素对巴戟天扦插条生根的影响

为提高巴戟天的扦插育苗率,对不同年龄巴戟天插条进行不同浓度的IBA激素浸泡扦插处理。结果表明:浓度为50mg/L、100mg/L和150mg/L的IBA溶液均可显著提高不同年龄巴戟天扦插条的生根率、平均生根数和最长根平均长以50mg/L的IBA溶液的处理效果最佳;1~3年生的扦插条以3年生的生根效果最佳,其生根率为88.3%,平均生根数为20.92条,最长根平均长为2.12cm。在生根过程中,POD活性呈先上升后下降的变化趋势,PPO活性呈先升高后下降再升高的变化趋势,IAAO活性呈先下降后升高的变化趋势;POD、PPO活性比对照组的高,而IAAO活性比对照组的低,IBA处理改变了POD、PPO及IAAO的活性进而影响插条生根。     

不同生长年份巴戟天挥发性成分的比较

[目的]分析并比较不同生长年份巴戟天的挥发性成分。[方法]采用同时蒸馏萃取法提取巴戟天的挥发性成分并比较其组分及含量。[结果]15年生巴戟天的挥发性成分鉴定出46种,已鉴定化学成分占总离子流图峰面积的89.98% 10年生巴戟天的挥发性成分鉴定出19种,已鉴定化学成分占总离子流图峰面积的70.01% 6~8年生巴戟天的挥发性成分鉴定出14种,已鉴定化学成分占总离子流图峰面积的63.23%。巴戟天的挥发性成分主要包括酸类、醛类、醇类和烯烃类等。其中,有机酸类含量最高,占总挥发性成分的65.28%,十六酸占总挥发性成分的45.75%。[结论]从巴戟天的挥发性成分中鉴定出的物质随生长年份的增加而增加,其中十六酸、油酸等主要成分的含量与巴戟天的生长年份显著相关。     

巴戟天的生物学特性和繁殖方式对其品质的影响

本研究以种子繁殖、扦插繁殖和组培苗繁殖3种不同方式种植巴戟天,观察栽培期间的生物学特性并测定比较其品质和成活率。结果表明,种植5年后收获时,扦插繁殖的巴戟天根直径、干重、蒽醌类化合物含量较高;组培苗繁殖的成活率较高。     

诺丽叶片DNA的提取及ISSR-PCR 反应体系的建立

[目的]提取诺丽（Morinda citrifoliaLinn.）叶片DNA,并建立ISSR-PCR反应体系。[方法]以3份采自海南、4份采自美国的诺丽种质的叶片为材料,对其DNA提取和ISSR分子标记方法进行了研究。[结果]采用改进的CTAB DNA微量提取法,可以得到高质量的诺丽叶片基因组DNA。用14条不同的ISSR引物对所提取的诺丽基因组DNA进行了ISSR分子标记分析,其中7条引物在诺丽DNA中可扩增出多态性产物。[结论]建立了诺丽叶片基因组DNA快速、高效的提取方法和ISSR标记体系,可为ISSR分析应用于诺丽遗传研究奠定良好的基础。