波尔山羊超数排卵研究

1999～2001年,分别在龙泉成都波尔山羊种羊场、邛峡四川波尔山羊种羊场分场、阳平四川波尔山羊种羊场、都江堰波尔山羊种羊场进行了波尔山羊超数排卵研究.对100只供体用FSH-PG法进行了超排处理,回收胚胎1867枚,平均18.67±8.50枚,其中可用胚1584枚,平均15.84±7.70枚.研究结果表明 (1)用30%聚乙烯吡咯烷酮(PVP)溶液稀释后一次注射总剂量与用生理盐水稀释FSH递减法多次注射,平均每只获可用胚分别为19.0±11.1枚、22±1.00枚;(2)使用国产和进口激素FSH,平均每只获可用胚分别为15.94±8.33枚、15.15±5.03枚;(3)春秋两季超排,平均每只获可用胚分别为19.4±12.14枚、14.85±9.17枚;(4)波尔山羊体况好的,其超排效果好于体况较差的,平均每只获可用胚分别为16.80±8.75枚、13.32±6.53枚;(5)2～3胎母羊的超排效果好于经产4～5胎、育成羊和一胎羊,平均每只获可用胚分别为18.43±8.21枚、14.17±6.34枚、13.33±2.52枚、13.33±2.52枚.以上结果经统计分析,差异不显著.     

影响小鼠超数排卵的若干因素

分析了激素剂量、激素注射间隔时间、发情周期、季节和温度等因素对小鼠超排效果的影响。结果表明:PMSG与HCG剂量为10IU时,见栓小鼠平均获卵数(39.6枚),显著高于5IU(27.2枚)和15IU(25.5枚)激素剂量;PMSG与HCG注射间隔时间46h与48h见栓小鼠平均获卵数(分别为35.7枚和38.0枚)差异不显著;当激素注射时间间隔为50h时,见栓小鼠平均获卵数(20.3枚)显著下降;发情周期不同阶段开始超排效果不同,发情前期开始超排,其见栓率(82％)、见栓小鼠平均获卵数(37.9枚)均显著高于其他情期;当环境温度维持在(20±5)℃时,不同季节小鼠超排效果无显著差异;冬季鼠房温度在(20±2)℃时,小鼠超排见栓率(77％)和见栓小鼠平均获卵数(33.2枚)均极显著高于环境温度为(10±2)℃的超排效果。     

不同处理方法对家兔超数排卵效果的影响

采用两种处理方法对家兔进行了超数排卵研究。结果表明:PMSG-HCG法处理的母兔卵巢上的平均排卵点数极显著(P<0.01)高于PMSG法,而PMSG-HCG法的平均囊肿卵泡数与平均卵泡数则显著(P<0.05)低于PMSG法;两种方法间的平均卵泡发育数则差异不显著(P>0.05)。说明PMSG-HCG法的超排效果明显优于PMSG法。试验还表明,母兔交配后28h采胚所获取的胚胎大多处于二细胞期,到交配后32h,胚胎多处于四细胞期。采用PMSG-HCG法进行超排处理,对家兔的胚胎发育无影响。     

不同处理方法对家兔超数排卵的影响

[目的]确定家兔稳定高效的超数排卵方法。[方法]PMSG试验组母兔颈部皮下注射PMSG 406、0、80 IU/只,FSH试验组母兔颈部下注射FSH 6次,每次间隔12 h,注射量递减,总用量分别为80、604、0 IU/只,注射PMSG、FSH后耳缘静脉注射HCG 100 IU/只,计算卵子回收率,比较2种处理方法的超数排卵效果。[结果]应用PMSG超排时,60 IU/只试验组的卵子回收率显著高于其他2组(P<0.05)。应用FSH递减法超排时,总用量为60 IU/只的试验组的卵子回收率显著高于其他2组(P<0.05)。FSH递减法试验组和PMSG试验组的卵子回收率无显著差异(P>0.05)。[结论]以60 IU/只的PMSG联合100 IU/只的HCG对家兔进行处理的超排效果最好,卵子回收率达70%。     

家兔的超数排卵和受精卵移植

受精卵移植,近年来在国内外已开始在家畜中试验应用。我们在1963年10月至1964年6月间,在研究家兔人工诱发排卵的同时,也进行了受精卵移植的试验。诱发母兔超数排卵,对研究卵移植问题,是一个重要的技术环节。在这方面,国外学者主要引用 Pincus(1940)和 Parkes(1943)的方法,他们主要应用垂体前叶促性腺激素制剂,进行诱发超数排卵试验。据 Pincus 的试验结果,认为用孕马血清促性腺激素(PMSG)代替垂体促性腺激素制剂时,效果远不如后者。鉴于当时国内尚缺乏垂体制剂成品,因此有必要探讨孕马血清对诱发母兔超数排卵的有效途径,同时对供体和受体母兔的同期化处理,取卵和移植方法等技术环节,也进行了研究,并取得一些效果。     

超数排卵在哺乳动物中的应用

超数排卵是动物遗传工程研究获得成功的技术支持和保障,在畜牧生产、生物工程研究中具有重要作用,并且具有一定的社会效益和经济价值。介绍了几种常用超排激素的用途和特点,并紧密结合动物繁殖及胚胎工程研究的需要,对超数排卵技术在不同哺乳动物中的最新应用进展进行了概括性的论述。     

动物超数排卵的影响因素及发展现状

概述了超数排卵技术的机理和影响因素 ,以及此项技术最近的研究进展和存在的问题     

奶牛超数排卵效果观察

采用加拿大生产促卵泡素(FSH FOLLTROPIN-V)以3头荷斯坦母牛进行超数排卵处理，逐日递减注射，连注4d，总剂量360mg。结果3头供体牛共采得卵(胚)27枚，其中可用胚26枚，退化胚1枚，平均每头获可用胚8．67枚(26／3)，效果较好。     

PMSG配合LH促使小鼠超数排卵试验

用四组不同剂量的孕马血清促性腺激素(PMSG)与促黄体素(LH)配合,对瑞士小鼠作超数排卵效果的比较表明,4.5IU PMSG分别与4.5或6 IULH配合,是促使瑞士小鼠超数排卵的适宜剂量,其超排的排卵率分别为29.7±11.7和52.6±20.01,显著高于(P<0.01)对照组的自然排卵(8.8±1.84)。超排胚胎的活力用体外培养法证明是可靠的。但这两种超排方法不能应用于LACA小鼠。     

兔病毒性出血症弥漫性血管内凝血动态研究

对兔出血症的凝血象和组织病理学变化进行了动态研究。结果表明：兔出血症伴有弥漫性血管内凝血（ＤＩＣ）病理过程，并呈动态发展规律。凝血象检测发现：感染后６ｈ凝血酶原时间（ＰＴ）、白陶土部分凝血活酶时间（ＫＰＴＴ）缩短或正常，为高凝期，该期短，很快进入低凝期。感染后１８ｈＰＴ、ＫＰＴＴ显著延长，死前更明显。血小板数（ＰＣ）呈渐进性降低，纤维蛋白（原）降解产物（ＦＤＰ）在感染后６ｈ显著增加（Ｐ＜０．０１），感染后１８ｈ达高峰值。组织病理学观察表明：肺的病变严重而且有规律，感染后１２ｈ肺的微血栓检出率最高，同时在心、肝、肾、脑等器官也见微血栓。感染后２４ｈ或死兔的肺出血严重，血栓少见，表现为纤溶亢进的特征性变化。此外，患出血症的兔血管壁早期损伤明显，先于高凝期，可能是ＤＩＣ的启动因素之一。     

小鼠发情周期观察与最佳超排时期的确定

实验以阴道涂片的方法观察ICR小鼠不同发情周期阴道上皮细胞的变化类型,并同时记录其外阴部的特点,根据小鼠不同发情周期所表现出的阴部特点依次将其分为发情前期(实验1组)、发情期(实验2组)、发情后期(实验3组)、间情期(实验4组)4个实验组别。超排处理后比较不同实验组与对照组(发情周期未观察小鼠)的超排效果。实验结果表明:处于阴道口紧闭的间情期和外阴略肿胀呈粉红色、阴道口开张、腔内浆液性液体较多的发情前期小鼠在超排成功率、每只小鼠平均可用胚胎数上均好于对照组和其他组别。     

家兔核仁组成区的银染多态性及其与品种间血缘关系的研究

对青紫蓝兔、加利福尼亚兔、大耳白兔、新西兰白兔,德系安哥拉兔等5个家兔品种。采用外周血淋巴细胞培养技术制备早中期染色体。并利用Ag-As、Ag-Ⅰ及1-stcp等3种方法进行Ag-NORs数目和频率分布的研究,分析各品种间亲缘关系。结果表明:本实验中制备的染色体其长度较长,可以被准确编号,并通过G-带分析支持了上述结论。在3种银染方法中,以1-step法最为满意。家兔的Ag-NORs定位于第13、16、20号染色体短臂和第21号染色体长臂端部。家兔Ag-NORs在细胞间、个体间、品种间均有差异,上述品种的Ag-NORs均数分别为3.27、2.97、3.53、2.93、2.67,品种间差异显著大于品种内个体间差异,说明Ag-NORs具有品种特征。并且以Ag-NORs的数目和频率分布进行聚类分析结果表明,新西兰白兔、青紫蓝兔、加利福尼亚兔、德系安哥拉兔为一个类群,而大耳白兔为另一个类群。证实Ag-NORs作为遗传指标,具有品种特征,可用于研究家兔各品种间的亲缘关系。     

兔血浆碱性磷酸酶活性与生产性能关系的研究

对新西兰白兔、加利福尼亚兔、布列塔尼亚兔 (A系 )、齐卡兔 (G系 )、布列塔尼亚兔 (A系 ,♂ )×加利福尼亚兔(♀ )、布列塔尼亚兔 (A系 ,♂ )×新西兰白兔 (♀ )、齐卡兔 (G系 ,♂ )×加利福尼亚兔 (♀ )、齐卡兔 (G系 ,♂ )×新西兰白兔 (♀ ) 1 0 0日龄血浆碱性磷酸酶 (AKP)活性 ,及其与 1 0 0日龄体重、平均日增重和料重比的关系进行研究。结果表明 :齐卡兔 (G系 )、齐卡兔 (G系 ,♂ )×新西兰白兔 (♀ )、布列塔尼亚兔 (A系 )血浆 AKP活性显著高于其他 5个品种 (组合 )(P<0 .0 5) ,而这 5个品种 (组合 )间血浆 AKP活性差异不显著 (P>0 .0 5)。 8个品种 (组合 )血浆 AKP活性与 1 0 0日龄体重、平均日增重均呈正相关 ,总相关系数达极显著水平 (P<0 .0 1 ) ;与料重比均呈负相关 ,相关不显著 (P>0 .0 5)     

兔出血症病毒人工感染幼兔的病理学研究

用兔出血症病毒（ＲＨＤＶ）分别感染５，１５和２５日龄家兔，接种后７２ｈ扑杀，对其肝，脾，肺，肾，胸腺，骨髓等作组织病理学和超微结构观察，发现幼兔感染ＲＨＤＶ与成年兔病毒性出血症不同，其主要病变是血管内皮细胞，网状细胞的增生和肝，肾等脏器实质细胞的变性，ＲＨＤＶ对一月龄以内幼兔抗亦具有感染性，并对其肝，肾等造成一定程度的病理损伤，病理损伤程度随年龄的增长而加重。     

玉米秸粉颗粒料添加尿素饲喂肉兔试验研究

颗粒料中玉米秸粉用量达50%时,影响肉兔增重;添加1%尿素,生产性能进一步降低。颗粒料中添加尿素对增重的效果有待探讨。     

兔病毒性出血症的研究

兔病毒性出血症是一种烈性传染病,主要发生于膘情较好的青、壮年兔,常在冬、春季节流行,临床症状和病理变化以急性败血症为特征。典型病变为肺有数量不等、大小不一的出血病灶,气管粘膜严重充血,呈紫红色,该病毒抗原能凝集人O型红细胞,这种血凝性可被病兔康复血清抑制。取病兔肝、脾,肾制成匀浆,用甲醛灭活制成的疫苗,安全性好,产生免疫力性,保护率达95％以上。