奶牛胚胎一分为四分割移植试验

1990年7月至1991年3月,以非手术方法采得黑白花奶牛7日龄胚胎。在立体显微镜下,应用徒手简易胚胎分割法,一分为四分割6枚胚胎。将所分割的24枚1/4裸胚,以非手术方法,分别移植给18头受体牛。其中9头妊娠,受体移植妊娠率为50％(9/18),胚胎移植妊娠率为150％(9/6)。得到同胚三犊一组,同胚二胎一组(其中一头产犊,一头流产)和单胎四个(其中两头产犊,两头流产)。     

奶牛鲜胚移植黄牛或奶牛技术应用

对１３头黑白花奶牛作超排处理，超排有效１１头，有效率８４．６％，头均获胚３．５枚，其中可用胚头均２．８枚。移植受体奶牛８头，妊娠４头，妊娠率５０％；移植受体黄牛１６头；妊娠８头，妊娠率５０％。卵巢和黄体发育好的供体牛在超排有效反应及超排后黄体数明显优于差的供体牛（Ｐ〈０．０１）。进口ＦＳＨ和国产ＦＳＨ的超排效果没有显著差异（Ｐ〉０．０５）。     

通过阴道穹窿移植奶牛胚胎试验

采用改造的日本产FHK奶牛胚胎移植器械,用长针头穿过奶牛阴道穹窿将胚胎注入子宫角。此法移植2头受体,2头妊娠产犊。这种方法在受体牛子宫颈特别细小、紧缩,胚胎移植管不能插入,不能进行非手术方法移植时可采用。较开腹的外科手术方法简便、快速和安全,亦可无数次地反复采用。     

本地黄牛移植奶牛冷冻胚胎试验

乳业是贵阳市畜牧业发展的优势产业。据统计,贵阳现有存栏奶牛仅8000余头,按照贵阳市人民政府《贵阳市“十一五”期间奶牛发展规划》,在“十一五”期间贵阳市将新增奶牛20000头。目前扩大牛群采取的方式主要是以外地购买和冻配繁殖为主,然而依靠外地购买,不仅牛源紧张,难以买到高产奶牛,而且还受疫病等因素的影响;采用冻配改良,时间长,数量有限,这些方式都严重制约了贵阳市乳业的迅速发展。试验研究利用贵阳市现有黄牛资源实施奶牛胚胎移植,对迅速扩大牛群、生产高产奶牛和建立奶牛核心群,具有重要的意义。1材料与方法1.1材料试验牛:选择符…     

安哥拉山羊胚胎徒手分割和移植试验

生产条件下，徒手二分割安哥拉山羊晚期桑椹胚和囊胚。用手术方法将裸半胚移植于受体羊子宫角。产羔受体率为２９．４％，共产羔１１只，其中１对为同卵双生，半胚成羔率为２０．０％（１１／５５）。早期囊胚、囊胚和扩张囊胚的半胚，移植后半胚成羔率分别为２８．６％（２／７）、３３．３％（７／２１）和９．５％（２／２１）。     

安哥拉山羊胚胎徒手分割和移植试验

生产条件下，徒手二分割安哥拉山羊晚期桑椹胚和囊胚。用手术方法将裸半胚移植于受体羊子宫角。产羔受体率为２９．４％（１０／３４），共产羔１１只，其中１对为同卵双生，半胚成羔率为２０．Ｏ％（１１／５５）。早期囊胚、囊胚和扩张囊胚的半胚，移植后半胚成羔率分别为２８．６％（２／７）、３３．３％（７／２１）和９．５％（２／２１）。于受体羊黄体侧子宫角移植２枚半胚或两侧各移植１枚半胚时，半胚成羔率分别为３３．３％（８／２４）和１６．７％（３／１８）。     

奶牛冷冻胚胎规模化移植效果研究

为了提高奶牛良种化程度,对奶牛冷冻胚胎的规模化移植效果进行了研究。结果表明:PG二次肌注法的发情率显著高于(P<0.05)PG一次肌注法,两种方法的发情同期率均超过85%,受体牛发情时间多集中在肌注PG后48～72h;胚胎解冻后的复苏率达到82.58%,且早期囊胚与囊胚的复苏率要高于桑椹胚(P>0.05);共移植受体牛218头,受胎97头,受胎率为44.5%,且春、秋季的移植效果差异不显著(P>0.05)。为奶牛冻胚的规模化移植研究提供了参考依据。     

波尔山羊胚胎徒手分割试验

在体视显微镜下，用含20％NCS的PBS液作为操作液，用显微玻璃针徒手分割波尔山羊早期囊胚。将13枚A级囊胚用于分割，其中11枚对称分割为两半胚，2枚为不对称分割。将13对半胚手术移植于13只同期发情的受体羊黄体侧子宫角．有5只受体妊娠，半胚移植受体妊娠率38．5％（5／13）。其中有2只妊娠受体发生流产，观察到3只流产胎儿，其余3只受体妊娠到期，获得3只正常半胚后代。     

现场分割奶牛胚胎产生同胚双犊的研究

采用简易徒手胚胎分割法,一分为二分割奶牛胚胎。应用非手术方法,每头受体移植成对二分胚。移植4头受体,2头妊娠,其中1头产公犊1头,1头产母犊2头。该母犊为同胚双犊,健康,发育正常。     

小鼠冻胚分割试验

研究了分割所用溶液、冷冻前胚胎发育时期和分割后将半胚是否装入透明带对冻胚分割效果的影响。结果证明:①将解冻囊胚分割后,无论是否将半胚装入透明带对冻胚分割的效果均无显著影响(P>0.05);②在PBS中分割解冻桑椹胚和囊胚的效果无显著差异(P>0.05);③与分割解冻桑椹胚相比,在蔗糖液中分割解冻囊胚可显著提高冻胚分割效果(P<0.05)。将在蔗糖液中分割冻囊胚获得10对半胚移植于5只受体,结果有2只妊娠,共获得半胚仔鼠6只,其中2对为同卵双生。     

安哥拉山羊胚胎的手术回收和移植

对３５只安哥拉山羊超排处理，配种后第３天放置阴道海绵栓，第６日由子宫手术回收胚胎。３１只发情配种的供体，共回收胚胎２０４枚，平均每只供体获可用胚４．３±３．９６枚。其中卵巢有功能黄体无大卵泡的６只供体，回收胚胎５１枚，回收率为８７．１５％±１５．９８％，平均每只获可用胚８．１±２．９６枚。卵巢上有大卵泡、或子宫及输卵管有病变者可使回收率和可用胚胎数严重降低。由于配种后放置了阴道栓，８只有黄体退化倾向的供体，平均每只仍获得可用胚４．６枚。移植桑椹胚和囊胚的５１只受体，３６只妊娠，妊娠率为７０．６％．移植４～１６细胞胚胎的对照组，妊娠率为５１．６％．本研究还证明，移植单胚较移植双胚的胚胎成羔率提高２８％以上     

西德高产奶牛胚胎引进移植试验

解冻西德高产奶牛冻胚16枚,其中可用胚13枚,3枚为部分变性胚。将其分别移植给16头受体牛,3头妊娠产犊,二母一公,犊牛健康活泼,毛皮细薄光亮。     

胚胎移植时机对牛体细胞克隆胚胎妊娠率的影响

以活体取卵OUP来源的牛卵母细胞为受体胞质,以Holstein奶牛的牛耳成纤维细胞作为供核细胞进行体细胞克隆．并将发育7d的克隆囊胚和体内胚分别及体外胚进行移植,观察移植时机对受孕率的影响。依据代孕牛排卵后天数的不同分为3个实验组,组1：排卵后5-6d（不含6d）;组2：排卵后6—7d;组3：排卵后7～8d（不含7d）。结果显示：对于体外胚胎而言,第2组的受孕率高于第1组（P〉0．05）,第3组的受孕率最低（Pt0．05）,且120d的受孕率为0。与此相反,对于体内胚胎。第3组的受孕率高于其他2组。通过实验可以证明对于7d的体外胚胎选择在代孕牛排卵后6—7d移植可以得到较高的受孕率：而对于体内胚胎而言则应选择在受体牛排卵后7—8d移植,可得到较高的妊娠率。     

奶山羊非手术采胚和移胚技术的研究

将蘸有２％盐酸丁卡因溶液的纱布块填塞在奶山羊子宫颈外口处松弛子宫颈，用自制的采胚管和移胚管进行非手术采胚和移胚。８只超排羊中有６只采出胚胎，采胚成功率为７５％（６／８），采胚率为３５．８（２４／６７），头均采胚４．００±３．４１枚（１～１０）。非手术移植２只受体羊，有１只怀孕。     

水牛胚胎分割技术的研究

为探讨水牛桑椹胚去致密化和不同分割方法对水牛切割胚发育效果的影响,将体外受精获得的水牛桑椹胚（第5d）和囊胚（第6～7d）分割后进行体外培养,观察其发育情况。结果显示：（1）水牛桑椹胚经去致密化处理后,其分割成功率（67．69％vs．51．71％）和囊胚发育率（58．30％vs．41．13％）均显著高于未处理组（P〈0．01）,但囊胚细胞数差异不显著（P〉0．05）;（2）以直接分割法和单臂分割法分别分割桑椹胚和囊胚,其分割成功率、囊胚发育率和囊胚细胞数三者均无显著差异（P〉0．05）。可见,水牛桑椹胚去致密化有利于切割胚的成活和发育,而直接分割法和单臂分割法均可用于水牛桑椹胚和囊胚的分割。