拮抗细菌和土壤添加剂防治烟草青枯病

烟草青枯病是烟草生产上危害性极大的病害之一。到目前为止,对该病尚无理想的化学药剂。本研究对烟草青枯病的生物防治途径进行了进一步的探讨,现将研究结果报道如下。１材料与方法１．１拮抗细菌与土壤添加剂拮抗菌Ｊ１是从芒果根际土壤中分离得到的,对烟草青枯菌株Ｔ...     

三株拮抗细菌的鉴定及抑菌作用研究

为了充分发掘和利用有益微生物资源,本文以草莓根腐尖孢镰刀菌Fusariumoxysporum为靶标菌,从草莓根际土壤中分离筛选得到3株拮抗细菌,通过培养性状与形态特征、生理生化特征以及16SrDNA同源序列比对分析进行了鉴定,菌株1-9和9—4为多粘类芽孢杆菌Paenibacilluspolymyxa、菌株12—4为枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis。这3株细菌对草莓根腐尖孢镰刀菌的抑菌作用进行了初步的研究,结果表明,3株拮抗细菌对草莓根腐尖孢镰刀菌的生长有很好的抑制作用,镜下观察对菌丝有致畸作用,其培养滤液还能够抑制草莓根腐病尖孢镰刀菌分生孢子的产生与萌发。     

三株拮抗细菌对水仙叶大褐斑病的拮抗机理

平板纸片法和液体混合培养法测定了三株拮抗细菌对水仙叶大褐斑病原菌的拮抗作用，其中菌株CS51和CS121显示出对病原菌的生长有明显抑制作用。试验证实菌株CS121在限铁条件下能产生嗜铁素。平板法和离体叶片法证明含该嗜铁素的培养上清液能有效抑制病原菌菌丝的生长，并能保护叶片减少侵染。遗传双标记回收法证实，菌株CS5、CS51和CS121均能在水仙根系成功定殖，CS5和CS51的定殖能力明显优于CS121。     

柑桔绿霉病拮抗细菌的筛选、鉴定及其抑制效果

从采集的柑桔园根际土壤中筛选得到1株对柑桔绿霉菌Penicillium digitatum具有较强拮抗活性的菌株HC-03.该菌株对柑桔绿霉菌、柑桔青霉菌Penicillium italicum、柑桔酸腐菌Geotrichum candidum等12种水果病原菌均有不同程度的拮抗作用,表现出广谱抗菌活性.菌落形态观察、生理生化特性分析及16S rDNA 序列测定和特异性PCR检测结果表明,该菌株为解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens.对沙糖桔的活体接种试验表明,菌株HC-03的发酵液、菌悬液及发酵滤液处理柑桔绿霉病的发生率均低于20%,病斑直径均在10mm以下.     

拮抗细菌菌株Bacillus spp.间的相互作用及其对水稻纹枯病的抑制

测定了6个Bacillus spp.和1个Pseudomonas sp.P-13(G-对照菌株)在PPM培养基上的相互作用。在总共42个组合中，有27个组合是可亲和性的。在以B5423为单剂之一的5个组合中，亲和性的组合有4个。在温室条件下通过分批播种，在水稻分蘖盛期喷以B5423-R(B5423的标记菌株，是利福平抗性的突变体)为单剂之一的4个亲和性组合的菌悬浮液，以检测该组合中B5423-R在水稻茎基部的种群数量。结果发现，与单剂B5423-R相比，在应用1～7天内，组合B5423-R B45中，B5423-R的群体数量显著性降低；组合B5423-R B95、B5423-R B77中，B5423-R的群体数量与单剂无显著差异；组合B5423-R B4313中，B5423-R的群体数量在应用1～4天内与单剂无显著性差异，但在应用第7天显著地高于单剂。离体叶片纹枯病痛斑面积的抑制试验表明，与各自的单剂相比，组合B95 B5423及B95 Er77显著地抑制了纹枯病病斑面积；而组合B45 B80、B45 B5423和B45 B95纹枯病病斑面积显著地高于各自的单剂；其余10个组合与各自的单剂无显著差异。     

烟草青枯病菌拮抗细菌的筛选、鉴定和抑菌机制研究

青枯雷尔氏菌Ralstonia solanacearum造成的烟草青枯病是烟草主要毁灭性病害之一.本研究采用牛津杯法从运城盐湖湖岸土壤中筛选获得一株对烟草青枯病菌具有较好拮抗效果的菌株FY-C;并进一步分析了菌株FY-C的抑菌谱、对青枯病菌的潜在生防效果.结果 显示,经菌株FY-C无菌滤液处理24 h后的青枯病菌细胞壁...     

烟草赤星病拮抗细菌的筛选及其控病作用

从烟草叶片上分离到236株非病原细菌,通过平板对峙培养,筛选出对不同致病力的烟草赤星病菌Alternaria alternata(Fr.)Keissl均有拮抗作用的菌株:Ata28、Ata81、Ata124和Ata160.室内测定其对赤星病菌抑菌带的宽度达6.1～10.5mm;室内离体叶片悬滴法测定,提前喷施拮抗菌其防治效果为53.9%～73.0%;接赤星病菌后喷施的防治效果为44.0%～60.0%;在温室中进行盆栽防病试验,防治效果为52.3%～75.8%.无菌滤液试验表明,拮抗菌Ata28无菌滤液在一定浓度范围内均能有效地抑制菌丝生长,减少孢子萌发,且浓度越高,抑制能力越强.     

几株拮抗细菌抑制致病疫霉孢子萌发的比较研究

前期试验中发现芽孢杆菌(Bacillus spp.)WL1和WL2等6株细菌的菌液对致病疫霉菌丝生长有较强的抑制作用,且其中WL1、WL2和M15菌株无菌体发酵液对致病疫霉的抑制作用也较强。为深入了解其抑制作用,以筛选出对马铃薯晚疫病更具生防潜力的菌株,本试验比较了这6株菌株的菌液和其中3株菌株的发酵液对致病疫霉游动孢子释放、游动孢子萌发和孢子囊直接萌发的抑制效果以及菌液在马铃薯离体叶片上病害的预防效果。结果显示,对游动孢子释放、游动孢子萌发和孢子囊直接萌发的抑制作用以WL2菌株最强,在最低菌液浓度(1×10~4 cfu/m L)下,病菌萌发率及释放率均在36%以下,显著低于对照(47%以上);菌液处理不同时间后,对游动孢子释放、游动孢子萌发和孢子囊直接萌发的综合抑制作用仍以WL2菌株最强,处理18 h后其抑制强度保持不变,其次是M15菌株,对孢子释放和游动孢子萌发的抑制作用也不随处理时间延长而明显下降;发酵液抑制不同时间后,也以WL2的抑制作用最强,抑制游动孢子释放、游动孢子萌发和孢子囊直接萌发所需时间仅为1.0~1.5 h,而WL1和M15则需处理2.0 h或2.5 h以上。预防效果也显示,经WL2菌液处理后的马铃薯离体叶片病情指数最低(14.4),相对保护率达到81.2%。     

烟草青枯病内生拮抗菌的筛选、鉴定及其防效测定

 植物体内的大量微生物,在进化的过程中,由于长期生活在植物特定部位,因而与植物形成了一种特殊的关系,这些微生物在植物体内大量繁殖和扩散,有望成为生物防治有潜力的微生物。内生细菌是植物体内大量存在的微生物之一,具有在植株体内分布广、定殖能力强、防效好以及增殖和扩散快等优点,因而成为发展前景很好的植物病害生防菌。     

无致病力青枯菌株对番茄青枯病的防治效果

用紫外诱变法获得的青枯无致病力菌株ATm0 4 4和Asp0 6 1对致病菌没有直接的抑制作用 ;处理番茄后对青枯病产生抗性 ;两菌株可在番茄体内定殖并繁殖 ,移栽浸根是最佳的处理方法。盆栽试验结果表明 ,番茄经ATm0 4 4和Asp0 6 1处理后 ,分别较对照推迟 9和 7d发病 ,2 0d后的防效达 56 .7%和 53.4 %。田间小区试验结果表明 ,经ATm0 4 4和Asp0 6 1菌悬液浸根处理番茄 ,1 5d后对青枯病的防治效果分别为 53.8%和 37.7%。     

Resistance and Susceptibility of Arabidopsis thaliana to Bacterial Wilt Caused by Ralstonia solanacearum

ABSTRACT Tomato bacterial wilt caused by Ralstonia solanacearum is a model system for studying plant-bacterial interactions, because it is genetically one of the best characterized plant diseases. We demonstrate here that four different strains of R. solanacearum, two from radishes (Rd4 and Rd15) and two from tomato (Ps21 and Ps95), can infect 27 different ecotypes of Arabidopsis thaliana, causing different responses. All ecotypes tested were highly susceptible to strain Rd15, which caused symptoms similar to those observed in tomato plants. For example, leaf drooping and discoloration developed just 3 days after inoculation, and plants completely wilted within 1 week. Strains Rd4 and Ps95 were less infectious than Rd15. With these two strains, a variety of disease responses were observed among different ecotypes at 2 weeks after inoculation; both susceptible and resistant ecotypes of A. thaliana were identified. Ps21 was the least infectious of the four strains and caused almost no symptoms in any of the ecotypes of Arabidopsis tested. Direct bacterial isolation and plant skeleton hybridization analysis from infected plants indicated that bacterial colonization was correlated with the severity of symptoms. Growth of bacteria was limited to the infection site in resistant plants, whereas the bacteria spread throughout susceptible plants by 1 week after inoculation.     

防治青枯病工程菌Hrp-菌株的固体剂型研究

本文对工程菌 Hrp-菌株的固体剂型进行了初步研究。经载体、保护剂和抑菌剂的筛选,最终得出固体菌剂的制作方法。具体为将发酵菌液以5000 r/min离心10 min后弃上清,收集菌泥;将菌泥加至石蜡油中,振荡15～20 min使其在石蜡油中充分分散,制成菌悬液;再将此菌液按1：1比例与灭菌后的草炭混合均匀,制成固体菌剂;再向这种固体菌剂中加入杂菌抑制剂乳酸链球菌素（0.75 g/kg）和纳他霉素（0.075 g/kg）,并混合均匀。制作的固体菌剂在pH值5.3左右、含水量35%、不抽真空及温度25℃的条件下保存6个月,存活率为44.4%,有效活菌量为1.12×1010 cfu/g。     

烟草青枯病内生拮抗细菌的鉴定及小区防效的初步测定

烟草青枯病是由青枯雷尔菌(Ralstonia solanacearum)引起的一种以土壤传播为主的细菌性病害.目前对该病的防治主要以化学手段为主,但长期大量施用化学农药易产生抗药性和造成环境污染,因此生物防治受到国内外研究者的广泛重视.内生细菌可系统地在植物体内定殖,生存环境较为稳定,是一类潜在的重要生防菌资源.我们从烟草茎杆中分离到160株内生菌株,在室内进行了对青枯病拮抗作用的测定,选择拮抗效果较好的菌株进行了小区防效试验.     

A Single Locus Leads to Resistance of Arabidopsis thaliana to Bacterial Wilt Caused by Ralstonia solanacearum Through a Hypersensitive-like Response

ABSTRACT Strains of Ralstonia solanacearum have been shown to cause bacterial wilt in some, but not all, ecotypes of Arabidopsis thaliana. We demonstrate here that after inoculation of the leaves of resistant ecotype S96 with R. solanacearum strain Ps95 necrosis around the inoculation site rapidly appeared and no further symptoms developed in the plant. Leaves of susceptible ecotype N913 completely wilted 7 days after inoculation with Ps95, and symptoms spread systemically throughout the whole plant within 2 weeks after inoculation. These results suggest that the resistance of Arabidopsis S96 to R. solanacearum is due to a response similar to the hypersensitive response (HR) observed in other plant diseases. Northern blot analysis of the expression of defense-related genes, known to be differentially induced during the HR in Arabidopsis, indicated that pathogenesis-related protein PR-1, glutathione S-transferase (GST1), and Cu, Zn superoxide dismutase (SOD) mRNAs increased significantly in S96 leaves between 3 to 12 h after infiltration with Ps95. The induction of these genes in susceptible ecotype N913 by Ps95 was clearly delayed. Genetic analysis of crosses between resistant ecotype S96 and susceptible ecotype N913 indicated that resistance to Ps95 is due to a single dominant locus.     

番茄枯萎病和青枯病拮抗细菌的筛选、评价与鉴定

从宁夏银川、江苏沭阳和福建厦门的番茄、辣椒、西瓜等作物根际土壤中,分离纯化获得367株细菌菌株。以番茄枯萎病菌Fusarium oxysporum f.sp.lycopersici和番茄青枯病菌Ralstonia solanacearum为靶标菌,从367株菌株中筛选出对两种病菌皆具有很强拮抗作用的菌株22株。拮抗细菌抑菌物质的研究结果表明：22株拮抗细菌均能分泌蛋白酶;不能分泌几丁质酶;3株细菌能分泌纤维素酶;3株细菌能分泌嗜铁素。盆栽试验结果表明：拮抗细菌PTS-394对番茄枯萎病和青枯病的防效最高,分别为77.4%和80%;菌株H-70、L-1和SJ-280对番茄枯萎病和青枯病的防效均大于60%。对上述4株拮抗细菌进行16S rRNA种属鉴定,均为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。     

烟草感染青枯菌后的组织病理变化

病症观察表明,烟草感染青枯菌后168h叶片全部萎蔫下垂、褐变。茎部切片表明,青枯菌处理72h,个别导管内出现了染色较深的物质,髓部和皮层的部分薄壁细胞出现破损。120h后导管内染色较深的物质增多,导管堵塞程度加大。168h后局部区域的木质部和韧皮部分离。对感病植株的叶进行青枯病菌分离,结果表明:从叶中可分离出致病青枯菌,并可以导致复感植株得病继而死亡。