黄芪多糖活性组分对鸡脾脏淋巴细胞功能的影响

探讨黄芪多糖不同活性组分对鸡脾脏淋巴细胞功能的影响。首先采用MTT法测定APSt和APS40、APS60、APS80、APS90黄芪多糖活性组分对鸡脾脏淋巴细胞的安全浓度,然后,分别用MTT法和ELISA法检测黄芪多糖活性组分对健康和免疫抑制鸡脾脏淋巴细胞增殖和分泌IL-2的影响。结果表明,各黄芪多糖活性组分均具有一定的促进淋巴细胞增殖和IL-2分泌的作用,且有一定的浓度依赖性,综合比较,各黄芪多糖活性组分对鸡脾脏淋巴细胞的作用顺序为:APS80APStAPS90APS60APS40。结论,APS80提高鸡脾脏淋巴细胞功能的作用最强,可作为进一步研制成免疫增强剂的候选药物。     

淫羊藿多糖对鸡脾脏淋巴细胞的调节作用研究

为研究淫羊藿多糖(EPS)体外增强免疫活性,采用酶学检测法测定淫羊藿多糖活性及对鸡脾脏淋巴细胞的增殖作用。根据活性检测结果,选择用50%的乙醇醇沉的淫羊藿多糖进行安全浓度试验;根据安全浓度检测结果,选择2 500.00μg/mL、1 250.00μg/mL、625.00μg/mL、312.50μg/mL、156.25μg/mL 5个浓度,用MTT法测定淫羊藿多糖单独和协同LPS刺激对鸡脾脏淋巴细胞增殖率的影响。结果显示:不同浓度乙醇醇沉的淫羊藿多糖均具有良好的活性,但乙醇浓度为50%醇沉的淫羊藿多糖活性最佳。淫羊藿多糖对鸡脾脏淋巴细胞的安全浓度为2 500.00μg/mL。淫羊藿多糖无论是单独还是协同LPS刺激脾脏淋巴细胞,均显示出不同程度增强脾脏淋巴细胞的活性,且均在浓度为1 250.00μg/mL时显示出较强的体外增强鸡脾脏淋巴细胞增殖的能力,说明淫羊藿多糖在安全浓度范围内可刺激鸡脾脏淋巴细胞增殖,从而实现调节免疫功能的作用。     

4种多糖对鸡脾脏淋巴细胞增殖和一氧化氮分泌的影响

将5种浓度的黄芪多糖(APS)、板蓝根多糖(IRPS)、牛膝多糖(ARPS)和山药多糖(CYPS)分别加入到培养的鸡脾脏淋巴细胞中,培养48 h时用MTT法测定淋巴细胞增殖的变化。将3种浓度的APS、IRPS、ARPS和CYPS分别加入到培养的淋巴细胞中培养24 h时收集细胞培养上清液,测定一氧化氮含量和一氧化氮合酶的活力。结果表明,适宜浓度的4种多糖均能提高细胞培养液中一氧化氮的含量、一氧化氮合酶的活力和促进淋巴细胞增殖,且4种多糖效果相当,这可能是多糖提高细胞免疫功能的机理之一。     

列当多糖对鸡淋巴细胞体外增殖能力的影响

为探讨列当多糖(OSP)对鸡脾脏淋巴细胞和外周血淋巴细胞增殖作用的影响,试验用水提醇沉法提取列当多糖,通过苯酚硫酸法和红外光谱对列当多糖进行检测,采用MTT法测定列当多糖的安全浓度及对鸡淋巴细胞的增殖能力。结果显示:试验所提取的列当多糖均具有多糖的特征峰为多糖类化合物。外周血T淋巴细胞增殖试验表明,OSP30和OSP80的增殖作用强且对T淋巴细胞增殖的浓度范围最大。脾脏B淋巴细胞增殖试验表明,OSP30和OSP80的增殖作用强且对B淋巴细胞增殖的浓度范围最大。结果表明,OSP30及OSP80对脾脏淋巴细胞和外周血T淋巴细胞的增殖作用最强。     

鬼臼多糖的分离纯化及药理学活性

目的：分离纯化鬼臼多糖（PEP）,测定PEP的单糖组成,观察PEP对小鼠脾脏、胸腺指数、溶菌酶含量及脾脏淋巴细胞增殖的影响.方法：用热水抽提及醇沉法纯化鬼臼多糖,采用纸层析法和红外光谱对PEP的组成进行研究,用比浊法测溶菌酶含量,用MTT法研究PEP对脾脏淋巴细胞增殖的影响.结果：PEP的得率为60%,PEP含有葡萄糖、果糖、甘露糖、和阿拉伯糖,红外光谱扫描表现出一般多糖类物质的特征吸收峰.PEP能够提高脾脏指数,但对胸腺指数和血清中的溶菌酶含量的影响不明显.MTT结果显示,PEP能够显著刺激小鼠脾脏淋巴细胞增殖,且与ConA有协同作用.     

不同组分、不同纯度中药复方多糖对小鼠免疫活性影响的研究

试验旨在观察不同组分、不同纯度中药复方多糖对小鼠免疫活性的影响。用环磷酰胺作免疫抑制剂建立免疫功能低下动物模型,测定了小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能和免疫器官脏器指数。结果表明,多糖组分A2和中间纯度的多糖B2能够显著提高正常小鼠和免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬率、提高胸腺指数和脾脏指数,能够使环磷酰胺造成的免疫抑制逆转至正常水平,因此,具有合适分子质量的多糖组分和合适纯度的多糖能显著增强小鼠的免疫功能。     

不同组分、不同纯度中药复方多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖影响

目的：研究中药复方多糖分级组分及不同纯度对小鼠脾脏淋巴细胞的增殖作用。方法：用ConA诱导T淋巴细胞增殖,用MTT法测定淋巴细胞的增殖能力。结果：水煎剂、总多糖、分级组分2、纯化组分2均可极显著促进小鼠脾脏淋巴细胞增殖,并能增加ConA诱导T淋巴细胞增殖。结论：中药复方的不同活性部位具有不同的免疫调节活性。     

不同桑叶提取物对小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力的影响

试验旨在比较不同桑叶提取物对小鼠脾脏淋巴细胞增殖作用的影响。用不同浓度乙醇醇沉桑叶水提物,制备桑叶粗多糖MLP-1、MLP-2、MLP-3、MLP-4、MLP-5,采用苯酚硫酸法测定各提取物多糖含量。以5种桑叶粗多糖和桑叶水提物（MLAE）为试验药物,采用MTT法比较多糖含量分别在15.625、31.25、62.5、125、250 μg/mL浓度时各提取物单独刺激及协同LPS、PHA共同刺激小鼠脾脏B、T淋巴细增殖的变化。结果显示,多糖浓度在15.625~250 μg/mL范围内,各提取物无论单独还是协同LPS和PHA时均能促进小鼠脾脏B、T淋巴细胞的增殖,其中,MLP-1多糖含量在低浓度时能显著刺激脾脏B淋巴细胞增殖（P<0.05）;MLP-3和MLP-5在低浓度时表现出较强的刺激T淋巴细胞增殖的能力;MLAE协同LPS在大部分浓度点的脾脏B淋巴细胞的增殖能力均显著高于细胞对照组和LPS对照组,可显著提升体液免疫功能（P<0.05）。     

3种植物多糖对鸡外周血和脾脏淋巴细胞体外增殖作用的影响

本试验旨在比较3种植物多糖对鸡外周血T淋巴细胞和脾脏B淋巴细胞体外增强免疫活性的研究.通过酶学检测法测定3种植物多糖对鸡胚成纤维细胞的安全浓度,MTT法比较3种植物多糖单独刺激和PHA协同刺激对鸡外周血T淋巴细胞增殖指数的影响,同时比较3种植物多糖单独刺激及与LPS协同刺激对鸡脾脏B淋巴细胞增殖率的影响.结果显示,黄芪多糖和桑叶多糖具有较高的细胞安全浓度,在64~512 μg/mL时,3种植物多糖对鸡外周血T淋巴细胞和脾脏B淋巴细胞的增殖作用较强.结果表明,3种植物多糖对鸡外周血和脾脏淋巴细胞都有不同程度的体外增殖作用,其中黄芪多糖的增殖作用最强,桑叶多糖其次,山药多糖最差.     

玉屏风多糖影响小鼠淋巴细胞归巢的组织学效应

通过研究玉屏风多糖对免疫损伤小鼠外周免疫器官和淋巴细胞归巢的影响,以及激活淋巴细胞后的组织学效应,探讨其临床药效的组织学基础。180只SPF小鼠随机分为6组,复制免疫抑制模型,灌服不同剂量玉屏风多糖,检测血常规、淋巴细胞增殖能力和NK细胞活性,观察主要组织器官淋巴细胞的数量和分布等。结果显示,玉屏风多糖可使免疫抑制小鼠全血白细胞总数增多(P0.05),淋巴细胞数量和百分比上升(P0.05),淋巴细胞增殖能力和NK细胞活性升高(P0.05或P0.01);促进外周淋巴器官(脾脏)淋巴组织的显著增生,肠黏膜相关淋巴组织归巢过程明显;非淋巴组织以肺脏的淋巴细胞归巢表现突出,对肝脏和肾脏也有一定影响。玉屏风多糖可激活小鼠脾淋巴细胞活性,促进脾脏淋巴细胞增殖,干预淋巴细胞的再循环和归巢过程,并可由此缓解和改善环磷酰胺诱导的免疫损伤。     

松乳菇菌丝多糖对小鼠免疫调节作用研究

为了探讨松乳菇菌丝多糖对小鼠免疫功能的影响,试验将小鼠分为4组,试验组每日分别灌胃3种剂量的松乳菇菌丝多糖,对照组灌胃等量的生理盐水,连续灌胃14 d。于第15天,称取胸腺和脾脏的重量,测定小鼠的胸腺指数和脾脏指数;以碳廓清法测定小鼠单核-巨噬细胞的吞噬功能;采用MTT法检测脾脏T淋巴细胞增殖能力;采用鸡红细胞免疫小鼠法检测血清溶血素效价。结果表明:与对照组相比,试验组胸腺指数和脾脏指数均明显升高,且中、高剂量组胸腺指数和脾脏指数差异极显著(P0.01);中、高剂量组能显著提高小鼠单核-巨噬细胞吞噬活性(P0.05);中剂量组能显著提高小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力(P0.05),高剂量组能极显著提高小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力(P0.01);3个剂量组均能进一步提高小鼠血清溶血素效价,且中、高剂量组能极显著提高(P0.01)。说明松乳菇菌丝多糖能增强小鼠的免疫功能。     

白花蛇舌草多糖对小鼠免疫功能和生长发育的影响

为探讨白花蛇舌草多糖对小鼠免疫功能和生长发育的影响,本研究将60只雌性昆明小鼠随机等分为4组,1~3组分别以50、100和150 mg/kg 体重的白花蛇舌草多糖粗提物灌胃小鼠,连续给药7 d,第4组以等量的生理盐水灌胃,作为空白对照组。最后一次给药12 h后,各组小鼠用鸡新城疫弱毒疫苗接种,2头份/只,分别于给药结束后的7、14和21 d采小鼠外周血并分离淋巴细胞和血清。用淋巴细胞转化试验(CCK-8法)测定外周血淋巴细胞增殖能力;微量血凝抑制试验评价血清中新城疫抗体水平;测定各组小鼠体重;21 d测定小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力,并测定脾脏指数。统计学分析结果显示,白花蛇舌草多糖组小鼠的外周血淋巴细胞增殖能力、免疫抗体水平、腹腔巨噬细胞吞噬能力、脾脏指数和体重均显著高于对照组(P<0.05),且具有量效关系。结果表明,白花蛇舌草多糖能显著提高机体的特异性免疫和非特异性免疫功能,促进机体的生长发育。本试验结果为利用白花蛇舌草多糖开发保健产品提供了参考。     

玉屏风复合多糖对环磷酰胺免疫抑制小鼠的恢复作用

为探讨玉屏风复合多糖对免疫功能损伤的调节和保护作用,以环磷酰胺(80mg/kg)诱导的免疫低下小鼠为实验动物模型,观察不同剂量玉屏风复合多糖(150,300,600mg/kg)对免疫器官结构和功能恢复的影响。结果发现,小鼠胸腺和脾脏体积显著增大,脾脏指数显著升高,脾淋巴细胞增殖、转化能力和NK细胞活性均显著增强(P<0.05或P<0.01)。脾脏结构中可见2种组织学变化,脾脏固有结构受损,淋巴组织明显增生。在对玉屏风复合多糖阳性对照组(未注射环磷酰胺)的观察中发现,小鼠脾脏结构清晰,出现结构性增生和肥大。结果证实,玉屏风复合多糖可明显促进免疫抑制小鼠脾脏结构和功能的恢复,对正常小鼠脾脏功能也有明显的增强作用。     

玉屏风多糖对小鼠脾脏形态结构及免疫功能的影响

为观察玉屏风多糖(Yupingfeng Polysaccharides,YPF-P)对小鼠脾脏组织结构的影响,探讨玉屏风多糖的复方效应,试验将80只SPF级小鼠随机分成5组(玉屏风多糖组、黄芪多糖组、白术多糖组、防风多糖组、生理盐水组),每天分别按体重200 mg/kg剂量灌服玉屏风多糖及其组方内的黄芪多糖、白术多糖和防风多糖以及生理盐水,连续灌服7 d,第8天剖杀,首先测定脾脏质量和脾脏指数,观察脾脏形态结构和组织学变化;再进行脾脏淋巴细胞体外培养,研究脾脏淋巴细胞活性的变化。结果表明:与生理盐水组相比,除白术多糖组外,其余多糖组小鼠脾脏均呈现不同程度的体积增大、脾脏指数升高,但无显著性差异(P0. 05);而玉屏风多糖组和黄芪多糖组在脾脏淋巴组织增生和淋巴细胞活性增强的变化上与其他3组间差异极显著(P0. 01),其中以玉屏风多糖增强作用最为明显。说明玉屏风多糖可促进小鼠脾脏组织增生,增强淋巴细胞活性,能有效增强脾脏免疫功能,且作用优于其组方内各单方多糖。     

黄芪多糖对红细胞调控T淋巴细胞增殖的影响

选择小鼠脾脏和外周血T淋巴细胞作为研究对象,通过体外试验探讨黄芪多糖的免疫调节作用。用不同剂量的黄芪多糖作用于红细胞和T淋巴细胞共同培养体系,48h后,应用MTT比色法检测细胞的增殖活性,研究黄芪多糖对红细胞免疫调控功能的影响。结果表明,小鼠红细胞、植物血凝素(PHA),单独作用对T淋巴细胞的增殖均有显著的促进作用,且红细胞对PHA激活的T淋巴细胞的增殖也有促进作用,但是二者没有明显的协同促进作用;黄芪多糖不能促进体外培养T淋巴细胞增殖,甚至还抑制PHA诱导的T淋巴细胞的增殖活性;但黄芪多糖可以协助红细胞对淋巴细胞的免疫调控功能,双方共同作用,引起淋巴细胞数目的增加和增强增殖功能。     

分级醇沉刺五加多糖不同浓度对小鼠脾细胞增殖和IL-2表达的影响

为了研究不同醇沉浓度刺五加多糖对脾细胞增殖和细胞因子IL-2表达的影响,试验采用分级醇沉的方法对刺五加多糖进行醇沉得到粗糖,并去蛋白得到精制糖,研究分级醇沉刺五加多糖不同浓度对小鼠脾细胞增殖、ConA和LPS诱导的脾淋巴细胞的增殖反应和脾细胞产生细胞因子表达的影响。结果表明:40%醇沉组多糖浓度为7.8～125μg/mL时均能促进脾细胞增殖,并且其促进脾细胞增殖作用与多糖浓度呈剂量依赖性,促增殖作用增强;40%醇沉组多糖浓度为15.62～125μg/mL时能促进ConA诱导的脾淋巴细胞的增殖反应;各醇沉组多糖浓度为15.62～125μg/mL时均能显著促进LPS诱导的脾淋巴细胞的增殖反应;20%、40%、60%醇沉组多糖浓度为3.9～7.81μg/mL时IL-2的表达水平呈上升趋势;并且随药物浓度的增大细胞因子表达量先增多后减少。说明以40%醇沉刺五加多糖免疫增强效果优于其他醇沉多糖。     

甘草黄酮抗氧化及免疫活性

为了研究甘草黄酮的抗氧化及免疫活性,试验通过DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟基自由基的清除率测定甘草总黄酮的抗氧化活性,通过测定不同浓度的甘草总黄酮刺激小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力、小鼠脾脏淋巴细胞抗体形成的影响,研究甘草黄酮的免疫调节作用。结果显示,甘草黄酮对DPPH自由基清除率为25%,对超氧阴离子自由基清除率为79.07%,对羟基自由基清除率为29.51%。各试验组小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力均显著高于对照组;IL-2水平试验中,各试验组均显著高于对照组,试验3组极显著高于对照组,显著高于1,2组;在IgG抗体水平分析中,甘草黄酮各试验组均极限著高于对照组。说明甘草黄酮具有较好的抗氧化及免疫活性。     

山药多糖对鸡新城疫疫苗免疫效果的影响

将150羽14日龄蛋公鸡随机分成3组,每组50羽,用新支二联弱毒苗点眼、滴鼻免疫的同时2个试验组分别肌肉注射高、低剂量的山药多糖（CYPS）溶液,对照组肌肉注射生理盐水。1次／d,连续3d。分别于免疫后第10,20,30,40,50,60天每组随机抽取8只蛋公鸡,翼下静脉采血,分离血清,用微量法测定新城疫血凝抑制抗体效价;每组再随机抽取5只蛋公鸡心脏采血,分离淋巴细胞,用MTT法测定淋巴细胞增殖的动态变化,用流式细胞仪双染色法检测CD3^＋、CD3^＋CD4^＋和CD3^＋CD8^＋淋巴细胞含量。试验结果表明,山药多糖高剂量组的血凝抑制抗体效价、CD4^＋／CD8^＋比值明显高于对照组,并可显著促进T淋巴细胞增殖,提示山药多糖对鸡新城疫疫苗的免疫效果有明显增强作用。     

苜蓿多糖和黄芪多糖对肉仔鸡淋巴细胞增殖的影响

本试验旨在研究苜蓿多糖(water soluble alfalfa polysaccharide,WSAP)和黄芪多糖(astragalus polysaccharide,APS)2种不同植物来源的多糖对肉仔鸡外周血液和脾脏中淋巴细胞增殖的影响.将4种不同浓度的WSAP和APS分别加入到鸡血液淋巴细胞和脾脏淋巴细胞中,培养48 h后用MTT法测定T、B淋巴细胞增殖的变化.结果表明:WSAP、APS在一定浓度下能显著促进肉仔鸡血液和脾脏中淋巴细胞的增殖,其中WSAP以20 μg/mL,APS以100 μg/mL效果最好.此外,APS对肉仔鸡淋巴细胞增殖的效果要好于WSAP,但APS的有效添加量比WSAP多.由此表明WSAP、APS促进淋巴细胞增殖可能是其发挥免疫作用的机制之一,且不同植物来源的多糖免疫效果不同.     

绢蒿水煎剂对小鼠免疫功能的影响

为了探讨新疆石河子南山地区牧草绢蒿对正常小鼠和环磷酰胺所致免疫低下小鼠的免疫调节作用,采用脾脏系数测定法、脾脏淋巴细胞ANAE染色法、姬姆萨-瑞特氏染色法、MTT法、抗支原体抗体ELISA法及大肠杆菌攻毒试验分别对小鼠脾脏指数、T淋巴细胞数量、巨噬细胞吞噬活性、脾脏淋巴细胞增殖、抗体分泌功能及抗致病性大肠杆菌感染能力等指标进行研究。结果表明,高、低浓度的绢蒿水煎剂均能不同程度提高免疫低下小鼠和正常小鼠的T淋巴细胞数量及腹腔巨噬细胞吞噬功能;高、低浓度的绢蒿水煎剂均能不同程度提高正常小鼠的脾脏淋巴细胞增殖能力;低浓度的绢蒿水煎剂能提高正常小鼠对大肠杆菌的抗感染能力;高浓度的绢蒿水煎剂能下调免疫低下小鼠和正常小鼠的脾脏指数,下调正常小鼠的血清抗体效价。提示,绢蒿水煎剂对免疫低下小鼠有一定的增强免疫作用,对正常小鼠具有双向免疫调节作用。本研究结果为进一步开发绢蒿免疫调节剂提供了依据。