酶联免疫法测定饲料中沙丁胺醇

该实验的目的是验证酶联免疫法测定饲料中沙丁胺醇的可行性。实验结果表明,沙丁胺醇标准曲线的相关系数为0.993,样品回收率90%以上。酶联免疫法具有灵敏度高、特异性强、检测时间短、测定方便等优点,具有良好的应用前景。     

尿样中沙丁胺醇的检测

利用沙丁胺醇和克伦特罗在分子结构上非常相似的特点,克伦特罗抗体与沙丁胺醇反应中具有一定的交叉性,在现有的克伦特罗检测系统的基础上建立沙丁胺醇的酶联免疫吸附检测体系。试验表明该方法完全可以应用于尿样中沙丁胺醇的检测。     

饲料中沙丁胺醇酶联免疫前处理方法的探究

为探讨酶联免疫法(ELISA)检测饲料中沙丁胺醇(salbutamol,SAL)的前处理方法,试验对提取液的pH、离子强度、有机溶剂浓度及样品稀释倍数等条件进行了考察,选取最适宜的提取液条件对2种不同类型的饲料样本进行提取,用ELISA测定样品中沙丁胺醇的残留量。结果表明,沙丁胺醇标准曲线的IC₅₀值为0.606 ng/mL,线性范围为0.221～1.658 ng/mL,R²=0.9998,提取液的pH为7.5,PBS缓冲液最优浓度为0.06 mol/L,稀释倍数为10倍,2种不同类型的饲料样本的检测限(LOD)为5.0 ng/mL。当沙丁胺醇的添加浓度为5、10 μg/kg时,该方法的添加回收率为77%～110%,变异系数<8%。     

不同钾水平日粮对绵羊血清、尿液中生化指标的影响

选择4头新疆细毛羊羯羊,采用4×4拉丁方试验设计,研究了以碳酸钾为钾源的高钾日粮对绵羊血清、尿液中生化指标的影响。试验分为4组,A组(对照组,基础日粮)、B组(基础日粮+538mg/kg)、C组(基础日粮+1084mg/kg)、D组(基础日粮+1631mg/kg),使4组的钾水平分别达到1.4%、1.8%、2.2%和2.6%。试验结果表明:绵羊血清钙含量是随着日粮钾水平的提高而增加,且A组与D组达到显著水平(P0.05),其它各组之间差异不显著(P0.05);血清磷含量也是随着日粮钾水平的提高而增加,但各组间差异不显著(P0.05);血清钾、钠的含量是随着日粮钾水平的提高有下降的趋势,各组之间差异不显著(P0.05);各组之间的镁含量也没有达到显著水平,C组镁含量低于A、B、D组,但差异不显著(P0.05);各组之间的羟脯氨酸含量没有达到显著水平,B组的羟脯氨酸含量低于A、C、D组,但差异不显著(P0.05)。绵羊尿液的pH值随着日粮钾水平的提高而增加,且A组、B组和C组相互之间pH值达到极显著的水平(P0.01),A组、B组和D组相互之间pH值也达到极显著的水平(P0.01),C组与D组之间差异不显著(P0.05)。绵羊尿钙含量随日粮钾水平的提高有降低的趋势,但各组间差异不显著(P0.05);尿磷含量随日粮钾水平的提高而降低,但差异不显著(P0.05);尿钾含量随日粮钾水平的提高有升高的趋势,且A组和D组之间达到显著水平(P0.05),其它各组之间差异不显著(P0.05);尿钠含量随日粮钾水平的提高而升高,但差异没有达到显著水平(P0.05);尿镁含量随日粮钾水平的提高而升高,但差异不显著(P0.05);羟脯氨酸含量随日粮钾水平的提高而升高,但差异不显著(P0.05)。     

巨菌草纤维素的酶解条件

纤维素酶酶解植物纤维的过程受许多因素的影响。选取酶解时间、纤维素酶用量、底物浓度、缓冲液pH值和反应温度5个因素对巨菌草(Pennisetum sp.)纤维素酶解条件进行初步研究。结果表明,各因素对该试验的影响效果依次为纤维素酶用量＞酶解时间＞底物浓度＞缓冲液pH值＞反应温度。酶解巨菌草纤维素的最佳条件:反应时间60 h,酶用量44.8 U·g-1,底物浓度10 g·L-1,pH值5.0,酶解温度45 ℃。在该条件下进行酶解反应,酶解液中还原糖含量为95.509 mg·g-1。该研究为巨菌草作为制备生物乙醇的材料提供了理论依据。     

不同保存条件对绵羊卵巢组织卵泡存活的影响

研究旨在通过组织学方法评估卵巢保存形式、温度、时间、保存液对绵羊卵巢组织短期保存以及培养后卵泡存活的影响。结果表明:碎块或整个卵巢组织39℃保存6 h或12 h后,正常卵泡比例与新鲜组织和其他组比较显著下降(P0.05)。经过6 d的组织培养后,在生理盐水中4、20℃保存6、12 h和39℃保存2 h以及在MEM中39℃保存2 h的组织碎块中正常卵泡比例显著低于整个卵巢保存后组织中正常卵泡比例(P0.05)。在MEM中4℃保存6 h或12 h,培养后卵泡存活率显著高于相同条件保存于生理盐水中的组织(P0.05)。此外保存12 h培养后正常卵泡比例显著低于保存2 h处理组(P0.05)。表明在生理盐水和MEM中整个卵巢4、20℃保存2~6 h,或者卵巢碎块20℃保存在MEM中2~6 h都可以用于卵巢体外培养的研究。     

酶解对苜蓿子叶原生质体分离效果的影响

以新牧1号杂花苜蓿(Medicago varia Martyn cv. Xinmu No.1)无菌苗子叶为材料,研究酶液组合、酶解时间、酶液渗透压及酶液pH值对其原生质体的分离效果。结果表明:获得有活力原生质体最佳的酶液组合、酶解时间、酶液渗透压和酶液pH值,分别为2%纤维素酶+0.5%果胶酶+0.3%离析酶、10h、0.55mol/L和5.6。     

酶联免疫吸附（ELISA）法测定生猪尿液中的沙丁胺醇

将标准品、样品和和酶标记物一并加入到微孔板中孵育,样品中的游离沙丁胺醇与酶标记的沙丁胺醇竞争结合酶标板微孔中固定相化的沙丁胺醇特异性抗体,通过清洗步骤洗掉未结合的酶标记沙丁胺醇,再通过酶的专一性显色剂显色,微孔显蓝色,加入反应终止液使颜色由蓝色转为黄色。在450nm处测量吸光度（OD）值,并设置标准曲线,通过标准曲线测定样品中沙丁胺醇的含量,结果显示：OD值的大小与样品中沙丁胺醇的含量成反比。     

淘汰鸡肉的酶解条件

本文研究猪胰酶粗提液水解淘汰鸡肉,其最佳条件是：温60℃、pH8．0、酶浓度为粗提液的2倍稀释,废物浓度为10％,时间为10小时。结果表明：其水解效果达到As1．398中性蛋白酶,淘汰鸡肉经90℃10分钟的加热处理,水解率显著提高。水解液中含有17种氨基酸,其含量为42．531mgs／ml。     

胍基乙酸对绵羊血浆、尿液中胍基乙酸相关代谢物含量和增重的影响

试验旨在探究补喂胍基乙酸（GAA）对绵羊采食前后血液、尿液胍基乙酸相关代谢产物和生长性能的影响。选取健康、3月龄平均体重（27.35±0.58）kg的哈萨克公羊12只,按体重分为对照组和GAA组,每组6只,所有羊只饲喂同一营养水平的粉状精料补充料和粗饲料,GAA组在此基础上补喂30 mg/kg BW胍基乙酸。预试期7 d,正试期15 d。结果表明：与对照组相比,GAA组绵羊采食后2 h和8 h的血浆GAA含量均升高（P<0.01）,0～12 h血浆GAA含量均值也升高（P<0.05）;GAA组绵羊采食后8 h血浆肌酸含量升高（P<0.05）;GAA组绵羊采食后1 h(P<0.05)和10 h(P>0.05)血浆肌酐含量降低;GAA组尿液中肌酸排出量与对照组无显著差异,尿液中肌酐排出量高于对照组（P<0.01）。在本试验条件下,饲粮补喂GAA能够提高绵羊血浆GAA和肌酸含量,增加尿液中肌酐的排出量,具有提高绵羊平均日增重的趋势。     

酶解条件对VC多聚磷酸酯水解程度影响的研究

L-抗坏血酸(即VC)是动物生长、繁殖过程中必不可少的营养性维生素,具有广泛的生理功能。然而,大部分的水产动物不能自身合成VC或合成不足,必须从食物中摄取,所以,在水产动物的饲料中必须适量添加VC。     

不同蛋白酶酶解制备鸡肉小肽的工艺条件研究

本研究拟制备2～3个氨基酸组成的鸡肉小肽,为鸡肉深加工和综合利用提供科学的方法和依据.试验采用4因素3水平正交试验设计,通过对中性蛋白酶和酸性蛋白酶的酶用量、时间、料液比、温度4个因素条件进行研究,确定最佳的鸡肉酶解小肽的工艺条件.结果表明:不同蛋白酶的酶解工艺条件对总氮(T-N)、游离氮(A-N)、水解度(DH)、氮...     

ELISA对猪尿中沙丁胺醇的测定效果

本文探讨了酶联免疫吸附法(ELISA)测定猪尿中沙丁胺醇的效果。在猪尿中添加1、2、4和8ng/m L四个不同浓度的沙丁胺醇,利用ELISA法测定回收率。结果显示,猪尿中沙丁胺醇在0~8.1ng/m L范围内的回收率在86.0~94.5%之间,精密度在3.9~11.6%之间,说明ELISA法检测猪尿中沙丁胺醇结果相对稳定、可靠,能够满足初检筛选要求,是一种值得在基层检测部门推广使用的方法。     

猪肝和猪尿中沙丁胺醇和克伦特罗残留的酶联免疫吸附检测法研究

采用混合酸酐法将沙丁胺醇与牛血清白蛋白偶联，并免疫家兔制备抗沙丁胺醇抗血清。以间接ELISA法测定血清效价，测得抗血清最佳工作浓度为1：6400，该抗沙丁胺醇抗血清对克伦特罗有110％的交叉反应性。建立了能够同时检测SAL和CL的间接竞争ELISA方法，该方法对沙丁胺醇的检测范围为0．48ng／mL～8．0μg／mL，对克伦特罗的检测范围为0．43ng／mL～7．3μg／mL，对沙丁胺醇的检测灵敏度为o．48ng／mL，对克伦特罗的检测灵敏度为0．43ng／mL。在猪肝和猪尿中添加1～50ng／g(ng／mL)的沙丁胺醇，添加回收率为72．2％～84．8％，变异系数为4．2％～28．3％，在猪肝脏和猪尿中添加1～50ng／g(ng／mL)的克伦特罗，添加回收率为84．3％～103．4％，变异系数为O．3％～35．5％。     

动物源性食品中沙丁胺醇残留快速免疫层析试纸条的研制

以高亲和力、高特异性的沙丁胺醇(SAL)单克隆抗体为基础,采用竞争式胶体金免疫层析原理,研制出了SAL胶体金免疫层析试纸条。试验表明,SAL试纸条除与克伦特罗的交叉率为0.2%外,与其他几种药物的交叉率均<0.01%,最低检测限为2μg/L;将SAL试纸条与高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法同时测试肉类组织和尿液,测试结果符合率达100%。鉴于SAL试纸条的快速、灵敏、准确、高通量等特性,适合现场大量样本的筛查。     

酶解血粉的单因素和响应面条件的优化

动物血液是资源丰富、非常具有开发价值的蛋白类饲料原料,因此开发和利用血液资源可解决饲料资源短缺的问题,且减轻血液排放对环境造成的有机污染。但是血粉的消化率差、血腥味和颜色深导致无法大量使用以及氨基酸含量不平衡等问题,且其含有的血腥味导致了其适口性差。目前,普遍使用的加工处理方法仍然无法解决血粉使用过程中存在的问题。加强对畜禽血液资源的精深加工和综合利用,继而研发出安全、营养、价廉的优质血粉产品对我国畜牧行业的可持续发展具有深远影响和重大意义。基于生物技术的发展和酶制剂生产的进步,酶解处理是一种很有潜力的处理血粉的方法,有可能更有效地解决血粉使用过程中遇到的消化率低、适口性差等问题。酶解处理可以改善血粉的营养特性,提高血粉的营养价值。酶解处理可以增加血粉中的游离氨基酸的含量。酶解处理可以改变血粉蛋白结构特性(分子质量变化和二级结构变化),提高血粉的可消化物质的含量。由于酶受到底物种类、底物浓度、酶添加量、p H值、温度、酶解时间的影响,因此每个蛋白酶都必须探讨其对某种特定的蛋白底物的作用条件。本实验首先筛选出最好的碱性蛋白酶,通过单因素实验找到最优的工艺条件,再通过响应面实验筛选出最佳的条件。结果表明,酶解血粉的最优条件为:底物浓度为41.44 mg/ml,温度为45℃,酶/底物比(E/S,酶添加量)为0.803 4,酶解时间为14 h,此时水解度达到了16.39%。     

棉饼对绵羊尿结石形成的影响

试验选用21~25 kg 4月龄断奶公羔30只,采用单因子3水平,随机分成3组,试验1组羊每只每天喂给棉饼70 g,试验2组每只每天140 g,试验3组每只每天210 g,以研究日粮中棉饼喂量对绵羊尿液的影响。结果表明,试验1组绵羊尿液pH值、尿蛋白和沉渣都没有变化,而随饲喂时间延长,试验2、3组绵羊尿液pH值不断增大,尿蛋白含量升高,尿结晶也增多,体积增大。     

不同酶促反应条件及热处理对木聚糖酶活的影响

本试验研究了还原糖法不同酶促反应时间、温度和ｐＨ值及干热、温热处理等因素对木聚糖酶活的影响。结果表明：大多数酶制产品获得最高木聚糖酶的促反应条件是１０ｍｉｎ、６０℃和ｐＨ６．３５。酶活测定时各酶制剂具有较宽的温度适应范围（３５￣７５℃）和较宽的ｐＨ值适应范围（ｐＨ４．５￣７．４）。各酶制剂在较高温度（６５￣９５℃）下干热处理１０ｍｉｎ，其酶活损失较少，而在８５℃温热处理时间愈长，其酶活损失愈多。