苏云金芽胞杆菌新菌株的研究

为筛选对昆虫有高力的苏云金芽胞杆菌特异性菌株,从韩国不同地区土壤中筛选出两株对鳞翅目和双翅目昆虫具有杀虫活性的苏云金芽胞杆菌菌株K9805和K9903,它们分属于苏云金芽胞杆菌库斯塔克亚种和鲇泽亚种,形成典型的双金字塔型伴胞晶体,两菌株不但对小菜蛾、甜菜夜蛾具有较高的生命活性,而且对双翅目昆虫致倦库蚊有毒。K9805含有cry IAa,cy IAb,cry IC,cry ID和cry I基因,K9903含有cry IAa,cry IAb,cry IAc,cry IE和cry Ⅱ基因。     

苏云金芽胞杆菌菌株YBT-1518的插入突变体库的构建及芽胞萌发突变株的筛选

通过携带Mini-Tn10转座子的温度敏感性质粒载体pIC333构建了苏云金芽胞杆菌YBT-1518菌株的插入突变体库。从突变体库中筛选得到1株芽胞不能在萌发剂L-丙氨酸诱导下萌发的突变株(命名为MA1),进一步的试验表明该突变株菌株的芽胞在其他氨基酸L-苯丙氨酸、L-缬氨酸和L-亮氨酸以及糖类萌发剂葡萄糖、果糖和蔗糖的诱导下也都不能萌发,表明MA1很可能属于新型的芽胞萌发缺陷突变株。     

苏云金芽胞杆菌剂型研究进展

苏云金芽胞杆菌是目前世界上应用最广的微生物杀虫剂,剂型加工与药效发挥有直接关系.综述了近十年来国内外剂型的研究进展.     

离心浓缩对苏云金芽胞杆菌芽胞保留率的影响

用正交试验法研究了苏云金芽胞杆菌发酵液浓缩过程中悬浮液固含量、离心转速和离心时间对苏云金芽胞杆菌芽胞保留率的影响.经方差分析,悬浮液固含量、离心转速和离心时间对芽胞保留率均有显著影响.随着离心转速和离心时间的增加,芽胞保留率呈下降趋势,而悬浮液固含量提高,则芽胞保留率升高.根据正交试验结果确定的使芽胞保留率保持较高水平的浓缩工艺条件是:离心转速3000r·min-1,离心时间5min,悬浮液固含量90g·L-1.     

小菜蛾对苏云金芽胞杆菌的抗药性研究

采用人工饲料感染法监测了我国不同地区小菜蛾田间种群对中国标准品Ｃｓ３ａｂ－１９９１的敏感性。结果表明：广东省深圳、东莞、广州的田间小菜蛾对苏云金芽胞杆菌产生了明显的抗性,最高抗性倍数分别为８．９,６．５,２．１。深圳的抗性小菜蛾种群在无毒条件下饲养,抗性会自然减退,经５代之后抗性消失。     

苏云金芽胞杆菌cry基因研究进展

从cry基因的分类、鉴定、遗传特性以及应用概况等4个方面综述了苏云金芽胞杆菌cry基因的研究进展,并对cry基因的研究进行展望。     

苏云金芽胞杆菌对淀粉塑料膜降解的促进作用

苏云金芽胞杆菌菌粉,玉米淀粉与线性低密度乙烯共混制得淀粉塑料,通过地理降解和摇床快速降解试验研究了淀粉塑料中淀粉的降解率。结果发现地理降解１２０ｄ后含５％菌粉和５０％淀粉的薄膜淀粉降解率达到８９．５２％,扫描电镜观察大部分淀粉颗粒破碎,出现许多小孔。不加菌粉的淀粉降解率只３５．４８％,表明添加的菌粉对淀粉降解有的促进作用。     

苏云金芽胞杆菌8010粉剂对流干燥的研究

利用对流干燥试验台，就苏云金芽胞杆菌８０１０粉剂（Ｂｔ ８０１０）对流干燥进行了风温、风速和物料层厚度的正交试验。分析了上述三因素对干燥时间和干燥后芽胞数目的影响的显著水平。同时还得出干燥时间、芽胞剩余率的回归方程及降速干燥阶段曲线方程，提出了较佳的干燥工艺参数。     

苏云金芽胞杆菌应用研究进展

由于苏云金芽胞杆菌(Bt)具有特异性高,对人畜无害,对环境友好等优点,因而其抗虫基因成为目前研究历史最久、应用最成功、使用最广泛的抗虫基因。现简述了cry基因资源的现状及在生物杀虫制剂、转基因作物中的研究进展。     

苏云金芽胞杆菌油剂增效因子的筛选

以小菜蛾、棉铃虫为生物测定昆虫 ,通过测定 5种无机盐 (Na2 CO3,K2 CO3,CaCl2 ,MgSO4 ,和MgCl2 )对苏云金芽胞杆菌油剂的增效作用进行增效因子的筛选。结果表明 ,以小菜蛾为供试昆虫 ,除CaCl2 外 ,其余 4种无机盐对苏云金芽胞杆菌油剂均表现增效作用 ,0 .0 10 %MgCl2 效果最好 ,增效比为 1.5 6。以棉铃虫为供试昆虫 ,5种无机盐对苏云金芽胞杆菌油剂均表现增效作用 ,0 .0 12 5 %MgSO4 效果最好 ,增效比为 1.6 9,0 .0 2 5 %的Na2 CO3 次之 ,增效比为 1.5 9     

苏云金芽胞杆菌研究进展

论述了苏云金芽胞杆菌的作用范围、ICPs基因的多样性、杀虫机理、基因工程以及产业化研究的进展情况。     

啤酒废水污泥培养苏云金芽胞杆菌

以啤酒厂不同处理工段废水、污泥为原料培养苏云金芽胞杆菌(Bt),并与城市污水做比较,研究啤酒废水、污泥的化学耗氧量(COD)、pH、发酵情况及其毒力.结果表明,以啤酒厂混合池原废水和酸化池废水为原料培养Bt,活芽胞数可达109cfu·mL-1级,与城市污水相比(D595nm=0.202),能产较高的晶体蛋白(D595n...     

苏云金芽胞杆菌晶体毒素对体外培养的日本血吸虫成虫的毒力

将人工感染日本血吸虫尾蚴４５ｄ的家兔主动脉灌注冲虫获得成虫,经Ｅａｒｌｅ′ｓ液洗涤,加入细胞培养板内,用含１０％牛血清的ＲＰＭＩ－１６４０培养液于３７℃、５％ＣＯ２培养箱中培养,苏云金杆菌Ｂ－００１、Ｅ－００２提取的伴胞晶体毒素,以不同浓度加入到各孔中。２４ｈ后成虫运动缓慢,并有部分死亡,随着伴胞晶体毒素作用时间的延长,成虫的死亡率也增加。当毒素总蛋白含量为１１７．２９μｇ／ｍｌ时,经菌株Ｂ－００１晶体毒素作用的成虫死亡率在２４ｈ时为８７．７４％,４８ｈ时为１００％,ＬＤ５０分别为２１．４２μｇ／ｍｌ、９．７７μｇ／ｍｌ;经菌株Ｅ－００２晶体毒素作用的成虫死亡率在２４ｈ时为８６．１８％,在４８ｈ时为１００％,ＬＤ５０分别为３３．１６μｇ／ｍｌ、１３．１９μｇ／ｍｌ。这表明两种苏云金杆菌晶体毒素均对血吸虫成虫有杀     

苏云金芽胞杆菌菌株94的培养基优化及对4种鳞翅目幼虫的毒力

采用正交设计，获得了苏云金芽胞杆菌菌株９４（Ｂｔ９４）的最适液体培养基配方：葡萄糖质量浓度为０．７６ｋｇＬ－１、胰蛋白胨＋酵母浸膏为０．８ｋｇＬ－１、无机盐为０．１ｋｇＬ－１．采用该培养基进行摇床培养，活芽孢数可达１０１×１０１１个Ｌ－１．用摇瓶培养液对斜纹夜蛾和小菜蛾进行毒力测定，其ＬＣ５０分别为３５５．９９５１±２．６０９８和５８．２９０８±１．４２６２ｍＬＬ     

棉铃虫对苏云金芽胞杆菌室内抗性初报

经室内10代筛选,棉铃虫对苏云金芽胞杆菌菌株YBT-1520和HD-73伴胞晶体产生了一定水平的抗性,F10代的抗性指数分别为1.30和2.07。从中可以看出棉铃虫对苏云金芽胞杆菌抗性发展的初步规律,即棉铃虫对多基因毒素(YBT-1520ICPs)的抗性发展比对单基因毒素(HD-73ICPs)的抗性发展速度要慢得多。     

由苏云金芽胞杆菌胞晶混合物直接提取原毒素的方法

采用室内实验技术,研究了直接从苏云金芽胞杆菌胞晶混合物提取原毒素的方法。胞晶混合物依次用0.5mol·L-1NaCl和无菌去离子水洗涤3次,洗涤后的沉淀物用0.05mol·L-1NaOH 0.1mmol·L-1PMSF溶液溶解10min,10000r·min-1离心15min去除不溶物。上清液以25%乙酸调至pH4.4,得原毒素蛋白沉淀,冷冻干燥。SDS-PAGE电泳扫描结果表明,原毒素分子量为130kDa,在提取过程中没有发生降解。该提取方法具有操作简便、成本低、效率高等优点。     

苏云金芽胞杆菌8010粉剂对流干燥的研究

利用对流干燥试验台，就苏云金芽胞杆菌８０１０粉剂（Ｂｔ８０１０）对流干燥进行了风温、风速和物料层厚度的正交试验．分析了上述三因素对干燥时间和干燥后芽胞数目的影响的显著水平．同时还得出干燥时间、芽胞剩余率的回归方程及降速干燥阶段曲线方程，提出了较佳的干燥工艺参数．     

苏云金芽胞杆菌CryⅠ基因RNA探针载体的构建

将办云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白ＣｒｙⅠＡ基因的高保守区ＥｃｏＲＩ－Ｆ片段重组到ｐＳＥ－ＬＥＣＴ－１载体的ＥｃｏＲＩ位点，构建出能够高效转录ＲＮＡ的探针载体ｐＳＢＰＬ－１。该载体在Ｔ７ＲＮＡ聚合酶作用了，通过ＤＩＧ体外标记转录制备的ＲＮＡ探针，具有灵敏度高，背景清楚，省时等优点，为苏云金芽胞杆菌分子生物学研究，及对鳞翅目有特异毒性高效菌株的筛选提供了一种方便而有效的方法。     

苏云金芽孢杆菌的伴胞晶体形成过程分析

通过对苏云金芽孢杆菌的伴胞晶体的染色形成过程的观察,分析其形成的影响因子,掌握伴胞晶体形成和积累的因素。     

苏云金芽胞杆菌肠毒素基因克隆与序列分析

根据蜡质芽孢杆菌(Bc)肠毒素基因序列,设计特异PCR引物,对本实验室保存的 16个苏云金芽孢杆菌 (Bt)菌株进行检测.结果显示, 15个菌株含有肠毒素基因片段.克隆了Bt8010肠毒素entS基因的编码框 (ORF)序列, 将该序列测序,用在线的BLAST软件与DNASIS软件进行同源性分析.结果表明,该基因与已知的Bc和炭疽芽孢杆菌肠毒素基因有很高的同源性,但该基因有 12个核苷酸缺失,不能表达完整多肽.