杭州市牛羊几种病毒病的血清学调查

近年来国内外对牛传染性鼻气管炎、白血病、粘膜病及牛羊兰舌病的流行屡有报道。我市随着改革开放,牲畜流动量不断增加。为摸清这些病在本市流行情况,我们在1987年于全市的种牛、羊进行了一次血清学调查,现报告如下。一、检出阳性情况:应用琼扩试验(诊断液由哈兽所提供)对3104头牛进行了牛白血病调查,查出阳性反应牛85头。对191头牛进行了牛粘膜病琼扩试验(诊断液由农业     

奶牛场长期自然交配结果的调查

对长期终年放牧和自然交配的雾岛山麓的某大规模奶牛牧场1972—1983年的繁殖结果进行了调查。 1983年7月在场的128头牛平均年龄为5.5岁,经产牛平均为6.1岁,10岁以上的老龄牛占经产牛的9.3％。平均产次为3.5次,经产牛的平均产次为4次,产次在7—11次的高产次牛占经产牛的14.8％。     

抗牛白血病试验羊肿瘤细胞膜抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

建立4株分泌抗牛白血病试验羊肿瘤细胞膜抗原(TAA)单克隆抗体细胞株,用抗鼠 Ig 亚类标准血清双扩证明4株均为 IgG,轻链为 K,染色体数平均为104.3次克隆,4次复苏,4个月传代培养,细胞分泌抗体稳定.用 TAA 包被的 ELISA 检测证明免疫鼠血清、单克隆抗体呈阳性反应,健康鼠血清呈阴性反应.中和试验 OD值与健康对照相同,抑制试验单抗 OD 值明显下降.建立了完整细胞包被的 ELISA 和间接免疫荧光检测试验羊肿瘤细胞的方法,并证明瘤细胞膜呈阳性反应,而健康羊外周淋巴及淋巴结中的淋巴细胞呈阴性反应,表现了很高的特异性,为提高牛白血病肿瘤细胞诊断和研究其肿瘤细胞发生提供了新试剂.     

酶联免疫吸附试验(ELISA)诊断牛日本血吸虫病的研究

对707头牛进行了酶联免疫吸附试验,其中感染血吸虫牛200头,检出率为97.5～97.7％,368头未感染血吸虫牛阴性符合率为97.2～98.5％,对寄生肝片吸虫、双口吸虫、东毕吸虫、棘球蚴牛共81头试验结果仅1头寄生肝片吸虫牛呈阳性反应,80头牛是阴性反应,说明ELISA用于牛血吸虫病诊断具有较高的敏感性与特异性,对基本消灭血吸虫病地区的现场试验也取得相似结果,说明BLISA是一种诊断牛血吸虫病较好的方法。     

鼻疽马骡固相补体结合反应与病理组织学关系的研究

为进一步探讨国相补体结合反应检测鼻疽马骡的判定标准的客观程度,扑杀了18匹鼻疽马,经病理组织学检查,均看到了典型的鼻疽病变,以SP-CFT作检测,阳性反应15匹,占83.3％;疑似反应2匹,占11.1％;阴性反应1匹,占5.6％。由上述结果认定,SP—CFT检测并无假阳性反应发生,与病理组织学变化一致,其结果是可信的。     

某规模化奶牛场牛肺外结核的病理学诊断

验证牛结核菌素阳性反应牛的结核病变及其病变的组织分布及病变特征,追踪感染源及传播途径,为奶牛场结核检疫净化提供技术支持。在新疆某规模化奶牛场应用牛结核菌素皮内变态反应(SIT)、IFN-γ试验、PPD点眼反应、ELISA抗体检测4种方法联合检疫,综合判定感染牛23头,全部扑杀并进行系统剖检,采集病料,进行病理组织学和细菌学诊断。剖检结果表明,23头牛中14头牛在肝、脾、淋巴结等肺外组织器官发现眼观结核病变而未见肺脏结核病变,仅有2头发现肺脏及肺门淋巴结病变,7头牛在全身组织器官未能发现眼观结核病变;病理组织学检查结果表明,剖检的23头牛均呈现早、中、后期典型结核结节病变,11头牛的病料分离培养到牛分枝杆菌。该奶牛场结核主要表现为肺外结核,经典肺结核较少,这可能是该奶牛场在以往扑杀的阳性牛中很少发现肺脏结核病变的原因。     

从付结核变态反应牛所生的后代中培育健康犊牛

我场于75—77年引入海伏特种牛14头。其中新华畜牧场调入我场的4头海伏特牛是在新华牛场分化出来的假定付结核健康牛。我场在75年9月和76年5月反复作了付结核检疫(用禽型结核菌素做皮内变态反应),结果4头牛中有3头是阳性反应,其中75004号是38号母牛于75年生的母犊牛。     

ESAT-6及PPD ELISA检测疫区和非疫区牛结核病的比较研究

本实验克隆、表达了牛结核早期分泌靶抗原蛋白6（ESAT-61抗原,建立了ESAT-6酶联免疫吸附检测方法（ELISA）。同时应用牛结核提纯菌素（PPD）ELISA和ESAT-6-ELISA对采自疫区的641头牛和非疫区的324头牛进行检测,其中PPD-ELISA检测中,疫区有581头阳性牛,阳性率为90．64％,非疫区有2头阳性牛,阳性率为0、62％;ESAT-6-ELISA检测中,疫区有567头阳性牛,阳性率为88．45％,非疫区没有阳性牛。对采自疫区的23例变态反应阳性牛和非疫区的7例变态反应阳性牛进行检测,其中PPD-ELISA检测中,疫区有20头为阳性。与变态反应的符合率为86．90％,非疫区有1头为阳性,与变态反应的符合率为14％;在ESAT-6-ELISA检测中,疫区有18头为阳性,与变态反应的符合率为78．30％,非疫区没有阳性。这些结果表明：ESAT-6-ELISA的敏感性要低于PPD-ELISA;牛结核ELISA在非疫区应用效果较差,在疫区更具有应用价值。     

日本牛白血病病毒传染:牛体内抗体和病毒的检查

作者分别在1977—1978年用免疫扩散试验对北海道(Hokkaido)和青森县Towada地区的奶牛和肉牛检查了抗白血病抗体的存在情况。这次检查发现抗体阳性牛的百分率高于以前在这里调查的百分率,(北海道为8.8％,以前是3.3％;Towada地区为44.2％,以前是32.2％)。表明牛白血病传染在日本这些区域逐年增加。为了阐明在牛体内存在白血病病毒与抗牛白血病抗体之间的关系,从带有(或没有)白血病抗体的牛体采取淋巴细胞进行了合胞体检查。当用牛脾细胞作指示细胞时,所有带白血病抗体的牛对合胞体检查呈阳性;当用牛的胸腺细胞作指示细胞时,它们中的71.4%是阳性。这些结果指出:当适宜的细胞被用作指示细胞时,用合胞体检查法几乎能从全部带白血病抗体的牛体检出白血病病毒。当用牛胸腺细胞作为指示细胞时,在不带白血病抗体的牛中只有15％能诱使形成合胞体,用牛脾细胞检查时,17.6％能形成合胞体。在已接种了淋巴细胞的指示细胞中既看不到蚀斑也看不到包涵体。这种合胞体检查呈阳性而抗体呈阴性的牛只被认为已感染了白血病病毒。     

牛暂时热血清学调查——血清中和试验

对广西六个地区25个牛群的不同品种、不同年龄的513头牛进行了暂时热中和抗体检测,阳性反应为299头(占58.3%).各牛群均有阳性例,小牛阳性率为33.9%,成年牛为61.6%,本地黄牛、引进黄牛和奶牛阳性率为61.7～79.3%,本地水牛和引进水牛为36.7～48.7%。对阳性反应牛中的135头血清作了中和抗体滴度测定.其抗体滴度最高达1:64。可见,广西牛群中有牛暂时热存在.     

应用灭活疫苗防制牛白血病病毒感染

检测了用感染牛白血病病毒（ＢＬＶ）的ＬＫ１５细胞系（ＬＫ１５疫苗）或蝙蝠肺细胞系（Ｂａｔ疫苗）制备的苗对牛的保护作用。１２头牛间隔４周免疫接种２次，然后于第２次接苗后４周攻毒，用ＬＫ１５疫苗接种的９头牛产生了ＢＬＶ特异性糖蛋白（ｇｐ）抗体，其琼扩试验效价为１：１６～１：６４。用１００μ１（含７０～１００个合胞体）ＢＬＶ持续感染奶牛血液攻击的４头牛均获得保护。其余５头牛用５００μ１感染牛血液攻毒，仅     

云南省楚雄州牛羊蓝舌病的血清学调查

应用琼脂扩散试验法，对采自云南省楚雄州４个县（市）的４１７份牛、４０６份羊血清进行了蓝舌病的血清学调查，结果血清抗体阳性率分别为１３．１９％和４６．３１％；对血清学检测呈阳性反应的１７头牛和３４只羊进行了临诊调查，结果未发现有关的病史、症状与病变，均呈隐性带毒状态。     

牛白血病前病毒Taqman荧光PCR检测方法的建立

设计并合成荧光引物,建立了Taqman荧光PCR体系,可快速检测全血样品中的牛白血病前病毒DNA。所建立的荧光PCR体系可特异检测牛白血病病毒核酸,而对牛病毒性腹泻—粘膜病毒(BVDV)、牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)以及羊胎肾细胞(FLK)、牛布鲁氏菌扩增均呈阴性反应,对pBST-pol重组质粒的检测敏感性可达0.32拷贝。重复性实验的Ct值变异系数介于0.67%~1.16%之间,稳定性实验的Ct值变异系数为3.14%。采用建立的Taqman荧光PCR体系和OIE推荐的套式PCR对94份临床样品进行检测,两者定性符合率达到97.87%。     

鲁西黄牛胚胎移植试验报告

选择63头鲁西黄牛作受体牛进行胚胎移植，经两次同期发情处理，发情率分别为84．1％和82．5％；34头牛可移植，占同期发情处理牛的54．0％；有13头牛受胎，移植成功率为38．2％。     

海晏县牛布氏桿菌病的感染率调查

近十年来,海晏县的牦牛和黄牛均未进行过布病的免疫,牛的流产率一般达10％左右。为了弄清该地区牛布病的感染状态,在1980—81年,我们对三个牧业公社和两个半农、半牧公社的1,091头牦牛和黄牛进行了布病检查,在被检牛只中,绝大多数为母牛,且以3—6岁为主。检查结果:共检出阳性反应牛78头(占7.15％)和可疑反应牛99头(占9.07％)。在永丰等十个牧业大队的982头牦牛中,共检出布病阳性反应牛71头(占7.03％)和可     

阿塞拜疆牛皮蝇幼虫的治疗试验

在一次使用2,292头牛的试验中看出,秋季在牛背使用5—10ml Sulfidofos—20[fenthion]防治牛皮蝇时,同敌百虫一样有效。阿塞拜疆的皮张由于牛皮蝇幼虫的损害,已从1970年的35％下降到1980年的1.3％。     

牛对IBR灭活抗源皮内试验的反应

为了评价皮试抗原对以前感染有IBR病毒牛的检测率,制备了灭活病毒抗原并作了研究.灭活抗原是经膜超滤浓缩再经56℃加热1小时和β—乙丙酸丙脂处理的感染细胞培养液.用于研究的牛来自兽医病毒研究所畜群的黑白花母牛.牛群由已知其感染史及未知其感染情况的牛组成.全部牛均作了IBR抗体的病毒中和试验的血清学研究.皮内注射前用试验抗原测其滴度.母牛由三组组成.第一组是皮试前已用Colorado 1活毒株感染约6个月的牛.第二组15头牛是未知感染和疫苗接种情况的,但9头作皮试时有中和(VN)抗体.第三组12头牛中6头有VN抗体,6头在最低血清稀释度(1:3)时亦为阴性.三组皮内试验的结果摘要如下:组1:感染组中的全部牛对皮试抗原均为阳性反应,但有一头经反复试验未测出VN抗体.组2:这组中6头对皮试和VN抗体试验均为阴性.9头对VN试验阳性,而其中只有6头对皮内试验呈现明显的阳性反应;2头为可疑反应;一头中和抗体为1:100的皮试为阴性.组3:6头牛对VN和皮试均为阴性.有高抗体滴度的6头中的4头皮试为阳性,2头为阴性.     

B细胞亚群与牛白血病发生的关系

对8头流行性白血病病牛,用8种单克隆杭体（McAb）,经过免疫组织化学ABC法和免疫荧光流式细胞检测法,观察了其免疫病理组织变化和外周血及肿瘤组织的B细胞亚群变化。结果7例病牛的BoCD5、BoCD11b和sIgM为阳性反应,表明肿瘤细胞来源于B1a细胞;1例病牛的BoCD11b和sIgM呈阳性反应,而BoCD5则呈阴性反应,说明该肿瘤细胞来源于B1b细胞。另外,在免疫组织化学染色肿瘤组织切片上在浸润的淋巴细胞中不仅见有较多的CD3和CD5阳性细胞,而且也见有较多的CD3和CD5阳性肿瘤细胞。表明流行性牛白血病的肿瘤细胞主要来源于Bla细胞,其他类型的淋巴细胞也有可能突变为白血病的肿瘤细胞。     

用光电比色计测定公牛原精液精子密度的情况

在工厂化的牛冷冻精液生产中,既要保证每一剂量产品达到规定的有效精子数,又要充分利用原精液,增加产品数量。因此,要求对原精液精子密度(以下简称“密度”)作频繁的检查。随机统计18头牛相邻两个采精日(同为第一或第二次)的密度差对密度平均值之比为74.3—15.1％,平均30.61％;随机统计某一天15头牛第二次对第一次密度之比为254.0—6.7％,平均75.5％。显然同一头公牛各天以及同天两次的密度波动都很大。因此,仅按国内现行操作规程规定每半     

应用三点同步注射比较变态反应诊断奶牛结核病

用三种结核菌素在颈部三点同步注射,检测非疫区奶牛５８９头,检出牛型提纯结核菌素皮内变态反应阳必 ７１头、牛禽双阳性牛２６头、牛副双阳性牛２５头,经用比较变态反应鉴别,２６头牛禽双阳性牛中,有２２头牛为禽型提纯结核菌素皮内变态反应阳性牛;２５头牛副双阳性牛中,２３头牛为副结核菌素皮内变态反应阳性,三点同步注射比较变态反应系解决特异性反应的简便适用的有效方法。