烟碱降解微生物的筛选、鉴定及其烟碱降解效果评价

采用烟碱降解微生物平板筛选鉴别方法,从白肋烟和烤烟中筛选出11株烟碱降解微生物,经初步鉴定,3株为细菌,8株为放线菌;采用荷移光谱法测定了11株菌对纯烟碱和白肋烟叶片中烟碱的降解能力,其中放线菌K2对烟碱的降解能力最强,对白肋烟叶片中的烟碱降解率(48h)为74.77%,对纯烟碱可以完全降解。经过生理生化试验鉴定和16SrDNA序列比对,确定放线菌K2为除虫链霉菌(Streptomyces avermitilis)。     

烟碱降解菌SCUEC2菌株的分离及其降解特性

以烟碱为惟一碳源,从湖北省襄阳市烟草种植土壤中分离得到1株烟碱降解菌,为蒙氏假单胞菌(Pseudomonas monteilii)SCUEC2。在30℃下,180 r/min摇床培养,烟碱质量浓度为1.00 g/L时,发酵10 h后烟碱降解率达到88.80%。在30℃下,180 r/min摇床培养48 h,烟碱质量浓度为6.00 g/L时,烟碱降解率为82.59%;烟碱质量浓度为7.00 g/L时,烟碱降解率和菌株生长呈下降趋势,烟碱降解率为18.94%。SCUEC2菌株发酵液经HPLC检测,结果显示,烟碱的保留时间为5.25 min左右,在培养到16 h时,烟碱峰峰面积明显减小,并在保留时间为11.79 min左右处出现一个新色谱峰,表明有中间代谢产物产生。     

烟碱降解的分子生物学研究进展

介绍了烟碱降解的分子生物学研究进展,阐述了嗜烟碱节杆菌及其新酶,以及假单胞菌属细菌降解烟碱的分子生物学机理。     

降解烟碱细菌的分离·筛选及初步鉴定

[目的]对1株具有高效降解烟碱能力的菌株进行初步鉴定。[方法]应用基础培养基、富集培养基从南昌卷烟厂废弃烟草及其污染的土壤中分离筛选出1株具有高效降解烟碱能力的菌株,通过观察该菌株的培养特征、生理生化特征对其进行初步鉴定。[结果]该菌在含0.5%烟碱为唯一碳源选择培养基上生长,48h烟碱降解率为83.2%,初步鉴定为革兰氏阳性的嗜烟碱节杆菌。[结论]试验所筛选的X5菌株在实际应用中具有重要意义,在烟草工业和环境保护中具有潜在的应用前景。     

高烟碱耐受力降解菌Arthrobacter sp. AH14的鉴定及其降解条件的优化

烟碱是烟草生物碱的主要成分,其含量高低直接影响着烟叶的品质,目前我国的卷烟企业面临着因上部烟叶烟碱含量高而难以较多地用于叶组配方的难题。此外,因烟碱具有毒性,如何将其从烟草废弃物中除掉是烟草行业面临的又一大难题,因此寻找一种简单、低耗、环保的方法来降解烟碱十分重要。前期分离保存了一株能够降解烟碱的细菌AH14,从形态结构特征、生理生化特性、16S r DNA序列分析以及构建系统进化树等方面对其进行鉴定,结果表明AH14为节杆菌(Arthrobacter sp)。以6 g/L的烟碱为唯一碳源,对该菌株降烟碱的条件进行了优化研究,得到其降解烟碱的最适条件为:接种量12.5%、p H 6.5、温度34℃、转速120 r/min。在此条件下,该菌能够在120 h内将6 g/L的烟碱完全降解,14 g/L的烟碱降解率为30.22%。说明菌株AH14具有极强的降解烟碱能力,可应用于降解高浓度烟碱。     

一株烟碱降解菌的筛选及改善烟叶品质的研究

从植烟土壤和废弃烟叶中分离筛选出降烟碱能力较高的一株新菌株Y523,并对该菌株培养发酵条件进行优化.结果表明:2％葡萄糖和0.2％( NH4)2SO4作为外加碳氮源可明显促进烟碱降解.适宜的发酵条件为:温度30℃、初始pH值7.0、发酵时间36 h.采用Y523菌液进行烟叶烘烤应用试验,理化指标测定结果显示,烘烤后烟叶中烟碱含量均有不同程度的降低,上部烟叶降烟碱效果最好,烟碱降解率达到28.7％,中部烟叶和下部烟叶烟碱含量分别降低了20.9％和15.8％;烘烤烟叶糖碱比、氮碱比协调,上部烟叶品质得到改善和提高.     

微生物降解烟叶烟碱研究应用进展

本文从降低烟叶烟碱含量的主要方式、微生物代谢烟碱的主要途径、微生物及其酶降解烟碱的研究进展3个方面综述了近年来国内外对利用微生物及其酶降低烟叶烟碱的研究应用成果，以期为烟叶生产提供参考。     

丝状真菌对烟草废料中烟碱和多酚的降解效果

研究丝状真菌在烟草废料培养基中的生长特性,及其对烟草废料中的烟碱和多酚(绿原酸)的降解效果,结果表明,所用丝状真菌在经乙醇浸提后的烟草废料培养料中生长良好,其中曲霉的烟碱降解能力最强,脉孢菌的多酚降解能力最强。在烟草废料培养基中发酵48 h,曲霉对烟碱的降解率达到60.5%;脉孢菌对多酚的降解率达到29.8%。将2种菌混合培养48 h,对烟碱和多酚的降解率分别为76.6%、48.1%,烟草废料培养基中烟碱和多酚含量分别降低至1.96 mg/g和0.81 mg/g,因此2种菌混合培养时降解烟碱和多酚的效率更高。     

一株烟碱降解菌的选育及其应用研究

[目的]寻求有效降低烟草中烟碱含量的方法。[方法]从延安卷烟厂发酵装置的废水中分离纯化出1株高效降解烟碱的细菌,并利用该菌制成的粗酶液作用于某等级烟叶,考察其是否可以降低烟碱含量,改善烟叶品质。[结果]利用含有烟碱的选择培养基共分离纯化出71株能够分解利用烟碱的细菌,其中W9菌分解能力最强,降解试验表明,该菌在烟碱含量1.4%左右的烟碱水提液里经16 h摇床培养,烟碱可被完全降解。将该菌的粗酶液喷施在烟叶上,经数天室内发酵后,评吸结果表明,刺激性、劲头明显降低,抽吸品质得到明显改善。[结论]研究表明,该菌在降烟碱含量及改善烟叶品质方面具有一定的应用前景。     

降烟碱融合子及其亲株大田降解烟叶中烟碱的研究

为降低上部烟叶中过高的烟碱含量,使用解淀粉芽孢杆菌T11、边缘假单胞菌和融合子A2等3种不同菌液对烟株进行叶面喷洒和根灌处理,研究不同菌液、处理次数、处理方式对烟碱降解率、菌株驻留时间及上部烟叶品质的影响。结果表明,根灌的处理方式不能达到降解烟叶中烟碱的目的,而使用菌液进行3次叶面喷洒后其降解烟碱的效果较好,解淀粉芽孢杆菌T11、边缘假单胞菌和融合子A2的烟碱降解率分别为17.7%、18.5%、25%,融合子A2的降解烟碱的效果最佳;绿色荧光蛋白(GFP)示踪试验中,使用菌液喷洒叶面后,菌株随着时间的推移会逐渐消亡;而处理后烟叶品质各化学成分含量在适当范围内,上部烟叶品质有得到改善趋势。在菌液喷洒烟叶条件下,烟叶中的烟碱含量显著降低,上部烟叶品质得到改善。     

啤酒酵母富铁培养条件筛选

本实验研究啤酒酵母菌生长特性以及不同pH和培养基起始铁浓度对酵母菌生长的影响,驯化菌株的耐铁能力,筛选培养基的最佳起始铁浓度,确定富铁酵母生产的适宜参数。结果表明:啤酒酵母菌适应起始pH值为5~7,偏酸性;培养时间为48 h;确定培养基铁浓度为800 mg/L时开始驯化菌株以制备耐铁酵母菌。利用驯化后的酵母菌,在起始pH值为6.0,铁添加量为800 mg/L的条件下,150 r/min,30℃振荡培养48 h,酵母菌的生长量为12.9 g/L,菌体铁的含量可达23.94 mg/g风干菌体,有机化程度为98.14%。     

戊糖乙醇发酵菌种的选育及菌种特性的研究

[目的]选育能利用木糖产乙醇的菌株。[方法]从自然界中分离、筛选能够发酵戊糖产生乙醇的酵母菌株,并对所得菌株进行发酵性能研究。[结果]选出了1株能利用木糖产乙醇的菌株b-11。其特性研究结果表明,菌株b-11耐乙醇浓度为5%,对数生长期为12～18 h,在50 g/L的木糖发酵培养基中发酵48 h时乙醇浓度达到最高值3.105 9 g/L,木糖利用率达82.52%,糖醇转化率是理论转化率的16.36%。[结论]该研究为利用木质纤维素生产燃料乙醇提供了参考。     

节杆菌K15发酵条件的研究*

 试验对烟碱降解能力强的节杆菌K15发酵条件的优化进行了研究,通过涂平板计数的方法得到节杆菌K15的最适发酵条件：淀粉、牛肉膏和硫酸镁分别作为节杆菌K15的最适碳源、氮源和无机盐,优化的培养基配方为6%的淀粉、2%的牛肉膏和0.2%的硫酸镁;最适pH值为7.5,最适温度为25℃,300mL瓶中加80mL的培养液的通气条件最佳,培养32h至48h为最适的菌种收获期。该研究结果为该菌株扩大培养以及工厂化生产提供了参考     

茄子黄萎病生防内生细菌29-12发酵条件的初步研究

初步探讨茄子黄萎病生防内生性枯草芽孢杆菌29-12的发酵条件,通过培养条件优化及正交试验得出最佳培养基配方为:玉米粉15 g/L、甘薯淀粉5 g/L、豆粕粉15 g/L、蛋白胨8 g/L、MgSO4 0.01%、K2HPO4 0.05%.最佳培养条件为:起始pH值7.5,250 ml三角瓶装液量100 ml,摇瓶速度120 r/min,接种量10%,温度30 ℃.在此条件下培养29-12菌株 84 h,抑菌圈大小为2.12 cm,1 ml含菌量为1.58×109 , 芽孢得率为100%.     

产生物絮凝剂自生固氮菌HY1141的筛选及培养条件优化

从48株自生固氮菌中筛选出一株高效絮凝剂产生菌HY1141。比较确定其最佳碳、氮源后,再通过正交试验筛选最佳培养基和最佳培养条件。结果表明,该菌株的最佳碳源为蔗糖,最佳氮源为N2。在不加外源氮素的前提下,最佳培养基为蔗糖5g/L,磷酸二氢钾1·5g/L,硫酸镁0·6g/L。最佳培养条件为转速150r/min,培养温度35℃,培养基初始pH7·0、培养时间36h。在此条件下,该菌产生的絮凝剂对高岭土悬液的絮凝率达96·4%。     

一株氨态氮降解芽孢杆菌的筛选及降解能力初步研究

为了研究微生物对水体中氨态氮的去除能力,通过多点采样、高浓度氨态氮废水驯化、梯度稀释、平板划线分离等步骤,从土壤中分离并筛选出对氨态氮具有高降解能力的菌株,并对其形态特征、生理生化特征进行了鉴定。对菌株最佳生长条件进行了研究,并将菌株投入模拟污水及养殖污水研究其氨态氮降解特性。在以硫酸铵为唯一氮源的筛选培养基上筛选分离到1株对氨态氮具有高降解率的菌株N9,初步鉴定该菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),菌株降解氨态氮最适温度为30℃,最适pH 7.0;其生长与氨态氮降解过程同步,随着模拟废水中氨态氮浓度下降,细菌湿重不断增加;在模拟废水中,当氨态氮初始浓度为50 mg/L时,48 h内的氨态氮降解率可达95.5%;养殖水体氨态氮降解试验结果表明,在氨态氮初始浓度为2.3 mg/L、接种量105CFU/L时,6 d内氨态氮降解率可达85.2%。可见N9菌株降解氨态氮能力显著,可用于氨态氮污染的治理。     

利用组合策略提高汉逊酵母发酵生产D-阿拉伯糖醇

[目的]提高多形汉逊酵母发酵生产D-阿拉伯糖醇的产量。[方法]通过正交试验确定了用多形汉逊酵母DL-1发酵生产D-阿拉伯糖醇发酵培养基的最佳组分,进而结合培养温度对发酵过程的影响,获得运用变温策略提高多形汉逊酵母生产D-阿拉伯糖醇的方法。[结果]最优发酵培养基组分为:葡萄糖200 g/L,蛋白胨20 g/L,酵母浸粉12 g/L,Triton X-100 10 g/L,硫酸铵3.0 g/L,七水硫酸镁2.5g/L,磷酸二氢钾2.5 g/L;多形汉逊酵母DL-1的最适生长温度和D-阿拉伯糖醇最适合成温度分别为37℃和34℃;变温调控发酵方法为:将发酵培养基在37℃培养24 h后,升温到48℃继续培养24 h,再降温至34℃继续培养96 h得到发酵液。采用该方法发酵结束后D-阿拉伯糖醇产量为114.92 g/L,比恒温发酵(37℃、48℃、34℃)分别提高了30.25%、208.66%、20.93%。[结论]该方法可以提高多形汉逊酵母发酵生产D-阿拉伯糖醇。     

红树莓组培快繁技术研究

以树莓品种红莓38为试材,MS为基本培养基,添加植物激素6-BA、IBA,研究树莓快速繁殖技术,结果表明:诱导侧芽培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+IBA 0.1 mg/L+蔗糖30.0 g/L+琼脂粉4.0 g/L,继代培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+IBA0.03 mg/L+琼脂粉4.5 g/L+蔗糖30.0 g/L,生根培养基为1/2MS+IBA 0.2 mg/L+活性炭0.2%+白砂糖20.0 g/L+琼脂粉4.0 g/L。苗高5 cm、有5条以上健壮根系时温室炼苗7 d,移栽基质为纯砂草炭土=1 l,移栽成活率高达92.78%。