蓝果忍冬果实发育过程中形态指标及内源激素含量的变化

[目的]探讨蓝果忍冬果实不同发育时期内源激素含量的变化规律,为蓝果忍冬果实生长发育生理机制研究及调控提供参考依据.[方法]采用液相色谱法测定蓓蕾和长白山1号两个蓝果忍冬品种(系)果实发育过程中的玉米素(ZT)、赤霉素(GA3)、生长素(IAA)和脱落酸(ABA)含量.[结果]蓓蕾和长白山1号果实生长曲线均呈不明显双S型.盛花后6d果实内GA3、IAA和ABA含量均处于峰值,此后随着果实的发育逐渐下降;第Ⅱ快速生长期前期和中期果实内GA3、IAA和ZT含量均出现一个小峰值,第Ⅱ快速生长期后期ABA含量出现高峰(蓓蕾为4.88 μg/gFW,长白山1号为3.32μg/gFW).两个品种(系)果实中GA3和IAA与单果重、横径的相关系数绝对值大于0.500.[结论]蓝果忍冬果实发育初期ABA含量出现小高峰可促进落花,且高含量的GA3、IAA和小高峰含量的ABA及第Ⅱ快速生长期前期高含量的GA3、IAA和ZT有利于果实快速生长,采收前高含量的ABA有利于果实成熟,可作为蓝果忍冬生产上应用生长调节剂调控果实生长发育、成熟的理论依据.     

蓝果忍冬果实花青素含量及合成相关基因表达分析

[目的]分析蓝果忍冬果实花青素含量及其合成相关调控基因表达情况,为蓝果忍冬种质的挖掘、利用及花青素的合成调控研究提供参考依据.[方法]利用高效液相色谱检测技术定性定量分析不同蓝果忍冬品种(蓓蕾、HSY-4和日本-5)果实花青素成分及含量,并以实时荧光定量PCR(qRT-PCR)对3个品种不同成熟期花青素合成相关基因及转录因子的表达量进行分析.[结果]在525 nm波长下,从成熟蓝果忍冬果实中检测出8种花青素,含量最高的花青素是矢车菊3-葡萄糖,占总花青素含量的76.61%~86.67%,其中蓓蕾的花青素含量最高,达500.14 mg/100 gFW,日本-5最低,为162.79 mg/100 gFW.半转色期花青素合成相关基因表达量最高,与花青素积累情况相符;PAL、ANS和bHLH基因的表达量随花青素合成积累量增加呈先升高后降低的变化趋势.[结论]蓝果忍冬果实含8种花青素,以矢车菊为苷元的花青素种类最多,其合成相关基因中PAL、ANS和bHLH基因在花青素合成过程中起调控作用.蓓蕾、HSY-4和日本-5的花青素合成相关基因表达情况相似,但品种间存在差异.     

反相高效液相色谱法测定火龙果有机酸

摘 要 采用高效液相色谱法测定火龙果有机酸种类和含量,结果表明,色谱柱：C18（3.9mm×300mm,10um）;流动相0.04mol/L KH2PO4-H3PO4缓冲溶液：甲醇=95：5,pH2.4;流速：0.8mL/min;柱温：30℃;检测波长：214nm的检测条件下,火龙果有机酸得到良好分离。草酸、酒石酸、丙酮酸、乳酸、柠檬酸、琥珀酸、富马酸标准曲线的相关系数达0.99以上,平均回收率在90.2～105.5%,检测限分别为2.0、1.5、0.2、6.0、10.0、5.0和0.02mg/L, 各组分保留时间以及峰面积的CV（n=3）均小于1.0%,其中保留时间的日内重现性CV（n=3）＜0.4%,保留时间的日间精密度CV（n=10）＜0.2%。     

反相高效液相色谱法同时测定枇杷中的某些有机酸

采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定枇杷果实中的有机酸成分和含量,结果表明,在以Waters μBondapakTMC18为色谱柱,使用紫外检测器(波长214 nm),0.04 mol·L-1KH2PO4-H3PO4缓冲液作流动相(pH2.4),流速为0.8 ml·min-1,柱温为30℃的色谱条件下,枇杷有机酸能得到良好分离,其中9种有机酸标准曲线相关系数达0.999 3以上,平均回收率为85%～102%,变异系数RSD＜5.05%.     

高效液相色谱法测定蜂胶液中的6种有机酸

建立了蜂胶中6种有机酸的高效液相色谱测定方法.固定相为Eclipse XDB-C18柱(4.6 mm×150 mm;5 μm),流动相为乙腈-0.4%的冰乙酸溶液(φ=30∶70, pH=2.93), 流速0.8 mL/min, 柱温28 ℃. 检测波长采用设定波长程序的方法, 样品中6种组分的加标回收率在89.35% ～104.5%之间, 绿原酸、 咖啡酸、 香草酸、 阿魏酸、 苯甲酸、 肉桂酸的线性范围分别为0.022～44,0.025～50,0.029～58,0.022～44,0.0414～62.1,0.0444～66.6 μg/mL, 检测限分别为4.55,3.95,8.7,6.29,10.35,3.92 ng/mL, 相对标准偏差小于3%. 该法简便、 快速、 灵敏, 可用于蜂胶中6种有机酸的同时分离测定.     

高效液相色谱法测定蜂胶液中的6种有机酸

建立了蜂胶中6种有机酸的高效液相色谱测定方法．固定相为Eclipse XDB-C18柱（4．6mm×150mm;5um）,流动相为乙腈-0．4％的冰乙酸溶液（φ=30：70,pH=2．93）,流速0．8mL／min,柱温28℃．检测波长采用设定波长程序的方法,样品中6种组分的加标回收率在89．35％～104．5％之间,绿原酸、咖啡酸、香草酸、阿魏酸、苯甲酸、肉桂酸的线性范围分别为0．022～44,0．025～50,0．029～58,0．022～44,0．0414～62．1,0．0444～66．6ug／mL,检测限分别为4．55,3．95,8．7,6．29,10．35,3．92ng／mL,相对标准偏差小于3％．该法简便、快速、灵敏,可用于蜂胶中6种有机酸的同时分离测定．     

高效液相色谱法测定烤烟非挥发性有机酸含量

采用高效液相色谱技术(HPLC)建立了一种同时快速测定烟叶中草酸、苹果酸、乳酸、柠檬酸、琥珀酸等非挥发性有机酸的方法。采用磷酸溶液,80 ℃水浴30 min,提取烟叶样品中的非挥发性有机酸,回收率可达到85.37%以上;采用Ultimate,AQ–C18 反相色谱柱,在215 nm波长下,以0.02 mol/L KH2PO4 溶液(pH3.0)和甲醇作为流动相,可较好地分离和测定初烤烟叶中的非挥发性有机酸含量,相对标准偏差为0.58%~1.99%,最低检出限为0.03~0.80 g/mL。     

高效液相色谱法测定葡萄中有机酸的含量

[目的]建立高效液相色谱法快速测定6种有机酸的方法.[方法]采用Ultimate C<,18>色谱柱(4.6 × 250mm,5 μm),流动相为磷酸盐缓冲溶液(pH2.0),流速0.5 mL/min,检测波长210 nm.[结果]建立了酒石酸、苹果酸、抗坏血酸、乳酸、乙酸、柠檬酸的高效液相色谱分析方法.测得相对标准偏差为1.38;～4.43;,检出限为0.012～2.291 mg/L,有机酸回收率为89.7;～105.8;.[结论]该方法分析速度快,具有较高的重现性及灵敏度,适用于葡萄中有机酸的测定分析.     

不同品种苹果果实中糖酸组成与含量分析

【目的】分析不同品种苹果果实中主要糖、有机酸的种类和含量,为苹果品质评价和品种改良提供依据。【方法】采用高效液相色谱法,分离和测定了12个苹果品种果实中的可溶性糖和有机酸的主要组成及其含量。【结果】苹果果实中的可溶性糖为果糖、蔗糖、葡萄糖、山梨醇,且果糖含量明显高于其他3种糖,秦冠、新红星、富士Ⅰ、富士Ⅱ果实中的4种糖含量高低顺序为果糖>葡萄糖>蔗糖>山梨醇,弘前富士、金冠、华冠、粉红女士、乔纳金、皮诺娃、红玉、澳洲青苹果实中的4种糖含量高低顺序为果糖>蔗糖>葡萄糖>山梨醇。苹果果实中的有机酸有苹果酸、琥珀酸、草酸、柠檬酸、酒石酸和乙酸,其中苹果酸为主要有机酸。甜度/总酸值比较高的是华冠和秦冠(>400),金冠、弘前富士、富士Ⅰ、富士Ⅱ、乔纳金介于200～400,较低的是新红星、澳洲青苹、红玉、皮诺娃和粉红女士(<200)。【结论】弘前富士、富士Ⅰ、富士Ⅱ、秦冠、金冠、乔纳金、新红星、皮诺娃、华冠果实中的主要可溶性糖为果糖,粉红女士、澳洲青苹、红玉中主要为果糖和蔗糖;12个苹果品种果实中的有机酸均主要为苹果酸。甜度/总酸值是影响苹果果实甜酸风味的一个重要因素。     

大豆根际溶磷菌分离鉴定及溶磷过程中有机酸的分泌

【目的】明确吉林省地区大豆Glycine max根际溶磷菌的种类及溶磷特点。【方法】利用溶磷圈法筛选溶磷菌,16S rDNA序列测定和Vitek2生理生化系统对菌株进行分析鉴定。测定菌株生长量、溶磷量、培养基pH变化与有机酸的产生。【结果】从大豆根际土壤中分离获得4株溶磷菌株WJ1、WJ3、WJ5和WJ6。4个菌株分别属于假单胞菌属Pseudomonas sp.、肠杆菌属Enterobacter sp.、苍白杆菌属Ochrobacterum sp.和克雷伯菌属Klebsiella sp.。4株溶磷菌96 h内最大溶磷量分别为558、478、596和586μg·m L-1。甲基红试验和培养物p H测定结果表明:4个菌株在溶磷过程中可使培养物的pH下降,当p H小于4时,会明显阻碍菌株的生长。p H为5时,WJ1和WJ3的生长受到轻微的影响,WJ5和WJ6能正常生长。GC-MS对菌株在溶磷过程中产生的有机化合物的分析表明,4菌株均分泌多种有机酸,其中α-酮戊二酸在WJ1、WJ3和WJ6菌株溶磷过程中大量产生。【结论】4菌株具有较好的溶磷能力,溶磷过程中分泌有机酸种类不完全相同,有机酸的分泌造成培养基的p H降低,影响菌体生长,而菌体数量决定各菌株的溶磷量。     

Establishment and Optimization of SRAP Amplification System in Lonicara caerulea L.

A single factor design was applied to optimize five factors influencing SRAP system, including Taq DNA polymerase, template DNA concentration, dNTPs, primer and Mg2＋, each at four levels. The optimal SRAP-PCR system for Lonicera caerulea L. was 20 ktL SRAP-PCR amplification reaction solution containing 2.0 μL 10×PCR buffer, 1.0 U Taq DNA polymerase, 30 ng template DNA, 0.2 mmol·L-1 dNTPs, 2.0 mmol·L-1 Mg2＋ and 0.2μmol·L-1 primer. The suitable amplification procedure consisted of an initial denaturation at 94℃ for 5 min; denaturation at 94℃ for 1 min, annealing at 35℃ for 1 rain, extension at 72℃ for 90 s and in total five cycles; denaturation at 94℃ for 1 min, annealing at 50℃ for 1 min, extension at 72℃ for 90 s and in total 35 cycles; extension at 72℃ for 8 rain; preservation at 4℃. The procedures and systems could meet the demand for SRAP amplification of Lonicera caerulea L. and would play an important role in Lonicera caerulea L. germplasm identification and genetic diversity analysis.     

2种忍冬果实挥发性物质组成1）

采用顶空固相微萃取（ HS－SPME）技术提取挥发性物质,用气相色谱－质谱联用法分析了金银忍冬（ Loniecr a ma ckii Maxim）和蓝靛果忍冬（ Lonicera caerulea L．）果实挥发性化学成分。结果表明,在2种果实中共鉴定出32种成分。其中在金银忍冬果实中分析出16种成分,包括3种烷烃类、1种酯类、4种醇类、5种醛类、2种酮类和1种萜烯类物质;从蓝靛果忍冬果实中鉴定出18种成分,包括4种醇类、11种酯类、1种醛类、1种酮类和1种酸类物质。2种忍冬果实中的酮类和烷烃类物质质量分数相对较少。     

高效液相色谱-二极管阵列检测器法测定水蜜桃中水溶性有机酸和维生素的含量

采用高效液相色谱-二极管阵列检测器法(HPLC-DAD) 同时检测水蜜桃中水溶性有机酸和维生素含量.样品经纯水超声波提取、离心和膜过滤,ZORBAX SB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm) 液相色谱柱分离,以0.5 mmol·L-1磷酸-乙腈梯度洗脱,流速0.8 mL·min-1;二极管阵列检测器(DAD) 同时以210 nm波长检测苹果酸、柠檬酸、琥珀酸,254 nm波长检测烟酸、维生素C、维生素B1,270 nm波长检测维生索B2.结果显示:待测成分在8 min内达到良好的基线分离,线性范围广,苹果酸、柠檬酸、琥珀酸的检出限为0.5μg·mL-1,烟酸、维生素C、维生素B.的检出限为0.1μg·mL-1,维牛素B2的检出限为0.05 μg·mL-1.方法的加标同收率为97.0%～102.3%,线性相关系数为0.999 3～0.999 9,精确度平均偏差0.33%～1.97%.该方法适用于水蜜桃样品中多种水溶性有机酸和维生素的同时测定.     

植物组织中有机酸的提取方法比较

以番茄果实和不结球白菜叶片为试验材料,用蒸馏水（水提）、80％乙醇-旋转蒸发浓缩（醇提）、蒸馏水-冷冻干燥浓缩（水提冻干）分别提取有机酸,采用高效液相色谱法测定。结果表明：3种提取方法下番茄果实中富马酸、丁二酸含量无显著性差异,草酸、酒石酸、苹果酸、草酰乙酸含量均以水提最高,而丙酮酸和柠檬酸以醇提含量最高;不同提取方法对不结球白菜叶片中草酸、酒石酸、富马酸含量无影响,其他几种有机酸（除草酰乙酸外）均以水提和水提冻干含量高于醇提,其中,水提法和水提冻干法提取丙酮酸、苹果酸、丁二酸的含量无显著差异,而柠檬酸含量以水提冻干法最高。综合考虑试验步骤和结果等各方面因素发现,蒸馏水直接提取法既能有效保证有机酸的提取量,又能大大简化试验步骤。     

小分子有机酸对香料烟生理生化特性及化学成分的影响

2009年在浙江新昌采用大田试验研究了苹果酸、丙二酸和柠檬酸对香料烟生理生化特性及化学成分的影响,结果表明,在烟株生长前期,3种有机酸能够促进烟叶的生长发育,提高转化酶、蔗糖合成酶、蔗糖磷酸合成酶和谷氨酰胺合成酶活性,协调烟叶的碳氮代谢;生长后期能够及时有效地促进叶绿素的降解,促进烟叶适时落黄成熟。同时不同程度地提高烟叶中总糖和钾含量,降低总氮、烟碱、氯离子含量,从而协调和平衡烟叶中的化学成分,改善烟叶品质。其中,以丙二酸和苹果酸的效果较好。     

碱胁迫诱导小冰麦有机酸积累和分泌的研究

【目的】探讨碱胁迫对小冰麦有机酸积累和分泌的影响。【方法】将2种中性盐(NaCl和Na2SO4)和2种碱性盐(NaHCO3和Na2CO3)均按物质的量比1∶1混合,模拟出相同强度的盐、碱胁迫条件,并以其对小冰麦33的幼苗进行胁迫处理,计算日相对生长率,测定盐、碱胁迫下小冰麦幼苗茎叶中有机酸和无机离子的含量,分析根外pH及根分泌物中有机酸含量的变化。【结果】碱胁迫对小冰麦生长的抑制作用明显大于盐胁迫。碱胁迫引起小冰麦幼苗茎叶中Na+含量急剧增加,NO3-、SO42-、H2PO4-含量明显降低,引起负电荷匮缺和离子不平衡。对照和盐胁迫处理小冰麦幼苗茎叶和根中有机酸均不积累,而碱胁迫可诱导有机酸急剧增加。小冰麦根系能够迅速降低碱胁迫下根外的pH。对照和盐胁迫下小冰麦分泌有机酸很少,而碱胁迫能明显刺激小冰麦根分泌有机酸。【结论】小冰麦可能通过积累有机酸来弥补负电荷不足,以保持细胞内pH稳定。分泌有机酸可能是小冰麦根外pH调节的重要途径。     

杨梅果实有机酸成分及含量动态变化

以黑晶、东魁和温岭大梅3个杨梅品种为材料,对杨梅果实发育过程中有机酸成分及其含量变化进行了测定。结果确定了杨梅果实中的3种有机酸成分,分别为柠檬酸、苹果酸和奎宁酸。在果实发育过程中,柠檬酸始终为最主要的有机酸成分。随着果实成熟,3种有机酸含量均呈下降趋势。成熟果实中,黑晶、温岭大梅和东魁3个品种的柠檬酸含量分别为（7.423±0.530）,（8.987±0.088 ）和（7.820±0.306）mg·g-1 FW;苹果酸的含量分别为（0.113±0.002）,（0.062±0.001）和（0.037±0.008） mg·g-1 FW;奎宁酸的含量分别为（1.122±0.098）,（0.952±0.042）和（0.738±0.056）mg·g-1 FW。分析表明杨梅果实属于柠檬酸型果品。