绵羊痘病毒和山羊痘病毒通用RPA检测方法的特异性试验

应用我们建立的绵羊痘病毒和山羊痘病毒通用RPA检测方法,通过对口蹄疫病毒、传染性脓疱皮炎病毒、鸡痘病毒、绵羊痘病毒、羊痘疫苗和羊痘重组质粒样本的检测,验证绵羊痘病毒和山羊痘病毒通用RPA检测方法对绵羊痘/山羊痘病毒检测的特异性。结果显示该方法对羊痘疫苗、羊痘重组质粒、绵羊痘病毒核酸和山羊痘病毒核酸阳性样品能够在试纸条上显示出阳性条带,而对其他样品不显示阳性条带。表明该方法具有良好的特异性,在绵羊痘/山羊痘病毒检测中应用前景广阔。     

山羊痘和绵羊痘研究进展

山羊痘和绵羊痘统称羊痘,是分别由山羊瘟病毒和绵羊痘病毒感染引起的山羊与绵羊的病毒性传染病,皆为世界动物卫生组织(OIE)法定报告的动物疫病.羊痘主要流行于亚洲和非洲,在我国青海、甘肃、湖南、内蒙等地区也有该病流行.建立敏感特异的检测方法和研制特效预防性疫苗将为该病的防控奠定良好的基础.论文将从羊痘流行病学、诊断技术和疫...     

一起绵羊痘的诊治

2007年3月,固原地区某养羊户饲养的绵羊发生羊痘疫情,发病率22.8%,病死率17.8%.发病初期被饲养户误诊为湿疹,曾用醋酸铅液和氧化锌软膏对患处涂抹,对病重的羊用抗生素进行治疗,效果不明显.笔者对此次疫病进行了流行病学调查、临床症状和病理变化观察、实验室诊断.根据羊体皮肤、黏膜上发生的典型痘疹和实验室诊断结果确诊为绵羊痘.采用对症治疗和羊痘弱毒疫苗接种,使病情迅速得到了控制.     

山羊痘病变的超微病理学研究

对发生在贵州省的山羊痘病变进行了透射电镜观察。在感染的皮肤和肺上皮细胞的胞浆内发现有大量不同成熟阶段的典型的山羊痘病毒颗粒。病毒颗粒也可见于巨噬细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞的胞浆内，甚至少量在血管腔内。受感染的细胞除可见胞浆内散在的病毒颗粒或形成病毒包涵体外，通常可见细胞水肿，线粒体肿胀，内质网和高尔基复合体扩张。一个有趣但十分重要的发现是，有髓神经纤维也被病毒和被感染的巨噬细胞所波及，并可见节段性脱髓鞘以及轴索和雪旺氏细胞的变性。在山羊痘痘疹材料感染鸡胚绒毛尿囊膜痘斑的上皮细胞和成纤维细胞中也可见成熟和不成熟的病毒颗粒。     

羊痘的研究进展

羊痘是危害养羊业健康发展的一种烈性传染病,各国学者对该病的诊断与防治进行了广泛研究。作者从羊痘的病原学特征、流行病学特征、诊断方法、防治等方面进行了综述。     

绵羊痘的诊断

绵羊痘是由绵羊痘病毒引起绵羊的疾病,其特征为发热、全身皮肤痘疹,内脏(特别是肺脏)黏膜结节,是危害养羊业最为严重的传染病之一。该病经常引起绵羊的大批感染或死亡,病死率可达50%以上,羔羊可达100%,不仅给养羊业带来巨大的经济损失,还严重阻碍了养羊业的发展。文章针对2011年1月份新疆某地区部分养羊户饲养的卡拉库尔羊发生的羊痘疫情进行了流行病学调查、临床症状、病理变化观察和实验室诊断,结果确诊为绵羊痘。     

山羊痘的流行及防治措施

山羊痘是由山羊痘病毒属的痘病毒引起的羊的一种急性、热性、接触性传染病。文章从山羊痘流行病学、症状、诊断和防治措施等方面对山羊痘进行综述。     

小尾寒羊绵羊痘病例的诊断

旨在对甘肃某羊场小尾寒羊疑似绵羊痘进行确诊,并深入探讨其病理变化特点。对临诊疑似患绵羊痘的小尾寒羊进行了羊痘间接ELISA抗体检测和PCR检测确诊,并对6只病羊进行病理剖检、病理组织学和超微结构研究。结果如下：羊痘间接ELISA抗体检测显示6例病羊样品均为阳性;同时,对2例病羊样品进行PCR检测,均扩增出绵羊痘病毒（SPV）585 bp的目的基因片段,表明本次小尾寒羊所患疫病为绵羊痘。病理剖检显示,病羊皮肤无毛或少毛处充血,局部有红斑和坏死,尾部常有感染化脓形成溃疡;消化道黏膜,尤其舌和瘤胃黏膜有大小不等痘疹与坏死病灶,局部甚至形成糜烂或溃疡。肺膈叶以及肝、脾等常有痘疹和坏死病灶。病理组织学观察显示,肺痘疹病灶主要呈现渗出-增生结节和坏死-增生结节变化,病灶内血管、细支气管等周围常有大量绵羊痘细胞,胞质内有嗜酸性包涵体;病变消化道黏膜局部,上皮细胞程度不等增生、水泡变性,固有层及黏膜下层充血、水肿,有大量绵羊痘细胞,其细胞质内包涵体明显。肝、脾、肾也有程度不等坏死-增生结节变化。肺超微结构观察显示,肺泡上皮细胞肿大,细胞核浓缩、染色质聚集,线粒体程度不等肿胀、嵴断裂、空泡化,可见细胞质内包涵体。研究证明,除局部皮肤病变外,消化道黏膜和肺等实质器官的痘疹病变是患绵羊痘小尾寒羊具代表性的病理变化,尤其痘疹病灶中大量绵羊痘细胞的出现具有证病性意义。     

山羊痘病毒NM株的分离鉴定

从内蒙古牛场疑似山羊痘病毒感染的病羊中分离到1株病毒,命名为NM株。取病羊的皮肤痘疹和水疱作病料样品,分别接种BHK-21传代细胞和10日龄SPF鸡胚。结果表明,BHK-21细胞出现了明显的、规律的细胞病变,鸡胚接种部位出现了明显的痘斑;NM株细胞毒和胚毒均能够被山羊痘病毒阳性血清所抑制。利用1对山羊痘病毒特异性检测引物对NM株病毒进行PCR扩增,获得445 bp片段,与预期大小一致。将扩增产物提纯后克隆至pMD18-T载体,经酶切鉴定正确后,对阳性克隆株进行序列测定,结果表明,NM株的基因片段与已发表的山羊痘病毒毒株的相应基因片段具有高度同源性,同源性在99.2%~100%之间。     

Effect on Proliferation of Goat Pox Virus of TK Gene Deficiency

In this study, the proliferation of goat pox virus (GPV) was researched using the recombinant GPV of TK gene insertion inactivation. Different length DNA fragments X1, X2, X3 and X4 were inserted into the transfer plasmid pTKfpgigp to constructed the recombinant transfer plasmids and these plasmids were transfected into lamb testis cells infected GPV. Recombinant GPVs of TK gene inactivation by inserting foreign DNA fragment of 2 800, 4 000, 5 200 and 7 700 bp,respectively, were generated via homologous recombination. Four recombinant GPVs (rGPV/tk^-) were obtained by selective culture and the virus titer were mensurated by 50% tissue culture infective dose. The results showed that the rGPV/tk^- virus titers were decreased obviosuly which was comparable with the wild type GPV AV41. Furthermore, the virus titer of the recombinant virus was decreased more obviously with the extension of the foreign DNA fragment. The result indicated that the proliferation of the GPV was depressed when GPV TK gene was deficient.     

山羊痘病毒TK基因功能缺失对其增殖的影响

为了研究山羊痘病毒TK基因功能缺失对其增殖的影响,同源重组构建TK基因缺失型重组山羊痘病毒,检测其增殖特性。试验在通用转移质粒pTKfpgigp内插入不同长度的X1~X4片段,构建了4个重组转移质粒;重组质粒转染已感染山羊痘病毒的羔羊睾丸细胞,经同源重组产生4株TK基因缺失型重组山羊痘病毒rGPV/tk^－,其TK基因内分别插入了长度约为2 800、4 000、5 200、7 700 bp的外源DNA片段;筛选纯化重组毒株,测定rGPV/tk^－病毒滴度。结果显示,TK基因失活后,rGPV/tk^－病毒滴度明显降低;随着插入DNA片段的延长,重组毒株的病毒滴度下降程度更加明显。研究表明,TK基因功能的缺失对山羊痘病毒的增殖具有一定的抑制作用,并与外源DNA的长度具有相关性。     

贵州省首次暴发山羊痘的诊断研究

山羊痘于 2 0 0 2年 1 0月在贵州省首次流行并被确诊。本次疫病以皮肤、呼吸道及消化道粘膜发生痘疹为主要特征 ;取病料经绒毛尿囊膜接种鸡胚传代 ,F2 绒毛尿囊膜明显增厚 ,在接种部位形成明显的痘斑。经病理组织学检查 ,患病皮肤在光学显微镜下可见细胞浆内出现嗜酸性包涵体。电子显微镜观察到典型的痘病毒粒子 ,细菌学检查阴性。为此 ,这次暴发流行的疫病确诊为山羊痘     

北方绒毛用羊养殖场的规划与建设

 在当今科学技术迅速发展的经济社会,规模化养殖场在我国也越来越多,在养殖场的建设过程中,如何根据地理、气候等条件,将各功能区合理的布置对养殖场的发展及羊只的生长繁殖来说至关重要。论文将对北方寒冷地区的绒毛用羊养殖场的建设进行分析和探讨,并将对养殖场的实际建设提供建议。     

河北省平原农区肉羊规模舍饲的前景分析

本文指出了当前河北省平原农区肉羊产业的发展面临瓶颈局面，理性分析了造成这一尴尬局面的原因，并提出了发展河北省平原农区肉羊规模舍饲是打破这一瓶颈局面的突破口。     

中国绵、山羊的遗传资源保护及对策

作者论述了中国绵、山羊的品种资源现状、遗传资源保护方法及存在问题,并针对绵、山羊的遗传资源保护问题提出几点建议。     

绵羊、山羊内源肺腺瘤病毒启动子甲基化修饰检测

为分析绵羊和山羊内源性肺腺瘤病毒启动子甲基化修饰状况,参照绵羊、山羊内源性肺腺病毒gag基因上游非编码区序列CpG岛设计特异性甲基化引物,采用甲基化特异性PCR（MSP）方法检测了5只绵羊和5只山羊胎儿的肺脏、皮肤、血液基因组内源性病毒基因启动子区甲基化情况.结果表明：山羊和绵羊肺脏、皮肤、血液基因组中均存在甲基化和非甲基化的内源性肺腺瘤病毒启动子.     

我国绵、山羊育种工作的回顾与思考

文章简要回顾了我国现代绵、山羊的育种历史与现状,探讨了现代生物技术在绵、山羊育种中的具体应用情况,并对目前绵、山羊育种工作存在的几个问题进行思考,对构建我国绵、山羊育种技术体系,提高育种效率和技术水平,实现优质高效绵、山羊育种关键技术的突破具有重要意义。     

中原地区肉羊生产系统的特征分析

 依据产区的生态地理特征,将河南省的地方绵山羊品种划分为不同的生态型,比较了平原型与丘陵型绵羊、平原型与山地型山羊的种质特征;论述了中原地区肉羊生产系统的结构功能特征,阐明了其进化发展过程;指出了中原地区肉羊生产系统的地位和需要探讨的问题。     

微卫星DNA及其在羊品种资源评价和保护中的应用

本文论述了目前我国及国外绵山羊品种资源现状，微卫星DNA形成特性以及国内外关于利用微卫星DNA研究绵山羊品种资源的进展，以期更好地推动我国绵山羊品种资源系统评价和保护的研究。     

肉碱棕榈酰转移酶基因在绵羊和山羊不同肌肉组织中的表达分析

采用实时荧光定量PCR方法比较分析了肉碱棕榈酰转移酶(carnitine palmitoyl transferase,CPT)基因在绵羊和山羊不同组织中的表达差异。研究结果表明,CPT1A mRNA在绵羊肝脏、脾脏中表达明显高于CPT1B、CPT2,CPT1B mRNA在绵羊腹外斜肌中的表达明显高于CPT1A、CPT2。CPT1A mRNA在山羊脾脏中表达明显高于CPT1B、CPT2 mRNA在山羊脾脏中的表达,CPT1B mRNA在山羊后腿股二头肌、腹外斜肌中的表达明显高于CPT1A、CPT2 mRNA在山羊后腿股二头肌中的表达。CPT1A mRNA在绵羊肝脏中的表达显著高于山羊中CPT1A mRNA的表达(P＜0.05)。CPT1A、CPT1B、CPT2基因在绵羊心脏、脾脏、腰大肌中的表达显著高于在山羊中的表达(P＜0.05),CPT1A、CPT1B、CPT2基因在山羊后腿股二头肌中的表达显著高于在绵羊中的表达(P＜0.05)。CPT1A、CPT1B、CPT2基因在绵羊、山羊各组织中的表达存在差异,可能与各基因表达模式、肌肉组织纤维类型、脂肪沉积含量不同等因素有关。