我国部分地区蛋鸡群ALV-J及与REV、MDV、CAV混合感染检测

为了解J亚群禽白血病病毒(ALV-J)及其与禽网状内皮细胞增生症病毒(REV)、马立克氏病病毒(MDV)和鸡传染性贫血病病毒(CAV)的混合感染现象,本研究从宁夏、湖北、广东、山东、辽宁、吉林、黑龙江7个省的39个蛋鸡群收集临床表现和剖检病理变化疑似禽白血病的病料样品184份,采用PCR、病毒分离和IFA检测样品中ALV-J、REV、MDV和CAV。结果表明,7个省蛋鸡场均存在ALV-J感染,病料样品阳性率为60.9%,检测鸡群阳性率为82.1%,与REV、MDV、CAV的混合感染率分别为13.6%、24.5%、22.8%,其中存在较为严重的双重感染(29.0%)和3重感染(18.8%),甚至4重感染(1.7%)。研究结果表明,我国蛋鸡群中普遍存在ALV-J感染,而且与REV、MDV、CAV混合感染严重;提示ALV-J已经可以引起蛋鸡群发病,在临床诊断和致病性研究中,应考虑到多重感染的影响。     

肉种鸡肿瘤病料中MDV、REV和CAV共感染的检测

从山东省东营、日照、潍坊、聊城等地区肉种鸡群采集102份有肿瘤病变的病、死鸡肝脏样品,用特异性核酸探针对样品进行马立克氏病病毒(Mareks disease virus,MDV)、网状内皮组织增生症病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)、鸡传染性贫血病病毒(chicken anemia virus,CAV)检测.结果显示,MDV、REV、CAV的检出率分别为88.24%、79.41%、47.06%,且存在严重的共感染现象,三重感染检出率达30.39%;二重感染检出率为59.80%,以MDV和REV共感染检出率最高,为44.12%;单一感染和阴性个体仅占3.92%和1.96%.结果表明,多种免疫抑制性病毒的共感染已普遍存在,是目前肿瘤性疾病发病率日趋上升的重要流行病学因素之一.     

山东省白羽肉鸡中MDV、REV、CAV和ARV感染状况的病原学调查

为了解鸡马立克氏病病毒(MDV)、鸡传染性贫血病毒(CAV)、禽网状内皮增生病病毒(REV)和禽呼肠孤病毒(ARV)在山东省白羽肉用型鸡中的流行情况,试验采用地高辛标记的核酸探针-斑点杂交法对淘汰的商品肉鸡、病死商品肉鸡及淘汰肉种鸡进行了上述4种病毒病原的检测。结果表明:ARV主要以单一形式感染,在病死商品肉鸡中感染率最高(30.07%),在3种类型鸡中ARV感染率高于MDV,REV,CAV。MDV在淘汰肉种鸡中感染率(12.82%)高于其他2种鸡群,而REV,CAV,ARV感染率在病死商品肉鸡中最高。混合感染亦相当普遍,以淘汰肉种鸡最高(混合感染率达10.25%),高于任一病毒单独感染率,其次为病死商品肉鸡。     

用斑点杂交法同时检测鸡群中的CAV MDV和REV

为研究鸡传染性贫血病毒(CAV)在鸡群中的感染状况以及马立克氏病病毒(MDV)和网状内皮细胞增生病病毒(REV)在鸡群中的发病率，用斑点杂交法对山东省4个肉鸡场和2个肉种鸡场进行CAV、MDV和REV的检测，结果表明除一个肉种鸡场没有检测出REV以外，其他鸡场均同时检测出CAV、MDV和REV，并且发现直接从病科中检测CAV的阳性率(20％)远远低于将病科接种SPF鸡胚后的检出率(80％)。     

商品代肉鸡群中禽网状内皮组织增生病病毒和马立克氏病病毒的混合感染

山东兖州某商品代肉鸡场的 2 0日龄肉鸡开始出现大批死亡 ,剖检发现肝脏、脾脏、肾脏和心脏等主要脏器均出现大小不等的肿瘤结节 ,采用细胞培养和间接荧光抗体试验的方法从这些病料中同时分离到了禽网状内皮组织增生病病毒 (REV)和马立克氏病病毒 (MDV) ,通过组织病理学检查和斑点杂交的方法表明该鸡场的疫病为REV和MDV共感染引起的肿瘤病。这是国内从商品代肉鸡中同时分离到REV和MDV的首次报道     

商品肉鸡群中MDV、REV、CAV和ARV多重感染的检测

从山东省东营、日照、潍坊、聊城等地区自然发病和临床健康AA商品肉鸡群中分别采集脏器样品,用特异性核酸探针对样品进行马立克氏病病毒（Marek’s disease virus,MDV）、网状内皮组织增生症病毒（Reticuloendotheliosis virus,REV）、鸡传染性贫血病病毒（Chicken anemia virus,CAV）和禽呼肠孤病毒（Avian reoviruses,ARV）检测。结果显示,自然发病AA商品肉鸡群中MDV、REV、CAV和ARV的检出率均较高,分别为69．30％、57．46％、63．60％和67．11％;临床健康AA商品肉鸡群中MDV、REV、CAV的检出率分别为36．96％、43．48％和30．42％,且自然发病和健康鸡群中均存在不同病毒组合的多重感染,感染率分别为85．96％和43．46％。用x2检验进行分析发现,自然发病商品肉鸡群与临床健康商品肉鸡群中MDV、CAV、MDV＋REV、REV＋CAV的检出率和未检出的比例差异极显著（P〈0．01）;REV、MDV＋CAV检出率差异显著（P〈0．05）。对自然发病商品肉鸡的肝脏、脾脏、法氏囊中4种病毒检出率进行X2检验分析发现,MDV在脾脏中检出率显著高于肝脏和法氏囊;REV在法氏囊中检出率显著高于肝脏和脾脏,而CAV和ARV分别在脾脏和肝脏中检出率较高。结果表明,多种免疫抑制性病毒的共感染已普遍存在,是目前AA商品肉鸡易发病且生长缓慢的重要流行病学因素之一。     

贵州土鸡中ALV-J、REV和MDV的混合感染

<正>禽白血病、网状内皮组织增生症和马立克病是禽类最为常见的3种肿瘤病,可导致家禽出现严重的免疫抑制,继发感染其他疾病,对养禽业危害巨大。出现混合感染时,疾病的致病力和致肿瘤能力都远大于单一感染,导致的免疫抑制也更为严重。禽白血病由禽C型反转录病毒科的禽白血病病毒(ALV)引起,根据病毒囊膜糖蛋白gp85抗原性的差异,ALV可分为A～J 10个亚群,J亚型禽白血病病毒(ALV-J)是最近较为流行的外源性病毒,可引起鸡的骨髓细胞瘤。禽网状内皮组     

鸡感染REV和ALV-J后血清指标动态变化的研究

研究禽网状内皮组织增生症病毒(REV)、禽J亚群白血病病毒(ALV-J)感染及混合感染引起血清指标动态变化与鸡群体重抑制的关系.3组1日龄哈伯德父母代肉种鸡,分别接种REV、LV-J和REV与ALV-J.定期称量体重,采外周静脉血,通过生化自动分析仪检测鸡血清中总蛋白(TP)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)、甘油三酯(TG)、胆固醇(CHO)的动态变化.结果表明,前7周,血清学指标TP、TG、LDL-c浓度变化与生长抑制的变化呈现相关性,随体重的增加,TP、TG、LDL-c浓度有上升的趋势,HDL-c、CHO浓度变化与体重的变化无相关性.因此,检测7周内的血清TP、TG、LDL-c浓度的动态变化与鸡群体重抑制的关系可作为这两种肿瘤性疾病早期诊断的依据.     

REV感染肉种鸡后动态病理学观察与抗原分布及检测

用网状内皮组织增生病病毒(REV)人工接种1日龄肉种鸡,定期剖杀,通过病理组织学观察病变特征及肿瘤的发生发展;用免疫组化、PCR检测抗原与病毒在体内各器官的分布规律;超薄切片观察肿瘸细胞、病毒的形态.结果显示,肝脏、脾脏、胸腺、法氏囊较早出现明显的肿瘤增生灶,在这些器官内免疫组化阳性信号出现最早,且信号最强,在5周龄时,心肌、腺胃、肺、肾、骨髓等器官才开始出现阳性信号,但呈中度的阳性反应,9周龄后阳性信号开始减弱.肝脏、脾脏、胸腺、法氏囊、骨髓扩增出REV的LTR基因片段,超薄切片显示病毒多分布在胞浆内和细胞间隙内.研究发现病变明显的组织中,阳性反应较强,肿瘤细胞增生明显,即强阳性反应的组织器官易形成肿瘤转移灶及肿瘤结节,同时,抗原最早出现在这些器官说明其中可能存在REV的靶细胞.虽然阳性信号在腺胃出现较晚,但90%以上的腺胃肿大说明腺胃也是REV的主要侵害器官.     

鸡源REV对HBK-SPF雏鸭的感染试验

为研究鸡源网状内皮组织增殖病病毒(REV)对HBK无特定病原体(SPF)鸭的致病性,利用鸡源REV现地分离株REV-HN,分别接种鸭胚成纤维细胞(DEF)、鸭胚(尿囊腔和卵黄囊腔接种)和雏鸭(口腔接种),试验设空白对照组,雏鸭还设有同居感染组.接种REV后不同时间收获DEF和胚体,及雏鸭的外周血淋巴细胞(PBL)和免疫器官,提取基因组DNA,通过RT-PCR和PCR方法检测REV前病毒env基因.结果在DEF中未检测到特异性的env基因片段,而在卵黄囊接种后72 h鸭胚胚体和试验感染的雏鸭PBL中检测到.接种后30 d,在1羽感染REV的雏鸭肾、胸腺和法氏囊中检测到REV前病毒.本研究为利用SPF鸭研究REV提供了依据.     

地方柴鸡中J亚群禽白血病与马立克氏病的混合感染

2008年9月,山东省菏泽市某柴鸡养殖专业户6 000只鸡80日龄时开始发病,至120日龄时死亡率高达15%.病鸡颜面苍白,机体进行性消瘦,瘫痪,最后衰竭死亡.部分鸡只可见单侧肢体麻痹症状和皮肤型肿瘤.对66份采自发病鸡群的血清及新生羽毛囊进行血清学检测.琼脂扩散试验结果显示所采的66份待检羽髓抗原MDV阳性率为59.09%,血清中MDV抗体阳性率为65.16%,抗原、抗体双阳性率为37.88%.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测鸡血清中ALV-J、REV抗体,结果显示ALV-J抗体阳性率为7.58%,REV抗体检测会部呈阴性.剖检病鸡可见内脏器官普遍肿大,肝、脾、肾表面及切面有大小不等的灰白色肿瘤样结节.病理组织学观察肿大的器官和组织内都有不同程度的淋巴细胞增生,并可在肝、脾、肾、腺胃等组织内同时观察到淋巴细胞样瘤细胞和髓样瘤细胞2种典型的肿瘤灶.免疫组织化学检测结果表明,发病鸡组织内同时存在MDV和ALV-J抗原的阳性信号.PCR检测结果显示6只来检病鸡MDV和ALV-J均呈阳性,都扩增出相应的条带,REV未扩增出任何条带,PCR呈阴性.以上结果表明地方柴鸡鸡群中存在MDV和ALV-J的共感染,提醒我们应当注意地方柴鸡肿瘤性疾病的预防和净化工作.     

一例肉种鸡MDV和REV混合感染的诊断

近两年来一些肉种鸡养鸡户反映免疫过鸡马立克疫苗的鸡群仍发生肿瘤,且这种情况较往年大幅增多,病鸡因肿瘤细胞扩散至全身而迅速死亡,造成鸡群死淘率明显偏高,生产性能下降,给养殖户带来较大的经济损失.……     

免疫鸡群发生新城疫的诊断

为了对某新城疫免疫鸡群发生的疫病进行准确诊断,根据流行病学调查、临床症状、病理变化和抗体监测作出初步诊断后,采集病料通过细菌学和RT-PCR进行病原检测,确诊为新城疫强毒感染。     

网状内皮组织增殖病病毒与马立克氏病病毒快速鉴别诊断

鸡群易发生网状内皮组织增殖病(RE)、马立克氏病(MD)、淋巴白血病(AL)等多种病毒的混合感染,金文杰等人[1]从66份疑似IBDV感染鸡的法氏囊的检查中,发现了免疫抑制性病毒二重和多重感染的普遍性.     

传染性法氏囊病病料中MDV、CAV、REV的共感染检测

从江苏、山东、浙江、河南、上海、广西、云南等地收集根据临床表现及病理变化诊断为传染性法氏囊病（IBD）的病鸡法氏囊样品66份，用相应的核酸探针及斑点杂交法分别检测样品中鸡传染性贫血病病毒（CAV）、马立克氏病病毒（MDV）、网状内皮细胞增生病病毒（REV）的感染；用抗IBD血清做琼扩检测IBDV。结果显示，部分地区病料中这些病毒有不同程度的二重感染、三重感染甚至四重感染。提示在研究特定毒株IBDV的毒力时，应考虑多重感染对致病性的影响。     

一例鸡传染性法氏囊病和大肠杆菌病混合感染的诊治与体会

通过对某养鸡户发病三黄雏鸡现场调查、病(死)鸡临床表现和剖检病变,以及实验室检验的结果,确诊为鸡传染性法氏囊病和大肠杆菌病混合感染症。通过采取一系列治疗措施,疫情得到有效控制。     

禽网状内皮组织增生病病毒感染性引起的鸡群免疫抑制

1999年8月，江苏省泰安州市某AA肉用型鸡父母代种鸡群呈现生长缓慢，鸡新城疫疫苗免疫注射后HI效价不高及多发性腹膜炎，心包炎等免疫抑制性症状，55日龄时，随机从4只患鸡采集血浆样品接种鸡胚成纤维细胞，7d后在间接荧光抗体反应中均对网状内皮增生病病毒（REV）的单克隆抗体11A25呈强阳性反应，结果表明，该鸡各的免疫抑制状态主要由REV的早期感染及其持续发现毒血症所引起。     

商品肉鸡群MDV和REV混合感染所致肿瘤的检测

马立克氏病病毒(Marek's disease virus,MDV)和禽网状内皮组织增生病病毒(Redculoendothelio-sis virus,REV)是引起禽类肿瘤病的两种重要的病原[1,2],这两种病毒感染不仅能引起肿瘤,还可以引起感染鸡胸腺、法氏囊等免疫器官萎缩,导致感染鸡产生免疫抑制,致使机体免疫应答降低和对其它疾病的易感性增高,是导致当前养禽业生产性能下降的重要因素之一[3].     

传染性腺胃炎发病鸡中MDV REV CAV共感染的检测

近年来我国出现了一种临床上以病死鸡消瘦或高度消瘦、腺胃高度肿胀为特征的传染病 ,给养禽业生产带来了巨大损失。荷兰学者 Kouwenhoven B等将临床有如此特征表现的流行病暂称为传染性腺胃炎 (infectious proventriculitis,IP) [1] ,目前这一命名逐渐地为我国学者所接受 ,但对引起该病的病因却众说不一 [2～ 8]。利用核酸探针技术我们对临床有上述特征发病表现的自然发病鸡群采集的病料进行了马立克氏病病毒 (MDV)、网状内皮细胞增生病病毒(REV)、鸡传染性贫血病病毒 (CAV)感染的检测 ,以助于探明该病的病因。1　材料与方法1.1　病料的收集与处理　从山东、河南、北京等地10个不同鸡场收集临床有发病表现的 6 6只病、死鸡的肝脏、脾脏、心脏、肾脏、胸腺、腺胃、法氏囊或羽毛囊等。按常规方法提取各组织的基因组 DNA,同时提取 SPF鸡 (由山东济南斯帕法斯 SPF鸡场提供 )的组织 DNA作阴性对照。1.2　用斑点杂交法对 MDV、CAV、REV进行检测1.2 .1　 DNA含量的测定　取一定量板 (1%琼脂糖凝胶 适量溴化乙锭 ) ,用 DL2 0 0 0 Marker...