125I-标记栓块溶解测定方法的建立与32种活血化瘀中草药溶栓活性的测定

目的：建立适用于大批量促纤溶活性样品分析筛选的,简捷、客观、可靠的实验方法,并测定32种常用活血化瘀中草药的溶检活性。方法：采用乳过氧化物酶法将^125I-放射性同位素碘标记到纤维蛋白原上,以此作为探针加入到无血小板血浆或优球蛋白溶液中,加入凝血酶刺激使之形成栓块,经37℃温育一段时间后,离心沉淀未能溶解的纤维蛋白块,取一定容积的上清液测定其中的放射性强度从而对栓块的自发纡溶进行定量分析。结果：(1)^125I-标记血浆和^125I-标记优球蛋白液所形成栓块的溶解时效曲线均具有酶促反应的倒“S”形特征,但前者溶解一半所需时间约为3．5d,后者约为3．5h。(2)32种活血化瘀中草药分析观察结果显示：赤芍、红花等8种中草药具有一定的促纤溶活性。结论：^125I-标记血浆和^125I-标记优球蛋白液栓块溶解法具有简捷、客观、可靠等优点。前者测定的活性范围较大,重复性较高;而后者则更为快速、灵敏。部份活血化瘀中草药具有明显的促纤溶活性,进一步筛选分离出其中的有效成份具有重要的理论意义和应用前景。     

电取蜂毒对意大利蜜蜂寿命的影响

３、６、９、１２、１５、１８、２１、２４、２７、３０日龄意蜂工蜂取毒后，其寿命均显著（Ｐ＜０．０５）或极显著（Ｐ＜０．０１）缩短。３－３０日龄取毒工蜂总体寿命缩短９．４７％，差异极显著（Ｐ＜０．０１）。因此，利用意蜂生产蜂毒，应考虑工蜂寿命缩短问题。     

电取蜂毒对意大利蜜蜂寿命的影响

３、６、９、１２、１５、１８、２１、２４、２７、３０日龄意蜂工蜂取毒后，其寿命均显著（Ｐ＜０．０５）或极显著（Ｐ＜０．０１）缩短．３－３０日龄取毒的工蜂总体寿命缩短９．４７％，差异极显著（Ｐ＜０．０１）．因此，利用意蜂生产蜂毒，应考虑工蜂寿命缩短问题．     

黄唇蜾蠃蜂蜂毒的毒性特征研究

通过分析黄唇蜾蠃蜂蜂毒中的蛋白质组分,发现SDS-PAGE可以分离出5条主要的蛋白质带.酶活力分析显示,黄唇蜾蠃蜂蜂毒和已研究过的其他胡蜂蜂毒一样,也具有透明质酸酶和磷脂酶A的活性,但蜂毒中没有检测到酯酶、磷脂酶C和酚氧化酶活性,也不含有酚氧化酶抑制因子.由此推测,黄唇蜾蠃蜂的蜂毒仅具有较弱的过敏活性.利用寄主斜纹夜蛾幼虫进行生理学活性分析证实,体腔注射黄唇蜾蠃蜂蜂毒不能引起寄主昆虫的麻痹反应,但脑部注射一个毒腺当量的蜂毒就会引起所有受试个体产生麻痹反应,但用胰蛋白酶处理后,蜂毒即失去麻痹活性.表明:黄唇蜾蠃蜂蜂毒的麻痹活性依赖于其蛋白质组分,而活性组分的作用靶标位于寄主昆虫的中枢神经系统.     

电取蜂毒对意蜂温驯性的影响

用黑棉绒球测定意蜂攻击行为,研究巢门前和巢内电取蜂毒对意蜂温驯性的影响。结果表明:巢门前每5d和巢内每3d取毒1次,取毒组意蜂攻击测定球1min所留下的螫刺数比未取毒组分别少45.5％和24.3％;巢内每3d和每1d取毒1次,取毒后立即测定,取毒组的螯刺数比未取毒组分别少68.2％和63.6％;取毒后立即测定的螫刺数比2h后测定的分别少67.5％和66.2％。以上差异显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)。由此可见,电取蜂毒可使意蜂更温驯,取毒后意蜂的即刻状态最温驯。电取蜂毒不会给意蜂群开箱管理造成不便。     

蜂胶与蜂毒的采集方法

<正>l 蜂胶的采集方法 （1）覆布采胶法。用帆布和细白布做成与副盖一样大小的覆布,盖在巢框上。覆布与上框梁形成约2毫米的缝隙,蜜蜂便会在缝隙中积累蜂胶。每隔15天左右取胶1次。把覆布取出用起刮刀刮取。 （2）集胶器采胶法。集胶器有副盖式、格栅式、框式等多种。将集胶器放入蜂群箱中特定的位置。每隔15天左右,从蜂群中提取集胶器,脱取蜂胶。在低温处脱取蜂胶的速度更快。因为蜂胶中的芳香物质极易挥发,所以蜂胶脱取下来后要及时捏成团,装入无毒的塑料袋中密封保存,以备提纯。不同地点、不同胶源树种的蜂胶质量有差异,因此采集的蜂胶应分别包装并注明。     

利用LC-MS/MS技术分析蜂毒对大鼠内源性代谢的影响

为了探究蜂毒对Sprague-Dawley (SD)大鼠机体内源性代谢的影响,采用LC-MS/MS技术分析了蜂毒对大鼠血清中代谢物及可能涉及的代谢通路的影响。选取年龄、性别、身体状况相同的SD大鼠,设置为蛰刺组(A组)、创伤组(B组)和对照组(C组)。对A、B两组大鼠分别进行蜜蜂蛰刺和针蛰刺处理,处理后10 min取血清进行LC-MS/MS分析。正负离子模式下,采用偏最小二乘判别分析(PLS-DA)方法进行数学建模,并验证其稳定性。结果表明,蜇刺组、创伤组、对照组的两两之间受影响代谢物种类及数量均有显著差异,其中71种物质与蜂蛰相关,39种物质与蜂毒相关,24种物质与创伤相关。经进一步筛选,共得到与蜂毒相关的9个比较主要差异代谢物,分别为肉毒碱、溶血磷酯酸、溶血磷脂酰胆碱、乙酰肉毒碱、白介素20、亚油酸、溶血磷酯酰乙醇胺、鞘氨醇、溶血磷脂酰丝氨酸;以及4个受影响代谢通路,包括亚油酸代谢、神经鞘脂类代谢、甘油磷脂代谢、丙氨酸和天门冬氨酸代谢。蛰刺、创伤和蜂毒均对大鼠的内源性代谢产生一定影响,其中,与创伤相比,蜂毒影响相对更大。根据受影响代谢通路的生理作用,推测蜂毒对机体内源性代谢的影响主要涉及脂肪酸的代谢过程,具有重要的生理学作用。     

电取蜂毒对蜜蜂群势和蜂王浆、蜂蜜生产的影响

电取蜂毒不利于蜜蜂群势发展和养蜂生产。电取蜂毒3d 1次，连续10次，使蜂蜜减产45.64%-49.90%，差异显著（P＜0．05）；蜂王浆产量平均降低46．17％，差异极显著（P＜0．01）；移虫接受率平均降低31．05％，差异极显著（P＜0．01）；对单台产浆量，饲料消耗量，蜂王有效产卵量等影响不大。连续取毒后11d，对蜜蜂群势的发展影响不大，23d后蜜蜂群势比对照组低12．87％，35d后低28．81％，差异均极显著（P＜0．01）。     

一株溶纤维蛋白细菌的筛选·鉴定及体外溶栓研究

从青海省玉树藏族自治州表层冻土中筛选到1株溶血栓细菌DR-929,经16S rRNA序列分析和生理生化特征鉴定,该菌株属于寡养单胞菌属(Stenotrophomonas).纤维蛋白平板法表明,菌株DR-929培养物具有溶纤维蛋白活性,其培养液对血栓的降解率在18h达到最大,为89%,明显高于阳性对照尿激酶.另外,该株细菌不产生溶血物质,注射其普通肉汤培养物的小鼠无不良反应和病理特征.     

Bee venom enhances guanylate cyclase activity

Bee venom and phospholipase A2 extracted from bee venom enhanced guanylate cyclase (E.C. 4.6.1.2) activity two- to threefold in rat liver, lung, heart, kidney, ileum, and cerebellum. Dose-response relationships revealed that bee venom at concentrations as low as 1 microgram per milliliter and phospholipase A2 at 1 microunit per milliliter caused a maximal enhancement of guanylate cyclase.     

尿素对蛋白激发子AMEP功能活性的影响

AMEP是从枯草芽孢杆菌BU412中提取出的一种新型的蛋白激发子,该蛋白激发子可以提高植物的抗病性,是理想的生物农药的候选材料。AMEP在施用过程中与叶面肥混用是目前药肥一体化研究的热点。尿素是叶面肥的主要组成,同时也是蛋白质的变性剂。高浓度的尿素可以改变蛋白质的结构,使蛋白质失去原有性质,其对AMEP蛋白的功能活性是否产生影响还有待阐明。本文为了探究尿素对蛋白激发子AMEP功能活性的影响,设置了一系列浓度梯度的尿素对AMEP蛋白进行处理,通过烟草叶片的过敏反应来检测尿素对AMEP的功能活性影响。结果表明,低浓度的尿素不会影响AMEP的功能活性;而尿素浓度超过0.5mg/mL,AMEP的功能活性则受到明显抑制。随后,本文通过灰霉菌发病实验确认了0.05mg/mL尿素处理的AMEP能够提高植物的抗病性。本研究确定AMEP可与0.05mg/mL尿素配伍施用,为尿素与AMEP的共同施用提供了理论依据。     

红曲不同溶剂提取物的抗氧化活性

为了研究红曲霉发酵产物提取物不同极性部位的体外抗氧化活性,分别用纯水、30%乙醇对红曲进行提取,采用有机溶剂萃取法将30%乙醇提取物分为石油醚相、乙酸乙酯相和2个水相等不同极性部位,考察其ABTS自由基、DPPH自由基和脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的清除效果,比较红曲提取物不同极性部位的抗氧化作用。结果表明,红曲的纯水、30%乙醇提取物及其不同极性部位均有抗氧化活性,且与剂量有关。不同极性部位的抗氧化活性有差异。相同浓度时,30%乙醇提取物的抗氧化性大于纯水提取物的抗氧化性,在浓度10 mg/m L时,石油醚萃取后的水相的抗脂质过氧化性最强,为57.18%,且与其他极性部位具有显著性差异(P0.05),乙酸乙酯相的DPPH自由基清除率最高,为20.66%,乙酸乙酯萃取后水相的ABTS自由基清除率最高,为86.16%,且与其他极性部位具有显著性差异(P0.05)。     

细极链格孢菌蛋白激发子对棉主要性状及相关酶的影响

为了给细极链格孢菌蛋白激发子的田间使用提供依据,测定了其粗提蛋白液对棉主要性状及相关酶活性变化影响的相关数据。结果表明:细极链格孢菌蛋白激发子诱导后显著提高了棉成铃数,且不同程度提高了株高、单铃重、衣指、子指和衣分,降低了单铃壳重,特别是促进了棉花早熟,获得了较高的产量。以浸种处理的籽/皮棉产量最高,分别达到3 800.60和1 598.15 kg/hm2,比对照提高了22.15%和26.11%;纤维的主要品质性状指标与对照间差异均达到了极显著水平,浸种 现蕾期喷雾处理的综合值比对照提高6.1%,为最高;诱导后POD(过氧化物酶)、SOD(超氧化物歧化酶)及NR(硝酸还原酶)的酶比活性增强,其中POD酶比活性均值最高为(502.00±1.10)μmol/(g.min),SOD为(378.36±0.43)μmol/(mg.min),NR为(168.96±2.30)μg/(g.h);而MDA(丙二醛)含量降低,最低为(2.814±0.090 9)μmol/g。     

多酚-肌原纤维蛋白互作对蛋白的影响

肌原纤维蛋白是组成肌肉纤维蛋白的其中一种,肌原纤维蛋白的空间结构,蛋白的氧化性、凝胶性、乳化性等功能特性对肉制品的品质有十分重要的影响。在日常生活中,蛋白质氧化是一种常见的现象,这一现象以前没有得到很好的认识,很大程度上被忽视但现在更好了,据了解,这是一个复杂的化学过程,比如我们经常在生活中发现肉储存久了,颜色会由鲜红色变成棕褐色,这就是蛋白质氧化的导致的。所以,在肉制品中加入合适的抗氧化剂来防止肉制品的氧化变质是非常重要的,也是现在科研正在积极探索的方向。据对食品蛋白质氧化的研究发现,茶多酚它具有极强的清除有害自由基的能力,可以有效的防止肉制品的颜色发生变化,延长了肉制品的保质期,故茶多酚是目前发现的一种可理想的运用在肉制品的天然抗氧化剂之一。这篇文章综述了近些年来国内外关于茶多酚与蛋白的相互作用方式,研究了茶多酚与肌原纤维蛋白相互作用的作用机理,及在肉制品中加入多酚后,多酚与肌原纤维蛋白形互作对蛋白质性能的影响。     

蜜蜂授粉对榨菜余榨2号结实率的影响

针对浙江省余姚市种子管理站培育的榨菜品种余榨2号在繁种中存在结实率低等问题进行蜜蜂授粉试验,结果在榨菜盛花期通过施放蜜蜂等处理,可极显著地提高榨菜的结实率。     

环境因素对小麦苗期SOD、MDA及可溶性蛋白的影响

采用盆栽试验 ,模拟干旱胁迫、铜污染 (三级农田 )及不同施肥状况 ,测定了小麦苗期的生物量及叶片中的 SOD活性、MDA和可溶性蛋白含量。结果表明 ,水分、铜污染和施肥三因素对小麦苗期的生物量都有显著影响 ,表现为水分 >施肥 >铜污染 ;水分对 MDA含量的影响大于铜污染和施肥 ,表现为干旱可显著增大叶片 MDA含量 ,并使 MDA/SOD值增大 ;对 SOD和可溶性蛋白 ,水分和铜污染的影响大于施肥的影响 ,表现为干旱胁迫下 ,SOD活性升高 ,可溶性蛋白含量降低 ,而铜污染处理使可溶性蛋白含量升高 ;3种环境因素之间存在交互作用     

日粮添加蜂花粉对肉杂鸡抗氧化性及血清生化指标的影响

活性氧(ROS)自由基,在生物体衰老与疾病以及正常的免疫、代谢与细胞信号传导等过程中都起着重要的生理作用.为了防御自由基对机体的损伤,机体在进化过程中形成了一套抗氧化防御机制,包括各种抗氧化酶类及其非自由基中间产物[1-2].抗氧化酶是生物体抗氧化的第一道防线,它们相互之间具有协同防止活性氧的损伤效应,并且能够彼此再生,形成网络抗氧化剂[2-3].