刺芫荽叶乙醇提取物的抗氧化活性

以乙醇为提取溶剂采用浸提法对刺芫荽叶进行浸提,进一步测定该提取物的总多酚、总黄酮含量以及对DPPH自由基、羟自由基的清除作用和高价铁离子的还原能力。结果表明:刺芫荽叶乙醇提取物总多酚含量为1mg提取物干粉的抗氧化能力相当(23.2±0.01)μg的没食子酸标准品;总黄酮含量为1 mg提取物干粉的抗氧化能力相当于(0.96±0.02)μg的芦丁纯品;高价铁离子的还原能力为1mg提取物干粉的还原力相当于0.72 mmol·L~(-1)的七水合硫酸亚铁;DPPH(2,2-二苯基-1-苦肼基)自由基清除作用半抑制质量浓度(IC_(50))为0.48 g·L~(-1),羟自由基清除作用半抑制浓度(IC_(50))为0.43 g·L~(-1),提取物对DPPH自由基和羟自由基的清除率低于对照的药剂(芦丁、特丁基对苯二酚)。     

溶剂类型对芍药花多酚类物质的提取及其抗氧化能力的影响

利用不同溶剂提取芍药花中多酚类化合物并测定总酚的含量及其抗氧化能力。结果表明,提取溶剂的差异对芍药花提取物总酚和抗氧化活性影响显著。总酚提取效率最好的是50%乙醇,铁离子还原能力和总抗氧化能力最强的是50%乙醇的提取液,DPPH·自由基清除能力最好的是甲醇-丙酮-水提取液。结果显示芍药花可作为一种经济的抗氧化剂来源。     

响应面法优化桑寄生总黄酮提取工艺及其抗氧化活性研究

【目的】为广西桑寄生的开发利用和文化传承提供数据参考。【方法】以广西农业职业技术大学内桂花树桑寄生为原材料,采用响应面法优化超声辅助乙醇提取桑寄生黄酮的工艺。在单因素实验基础上,选择超声功率、超声时间和乙醇浓度三个因素,以黄酮提取量为响应值,采用Design Expert 10.0.4软件设计的Box-Behnken响应面试验优化桑寄生黄酮提取的工艺条件,并采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基清除试验评估桑寄生乙醇提取物的体外抗氧化活性。【结果】结果表明,桑寄生黄酮提取的最优工艺条件为超声功率143.71 W,超声时间31.96 min,乙醇浓度48.05%,预测黄酮的提取量为49.1279 mg/g。在体外抗氧化活性试验中,桑寄生乙醇提取液对DPPH自由基有良好的清除能力,其IC50为6.24μg/mL,是同浓度抗坏血酸活性的3.33倍。【结论】桑寄生的乙醇提取液具有良好的抗氧化活性,可作为天然抗氧化剂加以利用。     

山荆子中根皮苷和黄酮含量的测定及其乙醇提取物的抗氧化活性

【目的】测定山荆子鲜叶、茎皮和果中根皮苷及阴干的果实和叶中黄酮的含量,并比较阴干叶和果实乙醇提取物的抗氧化活性。【方法】采用超声波辅助甲醇提取山荆子鲜叶、茎皮和果实中的根皮苷,用高效液相色谱法测定提取物中目标产物的含量;用超声波辅助乙醇提取山荆子阴干叶和果实中的黄酮,用亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠法测定其叶和果实中的黄酮含量,并通过清除DPPH、ABTS自由基和还原力比较研究其乙醇提取物的抗氧化活性。【结果】山荆子鲜叶、茎皮和果实中的根皮苷含量分别为(12.00±3.60),(21.60±6.10)和(1.18±0.15)mg/g;阴干的叶和果实中黄酮含量分别为(4.78±0.62)和(0.68±0.04)mg/g。在清除DPPH自由基、ABTS自由基活性及还原力方面,山荆子阴干叶乙醇提取物较果实的抗氧化活性强。【结论】超声波辅助提取技术结合HPLC法测定山荆子叶、茎皮和果实中根皮苷含量操作简单,重复性好,结果准确。山荆子阴干叶和果实的乙醇提取物都具有较强的抗氧化活性,且叶乙醇提取物的抗氧化活性较强。     

玫瑰花蒂多酚的超声辅助提取工艺优化及其抗氧化活性评价

【目的】确定玫瑰花蒂多酚的超声辅助提取最佳工艺并评价其抗氧化活性.【方法】通过单因素试验考察料液比、乙醇体积分数、超声时间和提取次数4个因素对多酚提取率的影响,采用响应面法分析优化其提取工艺,采用DPPH和ABTS自由基清除活性测定方法评价对该工艺制备所得玫瑰花蒂多酚的抗氧化活性.【结果】玫瑰花蒂多酚的超声辅助提取最佳工艺条件为料液比1∶17.5(g∶mL)、乙醇体积分数52%、超声时间60min、提取次数4次.在此条件下多酚实际提取率为8.33%,与理论值较为接近.玫瑰花蒂多酚对DPPH和ABTS自由基的半清除浓度(SC50)均低于阳性对照VC,分别为6.67g/mL和59.32g/mL.【结论】结果表明采用响应面法分析优化玫瑰花蒂多酚超声辅助提取工艺的方法可行,且玫瑰花蒂多酚具有显著的抗氧化活性.     

苦笋总黄酮提取工艺优化及其体外抗炎抗氧化活性研究

【目的】探索苦笋总黄酮最佳提取工艺条件及其体外抗氧化抗炎活性。【方法】以苦笋为原料,采用超声辅助提取法,通过单因素实验及Box-Behnken响应曲面法筛选出最佳提取工艺,并评估苦笋总黄酮提取物的体外抗氧化抗炎活性。【结果】苦笋总黄酮最佳提取工艺为：料液比1∶30 g/mL,提取温度51℃,提取时间23 min,乙醇浓度87%,提取溶液pH值为6,超声功率200 W。在此条件下苦笋总黄酮提取率为10.61%;苦笋总黄酮浓度为0.5 mg/mL时,FRAP值达到3.04 mmol/L,对DPPH自由基、羟基自由基和ABTS自由基的清除率分别为88.73%、60.22%和72.38%,其IC50值分别为0.07 mg/mL、0.39 mg/mL和0.23 mg/mL;苦笋总黄酮浓度为1.20 mg/mL时,NO产生抑制率可达到93.94%。【结论】苦笋总黄酮提取工艺切实可行,并且苦笋总黄酮提取物具有一定的抗氧化抗炎活性。     

凤仙花花青素苷的超声辅助提取工艺及其抗氧化研究

【目的】探究凤仙花花青素苷超声辅助提取最优工艺及其抗氧化性。【方法】在单因素实验的基础上,利用正交实验分析优化超声辅助法提取凤仙花花青素苷的工艺条件,并以DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率以及还原力测定为指标,对比凤仙花花青素苷与维生素C的抗氧化性。【结果】超声辅助法提取凤仙花花青素苷的最优提取工艺为：超声频率100Hz、乙醇浓度74%、提取温度43℃,最佳提取率为5.4039±0.330 8 mg·g^-1。抗氧化实验结果表明：凤仙花花青素苷在质量浓度范围对DPPH自由基、ABTS自由基的清除能力及其还原力均高于维生素C,具有较高的抗氧化活性。【结论】实验的提取方法工艺合理,其中超声辅助法提取率较高,凤仙花花青素苷抗氧化性较好,故实验为凤仙花花青素苷的深入研究和开发利用提供参考依据。     

迷迭香叶非精油组分的清除自由基和抗氧化作用

【目的】从自由基生物学角度探讨迷迭香叶提取物的清除自由基、抗氧化作用,为迷迭香在食品、保健和医药等领域的进一步开发利用提供依据。【方法】分别以水、乙醇和乙酸乙酯为溶剂,提取沪产迷迭香叶的非精油组分,然后用超氧阴离子自由基(O2.-)、羟自由基(.OH)、过氧亚硝基阴离子自由基(ONOO-)和.OH氧化损伤DNA的化学发光体系,及脂质过氧化和二苯代苦味肼基自由基(DPPH.)比色体系,检测质量浓度不同的3种提取物对自由基的清除作用和抗氧化作用,并通过计算IC50比较三者的作用效果。【结果】迷迭香叶非精油组分3种提取物均能有效清除O2.-、.OH、ONOO-和DPPH.,减轻自由基对DNA的氧化损伤,抑制脂质过氧化,且提取物质量浓度越大,清除自由基和抗氧化的效果越好。其中水提取物抑制自由基对DNA的氧化损伤和脂质过氧化能力较强,其抑制化学发光50%时的样品质量浓度(IC50)分别为32.3和36.11μg/mL;乙醇提取物清除O2.-和ONOO-的效果较佳,IC50分别为189.19和1.67μg/mL;乙酸乙酯提取物清除.OH和DPPH.的效果较佳,IC50分别为4.12和49.55μg/mL。【结论】迷迭香叶非精油组分可有效清除自由基和抗氧化,是一种多功能自由基清除剂和天然抗氧化剂。     

野火球总黄酮提取及抗氧化研究

[目的]优化野火球总黄酮的最佳提取工艺,研究野火球总黄酮的抗氧化活性。[方法]比较分析热回流提取法、索氏提取法、超声提取法对野火球总黄酮提取率的影响,并采用单因素试验及正交设计试验,优化超声提取野火球总黄酮的最佳提取工艺。采用DPPH和FRAP法对野火球总黄酮的DPPH自由基清除能力和总抗氧化活性进行评价。[结果]超声提取法为提取野火球总黄酮的最合适的提取方法,其最优工艺参数是:乙醇浓度50%,超声时间75 min,料液比1∶20,超声功率350 W。在上述条件下,野火球总黄酮提取率为1.686%。野火球提取物对DPPH自由基有较好的清除效果,IC_(50)为(0.207 7±0.010 3)mg/m L,并且具有较好的总抗氧化能力,FRAP值为(4.561 0±0.228 0)mmol/g。[结论]优化的野火球总黄酮提取工艺稳定可行,野火球总黄酮具有较好的抗氧化活性。     

牛角瓜叶乙醇提取物的体外抗氧化活性

为了评价药用植物牛角瓜叶的乙醇提取物的抗氧化活性,利用GC-MS对牛角瓜叶乙醇提取物的化学成分进行鉴定,并测定牛角瓜叶提取物的总酚、总黄酮含量;牛角瓜叶乙醇提取物对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基、HO·自由基的清除作用和2,6-二叔丁基对苯二酚(BHT)还原力。结果表明:牛角瓜叶乙醇提取物有较好的抗氧化活性,其醇类(60.2%)含量最高,其次为酯类(24.09%),羽扇豆醇(26.7%)为主要单组分物质。以干质量计,总酚的含量为(26.22±0.01)mg·g-1;以干质量计,总黄酮的含量为(0.35±0.02)mg·g-1;牛角瓜叶乙醇提取物对DPPH自由基的半清除率(IC50)为0.33 g·L-1,与芦丁差异不显著;对羟自由基的半清除率(IC50)为0.21 g·L-1,与TBHQ差异不显著;总还原力随着样品浓度的增加而增大,每克干质量牛角瓜叶乙醇提取物的高价铁离子还原能力为0.69 mmol·L-1Fe SO4·7H2O。     

4种蝴蝶雄性生殖系统形态学研究

【目的】明确4种蝴蝶雄性生殖系统的形态学结构。【方法】将新鲜标本剪下腹部,在Motic SMZ168-BL型显微镜下观察解剖,用Q Imaging Retiga 2000R(CCD)显微成像系统照相,采用Montage图像叠加软件进行图像处理。【结果】描述了4种蝴蝶的雄性生殖系统,其中外生殖器的差异主要表现在囊形突、钩突、背兜、阳基轭片等上,而内生殖器的主要差异表现在精巢、复射精管、单射精管及附腺上。【结论】4种蝴蝶雄性生殖系统的各部分结构特征存在较大差异。     

两株白粉寄生孢的生物学特性比较

对L9和L3两个白粉寄生孢菌株的生物学特性研究表明,它们的生长适温为10～30℃,其中最适生长温度分别为25℃和20℃;适宜生长的pH为4～10,其中最适pH均为8.有利于L9菌株菌落生长的碳、氮源分别为可溶性淀粉、乳糖和牛肉膏;有利于L3菌株菌落生长的碳、氮源分别为葡萄糖、乳糖和蛋白胨;改良查氏培养基有利于两者菌落的生长.     

青稞转录因子HvnANT1基因的克隆与表达分析

为探究HvnANT1基因在青稞粒色形成过程中的基因表达模式,以紫粒青稞‘涅如姆扎’和白粒青稞‘昆仑10号’为试材,利用简化基因组GBS(Genotyping-by-Sequencing)对青稞紫粒进行基因定位,克隆到HvnANT1基因,对其进行生物信息学分析。结果表明:1)在7H染色体的84.30—86.00 cM获得1个MYB类转录因子,命名为HvnANT1。2)该基因长1 033 bp,其完整开放阅读框为762 bp,编码253个氨基酸。HvnANT1蛋白分子量为27.14 kU,是亲水性的不稳定碱性蛋白且不存在跨膜结构,无信号肽。该蛋白的二级结构主要是由无规卷曲、α-螺旋、延伸链和β-转角组成,具有2个SANT结构域(分别位于第13—第63个;第66—第114个氨基酸)。3)同源比对与系统进化分析表明:青稞HvnANT1蛋白与大麦、乌拉尔图小麦、高梁、玉米、二型花、小米、水稻、土瓶草、车轴草和杨梅10种植物的ANT1蛋白序列相似性分别为100.00%、88.85%、54.64%、60.95%、60.82%、58.46%、57.61%、37.76%、36.05%和36.33%;这些序列都具有2个高度保守的2个SANT结构域;与大麦的亲缘关系最近,其次是与乌拉尔图小麦,与水稻最远。4)亚细胞定位结果表明,该基因定位在细胞核内。5)实时荧光定量PCR(qRT-PCR)结果显示:与籽粒颜色形成的乳熟早期和乳熟晚期相比,软面团期的HvnANT1基因在‘涅如姆扎’中表达量极显著上调,而在‘昆仑10号’中各时期的表达量较低且差异不显著;且软面团期的‘涅如姆扎’籽粒HvnANT1基因的表达量极显著高于‘昆仑10号’(P<0.01)。花青素合成相关的结构基因HvnCHI、HvnANS和HvnDFR与该基因表达量模式相似。综上,青稞HvnANT1蛋白结构中的SANT结构域在物种进化过程中比较保守;该基因定位在细胞核内,符合转录因子特性;HvnANT1基因表达模式与结构基因HvnCHI、HvnANS和HvnDFR相似,在籽粒颜色形成的软面团期表达量极显著升高。     

不同杀菌剂对3种马铃薯病害病原菌的毒力测定

采用生长速率法测定3种生物农药和3种化学药剂对马铃薯晚疫病菌、早疫病菌和黑痣病菌的室内毒力。结果表明：100万孢子/g寡雄腐霉WP对晚疫病菌、早疫病菌和黑痣病菌毒力较好,其EC₅₀分别为  0.041 2  μg/mL、0.000 1  μg/mL和0.052 0  μg/mL;0.3%四霉素AS对3种马铃薯病害病原菌的EC₅₀分别为0.009 3  μg/mL、0.208 4  μg/mL和0.265 9  μg/mL;3%中生菌素WG对3种病原菌的毒力较弱,EC₅₀分别为 7.494 1  μg/mL、2.035 6  μg/mL和20.266 6  μg/mL;20%烯肟·戊唑醇SC对3种病原菌的EC₅₀分别为  0.435 9  μg/mL、0.003 9  μg/mL和1.114 0  μg/mL;50%锰锌·氟吗啉WP对3种病原菌的EC₅₀分别为  1.216 2  μg/mL、0.192 5  μg/mL和5.153 5  μg/mL;30%苯甲·嘧菌酯SC对3种病原菌的EC₅₀分别为  11.270 1  μg/mL、0.227 8  μg/mL和6.071 8  μg/mL。综上所述,100万孢子/g寡雄腐霉WP、0.3%四霉素AS和20%烯肟·戊唑醇SC对马铃薯晚疫病、早疫病和黑痣病室内毒力较好。     

扩展莫尼茨绦虫丝氨酸蛋白酶抑制剂基因serpin部分片段克隆及不同体节mRNA转录水平分析

旨在初步了解丝氨酸蛋白酶抑制剂基因在扩展莫尼茨绦虫生长发育中的作用。采用分子克隆获得扩展莫尼茨绦虫丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin基因部分片段,应用MEGA软件对其进行进化分析。同时以beta-Tubulin基因作为内参基因,采用SYBR Green real-time RT-PCR技术检测该基因在扩展莫尼茨绦虫4个不同发育阶段即头节、幼节、成节、孕节中的表达差异,最终克隆获得749bp的serpin基因片段。进化分析表明,扩展莫尼茨绦虫serpin基因与多方棘球蚴serpin基因有较近的亲缘关系。标准曲线分析显示,serpin和beta-Tubulin基因的Ct值与阳性质粒的浓度均呈良好的线性关系,相关系数均大于0.99,熔解曲线分析表明,产物为特异的单峰,具有较高的特异性。同时试验结果显示,serpin基因在虫体各发育阶段中的表达丰度存在差异,从高到低依次为孕节、头节、成节、幼节。由此初步推测,此基因可能在扩展莫尼茨绦虫虫卵发育为六钩蚴的过程中发挥一定作用。     

摘除眼柄与注射眼柄粗提物对凡纳滨对虾性腺发育相关基因表达的影响

利用荧光定量PCR技术,检测了眼柄粗提物对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)性腺发育相关基因(DMC1、VASA和VTG)表达的影响,探讨性腺抑制激素(GIH)在性腺发育过程中的调控机制,结果表明:DMC1和VASA只在凡纳滨对虾精巢和卵巢中表达;摘除眼柄后,精巢和卵巢中DMC1表达量均显著性降低(P0.05),而注射眼柄粗提物后精巢和卵巢中DMC1表达显著增高(P0.05);相反,摘除眼柄后,精巢和卵巢中VASA以及卵巢中VTG基因表达量显著增高,但注射眼柄粗提物后性腺中的VASA和卵巢中的VTG表达量显著降低。结果表明眼柄粗提物通过影响生殖相关基因的表达影响凡纳滨对虾的性腺发育。     

两种药用植物残渣堆肥浸提液对黄瓜3种病害防治效果

通过室内孢子萌发试验和盆栽试验测定了药用植物砂地柏和马齿苋残渣堆肥浸提液对黄瓜灰霉病、霜霉病和炭疽病的活性.孢子萌发试验结果表明,马齿苋残渣堆肥浸提液对黄瓜灰霉病菌和炭疽病菌孢子萌发具有显著的抑制作用,抑制率分别达到78.69%和60.28%,对黄瓜霜霉病菌孢子萌发的抑制效果较差;砂地柏残渣堆肥浸提液对黄瓜炭疽病菌孢子萌发具有显著抑制作用,抑制率达到59.75%,对其他两种病原菌孢子萌发的抑制效果较差.盆栽试验结果表明,两种药用植物残渣堆肥浸提液对黄瓜3种病害的防治效果随浸提液含量的增加而增大,当使用浸提液原液时,砂地柏残渣堆肥浸提液和马齿苋残渣堆肥浸提液对黄瓜灰霉病的防治效果最好,保护和治疗效果分别为66.30%、61.02%和78.72%、76.75%,其次为黄瓜霜霉病,对黄瓜炭疽病的防治效果较差.     

岚皋魔芋软腐病病原细菌生物多样性研究

【目的】研究岚皋魔芋软腐病病原细菌生物多样性。【方法】采用组织分离法分离纯化魔芋软腐病球茎及叶柄中的致病菌,通过魔芋球茎、胡萝卜及马铃薯块的侵染试验初步确定其致病性,再利用魔芋球茎侵染致病及盆栽致病性试验确认其致病性;经菌落与细胞形态、生理生化特性及16SrRNA序列测定确定病原菌的类型。【结果】从魔芋软腐病球茎及叶柄中共分离获得16株细菌,侵染试验表明,其中CDS1-B1、CDS1-B2、CDS2-B1、CDS2-B2、CZS-B4和CZS-B6共6株细菌可使魔芋球茎表现软腐症状,并导致盆栽魔芋发病;6株细菌的菌落与细胞形态均存在差异;在魔芋、胡萝卜及马铃薯块上的侵染能力不同;16SrRNA序列分析表明,菌株CDS1-B1、CDS1-B2、CDS2-B1及CDS2-B2均与菊欧氏杆菌(Erwinia chrysanthemi)亲缘关系最近,菌株CZS-B4与菊欧文氏菌(Dickeya dadantii)亲缘关系最近,相似度为98.8%,菌株CZS-B6与菊果胶杆菌(Pectobacterium chrysanthemi)的相似度达99.9%。【结论】导致岚皋县魔芋软腐病的致病细菌存在生物多样性,其致病性也存在差异,其中新发现的魔芋软腐病原菌菊果胶杆菌(Pecto-bacterium chrysanthemi)致病性最强,菊欧氏杆菌(Erwinia chrysanthemi)和菊欧文氏菌(Dickeya dadantii)致病性较弱。     

新疆南疆部分地区3种璃眼蜱的分子生物学鉴定

旨在对新疆南疆部分地区璃眼蜱属的蜱进行分子生物学鉴定,了解其分布情况。采集新疆南疆部分地区蜱,通过形态学鉴定将璃眼蜱属蜱作为样本,通过12SrDNA和16SrDNA基因扩增、测序及序列分析进行蜱种类鉴定。13个采样点共559只璃眼蜱属蜱,鉴定为3种,分别为小亚璃眼蜱、亚洲璃眼蜱和残缘璃眼蜱。     

克氏原螯虾泛素结合酶E2基因的克隆及其在卵巢中的表达分析

利用RACE技术获得了UB-E2基因c DNA全长,通过RT-PCR技术研究UB-E2基因在不同组织、发育时期的表达量和17α-羟孕酮激素刺激后UB-E2表达量及性腺发育情况。结果表明:该基因序列全长3 943bp,开放阅读框675 bp,编码224个氨基酸,相对分子量23. 93 ku,等电点8. 61,82～219位氨基酸序列为泛素结合酶家族特有的结构域。氨基酸序列比对发现,克氏原螯虾UB-E2基因与节肢动物UB-E2基因有较高的同源性;系统进化分析表明,UB-E2基因与凡纳滨对虾和斑节对虾聚为一支。荧光定量结果显示,UB-E2基因在克氏原螯虾卵巢组织中的表达量显著高于其他组织(P 0. 05);在卵巢发育初期表达量最低,随后逐渐升高,到产卵后期开始下降; 17α-羟孕酮刺激结果显示,试验组卵巢发育速度明显加快,同时UB-E2基因的表达量也显著上升,卵巢发育速度和UB-E2基因表现为受17α-羟孕酮刺激响应一致。推测UB-E2基因在克氏原螯虾的卵巢发育和配子发生中起着重要的作用,本研究为克氏原螯虾性腺发育分子调控机制提供一定的理论依据。