应用植株快速诊断确定春小麦的追氮量

春小麦生长期间，取植株茎基部，采用二苯胺法和ＮＯ３＾－－Ｎ快速试纸法同时测定ＮＯ＾３－－Ｎ浓度。发现拔节能ＮＯ＾－３－Ｎ深度、氮施用量和地上部干物重有较了的相关性。同时两种测试方法之间也存在极好的相关性。     

一种便携式通用试纸测试仪的设计

针对试纸测试的人为误差较大、使用不便的缺点，提出一种基于MSP430的便携式通用试纸测试仪方案。采用颜色传感器TCS230采集试纸颜色RGB值，并进行HSV颜色模型转换，得到可用于颜色比对的色调参数，通过与数据库对应的标准试纸参数进行比对，获得试纸测试结果。实际测试表明，该方法可用于各种类型试纸的测试，具有较高的测试准确度和稳定性。     

猪瘟抗体检测试纸研发及制备工艺的优化

为研制灵敏、准确、稳定的猪瘟抗体检测试纸,对胶体金标记猪瘟病毒(CSFV)Erns-E2蛋白的pH、封闭液、保存液及样品垫等试纸生产各环节的保护剂、稳定剂及缓冲系统进行优化,确定猪瘟抗体检测试纸生产的工艺参数,使试纸的准确性、灵敏度及稳定性满足批量生产要求。该试纸在室温干燥条件下可稳定保存1a以上,为实现猪瘟抗体检测试纸的商业化及广泛应用奠定基础。     

氧化铁试纸法测定暗棕壤中有效磷

[目的]研究用氧化铁试纸法测定暗棕壤中有效磷的可行性。[方法]利用氧化铁试纸对4种暗棕壤中的有效磷进行测定,同时研究氧化铁试纸的载荷量和最佳吸附时间,并通过氧化铁试纸2种测定方法（直接浸提法和直接插入法）与传统双酸法的测定结果进行相关分析。[结果]该研究所制氧化铁试纸的最大吸磷容量可达每条520μg左右,最佳吸附时间为24h;氧化铁试纸法仅能吸附土壤溶液中很少一部分磷,但能很好地反映植物真实的吸磷情况。不同测定方法的相关性分析表明,氧化铁试纸直接浸提法和直接插入法所测定结果均与双酸法的高度正相关,相关系数分别为0.9795和0.8824,说明氧化铁试纸能够正确评价土壤有效磷状况。[结论]氧化铁试纸可以用于暗棕壤有效磷的测定。     

水产品中恩诺沙星残留胶体金免疫层析技术的研究

[目的]制备一种特异、快速、便捷的检测虾及鱼肉中恩诺沙星残留的胶体金免疫层析试纸条。[方法]用柠檬酸三钠还原法制备的胶体金标记恩诺沙星多克隆抗体,喷于试纸的金标垫。将ENR-OVA(恩诺沙星和卵清白蛋白的偶联物)和纯化的羊抗兔IgG分别喷于试纸的T(检测线)处和C(质控线)处,通过挑选试纸条材料和调试工艺参数,并最终组装成试纸条。[结果]制备的试纸条检测体系方法的检出限为0.9 ng/ml。试纸条对虾及鱼肉中的恩诺沙星残留的检出限分别为5和10 ng/g。[结论]制备的恩诺沙星胶体金检测试纸适用于现场实际样品恩诺沙星残留水平检测,具有良好的应用前景。     

免疫试纸条结合RT-PCR法快速检测马铃薯Y病毒

利用马铃薯Y病毒(PVY)免疫试纸条,对PVY进行了快速检测,结果表明,试纸在2 min内,可特异性检出PVY,而健康的叶片无反应.刮下试纸条上显示的检测带,进行RT-PCR,能扩增到与预期大小相同的DNA条带,是对快速检测试纸条检测结果的验证.     

化学实验操作口诀集锦

基本操作 固体需匙或纸槽，手贴标签再倾倒。读数要与切面平，仰视偏低俯视高。试纸测液先剪小，玻棒沾液测最好。试纸测气先湿润，粘在棒上向气靠。酒灯加热用外焰，三分之二为界限。硫酸入水搅不停，慢慢注入防沸溅。实验先查气密性，隔网加热杯和瓶。排水集气完毕后，先撤导管后移灯。     

烟草漂浮育苗旧苗盘残留物TMV带毒检测

为了建立烟草漂浮育苗旧苗盘残留物中烟草花叶病毒TMV的检测方法，以TMV病苗干根为材料，采用直接研磨法、液氮研磨法和浸泡研磨法制样，效果分别用三抗体夹心法（TAS—ELISA），TMV试纸条和枯斑寄主法检测灵敏度．结果表明，3种方法制备的样品都能用TAS-ELISA和试纸条检测出阳性，且3种制样方法间的差异小；3种制样方法制备的样品都具有侵染力，浸泡研磨法最强，直接研磨法次之，液氮研磨法最弱．TAS—ELISA，TMV试纸条和枯斑寄主接种的检测下限分别为千病根占健康根质量的0．01％，0．10％和0．10％．     

胶体金免疫层析试纸结合RT-PCR法快速检测烟草环斑病毒

利用烟草环斑病毒胶体金免疫层析检测试纸条,对烟草环斑病毒3个分离物进行了快速检测。结果表明,试纸条在10min内,可特异性检出烟草环斑病毒的3个分离物,对番茄环斑病毒、南芥菜花叶病毒、番茄黑环病毒和健康叶片无反应。剪下试纸条上显示的检测带,进行RT—PCR,能扩增到与预期大小相同的DNA条带。试纸条检测烟草环斑病毒粗提纯液,检测灵敏度在1μg·mL^-1,试纸条检测烟草环斑病毒的病汁液,检测灵敏度在10^-3（W／V）,试纸条检测灵敏度与DAS—ELISA方法灵敏度基本相同。     

葡萄糖试纸法初测油菜籽硫代葡萄糖甙的研究

葡萄糖试纸法是油菜品质育种中硫代葡萄糖甙初测的主要手段。研究表明:试纸定性法与分光光度定量法测定结果有明显的对应关系,即当试纸法测定结果为0时,分光光度法测定一般在13—30μmol/g之间,0- 时为35—50μmol/g之间, - 时则在60—80μmol/g之间;温度、放入时间长短对测定结果有影响,而试纸的长短对测定结果没有影响,因此掌握好试纸法应用的各个环节,可提高准确性。     

免疫金试纸法快速检测盐酸克伦特罗

试验选取自身蛋白制备克盐酸伦特罗克伦特罗载体抗原,免疫动物后产生高效价的特异性抗体,纯化抗体与胶体金结合成免疫金,制备成简易的检测试纸条。通过检测试纸条敏感性、保存期、金标抗体工作浓度选择、操作方法对比、实验检测及与单抗金标试纸条平行检测等试验,证明建立的免疫金试纸法快速检测盐酸克伦特罗具有实用性、可靠性和稳定性。自身全血清作载体可使抗盐酸克伦特罗的ELISA效价高达4万以上。免疫金试纸法对盐酸克伦特罗的最小检测量为40ng·mL-1,试纸条在室温保存150d不影响检测结果。实验检测86份ELISA试剂盒阴性样品和42份阳性样品,其符合率分别为100%和95.2%。市售单抗金标试纸条检测结果与ELISA法的阳性符合率为95%(19/20)。     

莱克多巴胺荧光试纸的初步研制及性能测定

基于河南省动物免疫学重点实验室制备并保存的莱克多巴胺单克隆抗体(RAC McAb),采用异硫氰酸荧光素(FITC)作为标记材料对之进行荧光标记,并对荧光探针FITC-RAC McAb进行纯化和荧光光谱鉴定;应用免疫层析技术研制RAC残留荧光检测试纸,并对其敏感性、特异性、重复性进行初步测定。结果表明：荧光探针标记成功,并应用于免疫层析试纸,检测试纸的最低检测限为1 μg/L,较同抗体的胶体金试纸的敏感性提高10倍;与其他激动剂类药物无交叉反应,具有良好的特异性;以不同批次的检测试纸对猪尿样和牛奶样进行检测,结果一致,具有良好的重复性;检测试纸在10 min内可显示结果。     

魏氏梭菌α毒素快速诊断金标试纸条的研制

【目的】研制魏氏梭菌α毒素快速诊断金标试纸条,为魏氏梭菌病的快速诊断提供新方法。【方法】采用分子生物学方法制备魏氏梭菌α毒素,将其免疫家兔制备多克隆抗体。用制备的抗魏氏梭菌α毒素多克隆抗体作为胶体金标记抗体和检测线上的捕获抗体,制备魏氏梭菌α毒素快速诊断金标试纸条,对其特异性、敏感性、稳定性和重复性进行检测。用制备的魏氏梭菌α毒素快速诊断金标试纸条对临床样品进行检测,比较其检测结果与PCR检测结果的符合率。【结果】成功制备了魏氏梭菌α毒素多克隆抗体。成功研制了α毒素快速诊断金标试纸条,其检测线上抗体的最适包被质量浓度为0.06 μg/mL。研制的试纸条仅与魏氏梭菌α毒素发生反应,且不同批次的试纸条重复检测结果无差异,表明试纸条具有较高的特异性和重复性;该试纸条最低可检测1.40 mg/mL的毒素量,与PCR方法测得结果符合率为80.77%,基本能满足实际应用要求。【结论】成功研制了魏氏梭菌α毒素快速诊断金标试纸条,该试纸条具有快速、特异、敏感、稳定等优点,适用于对魏氏梭菌病进行普查和检疫,具有良好的应用前景。     

试纸条法与琼脂扩散法检测IBDV抗体的比较(英文)

[目的]比较分析IBDV抗体的试纸条与琼脂糖扩散两种检测方法。[方法]用自行研制的试纸条法检测鸡血清中的鸡传染性法氏囊病毒抗体,并与传统的琼脂扩散法检测结果进行比较。[结果]试纸条较琼脂凝胶扩散试验敏感8倍,在216份临床样品测定试验中,检出率更高,同时其又具有特异性强、易保存、操作简单快速等优点,故试纸条更适合于临床抗体监测。[结论]该研究结果表明试纸条可替代现有的血清学方法,在抗体监测方面具有极大的推广应用价值。     

试纸法在食品及农业检测中的应用

试纸检测法是一种便捷的现场即时分析方法,因其携带方便、价格便宜而得到广泛应用。笔者对近年来试纸法在食品、环境监测等农业相关领域的应用研究进行了综述与分析,提出了试纸检测法研究应进一步采取的对策,并展望了其应用前景。     

甲霜灵、吡虫啉胶体金免疫层析试纸与色谱仪检测蔬菜农药残留比对试验分析

主要通过采用胶体金检测试纸与色谱仪检测蔬菜中农药残留的比对来检验胶体金免疫层析试纸的可靠性。经试验,胶体金检测试纸检测与色谱仪检测结果一致,相关性良好,可作为蔬菜采摘前农药残留自我检测的应用手段,适合在蔬菜生产基地、专业合作社等地推广应用。     

快速检测联苯菊酯的胶体金层析试纸条研制

[目的]采用免疫胶体金技术,建立一种快速检测联苯菊酯的试纸条方法。[方法]利用有机合成方法制备了联苯菊酯半抗原,并与载体蛋白偶联得到免疫抗原,利用人工免疫的方法获得其单克隆抗体,通过酶联免疫法对制备的单克隆抗体的性能进行了验证。联苯菊酯胶体金层析试纸条是利用单克隆抗体标记胶体金,并将联苯菊酯抗原与羊抗鼠Ig G分别喷制到硝酸纤维膜上,与样品垫、吸水垫组装在PVC衬板上制备而成。[结果]联苯菊酯胶体金层析试纸条检测限为500~800μg/kg,具有速度快、简单等优点。此外,该试纸条与大部分的拟除虫菊酯没有明显的交叉反应,利用该试纸条可实现对苋菜中联苯菊酯添加试验的准确判定。[结论]胶体金试纸条方法具有前处理简单、检测速度快、可以肉眼判断结果等优点,该试纸条有望实现对果蔬中联苯菊酯残留的快速筛查。     

莴苣花叶病毒胶体金免疫层析试纸条的研制

为建立莴苣花叶病毒的现场快速检测方法,采用胶体金标记莴苣花叶病毒的兔多克隆抗体,在硝酸纤维素膜上喷涂检测T线和质控C线,制作胶体金免疫层析试纸条。该试纸条检测莴苣花叶病毒提纯病毒的灵敏度为1μg·mL-1,检测昆诺阿藜病汁液可稀释1 000倍(重量/体积)。试纸条可特异性检测到莴苣花叶病毒的3个分离物,与马铃薯X等8种病毒无交叉反应。田间采集的莴苣样品试纸条和酶联检测的结果一致。该试纸条适用于疑似莴苣花叶病毒感染的莴苣叶片的快速诊断,并在10min内获得检测结果。     

快速检测生鲜乳中玉米赤霉醇试纸条的研制及其应用

[目的]采用免疫胶体金技术,建立了一种快速检测玉米赤霉醇的试纸条方法。[方法]利用有机合成方法,研制了一种玉米赤霉醇半抗原,将其载体蛋白偶联得到免疫抗原,并通过人工免疫的方法获得单克隆抗体。通过酶联免疫法对制备的单克隆抗体的性能进行了验证。玉米赤霉醇层析试纸条是利用单克隆抗体标记胶体金,其原理是玉米赤霉醇抗原和羊抗鼠Ig G分别喷到自制的膜(硝酸纤维)上,然后将样品垫、吸水垫分别放置在PVC板上,再制成试纸条。[结果]试纸条检测限可达0.5~1.0μg/kg,具有速度快、简单等优点。此外,该试纸条与大部分的玉米赤霉醇没有明显的交叉反应。[结论]利用该试纸条可实现对生鲜乳中玉米赤霉醇添加试验的准确判定。该试纸条有望实现对生鲜乳中玉米赤霉醇残留的快速筛查。     

基于p72蛋白的非洲猪瘟病毒抗体检测试纸研制

为了研制灵敏、准确、特异及稳定的非洲猪瘟抗体快速检测试纸产品,以非洲猪瘟病毒（ASFV）p72蛋白为检测抗原,以金黄色葡萄球菌A蛋白（SPA）为拦截线,对比重组蛋白p72的不同状态对试纸检测性能影响,优化标记条件、喷膜浓度、样品垫缓冲体系及成分、显色时间等因素,确定ASFV抗体检测试纸产品化的具体参数,并对试纸的特异性、均一性、准确性及稳定性进行鉴定。结果显示,试纸的检测敏感性为1∶51 200,优于商业化ASFV检测试剂盒,与其他猪源病毒阳性血清无交叉反应,变异系数小于10%,在临床样本检测中未见假阴性及假阳性结果,具有良好的敏感性、特异性、均一性及准确性;经加速稳定试验验证,可以室温保存1 a以上;与进口商品化试剂盒的总符合率为91.6%。综上,成功研制了ASFV抗体检测试纸,且试纸的检测性能良好,可以用于ASFV抗体的快速筛查。