猪瘟、猪伪狂犬病及猪繁殖与呼吸综合征的免疫试验

选择20日龄仔猪分组后于不同日龄应用猪瘟(CSF)、猪伪狂犬病(PR)及猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)疫苗进行免疫,检测猪群免疫前后的抗体水平。结果显示,仔猪免疫猪瘟活疫苗的日龄有待进一步探讨,猪瘟抗体ELISA检测方法比IHA方法可靠;仔猪于20、30、40日龄时免疫猪伪狂犬病gE基因缺失活疫苗,均不会对母源抗体造成干扰;猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗以及高致病性猪蓝耳病灭活疫苗如何使用尚需探讨。     

猪瘟等三种疫病的免疫试验

为了研究猪瘟(CSF)、猪伪狂犬病(PR)及猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)疫苗免疫猪群前后的抗体水平及免疫干扰现象,试验取20日龄仔猪50头,分组后于不同日龄应用以上3种疫苗进行免疫,并检测猪群免疫前后的抗体水平;同时另取18头仔猪,以高致病性猪蓝耳病灭活疫苗免疫,作对照试验。结果表明:仔猪免疫CSF活疫苗的日龄有待进一步探讨,CSF抗体ELISA检测方法比IHA方法可靠;仔猪于20,304,0日龄时免疫PR gE基因缺失活疫苗,均不会对母源抗体造成干扰;PRRS灭活疫苗及高致病性猪蓝耳病灭活疫苗如何使用尚需探讨。     

母猪与仔猪PRRS免疫程序的观察与分析

试验旨在观察南堰猪场母猪与仔猪的PRRS免疫程序。选取15日龄乳猪、25~79日龄保育猪、产后15d及产后25d的母猪,采用猪蓝耳病毒ELISA抗体检测法,检测其母源抗体与免疫抗体水平,其中25日龄仔猪的PRRS母源抗体合格率仅41.3%,而接种高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗后14d具有可靠保护力。因此,该场仔猪的PRRS免疫程序需要调整,免疫接种时间可提前到15日龄。产后25d的断奶母猪即免疫高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗后146d免疫抗体合格率为100%,说明所选用的高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗免疫保护期达5个月。因此,采用母猪断奶时接种该疫苗的跟胎免疫法切实可行。     

高致病性猪蓝耳病弱毒疫苗与灭活疫苗的免疫效果评估试验

在相同饲养条件下,对35日龄仔猪分别使用高致病性猪蓝耳病弱毒疫苗与灭活疫苗进行免疫接种。在接种当天、接种后28d、58d分别检测高致病性猪蓝耳病免疫抗体水平。结果显示,使用弱毒疫苗免疫的试验猪,其高致病性猪蓝耳病抗体上升速度和抗体水平均优于使用灭活疫苗的试验猪。弱毒疫苗可在接种后21～28d产生免疫力,免疫期为4个月。猪繁殖与呼吸综合征流行地区应该首先考虑使用弱毒疫苗。     

不同免疫方式对仔猪免疫高致病性猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、猪口蹄疫三种疫苗抗体水平的影响

采用不同的免疫方式,对38头36~38日龄健康仔猪进行高致病性猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、猪口蹄疫3种疫苗进行免疫,分别于免疫前（0 d）和免疫后15、30、45、60、90 d采血进行这3种疫病抗体检测。结果发现效果最好的方法是先免疫猪瘟和口蹄疫疫苗14 d后再免疫高致病性猪繁殖与呼吸综合征疫苗;其次是猪瘟疫苗和高致病性猪繁殖与呼吸综合征疫苗分别释稀后混合为1针,口蹄疫疫苗另作1针同时分点注射;免疫效果最差的是高致病性猪繁殖与呼吸综合征、猪瘟、猪口蹄疫3种疫苗同时分3点注射。     

猪繁殖与呼吸综合征母源抗体和免疫抗体的消长规律研究

为制定科学的免疫程序,从根本上控制猪繁殖与呼吸综合征的发生,用ELISA诊断试剂盒分别对母猪、仔猪进行了母源抗体和免疫抗体检测。试验证明母猪在配种前15 d首免,怀孕2个月时二免,在下一次配种前15 d再免,如此按生产周期免疫可以抵抗猪繁殖与呼吸综合征的感染。在母猪产前1个月免疫猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗,所产仔猪母源抗体60日龄时为阴性,故45日龄左右对仔猪进行首免最佳,为确定仔猪首免日龄提供了理论依据。对40日龄仔猪免疫猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗后,仔猪58日龄时抗体S/P平均值最高,到160日龄育肥猪时抗体S/P平均值为阴性,这时不能抵抗猪繁殖与呼吸综合征的感染。对40日龄仔猪肌肉注射2 mL猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗,70日龄同剂量二免,85日龄时抗体S/P值平均值最高,到180日龄育肥猪时抗体S/P平均值仍为阳性,还能抵抗猪繁殖与呼吸综合征的感染,如果作为肉猪可以安全上市;作为后备母猪,在配种前进行免疫即可。非免疫母猪、仔猪对照组抗体均为阴性。通过试验基本上查明了猪繁殖与呼吸综合征母源抗体和免疫抗体的消长规律,为以后制定免疫程序提供了理论依据。     

2014—2018年甘肃省天水市育肥猪群3种重大疫病抗体水平监测

为掌握近年来甘肃省天水市育肥猪群重大动物疫病免疫效果,在2014—2018年春秋集中免疫后,在天水市7个县（区）随机选择72个规模场和76个散养村育肥猪群,采集血清1 328份,采取正向间接血凝试验（IHA）检测猪O型口蹄疫和猪瘟抗体,采取酶联免疫吸附试验（ELISA）检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征抗体。结果显示,2014—2018年天水市3种重大猪病抗体合格率持续保持在70%以上,达到了农业农村部规定的最低要求,其中规模猪场抗体水平普遍高于散养猪,但两种饲养环境下的高致病性猪繁殖与呼吸综合征抗体水平偏低且不太稳定。结果表明,天水市3种重大猪病的免疫工作落实到位,免疫保护率较高,能够有效防范此类重大疫病发生,但应加强高致病性猪繁殖与呼吸综合征的动态监测,重点抓好散养村的猪群免疫工作。     

高致病性猪蓝耳病弱毒疫苗与灭活苗免疫效果评估

相同饲养条件下的35日龄仔猪分别使用高致病性猪蓝耳病弱毒疫苗与灭活苗进行首免,并分别在首免当日、首免后28 d、首免后58 d检测高致病性猪蓝耳病免疫抗体水平。结果发现,使用弱毒疫苗免疫的猪高致病性猪蓝耳病抗体上升速度和抗体水平均优于使用灭活苗免疫猪。试验结果表明,高致病性猪蓝耳病弱毒疫苗可在接种后21-28 d产生免疫力,免疫期为4个月,猪繁殖与呼吸综合征流行的地区应首先考虑使用弱毒疫苗进行免疫。     

猪瘟高致病性猪蓝耳病和口蹄疫母源抗体的测定及3种疫苗首免日龄的确定

为了确定仔猪免疫猪瘟、高致病性猪蓝耳病和猪口蹄疫3种疫苗的最佳首免日龄,课题组通过酶联免疫吸附试验对米东区一养猪场刚刚生产的30头仔猪开展了3种猪病母源抗体持续期测定,结果表明:母猪的抗体水平和仔猪是否吃到初乳决定着仔猪的母源抗体持续的时间;在1~7日龄仔猪的母源抗体水平达到最高峰,7日龄后,母源抗体水平逐渐衰减,并与日龄呈负相关;猪瘟、高致病性猪蓝耳病和O型口蹄疫的母源抗体持续期分别为28~32 d、30~35 d和29~34 d,根据这3种猪病的母源抗体持续期,确定了这3种疫苗联合免疫的最佳首免日龄为28~35日龄。     

高致病性猪繁殖与呼吸综合征的调查报告

为了解2011年盘锦地区免疫猪群中高致病性猪繁殖与呼吸综合征的免疫效果和感染状况,采用ELISA和荧光定量RT-PCR方法分别检测了本年度1-12月采集到的2160份猪血清和120份猪组织样品。结果表明,受检的猪组织样品中均无高致病性猪繁殖与呼吸综合征抗原;大洼县、盘山县、兴隆台区、双台子区猪繁殖与呼吸综合征抗体阳性率分别为82.2%、81.1%、78.8%、81.1%;种猪场、商品代猪场、散养户的猪繁殖与呼吸综合征抗体阳性率分别为90%、81.3%、75%。从总体来看,2011年盘锦地区的猪繁殖与呼吸综合征免疫状况良好,无猪繁殖与呼吸综合征疫情发生。     

母猪猪瘟病毒抗体与仔猪母源抗体衰减规律的研究

为了研究仔猪猪瘟病毒(CSFV)母源抗体的衰减规律,本研究随机选择36头待产母猪,产后采血,选择每头母猪对应的仔猪连续采血至8周龄,分离血清,通过ELISA方法检测CSFV抗体阻断率,所测结果利用EXCEL拟合指数曲线,计算分析母猪CSFV抗体水平与仔猪母源抗体衰减规律。结果显示,36头母猪中母猪抗体阻断率80%以上6头,母猪抗体阻断率70%~79%的11头,母猪抗体阻断率60%~69%的8头,母猪抗体阻断率50%~59%的5头,母猪抗体阻断率49%以下的6头。3周龄仔猪抗体阻断率整体与母猪抗体阻断率相近且高度相关,相关系数为99%。母猪抗体阻断率在80%以上时,母源抗体对所产仔猪8周龄时仍然具有保护力;母猪抗体阻断率在70%~79%时,母源抗体对所产仔猪7周龄时不再具有保护力;母猪抗体阻断率在60%~69%时,母源抗体对所产仔猪5周龄时不再具有保护力;母猪抗体阻断率在50%~59%时,母源抗体对所产仔猪4周龄时不再具有保护力;母猪抗体阻断率49%以下时,母源抗体对所产仔猪3周龄时不再具有保护力。以上结果表明仔猪母源CSFV抗体随着仔猪周龄的增加逐渐衰减,由试验得出仔猪猪瘟疫苗首免日龄的计算公式:y=1.19x-46.55(x为母猪CSFV抗体阻断率,y为首免日龄)。因此,母猪抗体阻断率在80%以上时,仔猪母源抗体在60日龄不再具有保护力,仔猪猪瘟疫苗首免为56日龄;母猪抗体阻断率在70%~79%时,母源抗体对仔猪的保护持续到50日龄,仔猪猪瘟疫苗首免为42日龄;母猪抗体阻断率在60%~69%时和50%~59%时,母源抗体对仔猪的保护持续至36日龄和29日龄,仔猪猪瘟疫苗首免分别为28日龄和21日龄。本研究中所得母猪CSFV抗体水平计算母源抗体衰减变化,为选择母猪首免日龄,提高仔猪猪瘟疫苗免疫效果提供了科学依据。     

仔猪猪瘟母源抗体消长规律

采用IDEXX公司阻断ELISA检测试剂盒,对仔猪0、1、4、7、10、14、20、30日龄的猪瘟母源抗体进行检测。结果表明哺乳前仔猪抗体水平为0,第1天抗体水平达到最高,之后缓慢下降。20日龄断乳时抗体水平有明显下降,但平均抗体水平还在25.9之上,30日龄平均抗体水平为24.3,由此推算仔猪猪瘟母源抗体的半衰期为6.8 d。     

不同猪瘟免疫程序对仔猪母源抗体水平的影响

本研究采用猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒,对应用不同猪瘟免疫程序的猪场进行仔猪母源抗体水平检测。结果显示,在20日龄以内仔猪母源抗体的OD630平均值和阳性率均维持较高的水平,仔猪能够获得较好的母源抗体保护,避免猪瘟病毒的早期感染。随着日龄增长,仔猪母源抗体逐渐下降,尤其在断奶后一周(30~40日龄)下降趋势最为显著。本研究可为本地区规模化猪场猪瘟免疫程序的制定尤其是仔猪首免日龄的确定提供参考依据。     

猪瘟母源抗体衰减及保护水平分析

为分析仔猪体内猪瘟母源抗体的衰减规律及母源抗体保护水平,测定了断奶时母猪和仔猪抗体水平,并监测仔猪母源抗体水平至81日龄;分别对12头81日龄仔猪（来自5头母猪）和25头35日龄仔猪（来自5头母猪）进行了攻毒试验,并用RT—nPCR进行了跟踪检测,对7头攻毒耐过猪用兔体中和法测定了中和效价。结果表明,母猪抗体水平不均衡会导致仔猪群体母源抗体水平不均衡;仔猪群体抗体到60日龄时仍然有67％（12／18）的个体用ELISA检测阻断率在50％以上：81日龄攻毒组有3头（3／12）耐过,35日龄攻毒组能全部耐过（25／25）,但有2头（2／25）在攻毒27d后仍然呈PCR阳性,此时中和抗体水平从低于1：4到1：16不等,推测中和抗体水平1：8～1：16是母源抗体保护的临界线。     

Transfer of maternal antibody against group A rotavirus from sows to piglets and serological responses following natural infection

An enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was developed for the measurement of antirotaviral antibody in sera and faeces from pigs and used to study the dynamics of antirotaviral antibody responses in three cohorts of pigs. Piglets acquired antirotaviral antibody by sucking their dams soon after birth. Antirotaviral antibodies of IgA and IgG classes were detected in both colostrum and milk of all sows tested but IgM class antibodies were not. The antibody levels in colostrum were eight to 32 times higher than those in milk which was collected 18 days post partum. The levels of antibody in piglets' sera were comparable to those in colostrum but declined quickly to low levels by one month old. Maternal antibody was also detected in the faeces of piglets up to 18 days old. Natural rotavirus infection occurred in each of these cohorts when the geometric mean ELISA titres of maternal antibody in their sera declined to 1/1600 (by days 21, 25 and 30 for cohorts 1, 2 and 3, respectively). However, a positive correlation was not obtained between the levels of antirotaviral antibody and protection in individual litters within each of the cohort groups. In each of the cohorts, rotavirus infection usually occurred in one or two piglets first and then spread to other piglets in the same cohort. It is therefore suggested that maternally derived antibody is protective against rotavirus infection in piglets only for the first one or two weeks. Following natural infection with rotavirus, increases in serum antibodies were detected in two of the three cohorts by 20 to 30 days after the average time of onset of faecal shedding of virus.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)     

猪伪狂犬病基因缺失活疫苗(SA215)免疫母猪后仔猪母源抗体消长规律及首免日龄

在研究猪伪狂犬病基因缺失活疫苗 (SA 2 15 )免疫接种母猪所产仔猪母源抗体消长规律 ,并绘制其消长曲线的基础上 ,确定了仔猪首免日龄。对免疫母猪所产仔猪于不同日龄进行抗体检测结果表明 ,全部仔猪均获得了高水平母源抗体 ,7日龄高达 2 8.56 ,6 0日龄降至 2 2 .56 ;随着日龄增长 ,抗体水平呈逐渐降低趋势 ,2次大幅下降出现在 14～ 2 1日龄、30～ 6 0日龄。对免疫母猪所产仔猪分别于不同日龄免疫接种 1头份剂量疫苗 (SA2 15 ) ,7d后采血进行抗体检测 ,结果表明 ,7日龄、14日龄、2 1日龄免疫接种仔猪均未引起明显抗体水平升高 ,反而较同期仔猪略有降低 ,30日龄和 6 0日龄免疫接种仔猪则出现了抗体水平的升高 ,其中以 6 0日龄仔猪升高幅度为大。结合母源抗体消长规律 ,确定猪伪狂犬病基因缺失活疫苗 (SA2 15 )免疫母猪所产仔猪的首免日龄为 30日龄     

妊娠母猪免疫高致病性猪繁殖与呼吸综合征疫苗对仔猪免疫功能的影响

规模化猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）呈持续性感染,给养猪业造成的损失最为严重。部分规模化猪场未实施切实的猪繁殖与呼吸综合征疫苗免疫,呈慢性和潜伏感染,作者现场对妊娠母猪接种高致病性猪繁殖与呼吸综合征（HP-PRRS）减毒活疫苗（TJM-F92株）,旨在从体液免疫、细胞免疫、非特异性免疫功能角度探讨妊娠母猪接种疫苗后对仔猪免疫功能的影响。选取妊娠60 d母猪随机分为A、B 2组,A组母猪接种HP-PRRS减毒活疫苗（TJM-F92株）,B组母猪接种等量生理盐水,2组所产仔猪于10、20、30日龄时检测PRRSV、猪瘟病毒（CSFV）、猪伪狂犬病病毒（PRV） 母源抗体,以MTT法测定外周血T、B淋巴细胞转化率、以琼脂平板法测定血清溶菌酶含量、以Griess试剂法测定NO含量。试验结果表明,妊娠母猪免疫HP-PRRS减毒活疫苗（TJM-F92株）后,其所产10日龄仔猪PRRSV母源抗体水平显著高于对照组仔猪（P＜0.05）,仔猪CSFV阻断抗体极显著增高（P＜0.01）,20日龄仔猪PRV感染抗体显著下降（P＜0.05）;免疫组和对照组所产仔猪的T、B淋巴细胞转化率及NO、溶菌酶含量均无显著差异（P＞0.05）。提示,妊娠母猪免疫HP-PRRS减毒活疫苗（TJM-F92株）,对所产仔猪非特异性免疫功能和T、B免疫功能均无免疫抑制作用,仔猪抗PRRSV母源抗体、抗CSFV阻断抗体均显著增高且PRV感染抗体降低。     

Evaluation of vaccine-induced maternal immunity against classical swine fever

The vaccine-induced maternal immunity against classical swine fever (CSF) was investigated in this study. Eight sows were vaccinated with the Chinese strain of classical swine fever virus (CSFV). The length of time between vaccination and farrowing was 167-217 days. Milk samples from the front, middle and back udder sections and blood samples were taken from the sows on days 3 and 14 after farrowing. Blood samples were obtained from the piglets at the age of 3, 6 and 10 weeks. The antibody level of the milk was examined by ELISA, and that of blood samples by the virus neutralization (VN) test as well. In all 3-week-old piglets and in 80% of the 6-week-old animals the neutralizing antibody level reached the titre of 1:40. In none of the 10-week-old piglets did the titre exceed the value of 1:20, but in about 25% of the piglets it reached 1:20; the half of these piglets came from two litters. In none of the piglets did the antibody level reach the negative threshold in the ELISA test during the study. No significant differences were found between the udder sections in milk antibody level by ELISA.     

Tissue Expression Profile and Differential Expression of LTβR Gene in Sutai Piglets of Different Ages

Dynamic changes of LTβR expression levels in 11 tissues (heart, liver, spleen, lung, kidney, stomach, muscle, thymus, lymph node, duodenum and jejunum) of Sutai piglets ranging from newborn to post-weaning days 8, 18, 30, and 35 were compared and analyzed by the Real-time PCR method, which aimed to provide theoretical basis for further investigate the relationship between LTβR gene and pathogenicity of E.coli F18.The results revealed that the LTβR expression levels were higher in the liver, spleen, lung, kidney, stomach, lymph node, duodenum and jejunum, and showed obvious age-dependent expression differentiation.The LTβR expression levels in the lymph node, duodenum, and jejunum were extremely significant higher in 8 days old piglets than in the other age stages (P<0.01), and the expression levels were extremely significantly higher in the lungs of 8 days old piglets than in 35 days old piglets (P<0.01) and significantly higher than 30 days old piglets (P<0.05).In the liver tissue, the expression level was extremely significant higher in 35 days old piglets than in other age stages (P<0.01).In the stomach tissue, the expression level was significantly higher in 35 days old piglets than in 18 days old piglets (P<0.05).The results speculated that intestinal immune barrier of piglets formed rapidly around 8 days old and the higher LTβR expression could contribute to the resistance to E.coli F18.     

不同日龄苏太仔猪LTβR基因组织表达谱及发育性表达规律分析

试验旨在探讨LTβR基因在仔猪出生至断奶期间的mRNA表达变化,为进一步研究该基因与F18大肠杆菌致病的相关性提供理论依据。本试验选取从初生到断奶的4个日龄(8、18、30和35日龄)苏太仔猪各4头,利用实时荧光定量PCR方法分别比较分析了LTβR基因在各个体11个组织(心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胃、肌肉、胸腺、淋巴结、十二指肠及空肠)间的表达规律。结果表明,LTβR基因在肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胃、淋巴结、十二指肠及空肠组织中呈现较高水平的表达,并且表现出明显的发育性表达差异。LTβR基因在8日龄仔猪淋巴、十二指肠和空肠组织中的表达极显著高于其他日龄(P<0.01);在8日龄仔猪肺脏组织中的表达极显著高于35日龄(P<0.01),且显著高于30日龄(P<0.05);在35日龄仔猪肝脏组织中的表达极显著高于其他日龄(P<0.01);在35日龄仔猪胃组织中的表达显著高于18日龄(P<0.05)。由此推测,8日龄左右为仔猪肠道免疫屏障快速形成期,LTβR基因的较高表达可能有利于仔猪对F18大肠杆菌抗性。