3种基础培养液对昆明小鼠ESC生长的影响

以昆明小鼠的囊胚及胚胎干细胞为材料,用组成成份清楚的培养体系,研究不同的基础培养液(h-DMEM,DMEM/F12,Knockout DMEM)对昆明小鼠胚胎干细胞生长的影响。分别将小鼠囊胚置于以上3种培养液为基础的培养液(M1、M2、M3)中,4 d后观察原代集落形成率;取正常培养较小的胚胎干细胞集落,分别接种在上述培养液中培养观察;单细胞传代并观察结果;以碱性磷酸酶染色及OCT-4免疫荧光染色鉴定。3种基础培养基中原代集落形成率分别为100%,100%,96.3%;Knockout DMEM与DMEM/F12中的胚胎干细胞增殖的速度远快于h-DMEM中的增殖速度;单细胞传代的昆明小鼠胚胎干细胞都能形成集落;经AKP染色和OCT-4免疫荧光染色,证明3种培养体系中的胚胎干细胞均符合胚胎干细胞的特性。Knockout DMEM与DMEM/F12较DMEM更有利于胚胎干细胞的生长。     

丹皮、泽泻混和物对黄粉虫幼虫体内蛋白酶和乙酰胆碱酯酶活性的影响

以中药材丹皮、泽泻及其混和物为饲料对黄粉虫幼虫体内蛋白酶和乙酰胆碱酯酶活性的影响进行了研究结果表明:丹皮能显著抑制幼虫体内的蛋白酶活性,在处理5d后,也抑制幼虫的乙酰胆碱酯酶活性;而丹皮泽泻饮片混和物与泽泻相比,幼虫体内蛋白酶和乙酰胆碱酯酶活性没有受到显著影响,但与面粉相比,在一定时间内幼虫的蛋白酶活性受到了影响,说明丹皮影响了幼虫对蛋白质的水解作用,随着时间的延长对幼虫的神经传导也有影响;而混和物在一定时间内可影响幼虫对蛋白质的水解作用而对幼虫的神经传导没有显著影响     

不同培养液对昆明小鼠体外受精率及早期胚胎体外发育的影响

在TYH受精液中添加促卵泡素（FSH）和苯甲酸雌二醇（E2）,检测不同浓度的FSH和E2对昆明小鼠的体外受精率的影响;检测在M16、CZB两种培养液中添加胎牛血清（FCS）与否对昆明小鼠早期胚胎体外发育的影响．结果表明：在．rYH中添加1．0IU／mL FSH,受精率和2-细胞胚率显著高于对照组;在TYH中添加0．1μg／mL E2,受精率和2-细胞胚率也显著高于对照组．在CZB中添加体积分数为10％FCS,可显著减少2一细胞期体外发育阻断,并显著提高小鼠胚胎体外发育的囊胚率,可见,以TYH添加1．0IU／mL FSH和0．1μg／mL E2为受精液,以含体积分数为10％FCS的CZB为胚胎培养液,小鼠胚胎可获得较高的囊胚率．葡萄糖并不是小鼠胚胎形成囊胚所必需的．     

青翅蚁形隐翅虫毒素粗提物对菜青虫3种酶活性的影响

[目的]研究青翅蚁形隐翅虫毒素的杀虫机制,为研制开发该杀虫剂提供理论依据。[方法]采用青翅蚁形隐翅虫毒素粗提物饲喂和点滴菜青虫,测定和分析了虫体组织中肠酯酶、谷-丙转氨酶、乙酰胆碱酯酶和乙酰胆碱的变化情况。[结果]饲喂夹毒叶片的3龄菜青虫在48h后中肠酯酶含量下降明显,酶活性略受抑制。经毒素点滴处理的3龄菜青虫谷-丙转氨酶含量24、48h后均降低,24、48h后酶比活力均呈现增强趋势;经毒素粗提物处理的菜青虫24、48h后乙酰胆碱酯酶含量变化不大,但均有明显的降低,酶比活力增强。毒素粗提物对乙酰胆碱有抑制作用。[结论]青翅蚁形隐翅虫毒素粗提物对菜青虫幼虫具有较好的抑制作用。     

主动免疫血管活性肠肽对泰和鸡繁殖性能的影响

５６周龄的母泰和鸡分为３组，第１组（ｎ＝３５）用血管活性肠肽（ＶＩＰ）类似物与牛血清白蛋白（ＢＳＡ）的偶联物进行免疫，第２组（ｎ＝３３）用矿油佐剂与水的乳化物进行注射，第３组（ｎ＝３６）作空白对照。试验结果显示：与对照组相比，免疫组日抱窝率明显减少，产蛋高峰后的产蛋率明显高于对照组，且各组间蛋的受精率和孵化率无明显差异。第１、２组血浆ＶＩＰ类似物抗体及催乳素（ＰＲＬ）水平的酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测结果显示：第１组二免后ＶＩＰ类似物抗体水平最高，Ｐ／Ｎ达４９３±１１６，而第２组的检测结果为阴性；第１组免疫后的血浆ＰＲＬ水平明显低于同期的第２组。以上结果表明，在泰和鸡中主动免疫ＶＩＰ可以降低血浆的ＰＲＬ水平，减少抱窝率，提高产蛋率。     

脱色素玉米活性肽对小鼠抗运动性疲劳的影响

以小白鼠为试验动物,建立小鼠疲劳模型,探讨脱色素玉米活性肽缓解疲劳的细胞生化机制.根据脱色素活性肽的药理作用,采用运动训练学方法研究了脱色素玉米活性肽对小鼠耐力及抗疲劳能力的影响.结果表明,脱色素玉米活性肽高剂量组(0.075 g/ml)能显著增强小鼠游泳时间、延长爬杆时间及常压耐缺氧时间(P<0.01),增加肝糖原、肌糖原含量(P<0.01),降低血清和肝组织中血清尿素氮(BUN)浓度、乳酸脱氢酶(LDH)活力(P<0.01).说明脱色素玉米活性肽对增强机体负荷的适应能力、抵抗疲劳产生和加速消除疲劳等方面具有明显作用.     

子宫和卵巢切除对昆明小鼠空间记忆功能的影响

试验旨在研究切除卵巢和子宫后昆明小鼠雌激素变化以及对空间记忆功能的影响.选择年龄一致、健康的雌性昆明小鼠18只,随机分为3组,每组6只,分别为对照组(试验1组),卵巢切除组(试验2组),子宫卵巢切除组(试验3组).采用Morris水迷宫图像自动采集和软件分析系统记录逃避潜伏期,游泳轨迹,初始角度,圆台穿越次数等,采用双...     

不同培养系统和传代方法对昆明白小鼠原始生殖细胞分离培养的影响

[目的]寻求适合昆明白小鼠EG细胞的培养系统和传代方法。[方法]常规方法从昆明白小鼠原始生殖细胞中分离EG细胞,用不同培养系统(EG细胞基础培养液,RH-CM,EG细胞基础培养液+MEF)及不同传代方法(机械法,酶消化法,连同饲养层消化法),研究对昆明白小鼠EG细胞分离克隆的影响。[结果]以RH-CM作为培养基效果最好,RH-CM能够更好地促进EG细胞贴壁增殖和集落的形成,有效地维持EG细胞未分化状态;酶消化法和连同饲养层消化法均能获得较高的克隆形成率。[结论]RH-CM和连同饲养层消化法可分别作为昆明白小鼠EG细胞的培养系统和传代方法。     

垂柳叶醇提物对小鼠毛发生长的影响

采用松香石蜡脱毛法,研究垂柳叶醇提物对小鼠毛发生长的促进作用,结果表明,垂柳叶醇提物对毛发有较明显的生长促进作用,醇提取物乙酸乙酯萃取物次之;而通过注射环磷酰胺将经松香石蜡脱毛后的小鼠诱导为化疗后损伤性脱毛模型,以此模型来研究在环磷酰胺所致小鼠化疗脱毛的情况下垂柳叶对其的预防作用,结果表明,垂柳叶醇提取物能够对减少对毛发的掉落,并能够在一定的条件下很好的修复毛囊,根据有关试验对比显示确实存在很大的差异。     

苏云金杆菌和灭幼脲混剂对美国白蛾幼虫2种酶活性的影响

通过室内外毒力测定和防治试验发现,苏云金杆菌（Bt）+灭幼脲混剂对美国白蛾2 ~ 3代4龄幼虫有较强增效作用,在此基础上分析该混剂对白蛾4龄幼虫体内中肠几丁质酶和乙酰胆碱脂酶（AChE）活力的影响。结果表明：5种浓度的Bt、灭幼脲及其混剂对白蛾4龄幼虫体内中肠几丁质酶活力的影响随处理浓度增高和处理时间延长抑制作用越明显,且差异极显著,说明Bt+灭幼脲混剂均有抑制白蛾4龄幼虫中肠几丁质酶活力的作用,是该混剂对白蛾4龄幼虫提高毒杀效果的原因;5种浓度Bt+灭幼脲及其混剂处理对白蛾4龄幼虫体壁AChE活性的影响随处理时间的增加有先升高后降低的趋势,36~96 h具诱导幼虫体壁AChE活性逐渐增强的趋势,96 h后活性明显减弱, AChE活性减低后白蛾4龄幼虫很快死亡,对AChE活性抑制率为2013%~9000%,为Bt+灭幼脲混剂增效关键作用的另一个原因。     

微塑料对小鼠生长和小肠结构的影响

为了探究微塑料对生物体的生长特性及肠道结构的影响,选取微塑料聚乙烯(PE)和聚苯乙烯(PS)作为原料,分别按0.3%(3 g kg-1鼠粮)、3%(30 g kg-1鼠粮)两种浓度混合添加于昆白小鼠日粮。饲喂期间记录小鼠的体重、饮食行为,27 d后进行剖检并采集小肠(十二指肠、空肠、回肠)制成石蜡切片观察显微结构。结果表明:对照组与微塑料添加组小鼠饮食与精神状态均正常,对照组小鼠体重在整个饲喂周期内逐渐增加,微塑料添加组在饲喂的前期体重增加,但在后续大部分小鼠体重增长停滞,甚至下降。不论是PE或PS微塑料添加组,整个小鼠体重增长均显著慢于对照组(P<0.01),并呈现浓度依赖性,但两种微塑料相比没有显著差异。肠道显微结构表明,微塑料添加组小鼠出现小肠绒毛肿胀、结构破坏、杯状细胞减少、黏膜下层增生等现象。小鼠摄入微塑料导致小肠显微结构破坏,生长减慢。     

秦香止泻方对小鼠小肠推进功能及镇痛作用的机制研究

目的探讨秦香止泻方对正常小鼠小肠推进功能及冰醋酸致痛的镇痛作用。方法 (1)将40只SPF级昆明小鼠随机分为空白对照组、秦香止泻方低、中、高剂量组,分别给药后灌服碳末,处死动物观察小肠碳末推进率:(2)将50只SPF级昆明小鼠分组给药方法同(1),给药后腹腔注射2 mL冰醋酸,观察第1次扭体时间和30 min内各组小鼠扭体次数。结果 (1)秦香止泻方低、中、高剂量组与空白对照组组比较,小肠推进率基本相同,差异无统计学意义(P>0.05);(2)秦香止泻方低、中、高剂量组、肠康片组与空白对照组比较,疼痛潜伏时间均较空白对照组延长,差异具有统计学意义(P<0.05);扭体次数相比差异具有统计学意义(P<0.01);秦香止泻方中、高剂量组与肠康片组比较,疼痛潜伏时间延长,扭体次数亦减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论秦香止泻方对正常小鼠小肠推进功能无明显抑制及推进作用;秦香止泻方低、中、高剂量组与肠康片组比较,扭体次数明显减少,提示秦香止泻方具有较好的镇痛作用。 更多还原     

诃子及其炮制品对小鼠小肠5-羟色胺分泌的影响

为探究诃子的2种藏医特殊炮制品(茜草制诃子和白狼毒制诃子)对小鼠小肠5-羟色胺(5-hydrox-ytryptamine,5-HT)免疫反应(immunoreactive,IR)细胞分泌活动的影响,采用免疫组织化学方法对小肠内5-HT的细胞定位及蛋白表达进行研究。结果表明,5-HT在小肠各段均有分布,其蛋白表达量从十二指肠到回肠逐渐降低。给药28 d后,茜草制诃子(1.0、4.0 g·kg^-1)、白狼毒制诃子(1.0、4.0 g·kg^-1)和原药诃子(4.0 g·kg^-1)处理组小鼠小肠各段5-HT蛋白表达量均显著减少。药效表现为茜草制诃子>白狼毒制诃子>原药诃子,且4.0 g·kg^-1剂量的效果优于1.0 g·kg^-1。5-HT-IR细胞形态多样,主要呈锥体形、椭圆形、梭形等。对照组5-HT-IR细胞主要分布在肠腺上皮和肠固有膜,而试验组在肠黏膜上皮细胞之间和肠腺上皮分布多一些。由此可知,诃子及其白狼毒制、茜草制炮制品能不同程度地抑制小肠5-HT的分泌,其中以4.0 g·kg^-1的茜草制诃子效果最好。     

牛磺酸对断奶小鼠小肠发育的影响

为研究牛磺酸对断奶小鼠小肠结构和功能的影响,采用单因子设计,48只体重为(12±2)g的昆明小鼠随机分为6组,每组8只,雌雄各半,分为对照组和试验组,对照组饮用普通自来水,试验组在饮水中添加2.5、5.0、10.0、20.0和40.0g/L牛磺酸,试验期31d。观察牛磺酸对小肠和肝脏重量,空肠绒毛形态、细胞凋亡、小肠核酸和蛋白质含量,以及血清指标的影响。结果表明:1)饮水中添加牛磺酸可显著提高小鼠小肠绝对重量和相对重量(P0.05),且呈现二次曲线关系(PQ0.05);可线性提高小肠绝对长度、肝脏绝对重量和相对重量(PL0.05)。2)2.5、5.0和10.0g/L组与对照组相比,显著降低空肠肠腺(肠隐窝)深度(P0.05);回肠Prot/DNA随牛磺酸添加量提高而线性提高(PL0.05)。3)与对照组比较,5.0g/L添加组的细胞凋亡指数显著降低(P0.05),但40g/L添加组有升高的趋势。4)随着牛磺酸添加量的提高,回肠MDA含量有降低的趋势(P=0.07),空肠GSHPx呈现先升高再降低的二次曲线关系(PQ0.05),但不影响血清IGF-I水平。研究结果表明,饮水添加中低浓度的牛磺酸可提高小鼠小肠长度和重量,降低肠隐窝深度,减少细胞凋亡。     

幼龄小鼠小肠组织内参基因的选择

选择B2 M、ACTB、GAPDH、SDHA、HPRT1和ARBP共6个内参基因,研究其在幼龄小鼠小肠组织内的表达情况.结果表明:6个内参基因均可获得特异性扩增产物;经geNorm程序和NormFinder分析,6个内参基因稳定度由高到低为SDHA=HRPT1>ARBP>ACTB>GAPDH>B2 M;基因表达的稳定值分别为0.006(SDHA)、0.006(HRPT1)、0.007(ARBP)、0.018(ACTB)、0.029(GAPDH)、0.111(B2 M),最终筛选出SDHA和HRPT1 2个内参基因适合用于校正目的基因的表达.     

接种不同剂量柔嫩艾美耳球虫对雏鸡小肠组织结构的影响

20日龄无球虫感染的雏鸡60羽,随机分为对照组和试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组,各试验组分别经口接种Eimeria tenella卵囊0.5×104、1.0×104、2.0×104、4.0×104和8.0×104个·只-1,对照组接种等体积生理盐水;接种7 d后.各试验组鸡全部宰杀并立即解剖取十二指肠、空肠和回肠,Bouin液固定,常规石蜡切片,HE染色,显微观察与摄影,研究接种不同剂量E.tenella卵囊对雏鸡小肠组织结构的影响.结果显示,与对照组相比较,各试验组小肠各段可见不同程度的病理组织学变化,其病理变化随E.tenella卵囊接种剂量的增大而趋于严重,其中试验V组空肠和十二指肠黏膜固有层和黏膜下层内常可见大量聚集的裂殖体.比较观察发现,空肠的病理损伤最为明显,其次为十二指肠,回肠的病理损伤最轻.结果表明,E. tenella在雏鸡小肠内寄生和损伤的主要部位是空肠,其次是十二指肠,最后为回肠,并且其对小肠各段黏膜组织结构的损伤程度与接种的E. tenella卵囊数量有明显相关性.     

不同类型猪小肠组织差异EST的鉴定及其SNPs分析

采用DDRT-PCR技术,对中国地方猪种和杜长大（大白×长白×杜洛克）猪的小肠组织进行差异EST分析。试验提取了地方猪和杜长大猪小肠组织的总mRNA,反转录成cDNA,利用3条锚定引物和6条随机引物组成18个引物对其进行PCR扩增,对特异性差异条带进行测序分析和鉴定其EST;针对EST序列特征,在不同产脂能力猪种中开展SNPs分析。结果表明,18个引物对共得到180多条EST序列,其中地方猪种个体间差异EST为6条,杜长大猪个体间差异EST为12条,地方猪与杜长大猪间差异EST为8条。选取具有代表性的3条种群间差异EST进行序列研究,结果显示,G24-300在种群之间的表达量存在明显的差异,是在杜长大猪群中高表达的EST;G01-360具有丰富的SNPs,并且其基因频率分布在不同类型猪群中存在明显的差异。     

热应激诱导大鼠小肠昼夜节律基因差异表达的研究

采用石蜡切片H.E染色观察热应激大鼠小肠形态学变化,利用Realtime-PCR技术对小肠中昼夜节律相关基因的表达进行研究。结果:大鼠小肠上皮出现严重损伤,肠黏膜绒毛顶端上皮细胞脱落,固有层裸露;热应激导致Per2和DBP基因瞬时表达极大升高,节律性受到严重影响,Bmal1基因瞬时表达差异不明显,其mRNA表达量峰值后移。     

α菠菜甾醇对小鼠小肠段药物转运体P-gp和PEPT1表达的影响

以酒石酸泰乐菌素为底药,探讨α 菠菜甾醇对小鼠小肠段药物转运体P gp和PEPT1表达的影响。48只小鼠分为4组：α 菠菜甾醇组,酒石酸泰乐菌素组,α 菠菜甾醇和酒石酸泰乐菌素混合组,生理盐水对照组。每组按0.2 mL·10 g-1体质量的剂量每天灌胃一次,共灌胃5 d,分别在1,3,5 d后处死1批采样。采用免疫组化的方法测定1,3,5 d的小鼠肠道上P gp和PEPT1的表达。试验结果表明,α 菠菜甾醇组和混合组相对于对照组外排性药物转运体P gp表达减少,而摄取性药物转运体PEPT1表达增多;酒石酸泰乐菌素组的外排性药物转运体P gp表达增多,摄取性药物转运体PEPT1表达减少;且都随着用药时间的延长差异增大。表明α 菠菜甾醇具有抑制药物转运体P gp表达和促进药物转运体PEPT1表达的作用。     

鸡肠道组织中血管活性肠肽的分布特点

为探讨鸡肠道组织中肽能神经支配的途径及其功能,运用免疫组织化学超敏SP法,对不同生长阶段鸡肠道中血管活性肠肽(Vasoactive intestinal peptide,VIP)的分布特点进行了研究。结果显示,肠壁中VIP的表达范围较为广泛,涉及黏膜上皮和固有层、肌层和外膜,尤以固有层和肌层最为典型;随着日龄增加,黏膜上皮间VIP阳性细胞数量逐渐增多;从肠道不同部位的分布来看,十二指肠中VIP的表达强于同时期其他部位,空肠中的表达次之,回肠和盲肠的表达相对较弱。黏膜固有层和肌层一直分布有染色较深的VIP阳性神经纤维,呈串珠状、细线状或膨体状。提示鸡肠道是产生VIP的又一个重要部位,肠道中的VIP可参与鸡免疫器官的功能调节,并作为一种信息分子介导神经内分泌系统和黏膜免疫系统之间的相互作用。