不同荧光染料对苜蓿原生质体染色效果的研究

以紫花苜蓿品种甘农4号(Madicago sativa L.‘Gannong No. 4’)愈伤组织酶解的原生质体为材料,采用FDA、罗丹明B、罗丹明6G、吖啶橙和DAPI共5种荧光染料对原生质体进行染色效果比较,以期为原生质体活力测定、细胞核计数及原生质体融合过程的观察提供参考。结果表明:FDA、罗丹明B、罗丹明6G和吖啶橙均可使紫花苜蓿原生质体清晰染色,可用于细胞融合时亲本原生质体的标识。FDA是检测原生质体活力的理想染料;吖啶橙和DAPI可对细胞核进行特异性染色,可用于融合时细胞核的观察和计数,前者还可用于检测融合细胞的活力。通过对异源融合体的鉴别及其活力的测定,为摸索融合条件和融合细胞的培养提供了理论依据。     

Yb~(3+)/Tm~(3+)共掺Y_2(MoO_4)_3的上转换发光

采用水热法制备了Yb~(3+)/Tm~(3+)共掺Y2(Mo O _4)_3系列上转换发光粉。由于Tm~(3+)在980nm附近没有吸收,单掺Tm~(3+)的样品观测不到任何发射。引入Yb~(3+)后,借助Yb~(3+)对980nm红外光的吸收和Yb~(3+)到Tm~(3+)的能量传递,在可将光区观察到源自Tm~(3+)的蓝光和红光。这两个波段的发射随着Yb~(3+)和Tm~(3+)的浓度增加均呈现先增强后减弱的变化规律,8%和0.5%对应Yb~(3+)和Tm~(3+)的最佳掺杂浓度。上转换发射的功率关系研究表明,蓝、红光均为三光子过程,因此二者的产生过程为连续三步Yb~(3+)到Tm~(3+)的能量传递。     

NaCeF_4:Tb~(3+)纳米棒的溶剂热合成及光学性质研究

本文采用溶剂热法合成了单分散的六角相NaCeF_4:Tb~(3+)纳米棒荧光材料并对其结构、形貌、尺寸及光学性质进行了表征。研究结果表明,氟化铵的用量对产物的结构、形貌和尺寸起着非常重要的作用,F-的选择性吸附是获得不同长径比产物的主要原因。同时晶体的各向异性生长显著改善了Ce~(3+)周围的晶场环境,影响了Ce~(3+)向Tb~(3+)的能量传递路径。     

β-NaGdF_4:Ln~(3+)纳米材料的下转换发光性质研究

采用水热法合成了β-NaGdF_4纳米晶体,研究了β-NaGdF_4:Ln~(3+)纳米材料的下转换发光性质。     

血清学诊断的免疫标记技术

1荧光抗体技术某种物质当受到短波光线如紫外线激发后,能放出波长比激发光长的可见光称为荧光,染料经激发后放出荧光称为荧光染料,将荧光染料连接到提纯的抗体分子上,此种抗体称为荧光抗体。荧光抗体与相应的抗原结合后,形成带有荧光的抗原抗体复合物,可在荧光显微镜下检测,常用的荧光染料有异硫氰酸荧光黄和异硫氰酸罗丹明B等。     

丝素缺失突变型家蚕添食罗丹明B制备彩色荧光丝胶的研究

具有高生物相容性和生物活性的荧光材料在创伤修复、药物递送、传感器、生物测定与成像等许多领域因便于示踪或实时监测而备受青睐。对丝素缺失突变型家蚕添食荧光染料罗丹明B,系统地研究添食罗丹明B对家蚕生理指标和茧质的影响，同时研究罗丹明B在家蚕体内的转移，以及添食后丝腺中丝胶液和蚕茧中罗丹明B的含量，制备彩色荧光丝胶纤维支架并分析其细胞相容性。结果表明，添食罗丹明B后家蚕幼虫体色、蚕茧或纤维支架均呈粉红色，随着罗丹明B添加量的增加，罗丹明B在家蚕体内存留量也随之提高，6 mg/mL罗丹明B处理组家蚕丝腺中丝胶液和蚕茧中的罗丹明B含量分别为0.011 mg/mL和0.166 mg/g;添食罗丹明B对家蚕的生命力和茧质均有显著影响，随着罗丹明B添加量的增加，家蚕的生命力和茧质均呈现下降趋势；添食获得的含有罗丹明B的蚕茧或纤维支架具有强荧光特性；添食罗丹明B可获得平整、均一的彩色荧光丝胶纤维支架，且该荧光支架无细胞毒性。综上，对丝素缺失突变型家蚕添食荧光色素是获得新型荧光丝胶材料的可行性途径。     

LaF_3:Yb~(3+)/Er~(3+)纳米材料的制备及发光性质研究

采用离子热法制备了LaF_3:Yb~(3+)/Er~(3+)纳米材料,研究了LaF_3:Yb~(3+)/Er~(3+)纳米材料的上转换发光性质。     

药物担载体系NaYF_4:Ce~(3+)/Tb~(3+)@mSiO_2球的制备

采用高温溶剂热法制备了NaYF_4:Ce~(3+)/Tb~(3+)球形纳米粒子,并成功合成了NaYF_4:Ce~(3+)/Tb~(3+)@mSiO_2纳米球。     

用于检测水产品中己烯雌酚含量的电致化学发光方法的建立

为了建立一种快速、灵敏地检测己烯雌酚(DES)的方法,试验采用胶体化学方法合成了具有强且稳定的电致化学发光(ECL)的Cd S纳米晶,在该纳米晶膜上构建了一种快速、灵敏地检测己烯雌酚的电致化学发光传感平台。结果表明:该传感平台对己烯雌酚的检测线性范围为1~50 pg/m L;当信噪比为3时,电致化学发光免疫传感平台的检测限为1 pg/m L,远远低于水产品的行业标准。将该传感器用于淡水鱼样品的检测,黄鳝与鲫鱼中几乎不含有己烯雌酚,而鲢鱼中有极微量的己烯雌酚残留(5.0 pg/m L)。     

NaYF_4:Yb~(3+),Er~(3+)纳米晶的溶剂热制备及光学性质研究

本文采用溶剂热法制备了Yb~(3+)和Er~(3+)共掺杂NaYF_4上转换发光材料,并对材料的结构、尺寸、形貌及上转换发光性质进行了表征。研究结果表明F-/Y~(3+)的比例对材料结构,形貌及尺寸有着重要影响,较高的F-浓度有利于六角相NaYF_4的生成。由于较小尺寸材料中表面吸附大声子振动基团的增加,增加了~4I_(11/2)-~4I_(13/2)无辐射驰豫速率,红光能级~4F_(9/2)得到有效布居,红光比例相对增强。     

白色念珠菌和鼠伤寒沙门氏菌的荧光标记及其对细胞粘附作用的影响

比较了几种荧光染料标记白色念殊菌和鼠伤寒沙门氏菌的效果及其对病菌生长和与Hela细胞粘附能力的影响，旨在为建立简便有效的荧光标记方法奠定基础。将2种致病菌分别在添加了罗丹明B、荧光素Na盐或吖啶橙的LB培养液，37℃条件下培养1d，结果发现这2种致病菌都可以被荧光素Na盐标记，鼠伤寒沙门氏菌还可以被罗丹明B标记，但这2种致病菌都不能在吖啶橙中生长。测定致病菌荧光强度发现，随罗丹明B标记剂量的增加，致病菌荧光强度增强，而荧光素Na盐小剂量组处理的致病菌荧光强度最强。此外还发现，致病菌与Hela细胞的粘附不受荧光标记的影响。     

聚乳酸/丝素共混膜的药物释放性能研究

使用聚乳酸对丝素蛋白膜进行改性，制备聚乳酸/丝素共混膜，期望改善丝素蛋白膜作为药物载体的药物释放效果。首先研究聚乳酸含量对共混膜断裂强力和溶失率的影响，接着以染料罗丹明B作为小分子模型药物，将共混膜作为药物载体，对其药释性能进行研究，并使用药释动力学模型对实验数据进行拟合，最后探讨药物的用量以及膜厚度等因素对共混膜的药释性能影响。结果表明，聚乳酸的加入能够显著地提高丝素蛋白膜的断裂强力，降低其溶失率；聚乳酸/丝素共混膜对供试药物罗丹明B具有较好的缓释性能，释放过程属于菲克扩散模型；适当增加药物罗丹明B的用量可以有效提高共混膜的药物释放速率，而共混膜厚度的增加则可抑制药物的释放速率。     

罗丹明B单克隆抗体的制备及初步鉴定

采用N-羟基琥珀酰亚胺活性脂(NHS)法将罗丹明B(Rhodamine B,RB)与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)分别偶联形成免疫原和检测原,经紫外分光光度计扫描鉴定初步判断偶联成功。以人工合成免疫原免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术获得了3株稳定分泌针对RB抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为2D1、4C3和7F11,将7F11注入BALB/c小鼠腹腔产生腹水,用所得到的腹水建立了间接竞争ELISA(ic ELISA)标准曲线。对ic ELISA的工作条件进行了优化,方阵试验确定了包被抗原的工作浓度为1∶2 000,腹水抗体的工作浓度为1∶64 000。利用RB作药物抑制标准曲线,其线性方程为y=0.2848x-0.2847(R2=0.9924),线性范围为1~1 000 ng/m L,最低检测浓度为1 ng/m L。交叉试验表明,该单抗与RB的抑制率为100%,与罗丹明6G、罗丹明123、苯酚红、副品红、中性红、曙红Y、橙黄Ⅱ、甲基橙、结晶紫均无交叉反应。     

T-2毒素对TM3细胞线粒体功能的影响

探讨T-2毒素对TM3细胞线粒体功能的影响。将不同浓度T-2毒素(0 nM、1 nM、10 nM、100 nM)作用于TM3细胞24 h,通过MTT法检测T-2毒素对TM3细胞增殖的影响;生化方法测定细胞内Ca~(2+)、活性氧、线粒体超氧化物、ATP的含量、Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase和Na~+-K~+-ATPase的活性以及线粒体膜电位的变化。结果显示,T-2毒素对TM3细胞具有毒性作用,可引起细胞内Ca~(2+)含量增加,使细胞内活性氧和线粒体超氧化物的含量增加,降低线粒体膜电位、ATP的含量以及ATP依赖的Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase和Na~+-K~+-ATPase的活性,进而影响线粒体功能的发挥。     

氟苯尼考纳米晶的研制及表征

氟苯尼考(florfenicol, FFC)是目前临床上应用广泛的动物广谱抗菌药,本研究旨在采用乳化溶剂挥发法制备氟苯尼考纳米晶(florfenicol nanocrystal, FFC-NC)。通过单因素试验优化制备工艺,即以FFC纳米混悬液的粒径大小作为筛选的主要参数,对6个影响因素进行考察,确定最佳制备条件,并对在最优条件下制备的FFC-NC进行物理表征评价。最终确定FFC-NC制备的最佳条件：有机相与水相体积比为1∶2,泊洛沙姆188的浓度为5‰,匀浆速度和时间分别为7 000 r/min和5 min,匀质压力和次数分别为300 bar和3次。利用最佳条件制备得到的FFC-NC平均粒径为(226.1±11.3) nm, PDI平均值为0.29±0.03。FFC-NC的粒径分布在141.8～243.0 nm范围内,表明其粒径分布范围窄。FFC-NC的理化性质表征结果显示,其化学结构未发生改变,纳米晶形态为不规则球体,粒径小且分布均一,纳米晶的晶型结构发生改变。电位测定结果表明,FFC纳米混悬液的稳定性好。本研究突破了传统的FFC-NC制备技术,为其在兽医临床上的使用提供了一种新的...     

纳米混悬剂的特征及其在兽医上的应用前景

<正>纳米混悬剂是以表面活性剂为助悬剂,将药物颗粒分散在水中,通过粉碎或者控制析晶技术形成的稳定的纳米胶态分散体。不论是难溶于水的药物还是既难溶于水又难溶于油的药物,均可以通过纳米技术制备得到相应的纳米混悬剂。作为一种中间剂型,可利用纳米混悬剂进一步制备适合口服、注射或其他给药途径的药物剂型,以提高药物的吸收和生物利用度。与传统意义上的基质骨架型纳米体系不同,纳     

基于添食上转换纳米颗粒制备近红外激发荧光家蚕丝纤维

家蚕蚕丝蛋白是一种环保、生物安全的材料,而上转换纳米颗粒(upconversion nanoparticles, UCNPs)因其具有生物相容性好、稳定性优、荧光强度高等特点,常被用于医疗、环境监测等领域。为拓展蚕丝纤维的多元化应用,文中通过家蚕添食UCNPs,制备了近红外激光照射下发出荧光的蚕丝纤维。结果表明,经添食后的家蚕吐出的蚕丝纤维,可在980 nm波长的光线激发下发射高强度的绿色荧光。同时,该荧光蚕丝纤维具有优良的力学性能,可与聚多巴胺协同作用,对环境中的氧化剂进行灵敏检测。文中研究对于开发新型荧光蚕丝材料提供了新的思路。     

奶牛生产瘫痪离子预警指标的研究

为了准确预测奶牛分娩时发生生产瘫痪的可能性,本试验在山东潍坊选择发病奶牛作为试验组,选取某规模化奶牛场中产后100d~160d的正常泌乳奶牛作为对照组。通过检测奶牛血浆中Ca~(2+)、Mg~(2+)、K~+和P~(3+)的浓度,阐明奶牛产前血浆中各离子水平与生产瘫痪的关系,对生产瘫痪发生起到预警作用。结果显示:生产瘫痪的发生,血浆P~(3+)、Mg~(2+)水平与血钙水平呈显著的正相关,血浆K~+水平与血钙水平并没有显著的相关性,奶牛产前血浆Ca~(2+)、P~(3++)和Mg~(2+)浓度可以作为奶牛产后生产瘫痪发生的预警指标。     

载Zn~(2+)、Cr~(3+)离子的凹凸棒石黏土对鸡艾美耳球虫病的防治效果研究

研究载Zn~(2+)、Cr~(3+)离子的凹凸棒石黏土对鸡艾美耳球虫病的治疗和预防效果。通过离子交换的方法制备载Zn~(2+)、Cr~(3+)离子的凹凸棒石黏土。治疗试验:将雏鸡饲养至14日龄,随机分为5组,即空白对照组、感染不给药组、载Zn~(2+)、Cr~(3+)离子的凹凸棒石黏土治疗组、地克珠利治疗组、地克珠利和黏土联合治疗组,每组30只。感染后通过临床症状、粪便、体重、盲肠病变、卵囊值、抗球虫指数等评价载Zn~(2+)、Cr~(3+)离子的凹凸棒石黏土对鸡球虫病的治疗效果。预防试验:12日龄雏鸡随机分4组,空白对照组、3个预防组,每组各150只鸡。通过观察临床症状、血便堆数、卵囊数等综合评价载Zn~(2+)、Cr~(3+)离子的凹凸棒石黏土对自然发生的鸡球虫病的预防效果。治疗试验结果显示,地克珠利和黏土联合治疗组抗球虫指数达179.06,接近高效抗球虫药,载Zn~(2+)、Cr~(3+)离子的凹凸棒石黏土效果优于地克珠利。预防试验结果显示,在饲料中添加载Zn~(2+)、Cr~(3+)离子的凹凸棒石黏土可缩短球虫所致鸡血便持续时间,显著降低球虫感染造成的生长迟缓。上述结果表明,载Zn~(2+)、Cr~(3+)离子的凹凸棒石黏土对鸡球虫病具有较好的治疗效果和预防效果。