大豆疫霉菌遗传多样性的RAPD分析

利用随机扩增DNA (RAPD)技术分析了15个大豆疫霉菌( Phytophthora sojae)的遗传多样性,并同其它7 个疫霉种的8个菌株进行了比较。运用筛选出的12个引物共获得152个RAPD标记,其中84. 2%具有多态性。通 过聚类分析结果表明,疫霉属种间的遗传相似系数的变化幅度为0. 533～0. 783,大豆疫霉菌与其它几种疫霉的遗 传距离相对较远,用引物OPB06扩增到P. sojae种特有的一个RAPD标记; P. sojae种内菌株间遗传相似系数的变化 幅度为0. 855～0. 967,亦存在较丰富的遗传多样性,该遗传多样性与菌株毒力之间有一定相关性,而与菌株地理来 源没有相关性。     

利用RPAD对中国热带地区疫霉菌分类的初步研究

以来自中国热带地区的２个疫霉种（柑桔褐腐疫霉Ｐ．ｃｉｔｒｏｐｈｔｈｏｒａ和芋疫霉Ｐ．ｃｏｌｏｃａｓｉａｅ）１６个菌株的菌丝体的总ＤＮＡ为模板,使用５种随机引物进行ＰＣＲ扩增,获得随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）分析与各菌株相对应的ＲＡＰＤ的相似性。结果表明,ＲＡＰＤ不但能辨别这２个疫霉种间的差异,而且可以辨别种内的分类单元,初步肯定了ＲＡＰＤ可以用于中国热带地区疫霉菌的分类鉴定。     

利用RAPD对中国热带地区疫霉菌分类的初步研究

以来自中国热带地区的2个疫霉种(柑桔褐腐疫霉P.citrophthora和芋疫霉P.colocasiae)16个菌株的菌丝体的总DNA为模板,使用5种随机引物进行PCR扩增,获得随机扩增多态性DNA(RAP- D),分析与各菌株相对应的RAPD的相似性。结果表明,RAPD 不但能辨别这2个疫霉种间的差异,而且可以辨别种内的分类单元。初步肯定了RAPD可以用于中国热带地区疫霉菌的分类鉴定     

大豆疫霉菌检测鉴定方法

大豆疫霉菌是一种较难分离和培养的病原菌,在国内,也是一种重要的植物检疫对象.因此,对大豆疫霉菌分离、鉴定方法的研究显得尤为重要.其传统的分离检测鉴定方法主要有病组织分离法、土壤诱集检测法等,近年来,随着生物技术的发展,血清学技术、同工酶技术及核酸技术等已应用到大豆疫霉菌的检测鉴定中.现综述这些方法在大豆疫霉菌检测鉴定中的应用现状,并对这些方法的应用进行评价.     

大豆疫霉病菌致病性分化研究

对采用黑龙江省和内蒙古地区的15株大豆疫霉病菌（P.sojae)进行了生理小种鉴定，只有4株表现稳定的抗感反应，其中3株为38号小种，能克服所有8个鉴别寄主所携带的抗菌基因，表现出较强的致病性；9个菌株（占60％）能克服4个以上Rps基因，包括多抗基因Rps1k,Rps1c和Rps1a，说明黑龙江省P.sojae群体毒性构成复杂，且存在一定比例强毒性菌株，对大豆生产构成潜在威胁，长期保存的P.sojae菌株致病性发生变化，表现为能克服的抗病基因数量增加。     

大豆种质对大豆疫霉菌株Pm8的抗性分析

采用黄化苗下胚轴接种法,利用大豆疫霉菌株Pm8对来自不同地区的355份大豆品种(系)进行疫霉根腐病接种鉴定。结果表明:96份材料表现为抗病类型,占鉴定总数的27%,106份表现为中间类型,占总数的30%。在所鉴定的品种(系)中,北京、浙江等省(市)抗大豆疫霉菌株Pm8的资源比较丰富;吉林、四川等省的抗性资源较贫乏。研究结果为大豆抗病育种选择亲本和利用品种布局进行大豆疫霉根腐病生态控制提供了依据。     

大豆对疫霉根腐病抗病性鉴定方法

应用下胚轴伤口接种方法鉴定８５份大豆种质对大豆疫霉菌１号生理小种的抗病性,在两次鉴定中有９５．２９％的大豆品种（系）表现一致的抗病或感病反应。本方法所获鉴定结果稳定可靠,利用注射器接种可以极大地提高工作效率,建议作为我国鉴定大豆种质资源对大豆疫霉根腐病抗病性的基本方法。     

水分胁迫对玉米叶片关键防御酶系活性及其同工酶的影响

本文对协同完成自由基清的变化做了研究.结果表明:水分胁迫下玉米叶片内的SOD、POD、CAT的酶活性和同工酶谱均发生了变化.其中,POD同工酶谱的变化最为明显,谱带颜色深浅和条数均有变化,部分酶分子失去了酶活性而谱带消失,另一部分酶分子活性则明显提高或出现新的谱带.SOD、CAT同工酶谱的变化相对不强.同时POD、CAT同工酶谱在不同玉米基因型间差异较明显,SOD则无太大差异.说明从抗旱育种角度出发,可将其作为抗旱性鉴定的生化指标。     

P-loop，Bet v 1结构域的缺失及突变对GmPR10 和Gly m 4l 抑制大豆疫霉菌能力的影响

大豆疫霉根腐病是由大豆疫霉菌（Phytophthora sojae）引起的危害大豆生长的严重病害。课题组前期研 究表明具有P-loop 结构域的GmPR10（Gene Bank accession no. FJ960440)和具有P-loop、Bet v1 结构域的Gly m 4l （Gene Bank accession no. HQ913577.1)抑制大豆疫霉菌生长,并且过表达GmPR10 和Gly m 4l 的转基因大豆植株可 以提高对大豆疫霉根腐病的抗性。为研究GmPR10 和Gly m 4l 抑菌机理,本研究利用点突变技术,获得了GmPR10 的P-loop结构域突变体（Gly48/Thr48和Gly51/Arg51）、Gly m 4l的P-loop结构域突变体（Gly49/Ile49和Lys55/Pro55）、GmPR10 和Gly m 4l的P-loop结构域以及Gly m 4l的Bet v1结构域缺失突变体,并纯化回收相应突变体蛋白,进行体外抑制 大豆疫霉菌试验。结果表明,突变或缺失P-loop,Bet v1结构域的GmPR10和Gly m 4l失去了抑制大豆疫霉菌（Race 1）生长的能力,说明P-loop、Bet v 1结构域对GmPR10和Gly m 4l行使抑菌功能至关重要。     

大豆疫霉病菌对四种杀菌剂的敏感性测定

2008年从黑龙江省15个大豆产地土壤中分离获得21份大豆疫霉(Phytophthora sojae)菌株,采用菌落生长速率法测定了21份Phytophthora sojae菌株对4种杀菌剂的敏感性.结果表明:甲霜霜霉、甲霜锰锌、霜脲锰锌和三乙膦酸铝对21个菌株的EC50值分别分布在0.442～4.833、1.005～6.691、2.928～21.651和61.394～262.384 μg·mL-1之间,均值分别为1.242±0.584、3.141±0.814、11.433±2.460和146.289±27.034 μg·mL-1,大豆疫霉病菌对甲霜霜霉、甲霜锰锌、霜脲锰锌和三乙膦酸铝的敏感性高;甲霜霜霉、甲霜锰锌、霜脲锰锌和三乙膦酸铝分别对组成连续单峰频次分布的敏感性菌株的EC50均值为0.966、3.141、11.343和146.289 μg·mL-1,可分别作为大豆疫霉病菌对甲霜霜霉、甲霜锰锌、霜脲锰锌和三乙膦酸铝的敏感性基线.因此黑龙江省大豆疫霉菌对甲霜霜霉、甲霜锰锌、霜脲锰锌和三乙膦酸铝敏感,未产生抗药性.     

香草兰疫病疫霉菌种的鉴定

从云南西双版纳的景洪、勐腊两地的热带作物园香草兰疫病果荚、茎节、叶片上分离到10个疫霉分离菌,根据孢子囊、厚垣孢子、藏卵器、雄器形态、菌落形态及主要生长温度,鉴定为烟草疫霉（寄生疫霉）Phytophthoranicotianae(P.parasitice),10个分离菌株均属于A1交配型。      

芦荟疫病疫霉种的鉴定

１９９７年１０月和１９９８年９月在海南儋州市海南省种苗组培中心芦荟苗圃和华南热带农业大学农学院花圃发现芦荟疫病,感病芦荟叶片病斑初呈水渍状,暗绿色腐烂。从病组织上分离到１０个疫霉分离菌。根据孢子囊形态、孢子囊梗脱落性、厚垣孢子有无、藏卵器形态、雄器着生方式、菌落形态,最低、最高生长温度,将其鉴定为烟草疫霉（寄生疫霉） Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ　ｎｉｃｏ－ｔｉａｎａｅ　 Ｖａｎ Ｂｒｅｄａ ｄｅ Ｈａａｎ．（Ｐ．ｐａｒａｓｉｔｉｃａ）。这１０个分离苗中存在Ａ１,Ａ２和Ａ１,Ａ２三种交配型。     

疫霉菌的研究现状及展望

在各种植物病害中,由疫霉菌引起的疫病是一类重要病害.主要阐述了疫霉菌的分类地位,一般形态特征,生活史,寄主范围,自身特性 (分离、培养和保存特性,交配特性,游动孢子的特性,致病力分化及遗传特性,生态特性,诱导特性,抗药特性),致病机制及检测技术,并指出了今后的研究方向 (各地区疫霉菌中主要致病种的重新确定,敏感基线的建立、抗药性发生动向的监测,病原菌致病基因的构建、调控及防治手段研究的新重点).     

大豆疫霉根腐病研究进展

从大豆疫霉根腐病病害起源、病菌分离技术、生理小种的鉴定、病害的流行、抗性遗传、抗源筛选、抗性机制、病害防治等方面,综述了国内外该病的研究进展.     

胡椒瘟病菌（Phytophthora capsici）孢子囊诱导及发育过程观察

孢子囊的产生和发育过程是研究胡椒瘟病菌（Phytophthora capsici）及其病害防控的重要基础。本研究分析不同诱导条件下胡椒瘟病菌孢子囊的产生情况,并通过光学显微镜和共聚焦显微镜观察孢子囊及其内部游动孢子的发育过程。结果发现：（1）3种诱导方法均能诱导出大量孢子囊,其中在V8-A平板上光照和抹伤双重诱导法获得的孢子囊数量最多,其次是在V8-A平板上光照诱导法,获得孢子囊数量最少的是V8液体光照诱导法,但仅差异最大的2个处理间达到显著水平;（2）显微镜观察发现,孢子囊由气生菌丝顶端逐步膨大形成,初始为近球形逐渐发育成倒洋梨形,孢子囊成熟后从顶端排出大量游动孢子,偶尔可见孢子囊顶端直接发育出芽管;（3）共聚焦显微镜观察发现,首先孢子囊内部原生质体被膜结构隔裂成大约数十个独立小格,然后在每个格子中积累数倍于细胞核的DNA,最后每份细胞核DNA发育成一个游动孢子。本研究从微观角度揭示P. capsici孢子囊发育外观及内部的形态特征,为胡椒瘟病菌后续致病机制研究和胡椒瘟病田间防控提供技术基础。     

Variation in susceptibility among macadamia genotypes and species to Phytophthora root decay caused by Phytophthora cinnamomi

Phytophthora cinnamomi is a major pathogen of cultivated macadamia (Macadamia integrifolia, Macadamia tetraphylla and their hybrids) worldwide. The susceptibility of the two non-edible Macadamia species (Macadamia ternifolia and Macadamia jansenii) to P. cinnamomi is not well-understood. Commercial macadamia trees are established on grafted seedling (seed propagation) or own-rooted cutting (vegetative propagation) rootstocks of hybrids of the cultivated species. There is little information to support the preferential use of rootstock propagated by either seedling or own-rooted cutting methods in macadamia. In this study we assessed roots of macadamia plants of the four species and their hybrids, derived from the two methods of propagation, for their susceptibility to P. cinnamomi infection. The roots of inoculated plant from which P. cinnamomi was recovered showed blackening symptoms. The non-cultivated species, M. ternifolia and M. jansenii and their hybrids were the most susceptible germplasm compared with M. tetraphylla and M. integrifolia. Of these two species, M. tetraphylla was less susceptible than M. integrifolia. Significant differences were observed among the accessions of their hybrids. A strong association (R² > 0.75) was recorded between symptomatic roots and disease severity. Root density reduced with increasing disease severity rating in both own-rooted cuttings (R² = 0.65) and germinated seedlings (R² = 0.55). P. cinnamomi severity data were not significantly (P > 0.05) different between the two methods of plant propagation. The significance of this study to macadamia breeding and selection of disease resistant rootstocks is discussed.     

东北三省大豆种质资源对大豆疫霉根腐病的抗性表现

以大豆疫霉根腐病病原菌1、25号生理小种，对黑龙江、吉林、辽宁省的大豆品种（系）956份进行了抗源筛选，筛选出了23个品种（系）兼抗25号和1号生理小种，占供试材料的2．54％。筛选出抗25号生理小种的品种（系）68份，占7．48％，抗1号生理小种的品种（系）251份，占27．77％。     

大豆疫霉根腐病传播途径研究

对带菌土壤、病残体进行病试验,研究了人工接种条件下种子带菌条件及带菌种子传病情况,结果表明,带菌土壤和病残体无论是在当年还是越科后都可有效地传播大豆疫霉根霉是大豆疫霉根腐病的主要初侵染不原和传播途径。人工接种可以导致大豆种子力,但只在有病资助以豆荚才有这种结果,幼荚期接种豆荚可以使荚内的豆粒严重发病,豆粒被一层菌丝包裹,这些豆粒虽然本身不能萌发,但能作为接种体导致邻近的健康植株发病。作者通过大量的     

Races of Phytophthora sojae in Iran

Phytophthora root and stem rot of soybean is a destructive disease of soybean in Iran. Races 1 and 3 of pathogen have already been reported from two major growing regions of the crop, Lorestan and Golestan provinces. In a survey during 2004-2005, 142 isolates of P. sojae were recovered from infected plants and naturally infested soil samples using selective media and soybean leaf baiting technique. The majority of tested isolates (110 isolates) belonged to race one of P. sojae and 32 isolates belonged to race 3. ITS region of 23 isolates were amplified with specific primers Ps1 and Ps2. Sequences of this regions were similar to other gene banks sequences except two isolates from China. This survey showed low diversity in Iranian population of P. sojae.