SSR 标记荧光毛细管电泳在种子检测中常见问题分析

SSR 分子标记荧光毛细管电泳在农作物种子质量检测中常用于种子真实性检测、种子纯度鉴定和指纹数据库的构建。试验过程中模板 DNA 浓度、特异峰型的统计分析以及仪器设备运行和维护、试验结果与指纹数据库的比对等关键环节都直接影响待测样品的结果判定。就检测中遇到的问题进行分析,并提出相应的解决方法,以期为农作物种子质量检测荧光毛细管电泳技术平台提供参考。     

玉米品种SSR标记毛细管电泳荧光检测法与变性PAGE银染检测法的比较研究

以192份玉米品种为材料,用7对SSR引物对毛细管电泳荧光检测和常规的变性PAGE银染检测两种SSR标记检测方法进行比较分析。结果表明,两种方法检测的SSR标记片段大小一致。毛细管电泳荧光检测法检测的结果更为精确、灵敏、高效,更适用于高通量材料的检测分析。对少量材料进行检测分析以及SSR标记的筛选时,使用常规的变性PAGE银染检测法更经济适用。     

毛细管电泳在食用油脂脂肪酸检测中的应用

综述毛细管电泳在检测食用油中脂肪酸的应用,并指出其研究发展趋势。食用油的营养价值主要体现在其构成的脂肪酸(FA)种类和比例,通过脂肪酸的检测,可以确定食用油的来源和纯度等。目前,脂肪酸检测方法很多,由于毛细管电泳(CE)具有样品量少、溶剂消耗量少、分离速度快、环境污染小、样品处理简单等优点,已成为一种重要的检测方法。     

毛细管电泳在食用油脂脂肪酸检测中的应用

综述毛细管电泳在检测食用油中脂肪酸的应用,并指出其研究发展趋势。食用油的营养价值主要体现在其构成的脂肪酸（FA）种类和比例,通过脂肪酸的检测,可以确定食用油的来源和纯度等。目前,脂肪酸检测方法很多,由于毛细管电泳（CE）具有样品量少、溶剂消耗量少、分离速度快、环境污染小、样品处理简单等优点,已成为一种重要的检测方法。     

混株方案在玉米自交系纯度检测中的可行性

本研究以‘京724’、‘京2416’、‘MC121’和80份自交系为材料,基于SSR标记探究混株法在自交系纯度检测中的可行性。采用梯度混株法确定适用于纯度检测的最适混株数量,来减少前期样品处理的工作量。结果表明,80份自交系中的异型株大多是同母本杂交种,与亲本有一条共同带型,少数异型株为其他自交系。在9株自交系中混合1株同母本杂交种能够准确地扩增出异源DNA;19株自交系中混合1个其他自交系能够准确扩增出异源DNA。在混合同母本杂交种的混株检测中,异源DNA占比3.3%以下时异型带不能被准确识别,占比5%以下3.3%以上时在1、4、8和9这4对引物可以识别出异型带,占比5%以上时异型带能够被准确识别。此方法可以应用到玉米自交系纯度检测中,满足实际应用中对自交系检测快速准确的需求。     

白僵蚕高效毛细管电泳指纹图谱研究

【研究目的】采用高效毛细管电泳法(HPCE)建立白僵蚕的指纹图谱。【方法】：电解质溶液由以10mmol/L磷酸二氢钠-20mmol/L的硼砂溶液(pH8.62)作缓冲液，在25℃，20kV的压力下进行电泳，201nm波长处检测，线性关系良好，在25min内完全分离。【结果】：上述条件下，白僵蚕成分得到了较好的分离，方法学考察结果符合定量测定和定性研究的要求。【结论】：该方法具有较好的分离效果和良好的精密度，可考虑作为白僵蚕的质量控制方法     

小麦SSR指纹图谱及品种身份证的构建——基于毛细管电泳分析

为解决小麦品种区分难的问题,以黄淮海和长江中下游地区160个小麦主栽品种为试验材料,经初筛和复筛,从分布于小麦21个连锁群的105对SSR引物中,筛选出21对稳定、多态性高的引物(每条染色体上各选取1对)。对供试小麦品种进行SSR荧光标记的毛细管电泳分析,获取其SSR分子指纹信息,并与品种基本商品信息结合,进行数字化编码,构建了160个小麦的品种身份证,实现小麦品种信息唯一性、通用性、可识别性和可追溯性的统一,为小麦种子的质量追溯和管理提供便利,同时为种子市场的知识产权保护提供科学依据。     

作物种子贮藏蛋白高效毛细管电泳及其在品种鉴定中的应用

介绍了一种新的种子贮藏蛋白分离与品种鉴定技术－高效毛细管电泳的原理，特点及其在小麦，水稻，燕麦等作物贮藏蛋白分离与品种鉴定中的应用现状及发展前景。     

毛细管电泳及其在种子科学领域的应用

本文简要介绍了毛细管电泳技术的原理、特点、检测方法及其影响因素.着重探讨了毛细管电泳在种子科学领域的应用前景,主要包括毛细管电泳在品种鉴定、种子遗传学、种子生物技术、种子营养成分、离子成分及农药残留分析等方面的应用.     

应用毛细管电泳技术鉴定杂交稻豪两优729种子纯度

为提高种子纯度检测效率,选用两系杂交稻豪两优729及其亲本自交系63-8S、R729作为试验材料,采用SSR标记结合聚丙烯酰胺凝胶电泳检测技术,筛选出适用于鉴定豪两优729种子纯度的特异引物RM336。采用毛细管电泳检测技术鉴定了4个豪两优729分户样的纯度,与田间正季鉴定结果一致。分析比较了聚丙烯酰胺凝胶电泳检测技术和毛细管电泳检测技术,综合多方因素,建议在引物筛选阶段选择聚丙烯酰胺凝胶电泳检测技术,在大量材料分析检测时,毛细管电泳检测技术的高效率优势不言而喻。     

毛细管电泳分离DNA片段的研究

应用毛细管无胶筛分电泳，对DNA的酶切片段的分离进行了研究。结果表明在0.5%羟基丙基甲基纤维素和1μg/ml溴化乙锭存在的条件下，11条DNA片段被基线分离，保留时间的RSD小于0.1%(n=4)。结合样品在线浓缩技术，进样90s仍然能够获得极高的分辨率。     

活性多肽提取分离方法研究进展

综述了近几年来生物活性多肽物质的分离和提纯方法,主要包括色谱、电泳等方法,以及这些方法在肽类研究中的应用现状。     

Injection Techniques and Application in Capillary Electrophoresis

A review about the techniques of injection in capillary electrophoresis with 31 references is presented. Advantages and shortage of the techniques which is based on the principles of hydrodynamics and electrokinetics are commented, especially the no discrimination electrokinetic injection which is expected to have an advance in the capillary electrophoresis in the future.     

高三尖杉酯碱注射液含量的毛细管电泳法测定

建立了高三尖杉酯碱注射液中高三尖杉酯碱含量测定的高效毛细管电泳法。磷酸二氢钠-硼砂为电泳介质,乙醇为有机添加剂,在20kV高压,pH6.98的条件下检测了高三尖杉酯碱注射液中高三尖杉酯碱含量。在最佳的试验条件下,高三尖杉酯碱标准品峰面积（y）与质量浓度（p）之间呈现良好的线性关系,该法的线性范围为0.005-0.080mg.L^-1。着重探讨了缓冲溶液浓度、种类、酸碱度及其操作电压对检测的影响,结果表明毛细管电泳法测定高三尖杉酯碱注射液的含量,不仅操作简单、准确,而且重复性好。     

毛细管与聚丙烯酰胺凝胶电泳检测甜菜SSR位点的比较研究

为了探究毛细管与聚丙烯酰胺电泳方法的适用情况,比较其优缺点。本研究以8个甜菜栽培种资源为材料,选择8个SSR位点,分别使用聚丙烯酰胺凝胶电泳银染检测和毛细管电泳荧光检测每个位点的多态性,并对这两种方法的检测结果进行了比较。毛细管电泳荧光标记法可以准确的知道DNA片段的分子大小;PAGE电泳只能用肉眼与Marker比较估测得出大致分子量,不能得出准确分子量。8对引物两种检测方法的匹配比率分别是75%、87.5%、50%、75%、25%、100%、37.5%、50%。研究结果证明,两种检测平台数据整合存在较大差异。检测结果与引物是否是单拷贝、引物多态性,稳定性等因素有直接关系。测序检验结果表明,样品较少时利用PAGE电泳的方法来检测SSR位点的多态性,既能节省成本又能节省时间,还能保证检测结果的准确性。     

鱼组织中氟喹诺酮类药的HPCE多残留检测方法的建立

建立了以伊诺沙星为内标,环丙沙星、恩诺沙星、沙拉沙星、二氟沙星在鱼组织中的毛细管电泳多残留检测方法。研究了缓冲溶液的类型,pH值,有机试剂添加等电泳条件.得到最佳的缓冲溶液是含10 mL/L乙腈的pH 5.0的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液。用C18固相萃取柱浓缩和净化处理,用二极管阵列检测器进行检测(275 nm)。结果,四种药物在组织中的溶度25~400 μg/kg范围内R＞0.999,线性关系良好。环丙沙星,恩诺沙星,沙拉沙星和二氟沙星回收率分别为75.2%,79.7%,80.1%,79.2%。恩诺沙星的检测限低于25 μg/kg,其余的检测限均为25 μg/kg,,方法的日内变异系数小于13.5%,日间变异系数小于12.3%。该方法简单快速,经济环保,适用于大量阳性样本的筛选。     

利用毛细管电泳法测定牛乳中乳铁蛋白含量

将样品经缓冲液处理,选择直径为50μm,有效长度为400mm的涂层中性毛细管柱,缓冲溶液为柠檬酸缓冲液(pH值为3.0±0.2),工作电压为21kV,检测波长为214nm,进行检测。结果显示,乳铁蛋白平均回收率为75%￣91%,相对标准偏差(RSD)为1.1%￣2.8%,最低检出限为0.003mg/mL。该方法简便、准确、灵敏度高,是快速检测乳品中乳铁蛋白含量的最适合的分析方法。     

利用种子醇溶蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定洋葱品种类型

利用改进的不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，分析了洋葱不同类型品种的种子醇溶蛋白。结果表明：长日型与短日型洋葱品种的电泳谱图具有明显差异，Rf0.15和Rf0.17两条特征带可用于鉴别两种类型品种。     

毛细管电泳技术检测有机杂环类除草剂方法的研究

毛细管电泳技术(CE),经过几十年的不断发展与改进,已经在农药残留领域被广泛应用,但是有关有机杂环类除草剂的毛细管电泳检测未见报道,其检测的方法技术体系有待研究。为此,通过筛选和优化CE技术的相关检测参数,建立了五种有机杂环类除草剂(西玛津、氰草津、西草净、扑草净、特丁津)的毛细管电泳检测方法(以10 mmol/L硼砂做为运行缓冲液,其PH为9.5;以30 mmol/L十二烷基硫酸钠,7.5%甲醇溶液为最佳分离介质;运行条件的设置为：进样压力为0.5 psi,进样时间为5s,分离电压为15 KV,毛细管柱温为：25 ℃,检测波长为221 nm),最终可以实现一次性对五种有机类杂环类除草剂进行高效、快速和准确的检测。