小麦网腥黑粉菌与光腥黑粉菌冬孢子的红外光谱研究

测定了小麦网腥黑粉菌［Ｔｉｌｅｔｉａｃａｒｉｅｓ（Ｄｃ．）Ｔｕｌ．］和光腥黑粉菌［Ｔ．ｆｏｅｔｉｄａ（Ｗａｌｌｒ．）Ｌｉｒｏ．］冬孢子的红外光谱，获得了谱图，两种光谱的差异较大，而同种的光谱则较为相似。光腥的光谱各吸收带的强度均较高，且酰胺Ⅰ，Ⅱ两带的分离度较好；网腥光谱的强度则较低，酰胺Ⅰ，Ⅱ两带的分离度较差，酰胺Ⅱ呈现一个宽斜肩峰。据此，可用于两种孢子的鉴别。     

稻粒黑粉菌冬孢子萌发的影响因素和休眠期的研究

本文详尽地描述了病菌冬孢子萌发的过程和形态特征，并研究了各种因素对病菌冬孢子萌发的影响，结果表明在水中、室温３０～３２℃、太阳光照下、ｐＨ１６～７、氧气充足的条件下，最适宜冬孢子萌发，产生的担孢子量也最多；约２％的冬孢子休眠期约一个月，但多数冬孢子需要体眠５～６个月；冬孢子室内保存有约２年的生命力，以保存７～１２个月的冬孢子萌发率最多。     

小麦矮腥黑粉菌和禾草腥黑粉菌的快速鉴别研究

快速准确地鉴别形态特征极为相似的小麦矮腥黑粉菌(TilletiacontroversaKühn)和禾草腥黑粉菌(T.fuscaEll.AndEV.),是我国进口草种检疫中迫切需要解决的技术难题。运用数学判别法,以冬孢子直径、网目数、网脊高度、胶鞘厚度为基本形态指标,在大量测量数据的基础上,建立了鉴别小麦矮腥黑粉菌和禾草腥黑粉菌的数学模型。最后,用未参加组建模型的100组数据测试该模型,并做萌发试验核对判别结果,其正确率达到100%,表明该模型稳定可靠。     

狗牙根黑粉菌冬孢子萌发影响因素及产孢培养基筛选

研究不同温度、水分含量、光照条件、p H值对狗牙根黑粉菌冬孢子萌发的影响,结果表明,温度23~28℃、光照与黑暗间隔12 h、p H值5~7的条件最适合冬孢子萌发;同时,还观察和描述了狗牙根黑粉菌冬孢子的形态特征和萌发过程;此外,还研究了不同培养基对次生小孢子形态及产孢数量的影响,结果发现9种培养基均能产孢,在4%葡萄糖酵母膏液体培养基中产孢量最多,存在3种不同形态的次生孢子,带荚膜的次生孢子无活性。     

稻粒黑粉菌冬孢子萌发影响因素及其产孢培养基的筛选

稻粒黑粉病是由担子菌亚门齿黑粉菌属的稻粒黑粉菌引起的。试验设置不同的温度、湿度、光照时间、pH值等培养参数,观察这些不同的参数对稻粒黑粉菌冬孢子萌发的影响。结果表明,冬孢子在充分吸水、温度24～28℃、光照与黑暗间隔培养12 h、pH值为7左右的条件下,最适宜冬孢子萌发。试验还观察并描述了稻粒黑粉菌冬孢子的形态特征和萌发过程。此外,为了建立稻粒黑粉病人工接种体系及研究稻粒黑粉菌与水稻之间的互作,需要筛选到能够产生稻粒黑粉病的接种体——次生小孢子的培养基。试验还研究了麸皮培养基等7种液体培养基的产孢效果,结果发现麸皮培养基最适合稻粒黑粉菌产生次生小孢子。     

玉蜀黍黑粉菌担孢子萌发及侵染过程的研究

从担孢子的体外萌发,人工接种方法、萌发,侵染和扩展过程的扫描电镜及乳酚油组织透明法观察几个方面研究了相互亲和的基因型的玉蜀黍黑粉菌担孢子培养物。结果表明(1)担孢子体外环境水份的连续蒸发和丧失可能是担孢子萌发的决定性因素;(2)玉蜀黍黑粉菌的质配及双棱菌丝体的形成需要在寄主组织内的特珠环境下才能完成;(3)注射接种是用担孢子诱发玉米苗发病的最有效的方法,其技术关键是让悬浮液自苗基部注入沿未展开的叶束上升到顶部苗心溢出;(4)担孢子的萌发及侵入完成于接种后3～24h;(5)接种后4～6d 左右,寄主肿瘤出现前,受侵杂组织内已充满网状的双棱菌丝体。     

进境黑麦草种子中黑麦草腥黑粉菌的鉴定

从广州（1997）和天津（1999）进境的美国黑麦草种子中均发现一种类似中国一类危险性有害生物小麦印度腥黑粉菌（Tilletia indica Mitra)的冬孢子。其大小分别为28．9－43．7μm和29．2－40．2μm，淡黄色至暗褐色，半透明至不透明，球形至亚球形，疣状突起常呈钝圆状，表面有脊状突起。检疫中常因其与印腥冬孢子极为相似而引起误诊。经形态学特征观察、PCR分析和PCR扩增产物测序分析，鉴定为黑麦草腥黑粉菌（Tilletia walkeri)。     

草坪草网腥黑粉菌洗涤检验研究

本试验比较了两种不同悬浮剂对草坪草网腥黑粉菌洗涤检验的影响，结果发现：用灭菌水作悬浮剂时，只有浓度为6000个孢子／克种子的条件下检测到孢子，其它低浓度均未观察到，而用席尔试液作悬浮剂时，所有浓度均可检测到孢子，说明在网腥黑粉茵洗涤检验中不能用灭菌水代替席尔试液作悬浮剂。另外，通过比较抽取10g和20g草种样本对洗涤检验的影响发现，两个样本洗涤检验结果差异不大，表明进行网腥黑粉茵洗涤检验时，抽取10g草种样品就能反映草种带菌的实际情况。     

稻粒黑粉菌对水稻不育系的侵染过程

用Ｎｅｏｖｏｓｓｉａ ｈｏｒｒｉｄａ的次生小孢子,在田间和离体接种水稻不育系的试验证明,病菌以菌丝从柱头直接侵入,经花柱到达子房的珠心组织。接种后８小时在子房中发现菌丝,第７天在种皮和糊粉层之间形成初生冬孢子,第９天冬孢子成熟。病菌在４个不育系上的侵染过程相似,病菌在无需授粉的条件下就能侵入,但只在胚乳能正常发育的水稻子房中形成冬孢子。     

茭白黑粉菌(Ustilago esculenta)某些生物学特性的研究

研究了茭白黑粉菌(Ustilago esculenta)冬孢子萌发和菌丝生长,结果表明冬孢子萌发的适宜温度为25～30℃,最适pH为6,该菌在合成培养基上的生长适温为28℃,最适生长pH为6,蔗糖、葡萄糖和果糖是菌丝生长的良好碳源,氮源以蛋白胨和天门冬酰胺为佳,菌丝生长需要98～100％的棚对湿度,菌丝体含多种氨基酸,以谷氨酸、精氨酸、天门冬氨酸和亮氨酸的含量较高。     

禾本科腥黑粉菌的研究Ⅰ.六月禾腥黑粉菌

腥黑粉菌是禾本科植物的重要病原菌。利用美国进口的六月禾种了中截获的腥黑粉菌为材料，通过形态观察和萌发生理研究，明确了六月禾腥黑粉菌的形态特征、各冬孢子萌发特性，并将该菌鉴定为菰草腥黑粉菌Ｔｉｌｌｅｔｉａ ｆｕｓｃａ。本文还首次报道了六月禾腥黑粉菌冬孢子萌可以产生多个先菌丝及先菌丝“异常”伸长及分枝均与蔗糖浓度有关。     

茭白黑粉菌营养菌丝的分离与确证

茭白黑粉菌冬孢子通过单孢子分离所得菌株,在马铃薯琼脂培养基上菌丝呈梭状,一般1～17个隔,于分隔处可产生1～2级分支或不分支,其上产生担孢子,两端尖锐或略钝圆,大小为1.5～6.0 μm×16.5～225.0 μm.这些形态特征与冬孢子在马铃薯液体中萌发形成的菌丝形态完全一致.此外,梭状菌丝能在人工培养基上形成厚垣孢子,其萌发方式与冬孢子一致.由此,确证了梭状短菌丝是茭白黑粉菌(Ustilago esculenta)的营养菌丝.     

小麦腥黑穗病冬孢子显微图像的获取及处理

针对入境小麦腥黑穗病检验检疫中冬孢子区域计数问题,提出了小麦腥黑穗病图像处理的方法和流程.首先介绍了显微镜下腥黑穗病菌冬孢子图像的获取方法;在将冬孢子的彩色图像灰度化后,采用中值滤波抑制噪声,利用metric算法进行图像分割;为了从背景中准确提取冬孢子区域,流程中采用图像形态学方法来消除二值图像中冬孢子区域的背景噪声和孔洞,并剔除图像边界处不完整的冬孢子区域;最后采用区域标记的方法获得了冬孢子数目.结果表明,该研究提出的方法和流程能有效地改善图像的质量,并能够自动准确地提取并统计冬孢子区域,便于后续的识别工作.     

基于K 均值聚类的小麦腥黑穗病菌冬孢子图像分割

图像分析技术能够实现对小麦腥黑穗病菌冬孢子特征的定量分析,冬孢子区域的分割则是分析的前提.针对小麦腥黑穗病菌图像的特点,考虑到传统分割方法的局限性,提出了一种基于彩色图像的分割算法.研究以病菌彩色图像B分量为聚类对象,以R、G、B分量值之和不变为迭代终止条件,利用K均值聚类的方法分割病菌图像,使类内像素均值的距离和取得局部极小值.与其他分割方法进行比较的结果表明,该分割算法既分割出亮度不均匀的背景,对噪声的敏感度较小,又减少了分割后的冬孢子粘连,分割出的冬孢子数目增加.     

玉米瘤黑粉病菌冬孢子生物学特性研究

通过对玉米瘤黑粉病菌冬孢子生物学特性的研究,明确了该病菌冬孢子萌发的最适温度为２５－３０℃,最适ＰＨ值为３－５,在自然光周期条件一萌发较好,以及适宜的营养培养液和浓度,适宜萌发的相对湿度。     

大蒜锈病冬孢子萌发条件及其生物学特性研究

试验结果表明,大蒜锈病冬孢子只有在不离体状态下,在2;水洋菜的平板培养下才得以萌发.萌发时自顶端芽孔下抽出长且为多隔膜的先菌丝,未见产生担子梗及担子孢子.光照与黑暗不是影响冬孢子萌发的因子,在必需要的高湿度条件下,温度是控制冬孢子萌发的重要条件.冬孢子萌发适宜温度为15～24℃,最适温度为17～19℃,当温度提高达24℃时冬孢子终止萌发.     

啤酒大麦药剂处理对TCK冬孢子的杀灭效果及问题

参考啤酒大麦加工工艺流程中所采用的药剂及浓度，设计不同浓度的漂白粉、石灰、甲醛以及石灰加漂白粉，对小麦矮腥黑穗病菌（Tilletia controversa Kuhn）（简称TCK）冬孢子分别处理4h，接种于3%琼脂培养基上，然后移入5℃生长箱内培养，观察药剂处理对孢子萌发率的影响。结果表明，漂白粉浓度达到0.05%以上时，孢子基本不能萌发；几种浓度的生石灰处理对TCK孢子几乎没有灭活作用；0.01%甲醛可以明显抑制TCK孢子的萌发；对TCK孢子直接浸水处理45d仍有50%以上的萌发率。大麦加工工艺中所采用的漂白粉及石灰处理浓度不足以杀灭TCK冬孢子；其污水处理中采用0.05%浓度的甲醛可抑制孢子的萌发。     

玉米丝黑穗病菌冬孢子生物学特性的研究Ⅰ

玉米丝黑穗病菌冬孢子用清水浸２ｄ,再用０．０５ｍｏｌ／Ｌ盐酸处理６ｈ、１２ｈ的能显著的促进冬孢子的萌发,萌发率为６４％和５８％;对照仅为２６．３％,０．４ｍｏｌ／Ｌ,０．６ｍｏｌ／Ｌ,０．８ｍｏｌ／Ｌ,ｌｍｏｌ／Ｌ的盐酸处理６ｈ、１２ｈ、２４ｈ、４８ｈ显著地抑制冬孢子的萌发、萌发率为０;０．０５ｍｏｌ／Ｌ盐酸予处理６ｈ、１２ｈ、２４ｈ、４８ｈ对冬孢子的萌发无影响。不同浓度的氢氧化钠溶液予处理不同时间对冬孢子的萌发均有抑制作用。以天门冬氨酸、吲跺乙酸为培养液,以质量分数０．１％的抗坏血酸为培养液的冬孢于萌发率最高,为６１．２％．冬孢子在不同的抗感玉米材料及植株的各器官上其萌发率有显著差异,感病材料“京黄４１７”（３２．９６％）,抗病材料ＭＯ１７（４．４％）、胚芽鞘（４７．２％）,根（１２．７％）．